Post on 17-Jun-2015
Comenzar bien no es poco, pero tampoco mucho (Sócrates)
MÉRIDA SILES CARLOS GABRIEL
UMSS ODONTOLOGIA
Presentación:
Docente:
Dra. SILES ROCIÓ INES
MICROBIOLOGÍAEl mundo oculto de los
microbios
Condiciones para el crecimiento microbiano
Nutrientes
agua
fuente de energía
fuentes de C, N, otros elementos
micronutrientes, factores de crecimiento
Condiciones de cultivo
temperatura
pH
luz
aireación
actividad de agua
potencial redox
Crecimiento
Medios de cultivo
DIAGNOSTICO DE MICOBACTERIAS POR EL
LABORATORIO
Cochabamba-Bolivia
Diagnóstico
Clínico
Investigaciones
No microbiológicas
Tomar correctamente
Rotular y embalar adecuadamente
Almacenar y transportar correctamente
No teñidos o teñidos con Gram u
otra tinción
Serología Tecnologíasde DNA
Por difusión en discos
o MIC
Característica de colonia, morfología, hemólisis, pigmento,
etc.
Cochabamba-Bolivia
CARACTERISTICAS
MORFOLÓGICAS
Características Morfológicas
Se logra por diferentes métodos, siendo los mas comunes: examen en fresco y las tinciones.
EXAMEN EN FRESCO:GOTA PENDIENTE
TINCIONES TINCION GRAM:
Tinción GRAM: Bacterias GRAM positivas
Cocos gram positivos:
Bacilos Gram positivos:
Tinción GRAM: Bacterias GRAM negativas
Cocos GRAM-negativos:
Bacilos GRAM-negativos:
Cochabamba-Bolivia
CaracTERISTICAS
De Cultivo
CARACTERISTICAS DE CULTIVO
Medio de Cultivo Líquido
Formación de una película en la superficie, sedimento y olor
Streptococcus mutans. Tinción de Gram. Cultivo en caldo de tioglicolato. Su morfología es parecida al Bacillus y forma cadenas cuando se cultiva en caldo, puede causar endocaditits sub aguda bacteriana y caries dental.
Cultivo de placa bacteriana subgingival en el que se aprecia la gran
diversidad microbiana de esta microflora.
Periodontitis. Se aprecia inflamación de la encía y presencia de bolsas periodontales
Medios de Cultivo Sólido
El AGAR es un elemento solidificante muy empleado para la preparación de medios de cultivo. Se licúa completamente a la temperatura del agua hirviendo y se solidifica al enfriarse a 40 grados. Con mínimas excepciones no tiene efecto sobre el crecimiento de las bacterias y no es atacado por aquellas que crecen en él.
Streptococcus mutans. Tinción de gram. El cultivo en placa de agar sangre produce una morfologia cocoide sin formar cadenas. Este microorganismo puede causar endocarditis bacteriana subaguda y caries dental.
Cultivos en placas de bicarbonato y agar sangre de Bacillus anthracis. Colonias lisas en bicarbonato (izquierdo) y colonias rugosas en el agar sangre (derecho).
En un estudio bacteriológico in-vitro se demostró que con una sola aplicación de campos magnéticos naturales a través de la mano del Doctor Wilhelm "Willy" Frinta durante 10 minutos y a una distancia de 1 1/2 pulgada sobre un recipiente de petri con agar sangre, hubo una inibición de crecimiento de gérmenes, (estreptococo, estafilococos)
CONTROL ESTUDIO
Cochabamba-Bolivia
ACTIVIDAD
BIOQUÍMICA
ACTIVIDAD BIOQUIMICA
BACTERIAS PROTEOLÍTICAS
Constituyen un grupo heterogéneo de bacterias fuertemente proteolíticas que forman proteinasas extracelulares , así
llamadas porque se difunden fuera de las células. Todas las bacterias poseen proteinasas intracelulares , pero sólo unas
cuantas las tienen en forma que puedan ser difundidas extracelularmente. Las Bacterias proteolíticas pueden
dividirse en aerobias o facultativas , que pueden ser esporógenas o no y anaerobias productoras de esporas.
Caracteristicas fermentativas sobre azucares
TEMPERATURA : Tiene una gran influencia en la fermentación del mosto, en la fermentación alcohólico no hay actividad de levaduras por debajo de 3ºC, siendo esta muy esta muy lenta hasta los 6 ó 7 ºC. Los cambios bruscos de temperatura actúan de forma muy negativa en la fermentación, a tal extremo que puede llegar a paralizarla. En general, para todo tipo de actividad microbiana, las temperaturas más favorables son alrededor de 30 ºC, sin embargo, para evitar competencia de cepas bacterianas no deseables, la temperatura más adecuadas para la fermentación alcohólica y maloláctica es la que ronda entre 12-18 ºC.
Fermentación de azucares por diferentes bacterias
SINTESIS DE UREASA
El HP sintetiza la enzima ureasa que cataliza la hidrólisis de la urea del jugo gástrico, formando bicarbonato y amonio. El bicarbonato aumenta el pH alrededor de la bacteria, protegiéndola del medio ácido. El amonio puede producir directamente daño celular, también se ha reportado que aumenta la retrodifusión de los iones H+, e inactiva el complemento (1-4).
El Helicobacter pylori sintetiza la enzima ureasa, que cataliza la hidrólisis de la urea del jugo gástrico, formando bicarbonato y amonio. El bicarbonato aumenta el pH alrededor de la bacteria, protegiéndola del medio ambiente ácido. El amonio puede producir directamente daño celular
METODO DE VACIADO EN PLACA
FACTORES QUE INFLUYEN EN EL CRECIMIENTO
Factores externos
Condiciones ambientales o culturales: pH, T°, Aw, O2, CO2 Condiciones nutricionales: Tasa C/N 10:1, 12:1
Factores internos
Capacidad metabólica
QUIMIOSTATO Es el dispositivo más comúnmente usado para cultivo
continuo. Su diseño y manejo permite el control de la densidad de la población nutrientes en el medio. Si la tasa de dilución se incrementa y la concentración de nutrientes es constante, la densidad de la población es constante y la tasa de crecimiento. Cuando el sistema está en equilibrio, el número de células (densidad de la población) y el estado nutricional permanecen constantes, a esto se le conoce como “estado estable” o “estado sostenido”.
Propiedad
Metabólica
CARACTERES
seROLÓGICOS
Acción
Patógena
ACCION PATOGENA
ACCION PATOGENA
VIA INTRADERMICA
VIAS DE INOCULACION
VIA SUBCUTANEA
VIA INTRAMUSCULAR
VIA ENDOVENOSA
VIA INTRAPERITONEAL
VIA INTRANASAL
VIA BUCAL
Cochabamba-Bolivia
tIPIFICACIÓN FÁGICA
Cochabamba-Bolivia
Medios de cultivoMedios de cultivo
-Los medios de cultivo son mezclas de -Los medios de cultivo son mezclas de substancias nutritivas que se combinan para substancias nutritivas que se combinan para favorecer el crecimiento, aislamiento e favorecer el crecimiento, aislamiento e identificación de microorganismos. identificación de microorganismos.
-material alimenticio en el que crecen-material alimenticio en el que crecen los microorganismos es el los microorganismos es el Medio deMedio de CultivoCultivo y el crecimiento de los y el crecimiento de los microorganismos es el microorganismos es el CultivoCultivo. .
Cultivo•Infecciones por bacterias viables•Infecciones polimicrobianas•Microorganismos anaerobios
Periodontitisperiimplantitis
PulpitisAbscesos periapicalesosteomielitis
Cultivo
Transporte de muestras IdentificaciónRecuento
RápidoCondiciones de anaerobiosis
Antibiograma
Crecimiento lento
Cochabamba-Bolivia
conscistencia
-Un medio de cultivo es una preparación-Un medio de cultivo es una preparaciónartificial liquida, sólida o semisólida, artificial liquida, sólida o semisólida, compuesta por nutrientes y utilizada para compuesta por nutrientes y utilizada para hacer crecer microorganismos.hacer crecer microorganismos.
Clasificacion de los medios de Clasificacion de los medios de cultivocultivo
Por su consistencia:Por su consistencia:
1-liquidos:1-liquidos: son soluciones preparadas a base de son soluciones preparadas a base de sustancias que satisfagan los requisitos nutritivos sustancias que satisfagan los requisitos nutritivos de los microorganismos,contienen nutrientes que de los microorganismos,contienen nutrientes que son capaces de mantenes un pH adecuado.son capaces de mantenes un pH adecuado.
-se clasifican : -se clasifican :
*sintéticos: tienen ingredientes de una *sintéticos: tienen ingredientes de una
composición perfectamente definida (sales, composición perfectamente definida (sales, azucares, aminoácidos, etc.) azucares, aminoácidos, etc.)
*no sintéticos:compuestos de origen natural *no sintéticos:compuestos de origen natural (peptonas, extractos de carne, de levadura(peptonas, extractos de carne, de levadura
-medios de cultivo mas empleados:-medios de cultivo mas empleados:
a)caldo tioglicolato a)caldo tioglicolato de sodio : medio de cultvo de sodio : medio de cultvo de bacterias anaerobicas ,que contiene de bacterias anaerobicas ,que contiene sustancias reductoras del potencial de óxido sustancias reductoras del potencial de óxido reducción y está contenido en un tubo o frasco reducción y está contenido en un tubo o frasco herméticohermético
Cultivo de caldo de tioglicolatoCultivo de caldo de tioglicolato
Cultivo Cultivo in-vitroin-vitro de de Staphylococcus Staphylococcus aureusaureus
b)Caldo nutritivob)Caldo nutritivo
2.-2.-medios de cultivo solidosmedios de cultivo solidos
Son medios de cultivo liquidos adicionados Son medios de cultivo liquidos adicionados de una sustancia gelificante :el agar agar de una sustancia gelificante :el agar agar que gelifica por debajo de 45 .C o gelosa.que gelifica por debajo de 45 .C o gelosa.
Los medios de cultivo nos permite observar Los medios de cultivo nos permite observar colonias separadas ,donde cada colonia es colonias separadas ,donde cada colonia es el resultado de la multiplicacion de cada el resultado de la multiplicacion de cada bacteria.bacteria.
Cultivo de agarCultivo de agar
Cultivos de agar Cultivos de agar
Agar de tiosulfato,citrato,sales de Agar de tiosulfato,citrato,sales de bilis y sacarosa(vibrio).TCBSbilis y sacarosa(vibrio).TCBS
AGAR DE TCBS AGAR DE TCBS VIBRIOVIBRIO
Agar marino y soya tripticasa Agar marino y soya tripticasa (TSA)(TSA)
Colonias en agar TCBSColonias en agar TCBS
Colonias de agar marinoColonias de agar marino
Purificación de VibriosPurificación de Vibrios
Vibrios en TSAVibrios en TSA
Colonias aerobicasColonias aerobicas
Colonias termofilas en cultivoColonias termofilas en cultivo
Colonias macroscopicas de Colonias macroscopicas de hongoshongos
Colonias de bacterias en cultivoColonias de bacterias en cultivo
Crecimiento bacteriano en agar de Crecimiento bacteriano en agar de schaedlerschaedler
Agar Agar
Cochabamba-Bolivia
Origen
Medio Sintéticos
Medio Naturales
Cochabamba-Bolivia
Composición
MEDIOS DE CULTIVOS COMUNES
Fermentadores de lactosa en agar Hektoen
Crecimiento de un no fermentador de la lactosa en agar Mac Conkey
Crecimiento de bacterias Gram. negativas que no son capaces de fermentar la lactosa en agar de eosina
MEDIOS DE CULTIVOS ENRIQUECIDOS
Medios de cultivo enriquecidos: Agar Chocolate
Agar chocolate
Agar sangre
Agar chocolate y sangre
Liquido ascitico
Cochabamba-Bolivia
mEDIOS DE enriquecimiento
C.- Medios de enriquecimiento. Son medios complejos (normalmente) con aditivos adicionales para favorecer el crecimiento de determinados microorganismos (particularmente heterótrofos exigentes). Ejemplo: adicción de sangre, suero o extractos de tejidos de animales y plantas.
D.- Medios selectivos. Son aquellos que favorecen por su diseño el crecimiento específico de un microorganismo particular (o grupo de microorganismos). Es de gran utilidad para el aislamiento de microorganismos a partir de una población microbiana mixta. Ejemplo: CO2 como fuente de carbono es selectivo para autotrofos; adiccionando cristal violeta se inhibe el crecimiento de los Gram (+); utilizando maltosa como única fuente de carbono sólo crecerán los que usen maltosa.
Cochabamba-Bolivia
mEDIOS sELECTIVOS
Cochabamba-Bolivia
mEDIOS eSPECIALES
Cochabamba-Bolivia
mEDIOS DIFERENCIALES
Cochabamba-Bolivia
mEDIOS DE TRANSPORTE
Cochabamba-Bolivia
mEDIOS DE TRANSPORTE
MEDIOS DE TRANSPORTE
INCUBACIÓN EN ANAEROBIOSIS
Cochabamba-Bolivia
mEDIOS DE CONSERVACIÓN
Medios de conservación
Los principales métodos de conservación que se aplican a los cultivos microbianos abarcan la refrigeración, liofilización, aceite mineral, gel de sílice, suelo estéril, agua destilada estéril.
Medios de conservacion
Métodos tradicionales de conservación:
Mantienen la viabilidad, propiedades morfológicas,
fisiológicas