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UNIVERSIDAD NACIONAL DE CÓRDOBA
FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS
ESCUELA PARA GRADUADOS
INSTITUTO DE REPRODUCCIÓN BOVINA CÓRDOBA (IRAC)
COMPARACION ENTRE EL USO DE SEMEN
FRESCO VERSUS CONGELADO EN PROGRAMAS
DE IATF
Hector Ezequiel Lopepe
Trabajo Final Para optar al Grado Académico de
Especialista en Reproducción Bovina
Córdoba - Año 2015
Trabajo final de la Especialización en Reproducción Bovina
AGRADECIMIENTOS
A mi amigo, socio y compañero MV. Bruno Bonadeo.
A los Dres. Gustave Decuadro Hansen, Jorge Cabodevila y Santiago Perez Wallace, por su valiosa colaboración en este trabajo.
A los docentes de la especialidad Dres. Gabrien Bó y Andrés Tríbulo por la buena predisposición.
A nuestros clientes, por confiar y creer en nuestro trabajo.
INDICE2
Hector Ezequiel Lopepe
Trabajo final de la Especialización en Reproducción Bovina
1. RESUMEN ...............................................................................................4
2. INTRODUCCIÓN....................................................................................5
OBJETIVO GENERAL..........................................................................8
OBJETIVOS ESPECÍFICOS.................................................................8
2. MATERIALES Y MÉTODOS................................................................9
2.1. ANIMALES Y LUGAR DE TRABAJO...................................................9
2.2. COLECTA DE SEMEN Y PROCESAMIENTO....................................10
2.3. SEMEN CONTROL.....................................................................................11
2.4. ANÁLISIS DE DATOS...........................................................................12
3. RESULTADOS.......................................................................................13
4. DISCUSIÓN............................................................................................16
5. CONCLUSIONES..................................................................................18
6. BIBLIOGRAFÍA....................................................................................19
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Trabajo final de la Especialización en Reproducción Bovina
1. RESUMEN:
El presente trabajo tuvo por objetivo comprobar si el uso de semen fresco mejora la
tasa de preñez en programas de Inseminación Artificial a Tiempo Fijo (IATF), en rodeos
comerciales de carne. Se utilizaron 1309 vacas con cría, vacas secas y vaquillonas Bos
Taurus, distribuidas en cuatro establecimientos en Provincia de Buenos Aires. Se
conformaron en todos los rodeos dos grupos aleatorios de vientres: Grupo A semen
fresco (n=790) y Grupo B congelado comercial (n=519). Se colectaron seis toros por
electroeyaculación, en los cuales se evaluó y diluyo su semen con 15 x 106
espermatozoides por dosis y se utilizó refrigerado en el Grupo A. En el Grupo B se
utilizó semen congelado comercial de once toros (9 nacionales, 2 importados), que
habían superado los estándares mínimos para las pruebas in vitro. Los datos se
analizaron por regresión logística. Los resultados obtenidos mostraron diferencias
significativas para las variables: Tipo de semen (mayor para fresco que para congelado;
P<0,01), Categoría de vientres (vaca con cría, vaca seca o vaquillona; P<0,05) y
fertilidad de los toros utilizados (P<0.05). No se encontraron diferencias significativas
entre los inseminadores (P>0.05). En conclusión el uso de semen fresco, mejora los
porcentajes de preñez en IATF y permite un mayor aprovechamiento de toros
genéticamente superiores de la región.
Palabras clave: semen fresco – preñez – fertilidad-genética
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2. INTRODUCCIÓN
La inseminación artificial (IA) es la biotecnología de mayor difusión entre los
ganaderos del mundo. La misma posee un gran Impacto en el avance genético
poblacional y un costo reducido (Brogliatti et al. 2012). La creciente necesidad de
semen de toros de alta perfomance genética, produjo el desarrollo y el refinamiento de
las tecnologías de producción de semen y almacenamiento de semen bovino tanto de
carne como de leche. En 1980 el número de inseminaciones alrededor del mundo
superaba los 130 millones (Bonadonna y Succi, 1980), ya en 1995 el número de dosis
producidas en el planeta superaba los 200 millones, siendo el 95 % congelado (crio
preservado), excepto en un reducido número de países como Nueva Zelanda, Francia,
Holanda, Australia y el este Europeo, donde se utilizaban unos 4 millones de dosis en
estado líquido, ya sea en el modo refrigerado o conservado a temperatura ambiente
(Chupin y Tibbier, 1995).
El principio de la dilución y refrigeración del semen bovino es proporcionar la
sobrevida del espermatozoide por períodos prolongados de tiempo (2 a 4 días)
(Salisbury y Van Demark, 1961). El mantenimiento refrigerado a 5ºC disminuye la tasa
metabólica de la célula, extendiendo así su supervivencia: avance que se conoció a
través del descubrimiento de la yema de huevo y sus propiedades como buffer y
protector de las membranas celulares (Phillips, 1939). No obstante, no todos los
cambios producto de la disminución de la actividad metabólica son favorables para la
célula, por ejemplo la disminución de la actividad Na/K+, también disminuye a 5ºC,
decreciendo la difusión de los iones a través de la membrana, aumentando de esta forma
la concentración intracelular de Na+, hecho que va en detrimento de la vida del
espermatozoide. (Quinn y White, 1966, 1967; Sweadner y Goldin, 1980). El desarrollo
de CAPROGEN (con su posterior adición de Catalasa) (Shannon et al, 1972), permitió
utilizar el semen a temperatura ambiente entre 15 ºC y 27 ºC, con buenas tasas de
fertilidad hasta el día 5 post dilución (Vishwanath y Sannon, 1997).
La criopreservación del semen bovino produce daños irreversibles en las
membranas espermáticas tales como expansión y alteración de las membranas 5
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plasmáticas y acrosoma, cambios en el medio osmótico, alteración del mecanismo del
Calcio y cambios en la actividad enzimática. La capacitación espermática, la reacción
acrosomica, y la posterior unión de los espermatozoides al ovocito, requieren de una
actividad de membrana bioquímicamente activa. Los cambios posteriores a la
congelación, producen la desestabilización de las membranas espermáticas, proceso que
se asemeja a los cambios sufridos en la capacitación fisiológica del esperma. Teniendo
en cuenta que los espermatozoides capacitados y/o con su reacción acrosomica
desarrollada tienen una menor sobrevida (cambios sufridos durante la congelación), esto
explica la disminución en la fertilidad del semen congelado (Tartaglione et al, 2004).
La fertilidad del semen de los distintos toros y procesado por diferentes métodos
tanto en estado líquido (fresco o diluido a temperatura ambiente) como congelado, ha
sido medida por años por la Tasa de No Retorno, la cual es una medida indirecta de la
fertilidad que definió específicamente Rycroft en 1992, como el porcentaje de vacas
que no retornan al servicio en un plazo determinado de tiempo después de una
inseminación, por lo general de 60 a 90 días (Dalton, 2013).
Distintos estudios se llevaron a cabo a lo largo del tiempo comparando semen
congelado o en estado líquido, previa colecta, dilución y ajustes de concentración de las
muestras obtenidas tanto en carne como en leche. Gerard (2005) en Francia, revisó ocho
campañas de inseminación midiendo tasas de no retorno de semen fresco (refrigerado a
5º) utilizado hasta la tercer jornada post colecta versus semen congelado de los mismos
toros. No encontró diferencias significativas entre la tasa de preñez, tanto por semen
fresco como congelado. Si encontró diferencias cuando se analizaron las jornadas de
utilización de los mismos toros en semen fresco comparando sus días de utilización,
donde disminuía drásticamente la tasa de preñez a partir de la segunda jornada post
colecta. Además revisó el incremento de producción de dosis que significaba para los
centros productores de semen la incorporación del semen fresco. Debido a que la dosis
producida en fresco se produjo con una concentración de 3 a 5 millones de
espermatozoides totales por dosis, mientras los mismos toros produjeron una dosis para
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criopreservación de 10 a 18 millones de espermatozoides totales por pajuela, se
producían de 2.5 a 3 veces más dosis por toro.
En trabajos realizados en Francia se observó que en los protocolos de IATF existe
un 15 a 20 % de vacas que ovulan en otro momento generalmente después de la mayoría
del rodeo. Esas vacas fuera del periodo óptimo son en principio penalizadas por semen
de toros sub fértiles o de sobrevida menor en el tracto genital, sabiendo que para detectar
estos animales es necesaria una batería de test que no se dispone en un Centro de IA
convencional (citometría entre otros) (Decuadro Hansen, 2015).
Durante el uso comercial de semen fresco (para aquellos países que lo utilizaron) se
conservó durante 3 días. Existiendo una caída de la TNR a partir de la hora 48,
encontrándose algunos reproductores que disminuyeron antes. El semen fresco en estos
casos proporcionó 2 puntos menos de tasa de gestación que el congelado.
Las concentraciones que se utilizaron fueron de 2 a 5 millones de espermatozoides
totales x dosis (dependiendo del toro) y esto fue uno de los motivos de la utilización del
semen fresco: multiplicar el uso de toros de calidad genética altamente solicitados
(generalmente ganado Holstein).
Tanto en Nueva Zelanda como en Europa el semen se conservó en forma anaeróbica,
sin nada de oxígeno. Para ello, en Europa las dosis se almacenaron en pajuelas
especiales impermeables al oxigeno (anaerobiosis total), iguales físicamente a las
pajuelas clásicas pero con un tapón diferente y el plástico no era de PVC, sino un
material impermeable completamente al oxígeno, refrigeradas a 4ºC.
En Nueva Zelanda la dosis se mantuvo a 20ºC en Caprogen®, diluyente que posee
gran complejidad para realizarlo, porque parte de los componentes de su fórmula afectan
su calidad (catalasa y ácido caproico). Para garantizar la anaerobiosis el diluyente se
gasificó con nitrógeno, y luego las dosis se envasaron en máquinas instaladas debajo de
una campana de nitrógeno (Decuadro Hansen, 2015).
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OBJETIVO GENERAL
El presente trabajo tiene por objetivo comprobar si el uso de semen fresco aumenta
la tasa de preñez en programas de IATF en rodeos comerciales de carne.
OBJETIVOS ESPECIFICOS
Entre los objetivos específicos se encuentran: Mejorar la perfomance reproductiva
general de los rodeos de carne usando semen fresco. Aumentar la tasa de
aprovechamiento de reproductores locales de alto valor genético (ajustando la relación
dosis, concentración, preñez). Comparar las tasas de preñez entre vacas, vacas secas y
vaquillonas inseminadas a tiempo fijo. Verificar si los datos a campo coinciden con la
bibliografía internacional.
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2. MATERIALES Y MÉTODOS
2.1. ANIMALES Y LUGAR DE TRABAJO
El presente trabajo se llevó a cabo en cuatro establecimientos de la provincia
de Buenos Aires, ubicados en los partidos de Adolfo Gonzales Chávez, Adolfo
Alsina, General Paz y Azul. Se utilizaron 1309 vacas (con 40 días post parto en
adelante), vacas secas y vaquillonas para carne, BosTaurus, con una condición
corporal entre 3 y 4 (3.3 promedio), (escala 1 a 5). Se realizó el trabajo durante tres
estaciones reproductivas (primavera 2013, otoño 2014 y primavera 2014)
Los vientres se inseminaron en su totalidad sobre pastoreo de praderas
naturales o implantadas, y la vaquillona recibió solo en su recría suplementación
invernal, pero no durante el servicio o a posterioridad del mismo.
TRATAMIENTOS
Todas las vacas recibieron palpación transrectal al inicio del tratamiento de
sincronización, rechazándose aquellos animales que no se encontraban aptos para ser
incluidos en el mismo. En este mimo día (Día 0) recibieron un dispositivo
intravaginal impregnado con progesterona (0.5 g DIB Syntex, Argentina) y se les
aplicó 2 mg de Benzoato de estradiol (BE, Syntex) vía IM profunda. El día 7 u 8 se
les retiro el dispositivo, y se inyectaron 150 µg de D-Cloprostenol (Ciclase, Syntex,
Argentina), junto con 1 mg de Cipionato de estradiol (Cipiosyn, Syntex, Argentina),
ambos vía IM profunda, y recibieron IATF a las 48 hs. posteriores al retiro del
dispositivo.
Se conformaron en todos los rodeos dos grupos aleatorios de vientres: Grupo
A semen fresco (producido por nuestro equipo; n=790) y Grupo B congelado
comercial (n=519).
El semen fresco y el congelado comercial fueron equilibrados, de manera tal
de presentar calidades seminales similares.
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El diagnostico de gestación se realizó entre los 30-35 días post IATF, por
ultrasonografía transresctal (Sono Scape SSI 600, Modo M, transductor Lineal 5
Mhz). Todos los vientres recibieron palpación transresctal entre los 80-90 días post
IATF.
2.2.COLECTA DE SEMEN Y PROCESAMIENTO
Se colectaron seis toros para utilizar en fresco en los distintos lotes por
electroeyaculación (Electrojac J5, USA). El proceso consistió, en una colecta previa
(7-10 días anteriores a la IATF) para evaluar los parámetros de calidad seminal
(Vigor, % Motilidad de progresiva, concentración y morfología espermática a través
de la tinción de eosina-nigrosina) a través de observación directa por microscopía. En
todos los casos, se colecto el semen el día previo (12-15 hs anteriores a la IATF). Se
realizaron dos colectas por toro con un intervalo de treinta minutos entre ellas y cada
muestra obtenida se pre-diluyo durante 15 minutos una parte de semen en una parte
de diluyente, se utilizó indistintamente leche y yema de huevo (leche 100%
descremada con el agregado del 20% de yema de huevo, elaboración artesanal) o
diluyente comercial con glicerol (BIOXCELL®, IMV, Francia), incubadas a 30ºC, en
baño María. Luego de la predilución se realizó una segunda evaluación microscópica
y, posterior a esta se llevó adelante la dilución total ajustando la concentración del
semen a 15 millones de espermatozoides totales por dosis. Después se mantuvo el
semen otros 15 minutos a 30ºC y finalizado este período se refrigeraron las muestras
a 5ºC hasta su uso al día siguiente. Se fijó un mínimo de 60% de motilidad progresiva
con vigor 4 al final de la evaluación para el semen refrigerado, seleccionándose la
mejor de las dos muestras elaboradas para cada reproductor (Tabla 1).
Todas las muestras fueron envasadas en pajuelas de 0.5 ml (IMV, Francia) previo a
su utilización y selladas con alcohol polivinilico (IMV, Francia). El semen
refrigerado se asignó al azar conformando el Grupo A (n=790)
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Tabla 1. Calidad de semen fresco de cada uno de los reproductores utilizados en el
ensayo
Toro* Diluyente %MP1 Vigor %EZ nor.2 Estab.3 Temp.4
Ortiz Bioxcell 65 4 90 La
Primera
Primavera
2013
Shorthorn Bioxcell 70 4 92 El
Combate
Primavera
2013
4318 Bioxcell 75 4 95 El
Combate
Primavera
2013
Ilusionista Leche
yema
75 4 90 San
Carlos
Primavera
2014
Ilusionista Leche
yema
70 4 90 El
Combate
Primavera
2014
Ch1037 Leche
yema
65 4 88 El
Combate
Primavera
2014
Puma Leche
yema
60 3 94 El
Alfanje
Otoño
2014
*No se incluye la concentración (Ver semen control). 1%MP: porcentaje de motilidad
progresiva.2% EZ nor.: porcentaje de espermatozoides normales. 3Estab.:
Establecimiento. 4Temp.: Temporada de inseminación.
2.3.SEMEN CONTROL
El semen congelado comercial, fue adquirido a centros comerciales de venta de
genética, que fueron evaluados por los test in vitro donde se evaluó porcentaje de
motilidad progresiva y vigor a la hora 0 y 2 post descongelado junto al porcentaje de
espermatozoides normales por tinción de eosina nigrosina (prueba de
termorresistencia), superando los parámetros mínimos y se utilizó al azar en cada uno
de los lotes conformando el Grupo B (n=519). Se utilizaron 11 toros de semen
comercial, que recibieron al azar desde 9 vacas hasta 160, dependiendo esta
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variabilidad del tamaño de los lotes y la libertad de prueba con la que se contó en
cada rodeo. Se utilizaron 11 toros de semen comercial, que recibieron al azar desde 9
vacas hasta 160, dependiendo esta variabilidad del tamaño de los lotes y la libertad de
prueba con la que se contó en cada rodeo. La concentración del semen fresco como
del congelado fue evaluada a través de la cámara de Neubauer utilizada para el
recuento de espermatozoides. Nueve de estos reproductores fueron de origen nacional
(genética argentina) y procesados por centros argentinos (Pascuale, 15 x 106
espermatozoides con motilidad progresiva por dosis; West, 9 x 106 espermatozoides
con motilidad progresiva por dosis; Chakourú 48, 18 x 106 espermatozoides con
motilidad por dosis; Brutal, 17 x 106 espermatozoides con motilidad progresiva por
dosis; Jacinto, 10 x 106 espermatozoides con motilidad progresiva por dosis; Soguero,
8 x 106 espermatozoides con motilidad progresiva por dosis; Legado, 9 x 106
espermatozoides con motilidad progresiva por dosis; Vistoso, 20 x 106
espermatozoides con motilidad progresiva por dosis y Yarara 318, 7 x 106
espermatozoides con motilidad progresiva por dosis), solo dos de ellos de origen
canadiense (Lego, 8 x 106 y Absolute, 9 x 106 espermatozoides con motilidad
progresiva por dosis, respectivamente).
2.4.ANÁLISIS DE DATOSLos datos se analizaron estadísticamente mediante el programa InfoStat (InfoStat,
2008 UNC). Se utilizó regresión logística, donde se evaluaron las variables: Tipo de
semen (fresco vs congelado), Categoría (vaca con cría vs vaca seca y vaquillona),
Establecimiento, Inseminador y Toro (evaluando la fertilidad individual de cada
reproductor).
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3. RESULTADOS
Los resultados obtenidos del análisis, mostraron diferencias significativas en
algunas de las variables analizadas entre ellas: tipo de semen (P=0.0001), porcentaje
de preñez según categoría (P<0.05), como así también entre la fertilidad del semen de
los toros utilizados (P<0.05).
No se encontraron diferencias significativas entre los inseminadores (P>0.05) a lo
largo del trabajo.
El uso de semen fresco en los rodeos evaluados, logro incrementar los porcentajes de
preñez obtenidos en IATF, de manera significativa sobre el uso de semen congelado
(Tabla 2)
Tabla 2. Porcentaje de preñez de semen fresco versus congelado en vacas y
vaquillonas de carne inseminadas a tiempo fijo
SEMEN
FRESCO
(Grupo A)
SEMEN
CONGELADO
(Grupo B)
% Preñez
Fresco
% Preñez
Congelado
VACAS
IATF
790 519 66.07a
(522/790)
55.23b
(285/519)
abValores con distinto superíndice difieren significativamente (P<0.01)
Entre las categorías de vientres evaluadas la correspondiente a vaca con cría,
presento valores significativamente superiores de preñez (P<0.05) con respecto a las
vacas secas (sin cría al pie) y vaquillonas. Es importante remarcar que en las vacas
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con ternero al pie (post parto de 40 días en adelante) fue donde se obtuvieron los
resultados más altos de porcentajes de preñez utilizando semen fresco. (Tabla 3)
Tabla 3. Porcentaje de preñez vaca con cría versus vaquillona y vaca seca
Preñez Fresco
(%)
Preñez
Congelado (%)
Preñez Total
(%)
Vaca Con Cría 66.88 55.81 61.35 a
Vaca Seca y
Vaq.
56.35 54.32 55.29 b
ab Valores con distinto superíndice difieren significativamente (P<0.05)
Se analizó también si existieron diferencias entre los establecimientos en los
cuales se realizó el relevamiento de datos, encontrándose también diferencias
significativas (P<0.05) entre dos de los establecimientos. (Tabla 4)
Tabla 4. Porcentaje de preñez de los distintos establecimientos
Vientres
IATF
Preñez
IATF
Porcentaj
e Servicio Año
LA
PRIMERA 303 170 56,11b PRIM 2013
EL
COMBAT
E 370 256 69,19a PRIM 2013
EL
ALFANGE 150 112 74,67ab OTO 2014
SAN
CARLOS 151 89 58,94ab PRIM 2014
COMBAT 333 202 60,66ab PRIM 2014
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E
ab Valores con distintas letras difieren significativamente (P<0.05)
La fertilidad entre el semen de los toros utilizados también presento diferencias
significativas (P<0.05), aunque no se encontraron diferencias entre ninguno de los
reproductores utilizados en fresco, si existieron entre algunos de estos y aquellos
congelados que presentaron menor fertilidad. (Tabla 5)
Tabla 5. Porcentaje de preñez de los distintos toros utilizados
IATF n PREN
PORCE(
%)
TIPO DE
SEMEN
R4318 227 172 75,77a Fresco
Shorthorn 28 22 78,57a Fresco
CH1037 78 49 62,82ab Fresco
ILUSIONIST
A 233 142 60,94ab Fresco
ORTIZ 124 74 59,68ab Fresco
PUMA 100 62 62,00ab Fresco
ABSOLUTE 10 7 70,00abCONGELAD
O
LEGO 10 9 90,00aCONGELAD
O
BRUTAL 28 19 67,86abCONGELAD
O
CHAK48 116 62 53,45abCONGELAD
O
JACINTO 9 6 66,67abCONGELAD
O
PASCUALE 18 11 61,11ab CONGELAD
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O
SOGUERO 37 16 43,24bCONGELAD
O
VISTOSO 50 28 56,00abCONGELAD
O
WEST 40 22 55,00abCONGELAD
O
YARARA
318 160 81 50,63bCONGELAD
O
LEGADO 39 26 66,67abCONGELAD
OabValores con distinta letra difieren significativamente (P<0.05)
4. DISCUSIÓN
La Inseminación artificial es una técnica eficiente y muy importante para el
mejoramiento genético bovino. El descubrimiento de nuevos agentes crioprotectores
y el avance en el desarrollo de diluyentes, han producido que el uso de semen fresco
haya sido gradualmente abandonado, aunque este último presente algunas ventajas
sobre el criopreservado. (Verberckmoes et al. 2005).
El proceso de congelado expone a los espermatozoides a un shock térmico, dando
como resultado daños en la membrana plasmática y el acrosoma (Woelders et al.,
1997; Celeghini et al., 2008). Durante la criopreservación se producen cristales de
hielo, y la redistribución de lípidos de membrana, alterando también el intercambio
de iones, resultando de ello una disminución de la viabilidad, la fertilidad y en
algunos casos hasta la muerte del espermatozoide. (Kaka et al, 2014). En cambio, el
semen refrigerado, posee un gran número de espermatozoides intactos, capaces de
fertilizar comparado con el semen congelado. Esto justifica su uso. No obstante, este
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proceso depende de su correcta manipulación y los diluyentes elegidos para su
preservación hasta la inseminación (Crespilho et al., 2012).
En Argentina se realizaron algunos trabajos comparando semen fresco y congelado
de los mismos toros, si bien encontraron diferencias numéricas a favor del primero no
pudieron arribar a diferencias significativas (Tribulo et al., 2005; Torquatti et al.,
2006; Vater et al., 2006; Felice et al., 2012).
Crespilho et al (2014), encontró que la fertilidad del semen refrigerado por 48 hs.,
luego de colectado, presenta resultados similares o inferiores al semen
criopreservado. Esto estuvo asociado a un alto estrés oxidativo, peroxidación de los
lípidos de membrana y fragmentación del ADN. Un trabajo reciente (Papa, et al
2014) en Brasil, contrastó estos resultados, obteniendo una tasa de preñez superior
(P<0.05) del semen fresco diluido en BB® (diluyente comercial) con agregado de
glicerol en IATF, por sobre el semen congelado descongelado también diluido en BB
®. El semen fresco diluido en BB® con agregado de glicerol obtuvo el cincuenta uno
por ciento (n=278), el semen fresco diluido en BB® sin glicerol obtuvo el cuarenta y
cuatro por ciento (n=268) y el congelado el cuarenta y uno por ciento (n=216).
Además, lograron corroborar a través de análisis computarizados de imágenes
(CASA;HTM-IVOS 12, Hamilton Thorne Research, Beverly, MA, USA), y por
citometría de flujo, la mejor performance que presenta el semen refrigerado versus el
congelado, en parámetros de medición objetiva donde se encontraron diferencias
significativos en: porcentaje de motilidad total (TM%;P<0.05), porcentaje de
motilidad progresiva (PM%; P<0.05) Velocidad media (VAP; P<0.05), velocidad
lineal (VSL; P<0.05), velocidad curvilínea (VCL; P<0.05), frecuencia de batido de
cola (TBF; P<0.05), rectitud (STR; P<0.05), linealidad (LIN;P<0.05), rapidez
espermática (RAP; P<0.05), integridad de membranas plasmáticas y acrosomales
(IPAM;P<0.05), índice de fragmentación de ADN (DFI; P<0.05) mientras que no se
encontraron diferencias en: peroxidación lipídica (LP;P>0.05), estrés oxidativo (OS;
P>0.05) y capacitación (CAP; P>0.05).
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De acuerdo con los resultados presentados en los párrafos anteriores, el
presente trabajo también obtuvo una diferencia significativa cuando se desafío el
semen congelado versus el semen fresco. La diferencia radicó, que el trabajo
realizado en Brasil, pudo utilizar sistemas de medición objetiva (CASA y Citometría
de Flujo) donde el semen fresco (refrigerado con y sin glicerol), mantuvo valores
superiores al congelado en todos los parámetros de medición que presentan relación
con la fertilidad.
5. CONCLUSIONES
El uso de semen fresco, posibilito aumentar los resultados de preñez obtenidos
en IATF con respecto al semen congelado.
El creciente uso de la IATF, a nivel mundial y resultados obtenidos similares a
este trabajo en el resto de Sudamérica, vuelven a poner al semen fresco como una
herramienta de potencial ilimitado para mejorar la eficiencia reproductiva de los
rodeos, maximizando el uso de individuos de alto merito genético producidos
localmente en cada país. Previo al advenimiento de la IATF, esta técnica no podía
superar al semen congelado, debido a la brusca caída que sufría en fertilidad con el
correr de las horas. Además logra aumentar la cantidad de preñeces a primo
inseminación de la categoría que más exigencias presenta para concebir en IATF, la
vaca con cría al pie.
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El semen fresco además, incrementa la tasa de aprovechamiento de los toros en
los centros de producción de semen, aunque serán necesarios más trabajos asociados
a IATF, para comprobar si se mantienen las diferencias significativas en preñez
respecto al semen criopreservado, cuando su concentración disminuya hasta valores
por debajo de los umbrales conocidos. Por último, puede permitir tasas de fertilidad
aceptables en aquellos toros que no la posean luego del proceso de congelado, debido
a que las células refrigeradas no sufren injurias a nivel de membrana, ni de su medio
intracelular. El presente trabajo encontró diferencias significativas entre algunos de
los toros utilizados en fresco y aquellos que obtuvieron menores índices de preñez en
congelado. A pesar de la gran variabilidad que existe entre eyaculados de los mismos
toros y entre ellos, es de esperar que si lográsemos identificar individuos con altas
tasas de fertilidad. Se puedan estabilizar porcentajes de preñez más elevados que los
logrados hasta aquí en IATF.
6. BIBLIOGRAFÍA
Bonadonna, T., Succi, G.W.,1980. Artifial insemination in the world. Proc. 9th Int.
Congr. Anim. Artif. Insem. Madrid, Spain, vol.5, pp. 655-657.
Brogliatti, G.M. García Miglaro F., Laramburu G. Tríbulo H., 2012. Aplicaciones del
análisis computarizado de semen (CASA) en la evaluación de la calidad seminal y la
fertilidad. Especialidad en Reproducción Bovina. Curso congelado de semen. Anexo. pp
37.
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