PRUEBAS GENETICAS EN LA JUSTICIA

Dr. Gustavo A. Penacino

Fundacion INGENwww.ingen.org.ar

Unidad de Análisis de ADN Colegio Oficial de Farm. y Bioquímicos

www.adn.ac

Sociedad Latinoamericana de Genética Forensewww.slagf.org

Qué parte del ADN estudia la Genética Forense?

• Sólo NO CODIFICANTE (junk dna) porque:

• 1) Hay mas regiones variables.• 2) Cuestiones éticas.

• Existen alrededor de 3.000.000 de sitios variables en nuestro genoma.

Ejemplo de sitio variable «NN»

Alelo 1

Alelo 2

Sitio de adhesión (constante en todos los humanos)

Unidad de Repetición (ej.: ACTG)

Sitio de adhesión (constante en todos los humanos)

ESCENA DEL CRIMEN

MUESTRAS

OTRAS MUESTRAS

PCR: Reaccion en cadena de la polimerasa

SE copia muchas veces un fragmento de ADN

ADN

Se desnaturalizan las cadenas

Reasociación de Primers

Síntesis de la nueva cadena

Se repite 30veces elCiclado

Secuenciador de adn

Ejemplo de sitio variable «NN»

Alelo 1

Alelo 2

Sitio de adhesión (constante en todos los humanos)

Unidad de Repetición (ej.: ACTG)

Sitio de adhesión (constante en todos los humanos)

Kits con 21 o mas marcadores

Marcadores de cromosoma masculino

Kits con 23 o mas marcadores

Analizando un caso criminal.

Material Indubitado de la Víctima.

Material SubunguealTomado de la Víctima

Tejido Dactilar de la Víctima.

Sangre del Sospechoso1.

Sangre del Sospechoso 2

Coincidencia total

CALCULOS ESTADISTICOS

* indice y probabilidad de paternidad.

* indice y probabilidad de coincidencia

Marcadores de cromosoma X

Investigator Argus X-12 Kit dyes and corresponding markers

Dye Markers

6-FAM Amelogenin DXS10103 DXS8378 DXS7132 DXS10134

BTG DXS10074 DXS10101 DXS10135

BTY DXS7423 DXS10146 DXS10079

BTR HPRTB DXS10148

Investigator Argus X-12 Kit dyes and corresponding markers

Marcadores de cromosoma X

•

Rastreo de Línea de Herencia Materna:

El ADN Mitocondrial (ADNmt)

Mitocondria

•*Central de energía celular.

•*100 a 1000 mitocondrias por célula.

•*Información Genética Propia.

Genoma Mitocondrial

•*Circular, covalentemente cerrado.

•*16.569 pares de bases.

•*D-Loop o Región de Control no codificante (variable).

Secuenciación del ADNmt

Herencia Materna Alto Número de Copias Regiones Variables ubicadas en el D-loop

COMO LLEGAMOS HASTA AQUÍ?

Los primeros intentos: metodo de southern blot(1985-1991)

GRAN AVANCE: PCR (1991)

LOS METODOS MANUALES

Los secuenciadores menos o mas «automaticos» (1996- Actualidad)

ABI 377 ABI 310

1992Atentado a la Embajada de

Israel

Toma de muestras del atentado

•

Métodos en uso en 1992

Métodos innovadores (basados en PCR)

1994Atentado a la

mutual israelita AMIA

Atentado a la AMIAVista general

Atentado a la AMIA.Muestras

Atentado a la AMIA.Resultados

Atentado a la AMIA.Resultados

Atentado a la AMIA.Resultados

www.ingen.org.ar

1) La realización de estudios de paternidad gratuitos o a bajo costo para personas de escasos recursos, y los análisis de evidencias forenses a bajo costo (50% del arancel normal) a través de convenios con los Poderes Judiciales provinciales.

- Particulares: laboratorios propios en Monte Grande.

- Poderes Judiciales: laboratorio del Colegio de Farm. y Bioquímicos, gestionado por la Fundación.

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2) La capacitación de profesionales que se dedican a los análisis de ADN mediante cursos y jornadas, con especial referencia a la solución de errores y dificultades que se presentan en el laboratorio.

Organización y/o patrocinio de Congresos –como COLTIC y TIAFT-, Jornadas y cursos de perfeccionamiento para profesionales.

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3) Puesta en marcha de laboratorios oficiales mediante la modalidad “llave en mano”, los cuales prestan servicios al Poder Judicial local.

- Estrategia: alta calidad de resultados al menor costo posible.- En San Luis (finalizado), Misiones (en ejecución) y Santiago del Estero (en ejecución).- Una decena de provincias en etapa de consulta.

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4) Estudio de metodologías de análisis de ADN orientadas al reemplazo de los costosos reactivos importados; y desarrollo de nuevas tecnologías.

-Asesoramiento sobre la optimización de recursos y uso de reactivos accesibles en el mercado local.-Investigación de nuevas tecnologías: fenotipado forense (proyecto).

2015?2017?2020?

Nuevos desarrollos: otros conceptos-INDELS-

Otra tecnología: Microarreglos de ADN

Microarreglos de ADN

Microarreglos de ADN

Fully Integrated Portable DNA Analyzer

Fully Integrated Portable DNA Analyzer

• (1) Recolección de la muestra • (2) Extracción del ADN • (3) PCR • (4) Electroforesis• (5) Análisis de STRs. • TODO EL PROCESO EN 25 MINUTOS!.

HACIA EL IDENTI-KIT GENETICO-Forensic Phenotyping-

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Analysed tooth of General Władysław Sikorski (World War II).

Władysław Sikorski indeed had blue eyes and blond hair

• OJOS AZULES , PIEL y CABELLOS CLAROS - mutación de los Genes OCA1 y OCA2- (oculocutaneous albinism)

↓ melanina : Hum Genetics

• CABELLOS ROJOS y PIEL CLARA - mutación del Gen MC1R ↑feomelanina : Science

Polimorfismo Gen MC1R (Melanocortin 1- receptor) - 30 variantes alélicas de la eumelanina a través de las

enzimas TYRP1, TYRP2, SILV y la proteína P

• COLOR DE OJOS , PIEL y PELOS - variantes alélicas de los genes SLC24A4 y IRF4

• COLOR DE PELO - variante cercana al gen KITLG

• COLOR DE OJOS y PECAS - dos variantes del gen TYR

• PECAS - una variante asociada a 6p25.3

• PELO OSCURO, PIEL COLOR OLIVA y COLOR DE OJOS - polimorfismos en el gen MATP (Membrane associated transporter protein)

FENOTIPADO FORENSE: últimos hallazgos publicados

FINMás información sobre análisis de ADN:

• Sociedad Latinoamericana de Genética Forense: www.slagf.org

• Laboratorio: www.adn.ac

• Fundación INGEN: www.ingen.org.ar