INSTITUTO POLITECNICO NACIONAL

CICS – UMA.

MEDICINAGEN. 40.

RESPUESTA INMUNE CELULAR

CORTEZ PALACIOS DAVIDSÁNCHEZ SÁNCHEZ JAZMÍN

SALCEDO MANZANARES SAYDE PALOMAROJAS VIGUERA ROSA EVELIA.RODRIGUEZ BERNAL KARYNA.

RESPUESTA INMUNE CELULAR.

Según el componente del S.I. que

participa

ANTECEDENTES HISTÓRICOS. 1893.

Se afirma que las células del huésped son los principales mediadores de la inmunidad. TEORÍA CELULAR DE LA INMUNIDAD.

1900 … Demostración que factores solubles presentes en el

suero inmunizado mejoraban la fagocitosis de las bacterias. OPSONIZACIÓN.

1950. Se establece firmemente la teoría celular inmune. Resistencia a la bacteria intracelular Listeria

monocytogenes.

La especificidad de la inmunidad celular se debe a los linfocitos (LT) y de la células fagocíticas (macrófagos) contra un antígeno determinado.

Acción directa de los Linfocitos timodependientes (LT).

Provee mecanismos para destruir células infectadas. Con ellas a los agentes

infecciosos. Impidiendo su diseminación.

R.I. Celular.

CARACTERÍSTICAS DE R.I.

ONTOGENIA DE LOS LT.

LT.

IL-3 (Producida por los LTh). Actuará a nivel medular

Unión con la timopoyetina. Hará que las cél. Pluripotenciales (Ag.

CD36) inicien la producción de linfoblastos.

Originar a los L pre-tímicos. Cél. Programadas a entrar al timo.

La IL-7 estimula la proliferación de estos L.

La timosina α 3-4 refuerzan la formación de estos (Ls p-t).

Pre-tímicos.

Generando la expresión del Ag --- CD7. Molécula conocida como Rct “homing” o de Residencia. Reconocimiento.

Existencia de “adressina” en los capilares del timo. Marca la dirección del “hogar”.

Durante todo este desarrollo el L expresa el AG CD45. Fosfatasa proteica de tirosina.

Enzima indispensable para maduración y regulación de funciones.

Presenciaimplica.

La interacción de los LT inmaduros con las células del estroma tímico va a determinar el tipo de receptores que van a presentar las diferentes subpoblaciones de los LT.

Adquisición de CD2 Favorece la adherencia de los L a las CPA.

Proceso de desarrollo. 3 eventos:

Intra-tímicos.

1. Eliminación de los clonos de L autoreactivos.

2. Orientación irreversible haia el linaje T.3. Selección de subpoblaciones o repertorio

del LT con capacidad de expresar los Ags del CMH y con capacidad funcional distinta.

Irreversible.

Reorganización del genoma Permitirá que las células expresen

determinados receptores.

UNIDAD DE DIFERENCIACIÓN.

Cél. Linfoide.Cél. Epitelial (estroma).

2 cél.

Formarán un laberinto de túneles. Los L que llegan al órgano a madurar

deben migrar de la corteza a la médula del Timo.

Algunas de estas cél. Epiteliales forman canastas o sacos. “Abrazan” de 20 a 100 timocitos. Denominadas “Células Nodrizas” (Thymic nurse cell).

Son responsables de la restricción HLA que adquieres los L.

ELIMINACIÓN DE LOS CLONOS DE L AUTOREACTIVOS.

Proceso de selección. Son destruidos mas del 99% de L que

ingresan al Timo. Algunos clonos son solo reprimidos.

Posteriormente por algún factor externo se convierten en agresores.

Originando enfermedades autoinmunes En esta etapa aprenden a reconocer lo

propio de lo no propio.

LINAJE DE LT.

Los sobrevivientes adquieren en su membrana el Ag CD3. Compuesto por 5 cadenas

diferentes.

El CD3 se expresa íntimamente ligada al conjunto de moléculas conocidas como receptor de los LT – “Rec T”.

Responsable de la transmisión de mensajes.

Reconocimiento de un Ag.

Los L que adquieren el CD3 pueden expresar otras proteínas propias del Rec T.

Timosina α-1.

ORIGEN DE SUBPOBLACIONES DE LT.

Perdida de uno

de estos Ags.

CD4+, CD8-, CD3+.

LTh (LT-A)

•Alfa y beta.•CD4+, CD8+,

CD3+, RecT-2+.

Perdida de uno

de estos Ags.

CD4-, CD8-, CD3+.

LT-S.

•Alfa y beta.•CD4+, CD8+,

CD3+, RecT-2+.

La timosina α-7 promueve esta

formación.

CD4-, CD8-, CD3+.

LT-S.Ag. CD28

ACTIVIDAD LÍTICA.

LTc (LT-Ctx).

El timo “exporta” un tipo de L capaz de reconocer millones de Ags diferentes.

Post-tímicos.

RECONOCIMIENTO DEL AG.

LINFOCITOS TC.

Su maduración es en el timo. Expresan la molécula accesoria de

membrana CD8 y sólo puede reconocer un antígeno extraño si está unido a la hendidura de la membrana de moléculas de CMH clase I.

También se le conoce como LT asesinas.

Establecen contacto físico con células extrañas o alteradas y las destuyen.

Luego de la unión con el complejo antígeno-molécula, se secreta linfosinas y perforinas.

Desempeñan un papel muy importante en el rechazo de los injertos y la inmunología de tumores.

Los linfocitos T citotóxicos (LTC), un tipo de célula inmunitaria que puede utilizarse para combatir las células tumorales, no sobreviven mucho tiempo y tienen una actividad antitumoral limitada en el organismo (microscopio de barrido).

CITOTOXICIDAD.

LNK

¿QUÉ ES CITOTOXICIDAD?

La citotoxicidad es la cualidad de ser toxico a células.

Uno de los mecanismos efectores de determinadas células especializadas del sistema inmunitario, consiste en la capacidad para interaccionar con otras células y destruirlas.

Las células sobre las que actuaran se llamaran “células diana”

Este mecanismo interviene cuando:

Las células citotoxicas reconocen y destruyen aquellas células portadoras del Ag que indujeron su activación mediante un mecanismo conocido como citotoxicidad

Infecciones Viricas

Células Neoplasias

Destrucción de células alogenicas

TIPOS DE CITOTOXICIDAD Citotoxicidad directa específica: es la

llevada a cabo por los linfocitos citotóxicos (TC), que están restringidos por el haplotipo propio MHC-I, y que poseen CD8+ como moléculas correceptoras. (aunque algunas son CD4+ y están restringididas por MHC-II)

Citotoxicidad directa inespecífica: las células agresoras naturales (NK) reconocen determinantes inespecíficos de células tumorales o infectadas con ciertos virus.

Citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos: es un mecanismo indirecto por el que células matadoras como NK, eosinófilos, etc., interaccionan con el antígeno por medio de puentes de anticuerpos previamente unidos a receptores para Fc (fracción cristalizable) de la célula

CITOTOXICIDAD DIRECTA ESPECIFICA

Se lleva a cabo por los linfocitos CTL (linfocitos T citoliticos)

Los linfocitos Tc (citotoxicos) en reposo al activarse apropiadamente terminan diferenciandose en los llamados linfocitos T citoliticos (CTL)

Su función principal es eliminar células infectadas por virus

FASES

La actuacion de estas celulas las podemos considerar en dos fases:

Activación y diferenciación de los precursores TC hasta CTL.

Fase efectora: destrucción de la célula diana

FASE DE ACTIVACIÓN DE LOS LINFOCITOS TC Los linfocitos Tc vírgenes se activan solo en

órganos secundarios. Se requerirá de tres señales para activarlos

La señal específica suministrada por la interacción entre su complejo TCR-CD3-CD8 con el MHC-I de una célula presentadora

La señal coestimulatoria suministrada por la misma célula (unión entre B7 y CD28).

La interleucina IL-2.

Una ves activados se va a iniciar la proliferación y diferenciación del linfocito T en reposo hasta que se convierta de linfocito T en CTL (linfocito T citolitico)

FASE EFECTORA

ADHESIÓN Y FORMACIÓN DEL CONJUGADO

Las células efectoras interaccionan a través de diferentes receptores de superficie con estructuras en la membrana de la diana.

Tras el reconocimiento especifico se produce una interacción de gran avidez entre las moléculas de LFA-1 del CTL y moléculas ICAM-1 de la célula diana

ACTIVACIÓN DEL LINFOCITO

Esta fase es dependiente de calcio Dura de 5-10 minutos Las señales resultantes de la union entre

receptores son enviadas al interior de la célula a través de cascadas proteín-quinasas y proteín-fosfatasas, así el linfocito queda programado para la lisis

FASE LITICA

El citoesqueleto del CTL se reorganiza, de modo que tanto el aparato de Golgi como los granulosomas se sitúan en el polo celular que queda en contacto con la célula diana.

Entonces, los gránulos se fusionan con la membrana citoplásmica, produciéndose la exocitosis de su contenido al estrecho espacio intercelular

DESTRUCCIÓN DE LA CÉLULA DIANA

La destrucción de la célula diana puede ocurrir por varios mecanismos, predominando uno u otro en función de la naturaleza de la superficie de la célula diana, y del grado de activación que haya alcanzado el linfocito CTL

Necrosis Celular Apoptosis

…......CUANDO ES POR LISIS

Lisis osmótica

de la célula

*su principal función es dejar pasar otros componentes de los gránulos

…. CUANDO ES POR APOPTOSIS

CITOTOXICIDAD DIRECTA INESPECÍFICA

Mediana por células NK los cuales son un tipo de linfocitos grandes que se consideran como linfocitos inespecíficos pertenecientes ala inmunidad natural

Poseen una función importante en los primeros días de una infección vírica, al eliminar células en las que el virus se esté multiplicando.

Modelo de dos receptores

Se piensa que las NK reciben señales de dos receptores de modo que distinguen entre células sanas y enfermas.

1._El receptor NKR-P1 se une a oligosacáridos de glucoproteínas de superficie de la célula enferma, procedentes de glucosilaciones anómalas.

2._ Simultáneamente una ausencia de señal procedente de otro receptor, el Ly-49. la interacción entre Ly-49 y las MHC-I envía una señal a la NK para que detenga su mecanismo matador

CITOTOXICIDAD MEDIADA POR CÉLULAS DEPENDIENTES DE ANTICUERPOS

Existen varios tipos de células potencialmente citotóxicas que poseen receptores para Fc de anticuerpos, y que pueden por lo tanto participar en la destrucción de células diana (enfermas) o de helmintos recubiertos en ambos casos por anticuerpos.

RECONOCIMIENTO

Las células NK, monocitos y PMN neutrófilos poseen el receptor Fcg RIII (=CD16), de baja afinidad, que reconoce las subclases IgG1 e IgG3.

Los eosinófilos posen (factor estimulante de colonias) Fce R-I y Fce R-II, estando especializados en destruir helmintos

FORMACIÓN DE INMUNOCOMPLEJOS

La célula infectada se recubre de anticuerpos.

Una célula agresora adecuada (p. ej., la NK) interacciona con la célula enferma o el parásito a través de los anticuerpos, que se engarzan con el receptor para Fc de la célula agresora

Célula BlancoCélula acecina

Finalmente la célula agresora libera por exocitosis el contenido de sus gránulos, y/o secreta productos tóxicos (proteínas catiónicas, hidrolasas lisosomales, anión superóxido y otros intermediarios reactivos del oxígeno (ROI),

LINFOCINASY SU IMPORTANCIA BIOLOGICA

Jazmín Sánchez Sánchez

Las células presentadoras de antígeno y los linfocitos respondedores reaccionan al contacto con el antígeno produciendo factores solubles con actividad biológica. Tratando de distinguir a los factores solubles producidos por los linfocitos de aquellos producidos por los macrófagos, a los primeros se les dio el nombre de linfocinas, en tanto que a los segundos se les llamo monocinas.

SE CONSIDERO….

*Que estos nombres ya no eran apropiados porque muchos de los factores producidos por los linfocitos y macrófagos también eran producidos por otras células, incluyendo las no linfoides. Así que se decidió utilizar el termino de citosinas.

1985

Se acordó que las linfocinas y monocinas retendrían el nombre descriptivo a su función hasta que se conociera su secuencia de aminoácidos, entonces se les conocería como interleucinas (IL) y se identificarían con un numero progresivo (IL-1, IL-2, IL-3, etc.)

A EXCEPCIÓN DE…

Factores de Necrosis Tumoral (TNF) alfa y beta.

Interferon (IFN) gamma.

Los mediadores liberados por células T activadas por el antígeno pueden activar después a los macrófagos. Tales mediadores se conocen con el nombre de LINFOCINAS.

Su función es atraer a las células macrófagos al lugar en que se ha producido una infección o inflamación, además de prepararlos para el ataque a los posibles invasores extraños que estén produciendo dicha infección

Las Linfocinas son proteínas que mantienen la comunicación entre diferentes células del S.I. Son secretadas principalmente por linfocitos T cooperadores o auxiliares y por macrófagos. El interferón es un tipo de linfocina de actividad antiviral y capaz de inhibir el crecimiento de los virus y de activar los macrófagos.

Dos son las principales citocinas de Inmunidad Celular o Th1: Interferón gamma (IFN-γ) o tipo 2, llamado también interferón Inmune porque sólo es producido por células inmunológicas activadas; la otra citocina es Interleucina 2 o Factor de Crecimiento de Células T (IL-2 o TCGF). IFN-γ es el principal activador de macrófagos y células citotóxicas T y NK. Interesantemente IFN-γ tiene acción en la Inmunidad Humoral, induciendo la producción de IgG.

IL-2 fue descubierta en 1977 por Robert Gallo (co-descubridor del VIH), es el factor autocrino de crecimiento de las células T, esencial para mantener viables los cultivos de linfocitos T, también genera células citotóxicas especialmente NK y macrófagos antitumorales.

¿Qué son? Origen Función biológica

Ejemplos

*son proteínas que mantienen la comunicación entre diferentes células del S.I.*Son polipéptidos, glucosilados o no

Pueden ser secretadas por las células T o B , aunque se cree que las primeras constituyen la fuente principal en las respuestas mediadas por células.

Activación de macrófagos:Por medio de tres tipos de efectos mediados por linfocinas:1.- Por una solo linfocina2.- Cuantitativos, aumentados o disminuidos según el estado de unas segundas señales3.- Efectos cooperadores (sinérgicos) en los que un mediador aislado carece de acción en ausencia de un segundo mediador.

*factor inhibidor del macrófago,*el factor mitogenético * linfotoxina

CASCADA DE ACTIVACIÓN

IL-2T

IL-2

SINERGIA POR ACTIVACIÓN DOBLE

IL-2

INF ɣ

SINERGIA

MACRÓFAGO

ACTIVACIÓN CELULAR

INDUCCIÓN DE LOS RECEPTORES

IL-1T T

IL-2INDUCCIÓN DEL RECEPTOR

Algunas linfocinas producidas por los linfocitos T activados

1.- Factor quimiotáctico para macrófagos (MCF)2.-Factor activador de los macrófagos (MAF)3.- Factor inhibidor de la migración de los macrófagos (MIF)4.- Interferón gamma 5.- Factor citotóxico o linfotóxina (LT) probablemente idéntico al llamado factor de necrosis tumoral beta, activo sobre diferentes tipos de células.

Las linfocinas secretadas por un tipo de linfocitos Th es capaz de suprimir la respuesta del otro tipo y viceversa.

La protección contra una enfermedad depende de una potente activación de los macrófagos (para destruir los microrganismos intracelulares) por las linfocinas liberadas por los linfocitos Th1.

Cuando por alguna razón se impide la respuesta Th1 o se provoca la respuesta Th2 (anticuerpos contra linfocinas Th1, incapacidad para producir linfocinas Th1, al añadir IL-4 o IL-10 exógena), los macrófagos no pueden ser activados para cumplir con su función .

Acción sobre macrófagos

Acción sobre otras células o tejidos

Acción sobre otros linfocitos

1.-FACTOR INHIBIDOR DE LA MRIGRACIÓN DE LOS MACRÓFAGOS (MIF)

2.-FACTOR ACTIVADOR DE LOS MACRÓFAGOS (MAF)

3.-FACTOR DE FUSIÓN DE LOS MACRÓFAGOS

1.-FACTOR ESTIMULADOR DE COLONIAS

2.-FACTOR ESTIMULADOR DE LA LINFOTOXICIDAD

3.- LINFOTOXINA (FNT)

4.-INTERFERONES

1.-INTERLEUCINA 2

2.-INTERLEUCINA 3

3.-INTERLEUCINA 4

4.- INTERLEUCINA 5

5.- INTERLEUCINA 6

6.- FACTOR DE TRANSFERENCIA

IL-2IL-3IL-4IL-5IL-6FT

MIFFAM

INFs

IL-5

IL-4

LINFOCINAS Y SUS CÉLULAS BLANCO

LINFOCITOS B Y T

MACRÓFAGOS

EOSINÓFILOS

MASTOCITOS

El mayor conocimiento a cerca del papel de las linfocinas se cree podrá ser de gran importancia en el tratamiento de los tumores, infecciones virales, SIDA y las aplasias medulares.

INTRADERMORREACCIÓN

CONCEPTO: Son pruebas para valorar clínicamente la respuesta inmune celular

ante diferentes antígenos.

Generalidades:

*Ayuda a diagnosticar: tuberculosis, tétanos etc.

Las pruebas cutáneas son reacciones de hipersensibilidad mediada por células se usa una inyección intradérmica

Los linfocitos T circulantes sensibilizados por una infección anterior reaccionan con el antígeno en la piel e inducen a una respuesta inmune especifica.

Valorar diversas funciones cutáneas, para el diagnóstico de algunas enfermedades en las que la piel se encuentra afectada.

para tratamiento de procesos alérgicos y principalmente para determinar la hipersensibilidad inmediata o retardada.

La hipersensibilidad retardada (HSR) se refiere a la respuesta inmunitaria de tipo celular.

Una prueba intradérmica La aplicación de una sustancia que pueda provocar una

reacción inflamatorio local y se realiza con dosis creciente de la sustancia potencialmente dañina.

La intradermorreacción practicada con toxinas diversas permite estudiar el grado de inmunidad o de receptividad para las enfermedades que corresponden a cada una de estas toxinas.

INTRADERMORREACCIONES

Son pruebas cutáneas de hipersensibilidad retardada mediada por células. Puede medirse experimentalmente mediante: La inyección intradérmica de antígeno y la observación para determinar si se desarrolla una lesión cutánea característica en el sitio inyectado.

Luego de 48-72 h si la reacción cutánea positiva indica que se cuenta con una población de células TH1 sensibilizadas específicas para el antígeno de prueba.

Por ejemplo, para saber si una persona se expuso a M. tuberculosis se le inyecta por vía intradérmica , un derivado proteínico de la pared celular de este microorganismo.

La lesión cutánea es resultado de infiltración intensa de células en el sitio de inyección de la proteína mencionada durante una reacción de hipersensibilidad tardía; 80 a 90% de estas células corresponde a macrófagos.

INTRADERMORREACCIONES MÁS UTILIZADASINTRADERMORREACCIONES MÁS UTILIZADAS

Tuberculina: Es una de las intradermorreacciones más

utilizadas en todo el mundo. Se usa para valorar la hipersensibilidad retardada de Mycobacterium

tuberculosis

Leishmanina: Se obtiene a partir de un

extracto de promastigotes de Leishmania braziliensis

cultivados en el medio, se utiliza para el diagnóstico de leishmaniasis, para estudios

inmunológicos y epidemiológicos.

Histoplasmina: Se aplica para determinar la existencia de

contacto previo con Histoplasma capsulatum. El antígeno está constituido

por un polisacárido de la pared celular. La reacción es positiva cuando se observa

induración de 5 mm; se utiliza para estudio epidemiológicos

RESULTADOS: Función del Sistema Inmunológico Del grado de lesión provocada en la piel

Función del Sistema Inmunológico Del grado de lesión provocada en la piel

Respuesta inflamatoria (+) indica dos cosas:

1)Individuo con la función inmunológica normal

2) indica experiencia -Pasada o Presente- con el antígeno especifico,

demostrada por la respuesta “sensibilizada”

Respuesta negativa (-), no hay inflamación, indica:

1)Ausencia de exposición previa al agente infeccioso.

2)Infección activa con perdida temporal de la reactividad, energía.

Respuesta negativa (-), no hay inflamación, indica:

1)Ausencia de exposición previa al agente infeccioso.

2)Infección activa con perdida temporal de la reactividad, energía.

INMUNOFLUORESCENCIA

Marcar anticuerpos con moléculas que tienen la

capacidad de fluorescencia

permite

emplean

Compuestos fluorescentes como:

Fluoresceína

Rodamina

Ficoeritrina

Estas moléculas pueden conjugarsecon la región Fc de

una molécula de anticuerpo sin afectar

su especificidad.

Colorante orgánico, absorbe luz azul (490nm) y emite una fluorescencia verde-amarillo intensa (517nm)

Colorante orgánico , absorbe en el intervalo de verde-amarillo (515nm) y emite una fluorescencia roja intensa ()546nm

Pigmento obtenido de algas absorbe luz 30 veces más que la fluoresceína y es un emisor brillante de fluorescencia roja, de uso amplio.

ExcitaciónEmisión

EL ANTICUERPO ESPECIFICO SE CONJUGA

DIRECTAMENTE CON FLUORESCEINA.

DIRECTA

puede ser

INDIRECTA

Se incuban diferentes diluciones del suero sobre portaobjetos que poseen el sustrato o preparación de antígeno. Este puede consistir en un corte histológico de hígado o de riñón, el cual se permeabiliza y se conserva en congelación. Sobre estos sustratos tisulares o celulares, se incuba el suero en estudio, para permitir la unión de los posibles autoanticuerpos a los antígenos presentes en el núcleo. Después de lavar el material no unido, los autoanticuerpos son detectados mediante la adición de fluorocromo. La preparación es finalmente observada bajo el microscopio de fluorescencia, Al igual que otros métodos de inmunofluorescencia indirecta, esta técnica permite no solo detectar los anticuerpos antinucleares, sino también titularlos (mediante diluciones seriadas) y clasificarlos según sus diversos patrones de reconocimiento.

APLICACIONES PRINCIPALES:

Es un instrumento cualitativo Identificar varias subpoblaciones de

linfocitos, en especial las de células T CD4 y CD8

Una aplicación mayor de la técnica de anticuerpo fluorescente es la localización de antígenos en cortes de tejido o en compartimientos subcelulares.

CITOMETRIA DE FLUJO

Automatizar el análisis y la separación de células teñidas con

anticuerpo fluorescente.

permite

•Permite seleccionar una población de células en subpoblaciones que tienen diferentes perfiles de marcadores de superficie.

•Analizar poblaciones celulares que se marcaron con dos o incluso tres diferentes anticuerpos fluorescentes.

•Es uno de los instrumentos esenciales para la detección y clasificación de leucemias en muchos centros médicos.

•La citometría de flujo constituye una tecnología extraordinariamente potente para el análisis cuantitativo y la clasificación de poblaciones celulares marcadas con uno o más anticuerpos fluorescentes.

APLICACIONES PRINCIPALES:

BIBLIOGRAFÍA. http://books.google.com.mx/books?

id=UhN9f8wiIKIC&pg=PA137&lpg=PA137&dq=linfocinas&source=bl&ots=3j1zRGks06&sig=bxmnnqkR3B_fq3jrkBzAcyWloNY&hl=es&sa=X&ei=zM8uUeORE6nkyQHDnYDgDg&sqi=2&ved=0CDUQ6AEwAg#v=onepage&q=linfocinas&f=true

http://books.google.com.mx/books?id=CtWACreoBkC&pg=PA152&lpg=PA152&dq=linfocinas&source=bl&ots=Yi173DzWnd&sig=NVKTSfZpz0JmQsYJ_eD2bSQzFI&hl=es&sa=X&ei=4bMuUZ-aDKblyQGvtoHIAw&ved=0CFAQ6AEwBQ#v=onepage&q&f=true