Tecnicas de cultivo in vitro de plantas

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El cultivo in vitro de plantas: ventajas y aplicaciones

Alejandro AtarésGrupo de Cultivo in vitro y Mejora Vegetal

I.B.M.C.P. – Departamento de BiotecnologíaUniversidad Politécnica de Valencia

Introducción al cultivo in vitro de plantasDefinición Métodos y aparatos

Aplicaciones del cultivo in vitro de plantasLa multiplicación de plantasLa mejora sanitariaLa mejora genética

El método haplo-diploideEl aprovechamiento de la variación intraespecífica y extraespecíficaLa transformación genética

Ventajas del cultivo in vitro

El cultivo in vitro de plantas: ventajas y aplicaciones

El cultivo in vitro de plantas: ventajas y aplicaciones

Definición de cultivo in vitro de plantas

Conjunto de técnicas que permiten el cultivo de las células y tejidos vegetales en condiciones axénicas y el aprovechamiento de su totipotencia, así como de su aptitud para la variación y capacidad de modificación genética

El cultivo in vitro de plantas: ventajas y aplicaciones

Definición de cultivo in vitro de plantas

Conjunto de técnicas que permiten el cultivo de las células y tejidos vegetales en condiciones axénicas y el aprovechamiento de su totipotencia, así como de su aptitud para la variación y capacidad de modificación genética

El cultivo in vitro de plantas: ventajas y aplicaciones

Cultivo de células y tejidos vegetales

Requerimientos para el crecimiento de células y tejidos vegetales

Aire

Luz

Agua

Nutrientes

El cultivo in vitro de plantas: ventajas y aplicaciones

Definición de cultivo in vitro de plantas

Conjunto de técnicas que permiten el cultivo de las células y tejidos vegetales en condiciones axénicas y el aprovechamiento de su totipotencia, así como de su aptitud para la variación y capacidad de modificación genética

El cultivo in vitro de plantas: ventajas y aplicaciones

Cultivo axénico

Desarrollado en un ambiente donde no hay ningún otro organismo vivo

El cultivo in vitro de plantas: ventajas y aplicaciones

Condiciones axénicas

Métodos de esterilización

PT

t

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Condiciones axénicas

Esterilización del material vegetal

NaOCl (0,25-1%) + 7X (gotas)

Agua desionizada estéril

10-30 minutos 15 minutos10 minutos

5 minutos

Agitación

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Condiciones axénicas

Trabajo sin contaminación

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Condiciones axénicas

Diseño del laboratorio

Almacenamiento (temperatura ambiente y frío) Áreas externas

Lavado (puede estar junto a la de esterilización)

Otras (despachos, salas de reunión, recepción, etc)

Preparación-esterilización de los medios de cultivo

Transferencia (condiciones de esterilidad)

Incubación de los cultivos (condiciones controladas) Áreas protegidas

Transferencia Incubación

El cultivo in vitro de plantas: ventajas y aplicaciones

Definición de cultivo in vitro de plantas

Conjunto de técnicas que permiten el cultivo de las células y tejidos vegetales en condiciones axénicas y el aprovechamiento de su totipotencia, así como de su aptitud para la variación y capacidad de modificación genética

El cultivo in vitro de plantas: ventajas y aplicaciones

TotipotenciaCapacidad de regeneración de una planta entera a partir de una célula o un grupo de células

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Totipotencia

Células vegetales totipotentes

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Totipotencia

Organogénesis adventicia

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Totipotencia

Embriogénesis somática

El cultivo in vitro de plantas: ventajas y aplicaciones

Definición de cultivo in vitro de plantas

Conjunto de técnicas que permiten el cultivo de las células y tejidos vegetales en condiciones axénicas y el aprovechamiento de su totipotencia, así como de suaptitud para la variación y capacidad de modificación genética

El cultivo in vitro de plantas: ventajas y aplicaciones

Aptitud para la variación genética

El cultivo in vitro de plantas: ventajas y aplicaciones

Aptitud para la variación genética

El cultivo in vitro de plantas: ventajas y aplicaciones

Definición de cultivo in vitro de plantas

Conjunto de técnicas que permiten el cultivo de las células y tejidos vegetales en condiciones axénicas y el aprovechamiento de su totipotencia, así como de su aptitud para la variación y capacidad de modificación genética

El cultivo in vitro de plantas: ventajas y aplicaciones

Capacidad para la modificación genética

El cultivo in vitro de plantas: ventajas y aplicaciones

Aplicaciones del cultivo in vitro de plantas

La multiplicación de plantas: MicropropagaciónLa mejora sanitaria: MicroinjertoLa mejora genética: Incremento de variabilidad genética

Método haplodiploideTransformación genética

El cultivo in vitro de plantas: ventajas y aplicaciones

Aplicaciones del cultivo in vitro de plantas

La multiplicación de plantas: MicropropagaciónLa mejora sanitaria: MicroinjertoLa mejora genética: Incremento de variabilidad genética

Método haplodiploideTransformación genética

El cultivo in vitro de plantas: ventajas y aplicaciones

Micropropagación

Multiplication

El cultivo in vitro de plantas: ventajas y aplicaciones

Micropropagación

El cultivo in vitro de plantas: ventajas y aplicaciones

Micropropagación

El cultivo in vitro de plantas: ventajas y aplicaciones

Aplicaciones del cultivo in vitro de plantas

La multiplicación de plantas: MicropropagaciónLa mejora sanitaria: MicroinjertoLa mejora genética: Incremento de variabilidad genética

Método haplodiploideTransformación genética

Microinjerto en cítricos

El cultivo in vitro de plantas: ventajas y aplicaciones

Variedad

Patrón

El cultivo in vitro de plantas: ventajas y aplicaciones

Aplicaciones del cultivo in vitro de plantas

La multiplicación de plantas: MicropropagaciónLa mejora sanitaria: MicroinjertoLa mejora genética: Incremento de variabilidad genética

Método haplodiploideTransformación genética

El cultivo in vitro de plantas: ventajas y aplicaciones

Incremento de la variabilidad genéticaVariación somaclonal: alternativa a otros agentes mutagénicos

Ficus benjamina

SC-Fb-’Green snow’

El cultivo in vitro de plantas: ventajas y aplicaciones

Incremento de la variabilidad genéticaRescate de embriones: solución de incompatibilidad sexual

Semilla inmadura con embrión híbrido

Fruto inmaduroEsterilización

Aislamiento de semillas inmaduras con proembriones

Polen Especie A

Polinización

Pistilo Especie B

Híbrido interespecífico

El cultivo in vitro de plantas: ventajas y aplicaciones

Incremento de la variabilidad genéticaRescate de embriones: solución de incompatibilidad sexual

Lilium auratum

Lilium henryx

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Incremento de la variabilidad genética

Hibridación somática

Permite la unión de dos materiales con incompatibilidad sexual

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Incremento de la variabilidad genética

Hibridación somática

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Incremento de la variabilidad genética

Hibridación somática

En función de la información genética que se combina de ambos parentales se habla de:

- hibridación simétrica- hibridación asimétrica- cibridación

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Incremento de la variabilidad genética

Hibridación somática

Hay distintos métodos de fusión de protoplastos:

- químicos- eléctricos- combinados

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Incremento de la variabilidad genética

Hibridación somática

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Incremento de la variabilidad genética

Hibridación somática

El cultivo in vitro de plantas: ventajas y aplicaciones

Aplicaciones del cultivo in vitro de plantas

La multiplicación de plantas: MicropropagaciónLa mejora sanitaria: MicroinjertoLa mejora genética: Incremento de variabilidad genética

Método haplodiploideTransformación genética

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El método haplo-diploide

Obtención de plantas haploides

Estadios florales Cultivo de anteras Regeneración plantas haploides

El cultivo in vitro de plantas: ventajas y aplicaciones

El método haplo-diploide

Ejemplo de mejora del arroz

Oryza sativa x O. glaberrima

Obtención de dobles haploides

Selección

El cultivo in vitro de plantas: ventajas y aplicaciones

Aplicaciones del cultivo in vitro de plantas

La multiplicación de plantas: MicropropagaciónLa mejora sanitaria: MicroinjertoLa mejora genética: Incremento de variabilidad genética

Método haplodiploideTransformación genética

El cultivo in vitro de plantas: ventajas y aplicaciones

La transformación genética

Cocultivo de explantes con Agrobacterium

A. tumefaciensPlántula de tomate Precultivo

(+)

Co-cultivoInfección

Cultivo sin PS (2-3 días) Selección Desarrollo TG1

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La transformación genética

Soja

Algodón Maíz

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La transformación genéticaInforme anual del I. S. A. A. A.

(INTERNATIONAL SERVICE FOR THE ACQUISITION OF AGRI-BIOTECH APPLICATIONS)

El cultivo in vitro de plantas: ventajas y aplicaciones

La transformación genética

Presente y futuro

El cultivo in vitro de plantas: ventajas y aplicaciones

Ventajas del cultivo in vitro de plantas

Uniformidad y reproducibilidad

Micropropagación

El cultivo in vitro de plantas: ventajas y aplicaciones

Ventajas del cultivo in vitro de plantas

Uniformidad y reproducibilidad

Obtención de un producto “superior”

Micropropagación

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Ventajas del cultivo in vitro de plantas

Uniformidad y reproducibilidad

Obtención de un producto “superior”

Mayor control sanitario

Micropropagación

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Ventajas del cultivo in vitro de plantas

Uniformidad y reproducibilidad

Obtención de un producto “superior”

Mayor control sanitario

Aplicable a un amplio espectro de especies

Micropropagación

El cultivo in vitro de plantas: ventajas y aplicaciones

Ventajas del cultivo in vitro de plantas

Uniformidad y reproducibilidad

Obtención de un producto “superior”

Mayor control sanitario

Aplicable a un amplio espectro de especies

Mejor planificación durante el año

Micropropagación

El cultivo in vitro de plantas: ventajas y aplicaciones

Ventajas del cultivo in vitro de plantas

Uniformidad y reproducibilidad

Obtención de un producto “superior”

Mayor control sanitario

Aplicable a un amplio espectro de especies

Mejor planificación durante el año

Ahorro de espacio

Micropropagación

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Ventajas del cultivo in vitro de plantas

Uniformidad y reproducibilidad

Obtención de un producto “superior”

Mayor control sanitario

Aplicable a un amplio espectro de especies

Mejor planificación durante el año

Ahorro de espacio

Alta tasa de multiplicación

Micropropagación

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Ventajas del cultivo in vitro de plantas

Uniformidad y reproducibilidad

Obtención de un producto “superior”

Mayor control sanitario

Aplicable a un amplio espectro de especies

Mejor planificación durante el año

Ahorro de espacio

Alta tasa de multiplicación

Disminución de costes

Micropropagación

El cultivo in vitro de plantas: ventajas y aplicaciones

Mejora sanitaria

Saneamiento del material cultivado

Ventajas del cultivo in vitro de plantas

El cultivo in vitro de plantas: ventajas y aplicaciones

Mejora sanitaria

Saneamiento del material cultivado

Eliminación de enfermedades de origen vírico

Ventajas del cultivo in vitro de plantas

El cultivo in vitro de plantas: ventajas y aplicaciones

Mejora sanitaria

Saneamiento del material cultivado

Eliminación de enfermedades de origen vírico

Aumenta la seguridad en el intercambio de germoplasma

Ventajas del cultivo in vitro de plantas

El cultivo in vitro de plantas: ventajas y aplicaciones

Mejora genética

Mayor rapidez en la obtención de ciertos logros

Ventajas del cultivo in vitro de plantas

El cultivo in vitro de plantas: ventajas y aplicaciones

Mejora genética

Mayor rapidez en la obtención de ciertos logros

Objetivos difíciles de conseguir por los métodos clásicos

Ventajas del cultivo in vitro de plantas

El cultivo in vitro de plantas: ventajas y aplicaciones

Mejora genética

Mayor rapidez en la obtención de ciertos logros

Objetivos difíciles de conseguir por los métodos clásicos

Objetivos inabordables por los métodos convencionales

Ventajas del cultivo in vitro de plantas