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Instituto de Medicina Legal y Ciencias Forenses de Panamá Universidad de Panamá Facultad de Medicina Centro de Postgrado y Maestría Maestría en Ciencias Clínicas con Especialización en Medicina Legal PROYECTO DE INVESTIGACIÓN Díptera (Calliphoridae y Sarcophagidae) que ovipositan y larvipositan sobre los restos de un hígado humano fresco, en un área boscosa del Parque Natural Metropolitano, provincia de Panamá. ASESOR MAGISTER PERCIS GARCÉS ESTUDIANTE DR. JORGE HIDALGO MUÑOZ NEPUBL/CAO£ PANAYA 111111t6tER .0 PUBLICO ir ,, "" "^` ■• ,.,.. +.11 I R.Mill ,1111 • 1,2. .... e, , .... 01. %%I ■ . ..1 . .. . ' "-.., ,. •-• < 14 de marzo de 2011
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Instituto de Medicina Legal y Ciencias Forenses de Panamá
Universidad de Panamá
Facultad de Medicina
Centro de Postgrado y Maestría
Maestría en Ciencias Clínicas con Especialización en Medicina
Legal
PROYECTO DE INVESTIGACIÓN
Díptera (Calliphoridae y Sarcophagidae) que ovipositan y larvipositan sobre los restos de un hígado humano fresco, en un área boscosa del
Parque Natural Metropolitano, provincia de Panamá.
ASESOR
MAGISTER PERCIS GARCÉS
ESTUDIANTE
DR. JORGE HIDALGO MUÑOZ
NEPUBL/CAO£ PANAYA
111111t6tER .0 PUBLICO ir
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14 de marzo de 2011
Agradecimientos
A MIS compañeros y amigos Victzela Aguirre y Juan Carlos Rodríguez quienes
trabajaron arduamente junto conmigo para poder lograr la matenahzación de
esta investigación al profesor Percis Garcés por sus consejos apoyo y guia al
Dr Carlos de Bernard del Departamento de Patología Forense a la Señora
Denis Castillo y a los asistentes de autopsia de la Morgue Judicial de Panamá
por su colaboración al Lic James Coronado del departamento de entomología y
al Lic Zevallos del departamento de microscopla del Instituto Smithsoman de
estudios tropicales por su gran ayuda en la toma de fotografías de los
especímenes A Dios todo poderoso por darme la fortaleza para seguir adelante
INDICE TEMÁTICO
INTRODUCCIÓN 2-4
OBJETIVOS 5
MARCO TEÓRICO 6 11
MATERIALES Y MÉTODO 12 15
RESULTADOS 16 23
DISCUSIÓN 24 25
CONCLUSIÓN 26
RECOMENDACIONES 27
BIBLIOGRAFIA 28
Diptero (Calhphondae y Sarcophagodae) que ovipositan y lamposttan sobre los restos de un higado humano fresco, en un arca boscosa del Parque Natural Metropolitano, provincia de Panamá
INTRODUCCIÓN
La entomología forense es una disciplina que data del siglo XIII cuya principal
utilidad es la estimación del intervalo post mortem También constituye una
herramienta valiosa para aportar evidencia en eventos como negligencia
detección de drogas y desplazamientos de cuerpos de una región a otra
después de la muerte (1)
La ciencias forenses de la actualidad reconocen y aceptan 5 fases de
descomposición el estado fresco que corresponde a los fenomenos cadavéricos
o abióticos y al periodo colorativo o cromático de los fenómenos destructores
de putrefacción el estado hinchado que corresponde al período enfisematoso o
hinchado de los fenómenos destructores de putrefacción el estado de
descomposición activa y avanzada que corresponde al periodo colicuativo o de
licuefacción de los fenómenos destructores de putrefacción y el estado de restos
secos que corresponde al periodo de reducción esquelética de los fenómenos
destructores de putrefacción (9 10)
Muchos autores hacen referencia a que existe una relación de insecto-estado de
descomposición activamente interdependiente Este comportamiento hace que
los insectos presenten patrones de sucesión definidos los que postenormente
son utilizados para definir el orden en que aparecen los insectos en la escena de
la muerte Además se ha demostrado que el estado de descomposición
avanzada se inicia con la pupacion y aparición de larvas de insectos comunes
en fauna cadavérica (2)
2
El orden de insectos Diptera se compone de moscas y cuenta con
aproximadamente 86 000 especies conocidas Es uno de los más grandes
órdenes de insectos que puede ser encontrado en casi cualquier hábitat
Los dipteros predominan en la fauna cadavénca respecto de otros artrópodos
especialmente los de las familias Calhphondae Muscsdae y Sarcophagdae (2)
Siendo estas las más importantes en proveer información precisa en cuento al
tiempo de muerte
Las moscas de la familia Calhphondae se encuentran entre los primeros
insectos en ovipositar y colonizar restos humanos Estudios expenmentales han
documentado su llegada a los restos en minutos de exposición (3 4 5) Los
dipteros califóndos ovipositan en la fase fresca y de hinchazon mientras otros
dípteros como los musados los hacen en la fase activa y avanzada de la
descomposición (6 7)
Las moscas de la carne o de la familia Samophagidae se pueden encontrar
asociadas a restos humanos en estadios tempranos y tardíos de la
descomposición y bajo la mayoría de las condiciones incluyendo sol sombra
sequedad espacios abiertos y cerrados (3) Los sarcofágidos son elementos
muy importantes del componente necrófago de la comunidad sarcosaprófaga y
sus larvas de tercer estado se consideran consumidores secundanos Autores
como Povolny & Verves (1997) citan un bajo numero de especies de
sarcofágidos implicadas en casos forenses no obstante son numerosos los
trabajos en los que los sarcofágidos aparecen relacionados con cadáveres
humanos (Goff 1991 Introna et al 1998 Benecke 1998 Leclercq 1997 Oliva
1997 Anderson 1995) (8)
La determinación del intervalo postmorten depende de la actividad de los
artrópodos y de datos climatológicos utilizándose diferentes metodologías para
poder determinarlo edad de larvas tasas de desarrollo de las mismas y la
sucesión de insectos siempre determinando la temperatura como factor externo
importante para que los insectos alcancen el desarrollo de su ciclo de vida (2)
3
En este trabajo se estudiaron los ciclos de vida de dípteros de las familias
Calhphondae y Sarcophagidae como pnmeras especies colonizadoras utilizando
como bemodelo un hígado humano fresco colocado en un ecosistema boscoso
humedo bajo sombra (Parque Natural Metropolitano) La toma de parámetros
morfométncos (longitud y ancho) en cada estadio del desarrollo ayudó a
determinar su tasa de crecimiento y por ende el tiempo que demoran en
desarrollarse pudiendo realizar una estimación del intervalo post mortem De
igual forma la medición de los parámetros antes mencionados y la utilización de
claves taxonómicas en las larvas de cada familia nos permitieron determinar su
instar o estadio del desarrollo que consta de 3 fases de menor a mayor tiempo
de desarrollo
En nuestro pais no existen estudios similares que detallen las especies de
dípteros que pnmanamente colonizan los cadáveres (relación insecto-estado) y
que son de relevancia forense para la estimación del intervalo postmorten por lo
que la información obtenida con datos reales y confiables permitira establecer
nuestra realidad en relación a otros países y podrá servir de punto de partida
para otros estudios en el futuro contnbuyendo a concentrar sobre la
importancia que tiene el desarrollo de la entomología forense en nuestro medio
como auxiliar en la administración de justicia
4
OBJETIVOS
Objetivo General
• Determinar las familias de Díptera (Calliphondae y Sarcophagidae) que
ovipositaron y larvipositaron sobre los restos de un higado humano fresco
en un área boscosa del Parque Natural Metropolitano provincia de
Panamá
Objetivos Específicos
• Estratificar los diferentes géneros de Diptera que colonizaron durante 48
horas los restos de un higado humano fresco colocado en un área
boscosa del Parque Natural Metropolitano
• Establecer el crecimiento larval de las diferentes especies de Díptera que
ovipositaron y colocaron larvas sobre los restos de hígado fresco
• Determinar el ciclo de vida de las familias de Diptera que colonizaron los
restos de hígado humano fresco
• Estimar el intervalo post mortem mediante la confección de curvas de
crecimiento y desarrollo larval
5
MARCO TEÓRICO
Los insectos son el grupo más numeroso entre los invertebrados de la carroña
en parte debido a su habilidad de colonizar rápidamente diferentes hábitats
Recientemente se han llevado a cabo muchos estudios de fauna entomológica
asociada a eventos criminales para una mejor definición de los grupos de
insectos como Entomoindicadores forenses
La mayor contnbución hecha por los entomólogos forenses en la investigación
de la muerte es una estimación de la duración del intervalo post modem En
general en las primeras fases de descomposición las estimaciones se basan en
el estudio del crecimiento de una o dos especies de insectos particularmente
dípteros
Dependiendo de las especies de insectos y de las condiciones de la escena el
grado de desarrollo puede indicar el tiempo de muerte Frente a la necesidad de
estimar el tiempo de la muerte a partir de datos entomológicos el investigador
puede seleccionar una metodología de estudio ya sea un modelo de desarrollo
de insectos o por sucesión de los mismos Esto puede incluir una comparación
con otras investigaciones o datos expenmentales pueden ser generados
postenormente para igualar un caso (24)
Muchas especies de dipteros sobre todo de las familias Calliphondae y
Sarcophagidae asociadas a cuerpos en descomposición han sido identificadas
en servicios forenses y por investigadores de escena del crimen (11 12)
En un estudio experimental llevado a cabo al norte de Italia de abnl a junio de
2002 se utilizó carne de cerdo como carnada para recolectar y definir la fauna
de insectos de interés forense en un hábitat urbano En este experimento se
recolectaron analizaron e identificaron especies de díptera y c,oleóptera Se
trabajaron numerosos individuos de las familias Calliphondae y Sarcophagidae y
Phondae Se observó que las 2 pnmeras familias eran atraídas por la carne
6
fresca mientras que la tercera era atraida por carne en descomposición
teniendo ciclos de vida completos en áreas cerradas y abiertas (13)
Bajo condiciones relativamente estables la Calliphora vicina tuvo un ciclo de
desarrollo de huevo a adulto de 19 a 22 días (2 días huevo 5 días larvas con
los ultimos 3 días en postalimentación y 11 dias como pupa) (13)
En condiciones de intempene la Sarcophaga sp estuvo en estadio larval por 6 a
8 días incluyendo 3 días como larva de postalimentación o madura
En condiciones de encierro y bajo condiciones climatológicas estables la
Sarcophaga sp tuvo un ciclo de desarrollo de 23 a 26 días (7 dias larvas con 2
dias de larvas de postalimentación y 15 días como pupa) (13)
En un área urbana de Brasil se expusieron cadáveres de cerdos domésticos
para determinar las etapas de la descomposición y los insectos de relevancia
forense explotando los cadáveres Cuatro especies de Calliphondae fueron
recolectadas y consideradas de ser de potencial importancia forense
Chrysomya albiceps Chrysomia megacephala Chrysomia putona y Lucillo
eximia A diferencia de otros estudios las Sarcophagidae fueron relativamente
tardías en llegar al cadáver con una actividad que inicio el día quinto mientras
especies de Muscidae llegaron más temprano (14)
En Buenos Aires Argentina (2001) se realizó un estudio en el que se utilizaron
camadas de carne mostrando que las especies dominantes son de amplia
distnbución (Calliphora mina y Phaenicia Sencata) con diferentes
comportamientos en una gran zona latitudinal Las especies de Calliphondae
Cochhomya macellana y Chrysomya albiceps fueron encontradas en cadáveres
encerrrados la ultima también en cuerpos a la intempene y como especie
primaria cuando se derramaba sangre (15)
7
En Brasil se realizó un estudio en el que se analizó la ocurrencia de especies de
insectos de importancia forense (Diptera) de 14 cadáveres tomados del Instituto
de Medicina Legal en Pernambuco acorde a las condiciones del cuerpo y al
patrón de colonización por insectos De forma simultánea registraron la
diversidad de insectos en el ambiente circundante utilizando trampas de
carnadas en donde 5 especies estuvieron presentes en los cadáveres
Chrysomya albiceps Chrysomya megacephala y Cochliomya macellana
(Calliphondae) Oxisarcodexia nograndensis y Rama belforti (Sarcophagidae)
C albiceps fue la especie más frecuente en los cadáveres y la más abundante
en las trampas Especies refendas como de importancia forense como Lucillo
eximia Chrysomya putona Oxisarcodexia modesta y Ophira chalcogaster fueron
recolectadas de las trampas pero no de los cadáveres lo cual indica una
colonización limitada de los cadáveres en las escena de muerte a pesar de la
ubiquidad de especies necrófagas en el área (16)
En un estudio realizado en Alemania se investigó el tiempo que le toma a las
moscas necrófagas encontrar y ovipositar cadáveres frescos colocados a la
intemperie y encerrados Se utilizó un par de cerdos uno a la intempene y el
otro en un cuarto expuestos simultáneamente en 9 ocasiones Las especies que
visitaron ambas locaciones y el numero de lotes de huevos depositados por las
moscas entre ambas locaciones se monrtonzaron las 2 8 24 y 48 horas luego
de la exposición En todos los casos el cadáver de cerdo encerrado fue infestado
por Calliphora vicina El cerdo a la intempene fue infestado por una vanedad de
especies L sencata L caesar L ilustns C vicina y C vomitoria Se detectó
una diferencia significativa en el numero de huevos entre el hábitat abierto y
cerrado Solo en 2 de las 9 comdas ocurrió ovipostura en 24 horas de exposición
en hábitat cerrado (17)
8
En Carabobo Venezuela se llevó a cabo un estudio de entomofauna asociada a
cadáveres en ratas observándose también sucesión de especies de la familia
Calliphondae (Lucillo cluvia) relacionada con los primeros días seguida por C
albiceps y C megacephala (18)
En Medellín Colombia se realizó un estudio de sucesión de insectos en
cadáveres utilizando como biomodelo cerdos domésticos para determinar la
secuencia de insectos por 207 dias
Se observaron 5 fases de descomposición (fresco hinchado pudrición activa
pudrición avanzada y restos secos) Durante la etapa fresca los pnmeros
insectos que aparecieron fueron moscas de la familia Sarcophagidae y
Muscidae Durante la fase de hinchazón las especies de Calliphondae fueron
predominantes y las pnmeras en ovipositar Durante la tercera y cuarta fase las
familias más abundantes fueron Calliphondae y Muscidae (9)
Segun algunos autores las moscas Sarcophagidae pertenecen a la segunda
oleada de descomponedores de la carroña (19) sin embargo otros autores
opinan que son moscas primarias en la carroña en zonas de temperatura alta y
regiones tropicales mientras en zonas más frías aparecen como moscas
secundarias (20)
Otro autor indica que algunas sarcofágidas (Sarcophaga sp ) se comportan
como moscas primaria en la pnmavera acudiendo al cadáver junto con algunos
Calliphondae mientras que en verano y otoño llegan después que estos y por
tanto pueden considerarse moscas secundanas (21)
En Mayagüez Puerto Rico (2005) se presenta la distnbución temporal
cuantitativa y cualitativa de insectos que participaron en la descomposición del
cerdo (Sus domesticus) bajo condiciones de sol sombra parcial y sombra total
Se tomaron muestras de insectos (adultos e inmaduros) en tres cerdos de unos
23 kg de peso junto con datos de humedad relativa temperatura ambiental
corporal y de las masas larvales Se presentaron los estados de descomposición
9
fresco hinchado activo activo avanzado y esqueletal Se colectaron 6645
especímenes adultos de 73 especies 39 familias y 10 órdenes El medio
ambiente de cada condición de exposición condicionó la duración de los estados
de descomposición y la entomofauna asociada a los mismos Los insectos de
importancia forense fueron Chrysomya rufifacies y Cochliomyia macellana
(Diptera Calliphondae) Hydrotaea aenescens y Fama pusio (Díptera
Muscidae y Fannidae) (22)
Para una estimación del intervalo post mortem basado en vanables
morfométricas y de ciclo de vida es importante conocer que las larvas de
moscas necrófagas presentan 12 segmentos y una terminación anterior
punteada boca con un par de ganchos La terminacion posterior es roma con 2
áreas circulares chocolatosas hacia el segmento final que son los espiráculos
postenores Las moscas presentan 3 estadios larvales o instars y cada estadio
larval se distingue de los demás refiriéndose como L1 L2 y L3 Un estadio
larval específico se puede identificar por el numero de hendiduras presentes en
cada espiráculo postenor En el pnmer instar se observa solo una hendidura en
el segunda instar presentan 2 hendiduras y en el tercer instar 3 hendiduras están
presentes (25)
En las moscas existe normalmente una diferencia en el tamaño de la larvas en
los 3 estadios larvales el primer instar mide usualmente menos de 2 mm
mientras el segundo mide entre 2 9 mm y el tercero de 9 22 mm Sin embargo
dichas longitudes dependen de la alimentación de la larva por lo que no son
parámetros precisos para estimar la edad de la larva (25)
Segun claves taxonómicas para la identificación larval (26 27) se pueden
distinguir familias de Díptera por las siguientes caractensticas morfológicas
Calliphondae hendiduras de espiráculos posteriores casi transversales botón
casi siempre distinguible espiráculos posteriores no se encuentran dentro de
una cavidad
10
Sarcophagidae Pro piernas no distinguibles espiraculos posteriores dentro de
una cavidad profunda hendiduras de espiráculos posteriores casi verticales
botón no distinguible
Los adultos de Calliphondae pueden presentar color azul verde metálico con
antenas palpos y rostro anaranjado cubierto por pubescencia del mismo color
(Chrysomia) color violeta verdoso y base de una vena radial con una fila de
vellos sobrepuestos (Cochlyomya) color verde cobrizo opaco y parte dorsal del
tórax con 3 surcos longitudinales (Phaenicia) (22)
Los adultos de Sarcophagidae presentan un color gns o negro con 3 rayas
longitudinales color negro en el mesonoto patrón cuadnculado gris y negro en el
abdomen (22)
En el Instituto de Medicina Legal y Ciencias Forenses de Colombia se realizó un
estudio sobre especies de insectos colonizadores para la determinación de
intervalo postmorten utilizando como biomodelo un hígado humano fresco se
utilizaron toma de datos morfométncos determinación taxonómica y se logró
con los datos obtenidos una curva de crecimiento y desarrollo Se demostró
que la familia Calliphondae es la primera en colonizar bajo condiciones
ambientales naturales (23) La metodología utilizada en este estudio semeja a la
utilizada en el nuestro ya que se manejó el mismo sustrato bajo condiciones y
metodologías similares
MATERIALES Y MÉTODOS
El presente estudio se realizó en un área boscosa del Parque Natural
Metropolitano provincia de Panamá Se emplearon restos de un hígado humano
fresco de 650 gramos extraído del cuerpo de un varón de 55 años
aproximadamente a las 6h de haber fallecido Seguidamente el mismo fue
colocado en un envase hermético y transportado al Parque Metropolitano para
ser colocado en un ecosistema boscoso de ambiente humedo y bajo sombra
luego de 30 minutos de la extracción en la autopsia
Una vez colocado se procedió a realizar observaciones visuales y anotaciones
se tomaron datos climatológicos y a cada lóbulo hepático se le ocasionaron dos
hendas (Herida #1 ubicada en la cara posterior del lóbulo hepático izquierdo y
Herida #2 ubicada en la cara postenor del lóbulo hepático derecho) con la
finalidad de ampliar la superficie de ovipostura y larvipostura para las moscas
(Rg 1) Cada herida se realizó con una diferencia de tiempo de 80 minutos (tipo
de henda punzocortante)
Para evitar la remoción por vertebrados carroñeros los restos del higado se
colocaron dentro de una celda de alambre de 1 5 x 2 2 metros El hígado fue
visitado y evaluado cada 24 horas por 2 chas consecutivos
Al comenzar el trabajo de campo se registró y evaluó la actividad de las
moscas proceso que se realizó por un período de tiempo de 4h Las moscas
adultas fueron recolectadas utilizando una red entomológica El procedimiento
de recolecta se repitió 4 veces al inicio a los 40 minutos 80 minutos y 120
minutos y se documentó mediante registro escnto y fotográfico
El primer día luego de 24 horas de exposición se evaluó el grado de
descomposición del higado y se registró la presencia de huevos o larvas en el
mismo y los datos de temperatura y humedad Se realizó un segundo ciclo de
recolecta de moscas adultas se recolectan huevos y se colocan en dos envases
12
con sustrato (hígado) y se documentó mediante registro escrito y fotográfico. El
segundo día, luego de 48 horas de exposición, se evaluó nuevamente el grado
de descomposición del hígado y, se registró la presencia de huevos o larvas en
él mismo asi como los datos climatológicos y de temperatura (Fig. 2).
Fig. 1 Hogado Fresco colocado en Parque Metropolitano con gemías en la superficre Fig. Z. Tercer dia se evaluó el estado de descompasroón del
"gado
Las larvas depositadas en las heridas fueron colectadas (aproximadamente 10
de cada herida). Se colocaron en un frasco de tapa enroscable de plástico
(envase de urinálisis), se le colocó agua tibia para detener crecimiento y luego
fueron pasadas a un tubo para colecta de fluidos biológicos de tapa hermética
que contenía etanol al 70%. El resto de las larvas se colocaron vivas en un
envase de helado con tierra, se colocó un fragmento del hígado en
descomposición, se tapó con tela de "tul" y luego se fijó con una liga a manera
de crear una cámara de cría, para las larvas, evaluando su desarrollo.
Los tubos y las cámaras de crías fueron etiquetados con datos de muestra, día,
hora, temperatura y herida a la que corresponde. Todo el proceso fue registrado
fotográficamente y por escrito (Fig. 3, 4)
Los días siguientes se evaluó la presencia de especímenes y se recolectaron las
larvas encontradas siguiendo la misma metodología descrita anteriormente.
13
Este trabajo se realizó en la Morgue Judicial de Panamá, en un área de depósito
abierta y bajo sombra, que semejaba el ambiente del área en donde se colocó el
hígado al inicio del trabajo de campo. Se detuvo la colecta de larvas hasta el
momento en que fueron observadas las primeras pupas.
Las cámaras de cría para cada herida, con las pupas, fueron colocadas en unas
cajas de cartón y, en nuestro caso, se envolvió con tela tul en forma de "cono"
con una pequeña abertura en la parte superior que permitiera la colecta de
adultos y se observó por varios días. Se registró por escrito y fotográficamente
el procedimiento (Fig. .5).
Fig. 3 Envases de halado taparlos con tul dentrficados por nendas 4. Tubos para colecta de larvas
14
Las moscas emergidas de las cámaras de cría, se colocaron en frascos con
etanol al 70 °/ci, para su posterior identificación por familia. Todos los cambios y
hallazgos se documentaron mediante registro escrito y fotográfico anotando las
horas.
Periódicamente, los especímenes preservados (moscas que llegaron los
primeros dos días, las larvas recolectadas y los adultos emergidos) fueron
medidos, caracterizados y fotografiados en cada uno de sus estadios. Luego
fueron montados con alfileres entomológicos y preservados para determinación
taxonómica (Fig. 6 y 7). Luego, los especímenes fueron evaluados utilizando un
estereoscopio, un microscopio electrónico, un sistema de fotografía photodyne y
un microscopio confocal. Se utilizaron claves taxonómicas para la identificación
y caracterización de las larvas (11,12) y adultos (13).
~111111~1111~1~1111.11~ - 24C
_
14 - 4, 44 41 Fig. e Preparación para la medzeón de largo y ancho corporal de las larvas Fig. 7 Especimenes &liaos montados en alfiler
entoroolbgxx)
Finalmente, con los datos obtenidos se realizó una curva de crecimiento y
desarrollo larval como método para la determinación del intervalo post modem.
Los resultados fueron analizados y comparados con estudios internacionales.
15
f ..v.
_ -
IIIP4 14 , r fi
,
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'
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..
YO,
• ,
Flg 9 Dípteras de la Familia Sarcopnagidae que
los pnmeros dos días (Sarcophaga spl y Sarcophaga sp21
RESULTADOS
Se desarrollaron dos cámaras de cría, una para cada herida, que fueron
seguidas por 25 días (600 horas).
Se logró determinar que las familias de díptera que colonizaron las primeras 24
horas fueron: Calliphoridae y Sarcophagidae. Se recolectaron 6 Calliphoridae y
4 moscas Sarcophagidae donde se logró identificar dos géneros para
Calliphoridae (Chrysomya y Phaenicia) y un género diferente para
Sarcophagidae (Sarcophaga). (Fig. 7, 8, 9)
Participación porcentual por Familia
Calliphoridac • Sarcophagtclac
Ftg 7 Participación Porcentual por Familia
16
La temperatura y la humedad ambiental durante el estudio fue en promedio 27.7
Celsius y 78 % de humedad, con fluctuaciones durante el tiempo que se
desarrollo el estudio (Fig. 10).
Temperatura relativa ambiental durante el estudio
1 3 5 7 9 11 13 1517 19 21
• Temperatura relativa
Tiempo (Dies)
Hg. 10 Temperatura relativa ambiental durante el estudio
En las cámaras de cría identificadas como herida #1 y herida #2, se dio un total
de 2 días desde el momento en que se puso el hígado al aire libre y el momento
en el cual se observaron las primeras larvas. Los cultivos se iniciaron el 02 de
agosto del 2010 y tuvieron un tiempo de postura de 48 horas.
En la cámara de cría, identificada como herida #1, se observaron adultos a los
17, 21 y 22 días, siendo los primeros la Familia Calliphoridae. En la cámara de
cría de la herida #2, los adultos se observaron a los 21 y 22 días observándose
ambas familias de díptera. (Fig. 11)
Clasificación porcentual de adultos
observados en Cámaras de cría
Calhobondae U 5arcophagidae
11; Frg 11 Clasoficaoón porcentual de aduftos observados en las cámaras de cría
17
En la Tabla 1 y 2 se presenta el valor promedio de la variable largo corporal,
para cada uno de los días de muestreo, además se presenta la desviación
estándar y los valores con un intervalo de confianza al 90%.
DIA LARGO rad MENOR MAYOR
Huevo 1 1.5 0 1,5 1.5
Larva 2 8.6 1.8 11 6
3 16.5 1.8 15 20
4 16.7 1.2 16 17
5 18.7 1.7 18 19
6 17 1.5 16 19
Pupa 8 15 0 15 15
- dulto 17 7 1.4 6 8
21 9 1 8 10
' 22 8.75 1.3 7 10
Tabla 1. Valor Promedio de la variable largo corporal en herida #1
VALOR PROMEDIO DE LA VARIABLE LARGO CORPORAL EN LA HERIDA #2
ES t A.L.ZGS ;...ARGC• MENOR MAYOR
1 1.5 0 1.5 1.5
2 7 0.77 6 8
3 15.75 0.82 15 16
4 14.75 2.9 10 18
5 18.5 0.5 18 19
6 16 1 15 17
8 14 0 14 14
21 9.5 3.5 6 13
22 8.5 3.5 5 12
Tabla 2. Valor Promedio de la variable largo corporal en herida #2
18
En el primer día de seguimiento, en ambas cámaras, se encontraron huevos de
1.5 mm de largo, estos iniciaron el desarrollo larval hasta el día 7. Entre los días
8 a 17, para la cámara de herida #1 y los días 8 a 21, para la cámara de herida
#2, se presentó el desarrollo pupal, al final del cual emergieron los primeros
adultos. El estado larval duró 6 días y el desarrollo pupal en promedio 11 días.
Los adultos emergieron en un intervalo de 6 días, dejando gran cantidad de
puparios.
En la variable largo puede observarse como a medida que trascurren los 6 días
de desarrollo larval se encuentra poca dispersión para las larvas de la herida #1
y gran dispersión para la herida #2, en cada uno de los muestreos, indicando
que las condiciones de desarrollo fueron heterogéneas.
Cuando se examina la variable ancho corporal, durante todo el desarrollo larval
se muestra una dispersión constante para la herida #1 y una gran dispersión
para la herida #2. A continuación se muestran los valores obtenidos en la tabla
Tabla 3. Valor Promedio de la variable ancho corporal en herida #1
19
Las curvas de crecimiento y desarrollo obtenidas para las variables largo y
ancho se presentan en las Figuras 12, 13, 14 y 15.
Fig. 12 Curva para venable largo henda 01
Curva de Crecimiento y Desarrollo para la variable largo en herida #1
25
i
1.- 15 /
1 r 10
1 5 ---- -.1.-
./
O
1 2 3 4 5 6 8 17 21 22
Tiempo (Olas)
Fig 13 Curve para la venable largo beoda 112
Curva de Crecimiento y Desarrollo para la variable largo en la herida #2
-E 1, —
E
10 LARGO
S --MENOR
MAYOR o
1 2 3 4 5 6 8 21 22
Tiempo (Dial)
Frg 14 Curva para vanable ancho herida 01
Curva de Crecimiento y Desarrollo
para la variable ancho en herida #1 6
5
4
----MAYOR
1 k 2 4
-O-MENOR o
1
o 1 2 3 4 5 6 8
nema, (dm')
F ■g 15 Curva para la variable ancho henda 112
Curva de Crecimiento y Desarrollo para la variable ancho en la herida #2
6 5 - -
Z 4
3 ANCII0
- MENOP 1 _ MAYOR O
2 3 45 6 8 1
Tiempo (Dios)
El uso de estas curvas de crecimiento permite realizar aproximaciones al cálculo
del intervalo post modem de cuerpos encontrados en condiciones ambientales
similares a las presentadas durante la cría de insectos.
En este trabajo se encontró que las variables largo y ancho presentaron
dispersión amplia, por lo tanto se generaron estimaciones de tiempo post
modem grandes, por lo que fue necesaria la utilización de otras variables como
la coloración de las larvas.
20
Las larvas del primer ínstar son de una coloración cremosa clara. Las larvas de
estados más avanzados en su desarrollo pertenecen a los dos últimos instar y
presentan coloraciones más oscuras (Fig. 16).
i iraRse.-4 • ~N.a
Fg 16 Larvas de fa FamMa SaroDphagdae e de rencas mstar
Inicialmente, las larvas presentan un movimiento continuo y permanente ya que
se encuentran en una etapa de gran alimentación, por este motivo se ubican al
interior del hígado; en el tercer instar las larvas van disminuyendo su movimiento
porque se están preparando para pasar al siguiente estadio que corresponde a
la prepupa, por esta razón se ubican fuera del hígado y buscan un lugar seco.
Luego de la evaluación, se logró determinar que las larvas recolectadas en las
cámaras de cría pertenecen a las familias de Calliphoridae y Sarcophagidae,
manteniendo de esta manera una correcta relación entre la colecta y los
resultados. (Fig. 17.18,19,20)
21
Sarcophagidae: Hendiduras de espirácu los posteriores casi verticales.
Calliphoridae: hendiduras de espiráculos posteriores casi transversales
Fg. 17 Microscopia confocal Sarcophagrclae
Fg 18 Microscopía confocal Calliphoodae
Calliphoriclae: hendiduras de espiráculos posteriores casi transversales Sarcophagidae: Hendiduras de espiráculos
posteriores casi verticales.
Fg 19 Microscopia electrónica Sarcophagidae Frg 20 Microscopia electrónica Calliphoridae
22
El siguiente estado de desarrollo es el pupal. Este estadio se caracteriza por la
quietud de las pupas, pero en realidad es un período de mucha actividad porque
se complementan todos los sistemas de adulto.
Los adultos que se recolectaron de las cámaras (40) fueron evaluados con un
estereoscopio y pertenecen a las familias de Calliphoridae y Sarcophagidae. Se
recolectaron 7 Calliphoridae (5 de ellas en la cámara de la herida #1) y 33
Sarcophagidae (21 de ellas en la cámara de la herida #2). (Fig. 21)
Fig 21 Moscas recolectadas de las cámaras (cuadrante superior izquierrto Sartophaga sp1. cuadrante supenor derecho Phaenicla sp., cuadrante írrienor
rzquierdo Chrysomya sp y cuadrante inferior derecho Sanmphaga sp2)
23
DISCUSIÓN
La utilización de un hígado humano como biomodelo representa un adecuado
procedimiento metodológico para lograr una estimación de la fauna de insectos
presentes como indicadores forenses Dicho biomodelo constituye un buen
sustrato para el desarrollo de los ciclos de vida de las moscas necrófagas y es
comparable a un estudio previo realizado en Colombia (23)
La metodología utilizada y los resultados de este estudio puede servir para
evaluar los especímenes de Diptera recolectados en una escena de Cnmen asi
como su ciclo de vida
En un área boscosa bajo sombra se recolectaron e identificaron Dipteros de las
familias Calliphondae y Sarcophagidae en estados inmaduros y adultos por un
penodo de 25 días En dicho penodo el pnmer espécimen adulto en emerger
fue de la familia Calliphondae seguido por la familia Sarcophagidae Dichos
resultados concuerdan con investigaciones previas (13 14 15 16 17 18) sin
embargo también confirma el rol pnmano de las sarcofágidas en la colonización
de la carroña tal como quedó establecido en investigaciones antenores
(9 13 19 20)
Los Diptera Sarcophagidae fueron la especie dominante con un porcentaje de
presencia del 82 % respecto de las califóndas en un ambiente tropical lo cual
repite los resultados obtenidos en otros estudios (13 20 21) Dicha
predominancia se pudo favorecer por los factores abióticos presentes (lluvia y
humedad excesiva) que pudieron haber evitado la eclosión de algunas larvas de
Calliphondae de los huevos disminuyendo la población larvana y por ende el
calor metabólico generado por la masa larvana necesario para favorecer el
desarrollo de los especímenes Además una ventaja clara de las Sarcophagidae
es su capacidad de larvipositan
Las tasas de desarrollo para la variable ancho presentaron una dispersión
amplia o heterogénea como se demuestra en los gráficos de los resultados lo
24
cual puede deberse a diferentes oleadas de colonización de Dipteros debido a
algunos factores ab:áticos presentes en el entorno (lluvia y humedad excesiva) y
que pudieron haber producido la muerte de algunos especimenes por anoxia sin
embargo la lluvia no evita la colonización ya que las moscas pudieron haber
esperado condiciones climáticas favorables para abandonar su sitio de refugio y
ovipositar o larvipositar sobre el cadáver Dicha dispersión puede generar
estimaciones en el intervalo postmortem muy amplias por lo que se tuvieron que
utilizar otras variables como el estadio o instar larval y la coloración de las pupas
en semejanza a un estudio previo realizado en Bogotá Colombia (23) para una
estimación más precisa del tiempo de muerte
La temperatura ambiental mostró también cierta dispersión en función de las
condiciones climáticas tropicales propias de nuestro país manteniendo un
promedio de 27 7 Celsius la cual permitió que las especies de Dipteros
recolectadas pudieran completar su ciclo vital
En este trabajo los factores abióticos como la temperatura ambiental la
humedad relativa y la realización de heridas en el biomodelo pudieron haber
afectado la presencia y abundancia de especies de Diptera
25
CONCLUSIÓN
En resumen en este biomodelo de cadáver (higado humano) dejado a la
intemperie en una zona boscosa de ambiente tropical el tiempo de ovipostura
fue de 24 horas momento en el que se observaron los primeros huevos
Las primeras larvas fueron observadas transcumdas las pnmeras 48 horas sin
embargo como las condiciones climáticas eran de lluvia y gran humedad las
larvas pudieron haber emergido antes y haberse refugiado en el interior del
hígado mientras otras pudieron haber fallecido
Los especimenes adultos emergieron entre los días 17 y 22 con una
temperatura ambiental bastante heterogénea en dichos días de observación lo
cual semeja los resultados obtenidos en investigaciones previas (13)
comprobando asi que la utilización de un higado humano como biomodelo
puede simular las condiciones de una escena del crimen para determinar la
entomofauna de insectos y estimar el intervalo postmortem
Es importante realizar estudios entomológicos forenses en diferentes ambientes
como hábrtas acuáticos terrenos boscosos y lugares secos porque el
crecimiento y desarrollo de la diversa entomofauna varia con las condiciones
biogeográficas y del medio
26
RECOMENDACIONES
• Tomar más en cuenta las factores abióticos que pueden influenciar la
ovipostura y larvipostura de dípteros en cuanto la entomofauna de
insectos de interés forenses que pnmariamente colonizan cadáveres por
lo que quizás se debió haber dejado el biomodelo en la escena por un
mayor periodo de tiempo para la recolecta de los especimenes inmaduros
y adultos tomando en cuenta que algunas moscas van a esperar
condiciones climáticas favorables para la postura de huevos o larvas
• Realizar el estudio en un espacio cerrado que simule una escena de
cnmen para evaluar la entomofauna de insectos presentes
• Con el transcurso del tiempo trabajando interdisciplinanamente
recolectando suficientes datos de condiciones climatológicas utilizando
las variables largo y ancho coloración del cuerpo e íntares larvales se
podnan construir bases de datos para llegar a modelos regionales más
precisos
27
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