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TIPOS DE MEDIOS DE CULTIVO

Uno de los sistemas ms importantes para la identificacin de microorganismos

es observar su crecimiento en sustancias alimenticias artificiales preparadas en

el laboratorio. El material alimenticio en el que crecen los microorganismos es

el Medio de Cultivo y el crecimiento de los microorganismos es el Cultivo. Se

han preparado ms de 10.000 medios de cultivo diferentes.

Para que las bacterias crezcan adecuadamente en un medio de cultivo artificial

debe reunir una serie de condiciones como son: temperatura, grado dehumedad y presin de oxgeno adecuadas, as como un grado correcto de

acidez o alcalinidad. Un medio de cultivo debe contener los nutrientes y

factores de crecimiento necesarios y debe estar exento de todo

microorganismo contaminante.

La mayora de las bacterias patgenas requieren nutrientes complejos similares

en composicin a los lquidos orgnicos del cuerpo humano. Por eso, la base

de muchos medios de cultivo es una infusin de estractos de carne y Peptona a

la que se aadirn otros ingredientes.

El gar es un elemento solidificante muy empleado para la preparacin de

medios de cultivo. Se lica completamente a la temperatura del agua hirviendo

y se solidifica al enfriarse a 40 grados. Con mnimas excepciones no tiene

efecto sobre el crecimiento de las bacterias y no es atacado por aquellas que

crecen en l.

La Gelatina es otro agente solidificante pero se emplea mucho menos ya quebastantes bacterias provocan su licuacin.

En los diferentes medios de cultivo se encuentran numerosos materiales de

enriquecimiento como hidratos de carbono, suero, sangre completa, bilis, etc.

Los hidratos de Carbono se adicionan por dos motivos fundamentales: para

incrementar el valor nutritivo del medio y para detectar reacciones de

fermentacin de los microorganismos que ayuden a identificarlos. El suero y la

sangre completa se aaden para promover el crecimiento de losmicroorganismos menos resistentes.

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Tambin se aaden colorantes que actan como indicadores para detectar, por

ejemplo, la formacin de cido o como inhibidores del crecimiento de unas

bacterias y no de otras (el Rojo Fenol se usa como indicador ya que es rojo en

pH bsico y amarillo en pH cido. La Violeta de Genciana se usa como

inhibidor ya que impide el crecimiento de la mayoria de las bacterias Gram-

positivas).

CONDICIONES PARA EL MEJORFUNCIONAMIENTO DEL MEDIO DE CULTIVO

El desarrollo adecuado de los microorganismos en un medio de cultivo se ve

afectado por una serie de factores de gran importancia y que, en algunos

casos, son ajenos por completo al propio medio.

1- disponibilidad de nutrientes adecuados

2- consistencia adecuada del medio

3- presencia (o ausencia) de oxgeno y otros gases

4- condiciones adecuadas de humedad

5- Luz ambiental

6- pH

7- Temperatura

8- Esterilidad del medio

TIPOS DE MEDIOS DE CULTIVOatendiendo a su estado fsico:

lquidos

semislidos

slidos

atendiendo a su utilidad prctica:

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Medios para aislamientos primarios:

para usos generales: no selectivos, para cultivo de una amplia variedad de

organismos difciles de hacer crecer. A menudo estn enriquecidos con

materiales como: sangre, suero, Hemoglobina, FX, FV, glutamina, u otrosfactores accesorios para el crecimiento de las bacterias (Agar Sangre,

Schaeadler, etc)

selectivos: (pueden ser de moderada o de alta selectividad) se aaden

sustancias que inhiban el crecimiento de ciertos grupos de bacterias,

permitiendo a la vez el crecimiento de otras. Variando las sustancia aadidas,

se vara el tipo y grado de selectividad (Mac Conkey, Kanamicina-Vancomicina)

enriquecidos: ralentizan/suprimen el crecimiento de la flora competitiva

normal potenciando el cultivo y crecimiento deseado (Selenito, medio con

Vitamina K).

para aislamientos especializados: formulaciones nutritivas especiales que

satisfacen requerimientos de grupos especficos de bacterias, ayudando a su

identificacin (Lowenstein).

Medios para identificacin:

diferenciales: formulaciones especiales en las que se estudian las

peculiaridades fisiolgicas (nutricin y respiracin sobre todo) especficas de

las bacterias. Seleccionando los medios adecuados se puede llegar a la

identificacin de casi cualquier bacteria (Oxidacin-Fermentacin)

MEDIOS DE CULTIVO DE USO HABITUAL

AGAR SANGRE : Medio enriquecido, estndar (ver ms)

AGAR POLIVITEX (chocolate) : Medio enriquecido, para bacterias que no

crecen en medios habituales y para atmsfera de CO2 (ver ms)

MAC CONKEY : Selectivo para BGN. Lactosa+indicador (ver ms)

MULLER-HINTON : medio slido estndar para antibiogramas con discos y

por difusin

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MULLER-HINTON/SANGRE : ATB bacterias que requieran sangre (Neumo.

Strepto)

MULLER-HINTON/CHOCO : ATB microorganismos que requieran Factores(Haemophilus)

THAYER-MARTIN : selectivo Neisserias patg. (N. lactamica,

Gono/Meningo) para atmsfera de CO2

OXIDACION/FERMENTACION (GLUCOSA) : Estudio de utilizacin de

Glucosa por los BGN

TREE SUGAR-IRON : tubo en pico flauta (base larga, pico corto), paraestudiar Oxid/Ferm de Gluc-Lact-Sac, produccin gas y SH2

TIOGLICOLATO : Medio lquido (ver ms)

SCHAEDLER : medio bsico enriquecido con sangre. Para ANA (ver ms)

KANA-VANCO : Con Kanamicina y Vancomicina. Selectivo para Bacteorides

y otros BGN anaerobios. Para atmsfera ANA (ver ms)

BBE: Bacteroides Bilis Esculina. Selectivo para Bacteorides. Para atmsfera

ANA (ver ms)

SABOURAUD : Cultivo de hongos (incubar a T ambiente y a 37 gC)

SAB + Cloranfenicol y Actidione : Selectivo hongos patgenos

CZAPEK : Medio para Hongos. Identificacin de Aspergillus (ver ms)

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SALMONELLA-SHIGELLA : medio altamente selectivo para Salmonella y

Shigella (ver ms)

XLD : Selectivo Salmonella y Shigella

SELENITO : Medio lquido de enriquecimiento selectivo para Salmonella-

Shigella

CIN : Selectivo Yersinia

CLED : Medio de recuento urinario. Indicador de fermentacin de Lactosa

GARDNERELLA : Selectivo Gardnerella vaginalis. Contiene sangre humana

para valorar hemlisis

CAMPY : Cultivo de Campylobacter

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