Prevalencia de anticuerpos anti-toxoplasma gondii en una poblacin de mujeres embarazadas en Cuba

Teresita Gonzlez-Morales,' Jorge Bacallo-Gallestey,2 Carlos A. Garcia-Santana.3 Jos R. Molina-Garciaq

Resumen

La toxoplasmosis congnrta se produce por la infecccl mtrauterina del feto con Toxoplasma gondii, a partir de una madre prrmoinfectada durante la gestacrn, y se caracterra clnrcamente de acuerdo al momento del embarazo en que se produzca la rnfeccin Esta enfermedad es un problema de salud en pases desarrollados y subdesarrollados, por lo que sudiagnstico oportuno constituye una importante necesidad dentro de los programas de atencin a la mujer embarazada En el presente trabqo se realiz un muestre0 repetrtrvo de anticuerpos anti T gondii en 5537 mujeres embarazadas de ocho areay de salud de dos municipios perfrrcos de la Ciudad de la Habana, durante los aos de 1990 a 1991, mediante un ELISA indirecto Se enconfd que el 70 9% de las mujeres estudradas presentaron antrcuerpos anti T gonddi en laprimeraprueba realrzada antes de las 12 wmanas de embarazo Las 1606 mujeres embara- zadas que representaban el 29 1% restante, Jueron consrderadas potencialmente ~usceptibles, por lo que se les repiti la prueba en el segundo y tercer trimestre Slo 16 (1%) de las mujeres presentaron ttulo de anticuerpos en la segunda o tercera prueba, lo que se interpret como una indicacin de primornfeccin que reportaron resultados negatrvo

Palabras clave: Toxoplasmosis, embarazo, ELISA

Summary

Congenital toxoplasmos~s is produced by intraute- rine rnfection of thefetus with Toxoplasma gondii9om a mother infected for the flrst time during her pregnancy and its clinlcal manfestations depend on lhe gestatronal age at the time of infection Thrs disease is consrdeved a health problem in developed and underdeveloped countrier and rts early diagnosrs w very important as part of the medrcal cave to pregnant women In this paper periodic screenrng of anti T . gondii antrbodies was carried out inpregnant women from 8 health areas m two perpheral y i o n s of the crty Havana, Cuba during 1990 and '991, by un rndirect ELISA In the first test performsd before 12 weeh of pregnancy oj was found that 70 9% of the women testedpresented anti T pondii antibodies. The remarnrng 1606 pregnant w xen (29 1%) were considered potentially suscep+*ble, so the test was repated during the second and third trrmesters Only 16(1%) of the negative patients showed antrbody trters in the second ov thrrd test, confirming that they acquired the infection for the first time during pregnancy

Key words: Toxoplasmosrs, pregnancy, ELISA

1 Instructor de Inmunologia, Departamento de Perinafologa Bsica, Instituto de C~encias Bsicas y Preclnicas "Victoria de Girn", 2 Profesor Auxiiiarde Estadstica, Departamento de Perinatologia Bsica, Instituto de Ciencias Bsicas y Preclinicas 'Victoria de Girn". 3 Jefe del Depaflamento de Biologia, Instituto de Ciencias Bsicas y Preclinicas "V~ctoria de Girn". 4 Subdirector de Investigacines, lnst~tufo de Ciencias Bsicas y Preclinicas "Victoria de Girn': SolicituddeSobretiros: Dra.TeresitaGonzlez Morales. ICBP'VVictonadeGirn", calle146 No. 3102, Cubanacn Playa. Ciudadde la Habana, Cuba

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Introduccin

Latoxoplasmosis congnita se produce cuando la mujeradquiereduranteel embarazola primoinfec- cin por el T. gondiiprevio al embarazo, no presen- tan el riesgo de desarrollartoxoplasmosis congni- ta, debido a que los anticuerpos IgG especficos contra el parsito son capaces de proteger al feto de la infeccin.'

Aproximadamente la tercera parte de las ma- dres que adquiere toxoplasmosis durante el emba- razo, trasmite la infeccin a su hijo. La tasa de trasmisin del parsito a travs de la placenta vara de acuerdo al momento del embarazo en que la gestante adquiere la infeccin. El riesgo de trasmi- sin trasplacentaria se incrementa 15% cuando la exposicin ocurre en el primertrimestre hasta 60% en el tercer^.^

Cuando la exposicin T. gondii ocurre en el primer trimestre de vida intrauterina, una tercera parte de estos fetos son abortados de forma es- pontnea, y el resto presentan uno o ms de la clsica triada de signos asociados con la toxoplasmosis congnita: hidrocefalia, calcifica- ciones cerebrales, conorretinitis bilateral y otras manifestaciones como: hepatomegalia, espleno- megalia, anemia y trombocitopenia. Esta forma severa de la enfermedad representa solamente el 10% de los casos de toxoplasmosis c~ngni ta.~,~

Los fetos que se infectan despus del primer trimestre, generalmente tienen aspecto normal al nacimiento pero las secuelas de la enfermedad aparecern en el transcurso de la vida. Esta inclu- yen coriorretinitis, ceguera, retraso mental y psicomotor, epilepsia y ~o rde ra .~ En los casos de toxoplasmosis congnita inaparente, el diagnsti- co precoz y el tratamiento oportuno pueden mejo- rar el pronstico de la enfermedad y prevenir sus secuela^.^,^ La dificultad fundamental para la pre- vencin de esta forma de toxoplasmosis radica en identificarla primoifeccinen la mujerembarazada debido a que las toxoplasmosis, en las personas inmunocompetentes no tienen manifestaciones clnicas que permitan el diagnstico y sto slo puede conocerse con pruebas de lab~ratorio.~ En el presente trabajo se reportan los resultados de una investigacin delos nivelesde inmunoglobulinas sricas anti T. gondii, utilizando ELISA, en una muestra poblacional de mujeres embarazada de

los municipios Playa y Marinaode la periferia de la Ciudad de la Habana, que es parte de un estudio epidemiolgico ms amplio que tiene como ~ r o ~ - sito eva~ua~el problema de la toxoplasmos/s con- gnita en Cuba, ascomo fundamentarla eventual ktrumentacin de un programa de prevencin.

Material y mtodo

Se estudiaron 5537 muestras de suero de mu- jeres embarazadas durante su primertrimestre de gestacin, procedentes de siete reas de salud del municipo de Playa y de un rea del municipio Mariano, ambos de la periferia de la Ciudad de La Habana. Aquellas que fueron negativas para anticuerpos anti-Tgondiifueron evaluadas poste- riormente en el segundo y tercer trimestre de ges- tacin. ELISA. Se emple antgeno soluble de T. gondii, obtenido segn Machin y col6 porel Centro de Biopreparados de La Habana, Cuba, con una concentracinoriginal de protena de 1.3mmlml. El antgeno se fij a placa (NUNC) a una concentra- cin de40 uglml en amortiguadorcarbonato bicar- bonato0.5 M pH 9.6 con 1 OOul porpozo y se incub la placa de cmara hmeda a 4'C durante 18 horas. Se realizaron tres lavados con solucin salina temporada con fosfatos pH 7.4 con .05% de Tween-20 (SSTF-T20). Las muestras de suero de las mujeres embarazadas y los sueros testigos positivos y negativo para anticuerpos anti Tgondii se diluyeron 1 : lo0 en SSTF-T20. Se utlizaron dos testigos positivos y cuatro negativos en cada placa. Se agregaron 100 ul de los sueros y se incubaron las placas en cmara hmeda a 37'C durante una hora. Se realizaron los lavados y despusseagre- g el suero anti Igs humanas conjugado con peroxidasa (Instituto Finlay C de la Habana, Cuba) diluido 1:lOOen suerodecarneroal 80% en SSTF. Las placas fueron incubadas y lavadas de igual formaqueenel pasoanterior. Porltimoseatiadieron 100 ul por pozo de la solucin sustrato compuesta porperxidode hidrqenoal0.3%enamorticiuador citrito de sodio O .O~M, pH5 con 0.1 ug d e las sustancia cromgena ortofenilendiamina (Merck). La reaccin se detuvo con igual volumen de cido sulfrico al 12% (vlv) en agua destilada sedetermi- n la densidad ptica (D.O.) en un lector de ELISA a 492 nm.

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Anlisis estadstico

El punto de corte fue determinado en un estudio piloto previo y se calcul a partirde la ecuacin de regresin lineal ajustada VL= 1.574 N + 0.013 (en donde N representa la medida de la D.O. de los testigos negativos). En el presente trabajo sedeter- min el nmero y el porcentaje de casos positivos y negativos porreadesalud, ascomo lafrecuen- cia absoluta y el porcentaje de seroconversin. Para evaluar la asociacin entre la edad y la pre- sencia de anticuerpos anti T. gondii, se agruparon las mujeres en diferentes grupos de edad y se evalu la tendencia lineal del riesgo de positividad con laedad, medianteel clculochi cuadrada para anlisis de tendencia^,^ y se estim tambin la razn momios (RM) (OddsRatio), asociado acada estrato de edad.

Resultados y discusin

El cuadro I muestra los resultados de la prevalencia deanticuerpos anti T. gondiiporreas de salud. Del grupo estudiado encontramos aue 3915 mujeres embarazadas (70.9%), fueron tivas para anticuerpos especficos anti T. gondii, lo que indica que haban sido infectadas en algn momento desuvida. Estas cifras son superiores a las referidas por Frenkel, quien plantea que en Amrica Latina entre el 50 al 60% de las personas entre 20 y 30 aos tienen dichos antic~erpos,~ y puede serporla influenciadel climadecuba, pues se ha dicho que en las regiones hmedas y clidas, es ms frecuente la infeccin por T. gondiigy estas condiciones climticas noson igualesen todos los pases latinoamericanos, lo cual contribuye a la heterogeneidad de los resultadosentre pases. En estudios realizados a mujeres embarazadas en otros continentes, se reportan tasas diferentes 9.8% en Hong Kong, 49% en Argelia y 83% en Pars, endonde el elevado porcentajede positividad posi- blementesedeba a la costumbrede la poblacin de consumir las carnes poco cocinadas, lo cual se considera una de las vas de transimisin de este par~i to.~

Durante varios aos se ha reportado que la determinacin de anticuerpos IgM anti Toxoplasma es la mejor forma de diagnosticar la infeccin

aguda por T. gondii,I0 aunque al describirse la cintica de la respuesta de los isotipos de anticuerpos anti protena P30 durante la infeccin por T. gondii, se reporta la importancia de la deter- minacin de IgAanti P30 paradichodiagnsti~o.~~En nuestro estudio utilizamos la determinacin de las inmunoglobulinas totales, que si bien no tienen la especificidad y sensibilidad para el diagnstico de la toxoplasmosis aguda, son de gran valor para la identificacin de las personas que no estn sensi- bilizadas contra el parsito para poder monitorear durante un tiemposi adquieren o no la infeccin con base en la seroconversin de las inmunoglobulinas anti-T. gondii

Cuadro l. Prevalencia deanticuerpos anti T. gondii por rea de salud.

Area de Casos Porcentaje Salud Positivos

1 457 79.1% 2 368 72.6% 3 770 72.8% 4 694 68.4% 5 323 64.5% 6 300 66.7% 7 671 72.1% 8 332 69.0%

Total 3915 70.9%

En el presente trabajo resultaron negativas para anticuerpos anti Tgondiil606embarazadas(29.1%) (Cuadro II), este grupo no est protegido y por lo tanto es potencialmente susceptible de infectarse con el parsito y de transmitirla infecin al feto. Con el seguimiento trimestral de las mujeres embara- zadas negativas pudieron detectarse 16 serocon- versiones(l%).

Existieron diferencias en la seroconversin en- tre lasreasdesalud estudiadas, cuyo margen fue de 0.56-2.00% (cuadro 11). En otr& trabajos se reportan tasas de seroconversiones de 0.24% y 0.30%,120.2%,131 .43I4y 1 .6%.5 Laseroconversin se interpreta como una infeccin aguda que puede producir daos en el desarrollo del feto.2

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Cuadro 11. Porcentaje de mujeres embarazadas con seroconversin por rea de salud

krea de salud Negativas (%) Seroconversin(%)

La distribucinde mujeres positivas y negativas porreasde salud no fue homogneas (figura 1) el mejor porcentaje de positividad se encontr en el rea "Manuel Fajardo"queseencuentra prximoa la zona rural. Entre las vas de transmisin de T. gondiseencuentra el contacto con animales infec- tadosy con la tierra contaminadas porlas hecesde sto^.^.'^,^^ Adems, existen estudios que han en- contrado un mayor porcentajede positividad en las personasque tienen contacto con tierra,17as como en lasqueviven enzonas r~rales,'~en dondeestos contactos son comunes. El rea de menor preva- lencia fue "Docente Playa" (64.5%), que se en- cuentra ubicado en una zona urbana y en donde coincidentemente existi el menor porcentaje de seroconversiones (0.56%).

POLICLINICOS (No.)

Manuel Fajardo ( 1 ) u Isidro de Armas ( 2 ) D

1 de enero ( 3) , D 5 de septiembre ( 7 ) M

26dejulio(4) M Jorge Ruiz ( 6 )

Docente Playa ( 5 ) - o io 4'0 6'0 80 I 00

% a Positivos Negativos

En el presenteestudiose encontr una tenden- ciasignificativa al incrementode la positividad con la edad calculada por chi cuadrara y razn de momios(RM) paracadagrupodeedad (Cuadro 111). No obstante las mujeres embarazadas de menor edad, 13-1 9 aos, resultaron positivas, lo que de- muestra que puede existir un alto ndice de infec- cin desde edades tempranas. En otro estudio realizado en dos municipios del pas, se encontr que la infeccin por T. gondii es menor en las edades tempranas, siendo la tasa de positividad alta a partir de los 10 aiios de edad.18

Cuadro 111. Distribucin de mujeres embarazadas positivas para anticuerpos

anti T. gondiiporgrupo deedad

Grupo de Positivoltotal % Positivos R M edad

13 a 19 4471651 68.6% 1.00 2 0 a 2 5 134611911 70 4% 1.09 26a30 116111627 71.3% 1.14 31 a 35 3771509 74.0% 1.30 36 o ms 1141154 74.0% 1.30

La tendencia lineal fue 4.78, p 4 . 0 5 Razn de momios

La evaluacin realizada en el presente trabajo permite determinar la conducta mdica a seguir con las mujeresembarazadas, yaquededetectar- se una serconversin durante el embarazo, se podrn aplicar las medidas terputicas que impi- dan losdaosqueestaenfermedad puede producir en el feto.

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