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EL ASMA EN EL LABORATORIO

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EL ASMA EN EL LABORATORIO

Título original: El asma en el laboratorio

Autores: Juana Moral Moral, Joaquina Viso Rodríguez y Francisca Muñoz Marín Especialidad: T.S.S. de Laboratorio de Diagnóstico Clínico Edita e imprime: FESITESS ANDALUCÍA

C/ Armengual de la Mota 37 Oficina 1 29007 Málaga Teléfono/fax 952 61 54 61 www.fesitessandalucía.es

Diseño y maquetación: Alfonso Cid Illescas Edición: mayo 2012

CONTENIDO

UNIDAD DIDÁCTICA I PRESENTACIÓN Y METODOLOGÍA DEL CURSO 5 1.1 Sistema de Cursos a Distancia 7 1.2 Orientaciones para el estudio 8 1.3 Estructura del Curso 10

UNIDAD DIDÁCTICA II ALERGIA 13 2.1 Introducción 15 2.2 Alérgenos 16

UNIDAD DIDÁCTICA III EL ASMA 23 3.1 Introducción 25 3.2 Medicamentos usados 31 3.3.Algoritmo del diagnóstico de asma 33

UNIDAD DIDÁCTICA IV INMUNOTERAPIA 35 4.1 Inmunoterapia 37 4.2 Formas de actuación 37

UNIDAD DIDÁCTICA V MUESTRAS PARA EL LABORATORIO 41 5.1 Recogida de muestras 43 5.2. Identificación del paciente 45 5.3 Bioseguridad 46 5.4 Manipulación de las muestras 46 5.5 Ventajas de las pruebas de alergia en la sangre 47

UNIDAD DIDÁCTICA VI DATOS PARA EL DIAGNOSTICO 49 6.1 Muestra esputo 51 6.2 Muestra de sangre 53 6.3 Química hamática 54

UNIDAD DIDÁCTICA VII MÉTODOS “IN VITRO” 57 7.1 Introducción 59 7.2 Métodos para la detección de IgE 59 7.3 Determinación IgE alérgeno específico 64 7.4 Ventajas de la cuantificación de IgE específica 68 7.5 Otros procedimientos para el diagnóstico 69 7.6 Ventajas a cosiderar del PHADIATOP frente IgE total y recuento de eosinófilos 70

UNIDAD DIDÁCTICA VIII TÉCNICAS EN VIVO 73 8.1 Introducción 75 8.2 Pruebas de función respiratoria 75 8.3 Técnica de realización de la espirometría 76 8.4 Test de broncodilatación 77 8.5 Pruebas de provocación 77 8.6 Test cutáneos 78 8.7 Técnica de PrickFilm IgE sérica total (automatizado) 80 8.8 Comparación entre pruebas: in vivo – in vitro 82

UNIDAD DIDÁCTICA IX SUPUESTO PRÁCTICO 83 9.1 Supuesto práctico 85 9.2 Respuestas supuesto práctico 88

UNIDAD DIDÁCTICA X GLOSARIO 91 10.1 Glosario 93

UNIDAD DIDÁCTICA XI BIBLIOGRAFÍA 105 11.1 Bibliografía 107 11.2 Webgrafía 108

UNIDAD DIDÁCTICA XII CUESTIONARIO 109 12.1 Cuestionario 111

UNIDAD DIDÁCTICA I PRESENTACIÓN Y METODOLOGÍA DEL CURSO

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Presentación, normas y procedimientos de trabajo.

Introducción Antes de comenzar el Curso, es interesante conocer su estructura y el método que se

ha de seguir. Este es el sentido de la presente introducción.

Presentación

1. Sistema de Cursos a Distancia

En este apartado aprenderá una serie de aspectos generales sobre las técnicas de formación que se van a seguir para el estudio.

2. Orientaciones para el estudio.

Si usted no conoce la técnica empleada en los Cursos a Distancia, le recomendamos que lea atentamente los epígrafes siguientes, los cuales le ayudarán a realizar el Curso en las mejores condiciones. En caso contrario, sólo tiene que seguir los pasos que se indican en el siguiente índice:

Se dan una serie de recomendaciones generales para el estudio y las fases del proceso de aprendizaje propuesto por el equipo docente.

3. Estructura del Curso

Mostramos cómo es el Curso, las Unidades Temáticas de las que se compone, el sistema de evaluación y cómo enfrentarse al tipo test.

1.1 Sistema de Cursos a Distancia

1.1.1 Régimen de Enseñanza La metodología de Enseñanza a Distancia, por su estructura y concepción, ofrece un

ámbito de aprendizaje donde pueden acceder, de forma flexible en cuanto a ritmo individual de dedicación, estudio y aprendizaje, a los conocimientos que profesional y personalmente le interesen. Tiene la ventaja de estar diseñada para adaptarse a las disponibilidades de tiempo y/o situación geográfica de cada alumno. Además, es participativa y centrada en el desarrollo individual y orientado a la solución de problemas clínicos.

La Formación a Distancia facilita el acceso a la enseñanza a todos los Técnicos Especialistas/Superiores Sanitarios.

1.1.2 Características del Curso y del alumnado al que va dirigido Todo Curso que pretenda ser eficaz, efectivo y eficiente en alcanzar sus objetivos, debe

adaptarse a los conocimientos previos de las personas que lo estudiarán (lo que saben y lo que aún no han aprendido). Por tanto, la dificultad de los temas presentados se ajustará a sus intereses y capacidades.

Un buen Curso producirá resultados deficientes si lo estudian personas muy diferentes de las inicialmente previstas.

Los Cursos se diseñan ajustándose a las características del alumno al que se dirige.

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1.1.3 Orientación de los Tutores Para cada Curso habrá, al menos, un tutor al que los alumnos podrán dirigir todas sus

consultas y plantear las dificultades.

Las tutorías están pensadas partiendo de la base de que el aprendizaje que se realiza en esta formación es totalmente individual y personalizado.

El tutor responderá en un plazo mínimo las dudas planteadas a través de correo electrónico exclusivamente.

Diferenciamos para nuestros Cursos dos tipos de tutores:

• Académicos. Serán aquellos que resuelvan las dudas del contenido del Curso, planteamientos sobre cuestiones test y casos clínicos. El tutor resuelve las dudas que se plantean por correo electrónico.

• Orientadores y de apoyo metodológico. Su labor se centrará fundamentalmente en cuestiones de carácter psicopedagógicas, ayudando al alumno en horarios, métodos de trabajo o cuestiones más particulares que puedan alterar el desarrollo normal del Curso. El tutor resuelve las dudas que se plantean por correo electrónico.

1.2 Orientaciones para el estudio

Los resultados que un estudiante obtiene no están exclusivamente en función de las aptitudes que posee y del interés que pone en práctica, sino también de las técnicas de estudio que utiliza. Aunque resulta difícil establecer unas normas que sean aplicables de forma general, es más conveniente que cada alumno se marque su propio método de trabajo, les recomendamos las siguientes que pueden ser de mayor aprovechamiento.

Por tanto, aún dando por supuestas la vocación y preparación de los alumnos y respetando su propia iniciativa y forma de plantear el estudio, parece conveniente exponer algunos patrones con los que se podrá guiar más fácilmente el desarrollo académico, aunque va a depender de la situación particular de cada alumno y de los conocimientos de la materia del Curso:

• Decidir una estrategia de trabajo, un calendario de estudio y mantenerlo con regularidad. Es recomendable tener al menos dos sesiones de trabajo por semana.

• Elegir el horario más favorable para cada alumno. Una sesión debe durar mínimo una hora y máximo tres. Menos de una hora es poco, debido al tiempo que se necesita de preparación, mientras que más de tres horas, incluidos los descansos, puede resultar demasiado y descendería el rendimiento.

• Utilizar un sitio tranquilo a horas silenciosas, con iluminación adecuada, espacio suficiente para extender apuntes, etc.

• Estudiar con atención, sin distraerse. Nada de radio, televisión o música de fondo. También es muy práctico subrayar los puntos más interesantes a modo de resumen o esquema.

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a) Fase receptiva.

• Observar en primer lugar el esquema general del Curso.

• Hacer una composición de lo que se cree más interesante o importante.

• Leer atentamente todos los conceptos desarrollados. No pasar de uno a otro sin haberlo entendido. Recordar que en los Cursos nunca se incluyen cuestiones no útiles.

• Anotar las palabras o párrafos considerados más relevantes empleando un lápiz o rotulador transparente. No abusar de las anotaciones para que sean claras y significativas.

• Esquematizar en la medida de lo posible sin mirar el texto el contenido de la Unidad.

• Completar el esquema con el texto.

• Estudiar ajustándose al horario, pero sin imbuirse prisas o impacientarse. Deben aclararse las ideas y fijarse los conceptos.

• Resumir los puntos considerados primordiales de cada tema.

• Marcar los conceptos sobre los que se tengan dudas tras leerlos detenidamente. No insistir de momento más sobre ellos.

b) Fase reflexiva.

• Reflexionar sobre los conocimientos adquiridos y sobre las dudas que hayan podido surgir, una vez finalizado el estudio del texto. Pensar que siempre se puede acudir al tutor y a la bibliografía recomendada y la utilizada en la elaboración del tema que puede ser de gran ayuda.

• Seguir paso a paso el desarrollo de los temas.

• Anotar los puntos que no se comprenden.

• Repasar los conceptos contenidos en el texto según va siguiendo la solución de los casos resueltos.

c) Fase creativa. En esta fase se aplican los conocimientos adquiridos a la resolución de pruebas de

autoevaluación y a los casos concretos de su vivencia profesional.

• Repasar despacio el enunciado y fijarse en lo que se pide antes de empezar a solucionarla.

• Consultar la exposición de conceptos del texto que hagan referencia a cada cuestión de la prueba.

• Solucionar la prueba de cada Unidad Temática utilizando el propio cuestionario del manual.

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1.3 Estructura del Curso

1.3.1 Contenidos del Curso • Guía del alumno.

• Temario del curso en PDF, con un cuestionario tipo test.

• FORMULARIO, para devolver las respuestas al cuestionario.

• ENCUESTA de satisfacción del Curso.

1.3.2 Los Cursos Los cursos se presentan en un archivo PDF cuidadosamente diseñado en Unidades

Didácticas.

1.3.3 Las Unidades Didácticas Son unidades básicas de estos Cursos a distancia. Contienen diferentes tipos de

material educativo distinto:

• Texto propiamente dicho, dividido en temas.

• Bibliografía utilizada y recomendada.

• Cuestionario tipo test.

Los temas comienzan con un índice con las materias contenidas en ellos. Continúa con el texto propiamente dicho, donde se desarrollan las cuestiones del programa. En la redacción del mismo se evita todo aquello que no sea de utilidad práctica.

El apartado de preguntas test serán con los que se trabajen, y con los que posteriormente se rellenará el FORMULARIO de respuestas a remitir. Los ejercicios de tipo test se adjuntan al final del temario.

Cuando están presentes los ejercicios de autoevaluación, la realización de éstos resulta muy útil para el alumno, ya que:

• Tienen una función recapituladora, insistiendo en los conceptos y términos básicos del tema.

• Hacen participar al alumno de una manera más activa en el aprendizaje del tema.

• Sirven para que el alumno valore el estado de su aprendizaje, al comprobar posteriormente el resultado de las respuestas.

• Son garantía de que ha estudiado el tema, cuando el alumno los ha superado positivamente. En caso contrario se recomienda que lo estudie de nuevo.

Dentro de las unidades hay distintos epígrafes, que son conjuntos homogéneos de conceptos que guardan relación entre sí. El tamaño y número de epígrafes dependerá de cada caso.

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1.3.4 Sistema de Evaluación Cada Curso contiene una serie de pruebas de evaluación a distancia que se encuentran

al final del temario. Deben ser realizadas por el alumno al finalizar el estudio del Curso, y enviada al tutor de la asignatura, con un plazo máximo de entrega para que pueda quedar incluido en la edición del Curso en la que se matriculó y siempre disponiendo de 15 días adicionales para su envío. Los tutores la corregirán y devolverán al alumno.

Si no se supera el cuestionario con un mínimo del 80% correcto, se tendrá la posibilidad de recuperación.

La elaboración y posterior corrección de los test ha sido diseñada por el personal docente seleccionado para el Curso con la intención de acercar el contenido de las preguntas al temario asimilado.

Es IMPRESCINDIBLE haber rellenado el FORMULARIO y envío de las respuestas para recibir el certificado o Diploma de aptitud del Curso.

1.3.5 Fechas El plazo de entrega de las evaluaciones será de un mes y medio a partir de la recepción

del material del curso, una vez pasado este plazo conllevará una serie de gestiones administrativas que el alumno tendrá que abonar.

La entrega de los certificados del Curso estará en relación con la fecha de entrega de las evaluaciones y NUNCA antes de la fecha de finalización del Curso.

1.3.6 Aprendiendo a enfrentarse a preguntas tipo test La primera utilidad que se deriva de la resolución de preguntas tipo test es aprender

cómo enfrentarnos a las mismas y evitar esa sensación que algunos alumnos tienen de “se me dan los exámenes tipo test”.

Cuando se trata de preguntas con respuesta tipo verdadero / falso, la resolución de las mismas está más dirigida y el planteamiento es más específico.

Las preguntas tipo test con varias posibles respuestas hacen referencia a conocimientos muy concretos y exigen un método de estudio diferente al que muchas personas han empleado hasta ahora.

Básicamente todas las preguntas test tienen una característica común: exigen identificar una opción que se diferencia de las otras por uno o más datos de los recogidos en el enunciado. Las dos palabras en cursiva son expresión de dos hechos fundamentales con respecto a las preguntas tipo test:

• Como se trata de identificar algo que va a encontrar escrito, no va a ser necesario memorizar conocimientos hasta el punto de reproducir con exactitud lo que uno estudia. Por lo tanto, no debe agobiarse cuando no consiga recordad de memoria una serie de datos que aprendió hace tiempo; seguro que muchos de ellos los recordará al leerlos formando parte del enunciado o las opciones de una pregunta de test.

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• El hecho de que haya que distinguir una opción de otras se traduce en muchas ocasiones en que hay que estudiar diferencias o similitudes. Habitualmente se les pide recordar un dato que se diferencia de otros por ser el más frecuente, el más característico, etc. Por lo tanto, este tipo de datos o situaciones son los que hay que estudiar.

Debe tenerse siempre en cuenta que las preguntas test hay que leerlas de forma completa y fijándose en determinadas palabras que puedan resultar clave para la resolución de la pregunta.

La utilidad de las preguntas test es varia:

• Acostumbrarse a percibir errores de conceptos.

• Adaptarse a los exámenes de selección de personal.

Ser capaces de aprender sobre la marcha nuevos conceptos que pueden ser planteados en estas preguntas, conceptos que se retienen con facilidad.

1.3.7 Envío Una vez estudiado el material docente, se contestará la encuesta de satisfacción, la

cual nos ayudará para evaluar el Curso, corregir y mejorar posibles errores. Cuando haya cumplimentado la evaluación, envíe las respuestas a la dirección indicada.

UNIDAD DIDÁCTICA II ALERGIA

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2.1 Introducción

La palabra alergia viene del griego, de las palabras Alos y Ergos. Alos quiere decir otro, diferente, extraño y Ergos quiere decir reacción. Reacción extraña, porque las personas con alergias tienen reacciones diferentes a las personas sin alergias. Pero también podemos darle otro sentido, el de reacción frente a lo diferente, frente a lo otro, frente a lo extraño, porque la alergia es una reacción frente a las sustancias extrañas al organismo, sustancias extrañas y diferentes a los componentes propios del organismo de cada uno.

La alergia es una reacción de defensa del organismo contra sustancias extrañas que penetran en el cuerpo. Esas sustancias pueden penetrar por el aparato digestivo (alimentos, medicamentos), por el aparato respiratorio (inhalantes) absorbidas por la piel (contactantes), o atravesando la piel (inyecciones, picaduras).

El sistema inmune del cuerpo reconoce esas sustancias como extrañas e intenta neutralizarlas. Las personas sin alergia también las reconocen como extrañas, pero su organismo las neutralizan sin dañarse a sí mismo, mediante mecanismos llamados de tolerancia. Las personas con alergia las intentan neutralizar por mecanismos que se vuelven dañinos contra el propio organismo y causan los síntomas de la alergia.

La palabra Atopia se usa frecuentemente como equivalente a alergia, pero no son exactamente lo mismo. La alergia se refiere a la reacción frente a un sustancia concreta, mientras que la atopia se refiere a una gran facilidad para desarrollar alergia y para mantenerla. Hay personas que se hacen alérgicas a alguna cosa, pero no por ello se les debe de considerar atópicas, las personas atópicas suelen empezar a desarrollar alergia desde muy corta edad, y van desarrollando numerosas alergias unas detrás de otras, y con síntomas en el sistema digestivo, respiratorio y en piel, esto se llama Marcha Alérgica o Marcha Atópica.

La reacción antígeno- anticuerpo es la responsable de los síntomas, que se manifestarán dependiendo de la región del organismo en la que se produzca (tos y pitos, rinitis, urticaria, etc.). Pero estos síntomas no aparecen hasta que los niveles de ANTICUERPOS producidos (y por tanto, la intensidad de la Reacción) sobrepasan el nivel de tolerancia individual de cada persona. Prácticamente cualquier sustancia imaginable es capaz de producir alergia en individuos predispuestos.

Las reacciones alérgicas resultan de:

− la interacción entre la IgE fijada a células (mastocitos y basófilos)

− un alérgeno específico

2.1.1 Epidemiología La alergia es muy frecuente, una cuarta parte de las personas de los países

desarrollados tienen alguna alergia. Los síntomas que causan a veces son muy intensos y evidentes y otras pasan desapercibidos y apenas causan molestias. La alergia ha aumentado muchísimo en los últimos años20-30años y no se sabe si seguirá subiendo aún más.

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La causa de dicho aumento no se sabe bien, la alergia depende de la genética el ambiente.

a) La carga genética no puede haber cambiado en sólo 20 o 30 años.

b) así que las razones deben ser ambientales. Hay diversas teorías sobre la acción de la alimentación, las infecciones, la contaminación, etc.

La alergia es más frecuente en los países desarrollados, de modo que se echa la culpa a un “modo de vida occidental “.

2.1.2 Clínica La alergia consta de tres tipos de tratamiento.

1. El de rescate o alivio de los síntomas

2. El preventivo o antiinflamatorios

3. El etiológico o de la causa que puede ser de evitación de alérgenos y de inmunoterapia o vacunas.

La alergia desaparece por completo en algunos casos, en otros puede permanecer, pero se pueden mejorar mucho los síntomas. La desaparición se puede dar de manera espontánea y otras veces con el tratamiento que le recomienda su especialista. Hay pacientes que con el tiempo desarrollan tolerancia a la sustancia a la que tenia alergia, y no necesitan ninguna precaución especial con ella, igual que las personas que nunca han tenido alergia.

2.2 Alérgenos

2.2.1 Introducción Se llama alérgenos a las sustancias capaces de provocar respuestas alérgicas, son

sustancias extrañas al cuerpo humano y tienen acciones químicas dañinas sobre el organismo.

Cualquier sustancia puede ser alérgica, alimentos, medicamentos, sustancias que flotan en el aire y se respiran como el polen, los hongos ,las partículas de ácaros o la caspa de los animales, sustancias que se tocan ,materiales utilizados en diversas profesiones etc.

2.2.2 Fases definidas

2.2.2.1 La primera fase Consiste en una respuesta inicial caracterizada por vasodilatación, o secreción y según

su localización, contracción del músculo liso o secreción glandular. Estos síntomas aparecen entre 5 y 30 minutos después del contacto con el alérgeno.

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2.2.2.2 La segunda fase Puede aparecer entre 8 y 10 horas después de la exposición y dura varios días, se

caracteriza por una infiltración más intensa de los tejidos por sustancias que producen inflamación, así como destrucción celular.

• La reacción alérgica puede adoptar la forma de un trastorno sistémico o de una reacción local. El trastorno sistémico suele producirse tras la inyección intravenosa de un alérgeno al que el individuo se encuentra sensibilizado. En sólo unos minutos puede provocar un estado de Shock que a veces resulta mortal.

• Las reacciones locales dependen del lugar por donde el alérgeno ha penetrado en el organismo, normalmente los alérgenos que se inhala producen congestión nasal, prurito en garganta y nariz, producción de moco, tos y sibilancias.

• Las alergias a la comidas pueden producir dolor abdominal, cólicos, diarrea, náuseas, vómitos o reacciones graves potencialmente mortales.

• Las alergias a las plantas producen erupción cutánea y normalmente las alergias a medicamentos comprometen a todo el cuerpo.

2.2.3 Alérgenos de pólenes. Neumoalérgeno o Aeroalérgenos. Los pólenes son los aeroalérgenos más importantes en cuanto a la incidencia y

prevalencia de la patología alérgica, que causan, desde el punto de vista alergológico tres grupos de plantas que son muy importantes como las gramíneas, árboles y malezas.

2.2.3.1 Influencia de los pólenes en la alergia Las plantas se reproducen pasando el polen de unas flores a otras. Todas las plantas,

árboles, hierbas, arbustos y malezas forman polen, y para el traspaso de polen hay dos métodos: mediante insectos y mediante el viento.

Las plantas llamadas entomófilas intercambian el polen mediante insectos. Tienen flores grandes, vistosas, llamativas, que producen néctar y atraen a las abejas, avispas y otros insectos. El polen se queda pegado a las patas de los insectos, que lo transportan de flor en flor. Estas flores vistosas, como rosas, claveles, etc., tienen granos de polen grandes, que flotan poco, y por tanto no suelen dar alergia. Prácticamente sólo dan alergia a las personas que trabajan en jardinería, viveros o floristerías, y que están muy expuestas a estos pólenes.

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Las plantas llamada anemófilas intercambian polen soltando los granos al aire, para que el viento los transporte. Tienen flores pequeñas, poco llamativas, que no producen néctar y no atraen insectos. Los granos de polen son pequeños, muy numerosos, flotan mucho en el aire, y el viento los puede transportar a cientos de kilómetros de distancia. Este tipo de plantas son las que dan alergia con mucha frecuencia.

2.2.3.2 Alérgenos de Pólenes

Gramíneas Alérgeno

.. Lolium perenne Lol p 1 a lol p 11 .. Cynodon dactylon Cyn d 1 .. Phleum pretense Phl p 1 a Phl p 11 .. Dactylis glomerata Dac g 1, Dac g 2, Dac g 5 .. Poa pratensis Poa p 1, Poa p 5, Poa p 9, Poa p 10 .. Secale cereal Sec c 1 .. Sorghum alepense Sor h 1 .. Hordeum vulgare Hor v 1, Hor v 9

Arboles Alérgeno

Betula verrucosa Bet v 1 a Bet v 5 Carpinus betulus Car b 1 Alnus glutinosa Aln g 1 Corylus avelana Cor a 1 Quercus alba Que a 1 Castanea sativa Cas s 1 Olea europea Ole e 1 a Ole e 7 Cryptomeria japonica Cry j 1, Cry j 2

Malezas Alérgeno

Parietaria judaica Par j 1 Parietaria oficinalis Par o 1 Artemisia vulgaris Art v 1 a Art v 3 Ambrosia artemisiifolia Amb a 1 a Amb a 10 Ambrosia trífida Amb t 5 Salsola pestifer Sal p 1

Gramíneas La familia botánica gramínea está universalmente extendida, siendo la causa más

frecuente de Polinosis en nuestro país y en todo el mundo. Los estudios en los pólenes de Loliun perenne (ballico) y Pholeum pratense (hierva Timotea), son modelo de las investigaciones sobre alérgenos de Gramínea.

Estos alérgenos presentan un elevado grado de similitud inmuno-química, debido a que la mayoría pertenecen a la subfamilia Pooideae.

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Un extraño alergénico de pólenes de gramíneas contienen generalmente 30-40 componentes, de los cuales 5-10 son alergénicos, por ello han sido clasificados en varios grupos, porque los alérgenos de diferentes especies de gramíneas incluidos en el mismo grupo, generalmente presentan propiedades físico-químicas e inmuno-químicas similares.

Vista del polen al microscopio Óptico Vista del polen al microscopio electrónico

Árboles

El polen de algunos árboles alergénicos puede encontrarse a concentraciones muy altas durante la época de floración Existen estudios alergénicos de diferentes especies, siendo los pólenes de árboles del orden de las Fagales (abedul, aliso, avellano, carpino, castaño y roble) los mejor estudiados, dada su importancia alergológica durante meses de primavera (febrero a mayo) en las zonas templadas del hemisferio norte.

En el polen de abedul ( Betula verucosa) se han identificado y purificado varios alérgenos, denominados de Bet v1 a Bet v5.

Bet v1 es un alérgeno es el alérgeno mayormente estudiado desde el punto de vista bioquímico y molecular. Los datos obtenidos a partir del alérgeno clonado muestran que está formado por 160 aminoácidos con un peso de 17kd. La secuencia aminoterminal muestra una hormología significativa con la secuencia parcial de alérgenos de aliso ( Alnus ) , avellano ( Corylus ) y carpino ( Carpinus ) .

Bet v2 es un alérgeno menor del polen del abedul, clonado recientemente y cuyo estudio ha revolucionado el conocimiento de la reactividad cruzada entre los diferentes alérgenos vegetales. Se ha demostrado que el ADNc que codifica el alérgeno Bet v 2 presenta una homología significante con las profilinas . Estas proteínas forman complejos con actina, regulando su polimerización y la forma de movimiento celular.

En el área mediterránea tiene gran interés el polen de Olea europea (Olivo), ya que su importancia en la polinosis de algunas zonas es incluso mayor que la de las gramíneas. Se han identificado y caracterizado el alérgeno mayor Ole e 1, integrado por dos bandas de 19 y 17 kd y otros alérgenos que van de Ole e 2 a Ole e 7.

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Alérgenos similares a Ole e 1 han sido observados en otras oleáceas, como Fra a 1 en Fraxinus americanus (fresno) Lig v1 en Ligustrum vulgaris (aligustre) y Syr v1 Syringa vulgaris (lilo).

Se han identificado dos alérgenos mayores del cedro japonés (Cryptomeria japónica) Cry J 1 y Cry J 2 y se ha demostrado la existencia de importante reactividad cruzada con el polen de Cupressus Serpervierens (ciprés).

Se han realizado varios estudios de caracterización del polen de Curessus arizónica , que poloniza en invierno y tiene una gran reactividad cruzada en el polen de Juniperus sabinodieds ( sabina ).

También se han realizado estudios inmunoquímicos para la caracterización de alérgenos de polen de Phoenix dactylifera (palmera), Pho d 1 Pho d 6.

Malezas

El polen de estas plantas puede ser muy alergénico. Su presencia, sin embargo, difiere mucho en función de la localización geográfica. En nuestro país son importantes lo pólenes de Parieraria judaica,de la familia de la Urticaria y de Artemisa vulgaris, de la familia Compositae.

Los extractos de polen de parietaria contienen aproximadamente 40 antigenos y proteínas de las cuales nueve fijan IgE, la parietaria judaica es la variedad más ampliamente distribuida en nuestro país. Uno de los alérgenos mayores, Par j 1 ha sido identificado y purificado como una glicoproteína de 10KD, también en el polen de Artemisa vulgaris existen diversas bandas que captan IgE.

Se conocen los alérgenos Art V 1, proteína monomérica de 47kd yArt v 2, glicoproteína con un PM de 35DD.

También ha sido identificado un tercer alérgeno de Artemisa vulgaris Art v 3.

Otro polen de Compositae analizado desde el punto de vista alergénico ha sido el de Helianthus annus (girasol).

Existen estudios alergénicos de otros pólenes de malezas:

− Salsola pestifer (familia quenopodiaceae ) Plantago lanceolada ( familia Plantaginaceae )

− Mercurialis anna. Se ha observado que el citocromo C es uno de los alérgenos de P. lanceolada.

2.2.4 Alérgenos de animales En el medio domestico de alergia a epitelios suele estar producida por la exposición a

gatos y con menor frecuencia a perros. En el medio laboral cualquier animal puede producir patología profesional. La fuente del alérgeno puede ser la piel, saliva, suero y orina. La importancia de una u otra fuente depende de la fisiología del animal.

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2.2.4.1 Animales que causan alergia En primer lugar destacaremos el gato, que da problemas

alérgicos frecuentes y que pueden ser severos. El perro también causa alergias, aunque comparativamente con gato y caballo no son tan frecuentes, a pesar de ser el animal más común en las casas. El caballo da problemas severos, aunque no son tan frecuentes. Cualquier otro animal de pelo puede causar alergia: hámster, conejo, hurón, vaca, oveja, cerdo, cabra, chinchilla, ratón, rata, etc.

Las personas se hacen alérgicas a los animales con los cuales tienen contacto directo o indirecto. Como perro y gato son los animales más comunes, son los que causan alergia más frecuente.

En países que tienen contacto con otros animales, como camellos, búfalos, etc., es de esperar que también se tenga alergia a estos animales.

Los animales más frecuentemente involucrados en las alergias en el hombre son el perro y el gato por ser los que más conviven con él como mascotas. Esta ocurre en el 15% de la población, pero se eleva a más del 20% para las personas que padecen Asma.

El gato En el gato la saliva es la fuente principal de Fel d 1 8 alérgeno

mayor del gato), influyendo en su importancia la costumbre de los gatos de lamerse la piel, por el contrario en el ratón, la fuente principal de los alérgenos es la orina, ya que la proteinuria de este roedor, sobre todo en los animales machos, es superior a la de cualquier otro mamífero.

Los alérgenos de roedores son considerados como alérgenos de enfermedades profesionales, ya que la sensibilización suele ocurrir en el medio laboral.

Se ha estimado que la prevalencia de sensibilización al gato ( Felis domesticus ) en la población asmática es del 20%. En la mayoria de los casos esta sensibilización está producida por Fed d 1, la concentración de Fed d 1 varía según las especies de gatos y para un mismo gato, según las horas del día, igual que el hábito de lamerse.

Fed d 1 está presente también en otros felinos como ocelote, pumas, leones, jaguares etc.

No ha sido localizado en otras familias como por ejemplo el perro.

Además de Fed d 1, existen en el gato otro alérgenos de menor importancia, que han sido localizado en la piel, orina y suero.

El perro

El perro (cannis familiaris) no posee el alérgeno tan potente como Feld d 1, estudios alergénicos en el perro han detectado diversas proteínas séricas y no séricas que captan IgE.

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Uno de estos alérgenos Cam f 1, ha sido caracterizado como una proteína de 25 Kd de PM. Es un alérgeno mayor al que están sensibilizados el 70% de los pacientes alérgicos al perro.

Ha sido localizado en la saliva y en la piel. También a diferencia del gato, la albúmina y las globulinas del perro son frecuentemente reconocidas por los individuos alérgicos.

En el mundo anglosajón el conejo es un animal de compañía de amplia difusión entre los niños. En la piel del conejo se han detectado varias proteínas alérgicas, siendo la más importante las de 18 y 30 Kd con movilidad de albúmina en la electroforesis. También son alergénicas la saliva y la orina

2.2.4.2 Fases de la alergia a epitelio de animales La fase de la alergia en epitelio de animales se puede dividir en:

Fase 0: El sujeto no tiene alergia.

Fase 1: El sujeto desarrolla alergia a la caspa de un animal. Pero al ponerse en contacto con él, la reacción alérgica es casi nula.

Fase 2: El sujeto se sensibiliza. Al entrar en contacto con la caspa del animal (ya no hace falta que el animal esté en la misma habitación que el sujeto), el sujeto padece de tos, moqueo nasal, estornudos, lagrimeo en los ojos (menos frecuente), urticaria (muy frecuente), ojos rojos(bastante infrecuente).

Fase 3: El sujeto está completamente sensibilizado. Le produce alergia todo lo que haya estado en contacto con epitelio de animales. Por ejemplo, si a alguien se le muere un animal con pelo, y a los 2 meses el sujeto va a casa de esa persona, tendrá una reacción alérgica. Peligro de shock anafiláctico.

Fase 4: Pacientes muy sensibilizados. Riesgo de asma crónica (lo que reduciría la calidad de vida del paciente mucho) y riesgo muy alto de shock anafiláctico (si se produce, la vida del sujeto corre un grave peligro).

UNIDAD DIDÁCTICA III EL ASMA

EL asma en el laboratorio

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3.1 Introducción

El asma es una enfermedad crónica1 de los pulmones que causa la inflamación y el estrechamiento de las vías respiratorias. Existe una evidencia persuasiva de que los mastocitos juegan un importante papel en la respuesta inmediata al alérgeno y el asma inducido por el esfuerzo y el relacionado con alimentos, pero las células responsables de la inflamación crónica que provocan la hiperreactividad bronquial son los macrófagos, los eosinófilos y linfocitos T, todos ellos aparecen activados en el asma. Los linfocitos T están programados para producir ciertas citoquinas (células Th2) que conducen a la característica

inflamación eosinofílica. Esta programación comprende a células presentadoras de antígeno, tales como las células dendríticas en el epitelio de vía aérea.

3.1.1 El origen del asma Asma deriva su nombre del griego asthma

(respiración difícil). Se caracteriza por episodios de variada intensidad, duración y frecuencia, en los cuales la persona afectada presenta dificultad para respirar, acompañada de sonidos de alto tono, similares a un silbido (sibilancias). Estos episodios, o ataques, son desencadenados por una reacción alérgica de las vías respiratorias que hace que diversos agentes produzcan una inflamación en los bronquios, dificultando el paso de aire al pulmón bronquial es la inflamación de

predominio eosinófilo producida, en origen, por la alergia a productos conocidos o desconocidos. Es por ello que en una mayoría de los casos se acompaña de una rinitis con estornudos aguilla nasal (secreción nasal acuosa), picor y obstrucción. Esta asociación es en la que se basa la teoría hoy en día aceptada de que el asma es una parte de una enfermedad alérgica y no un problema orgánico exclusivo pulmonar. Sobre esta inflamación alérgica actúan otros mecanismos que desencadenan síntomas:

• Las infecciones • Olores fuertes • Cambios bruscos de temperatura • Esfuerzo • Estrés, nerviosismo • Alteraciones de la digestión, reflujo

gastroesofágico • Otros

1 Las enfermedades crónicas son enfermedades que duran mucho tiempo.

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El asma causa períodos repetidos de sibilancias (silbidos al respirar), presión en el pecho, dificultad para respirar y tos. Con frecuencia la tos se presenta por la noche o en las primeras horas de la mañana.

El asma afecta a personas de todas las edades, pero por lo general comienza en la infancia. En los Estados Unidos hay más de 22 millones de personas con asma comprobada, casi 6 millones de estas personas son niños.

3.1.1.1 Epidemiologia El asma es un problema de salud pública mundial. Según la Organización Mundial de la

Salud, entre 100 y 150 millones de personas en el mundo sufren de asma, y el número de muertes anuales por esta enfermedad alcanza las 180.000.

Principales causas del asma:

− una combinación de factores ambientales

− una combinación de factores genéticos (hereditarios)

En España, cada año mueren unas 800 personas a causa del asma, según datos de la Sociedad Española de Neumología y Cirugía Torácica (SEPAR), siendo evitables dos terceras partes de los casos de desenlace fatal. En un estudio elaborado por esta Sociedad, tras analizar 233 casos de asma de riesgo vital, se concluyó que en un importante porcentaje de los mismos fue posible apreciar graves deficiencias asistenciales tanto en el control periódico médico y de la función pulmonar como en lo relativo al tratamiento preventivo del afectado, además de un bajo nivel de cumplimiento por parte de los enfermos en cuanto al seguimiento de las pautas terapéuticas

3.1.2 Características Obstrucción de la vía aérea total o parcialmente reversible, bien espontáneamente

o con tratamiento.

Inflamación bronquial y remodelado (fibrosis) de la arquitectura del bronquio, con infiltración de la mucosa por eosinófilos y otras células, y un mayor o menor grado de fibrosis subepitelial permanente, aún en ausencia de síntomas.

Hiperreactividad bronquial, o respuesta aumentada de la vía aérea frente a distintos estímulos, pero no específica de esta enfermedad.

3.1.3 Clasificación etiológica El asma bronquial no sólo se caracteriza por las amplias variaciones en la expresión de

la enfermedad, sino también por la frecuencia con la que se encuentran, en el mismo paciente, múltiples factores implicados, es poco probable que un solo factor causal sea responsable de todas las alteraciones que acompañan al asma, aunque, un agente concreto puede ser el responsable de los síntomas en un momento de la evolución.

EL asma en el laboratorio

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Desde que Rackemann introdujo en 1918 los términos de asma extrínseca y asma intrínseco, éstos se han venido utilizando de forma tradicional, pese a todas las limitaciones de esta clasificación.

a) El Asma extrínseco incluye a aquellos pacientes en los que puede demostrarse una reacción antígeno-anticuerpo como desencadenante del proceso. En general esta reacción antígeno-anticuerpo está mediada por IgE (asma extrínseco atópico), mientras que en otros casos generalmente de origen ocupacional no puede demostrarse una reacción de hipersensibilidad tipo I de Gell y Coombs (asma extrínseco no atópico).

b) El Asma intrínseco es un término más amplio y se aplica a un grupo heterogéneo de pacientes con la característica común de que no es posible detectar un antígeno concreto como causa precipitante. El asma intrínseco tiene además una serie de características propias que lo diferencian del extrínseco:

Suele comenzar en la vida adulta

Se asocia con pólipos nasales,

sinusitis maxilar

idiosincrasia a aspirina y otros antiinflamatorios no esteroideos tríada A.S.A. o de Vidal.

3.1.3.1 Otras formas especiales de asma a) Asma inducido por ejercicio: fenómeno que puede ocurrir de forma aislada o en

asociación con cualquier tipo de asma. Muchos pacientes experimentan obstrucción de las vías aéreas de 5 a 20 minutos después de completar el ejercicio o en el curso del mismo, por un mecanismo que parece incluir el enfriamiento, la sequedad relativa de la vía aérea secundaria al aumento de la ventilación y la pérdida de calor de la vía aérea.

b) Asma ocupacional: producido por la inhalación de humos industriales, polvos y emanaciones que se encuentran en el lugar de trabajo. Se han descrito cuatro patrones de respuesta en el asma ocupacional: Inmediata exclusiva, tardía exclusiva, dual, y nocturna recurrente durante varios días.

3.1.4 Factores de riesgo de asma Aun cuando cualquiera puede tener una crisis de asma, las crisis se producen con más

frecuencia en:

• Niños y adolescentes de edades 5 a 17 años.

• Adultos mayores de 65 años de edad.

• Personas que viven en comunidades urbanas.

3.1.4.1 Otros factores incluyen • Antecedentes familiares de asma: El asma tiene una base genética (ello explica

que en una misma familia pueda haber varios asmáticos).Ese trastorno genético es el que hace que estos niños-adolescentes reaccionan de forma anómala ante determinados agentes (alérgenos, deporte, virus, etc) e inflamen sus bronquios. Una vez inflamados los bronquios ante un nuevo contacto con dichos agentes o con otros,

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los bronquios se estrechen, desencadenando una crisis. Dado que el asma bronquial y las alergias en general involucran la interacción de factores ambientales y genéticos, muchos estudios realizados hasta ahora revelan que existe una contribución hereditaria importante en la etiología del asma y las enfermedades alérgicas. Sin embargo, la herencia de este tipo de desórdenes no sigue el patrón de herencia clásica mendeliana característica de desórdenes ocasionados por un sólo gen. En todas estas enfermedades no se muestra un patrón hereditario claro, ya que no puede ser clasificado simplemente como autosómico dominante, recesivo o ligado al sexo.

• Antecedentes personales de alergias

3.1.5 Clasificación según la evolución clínica a) Asma intermitente o episódica: si la enfermedad cursa con crisis de disnea con

intervalos asintomáticos.

b) Asma crónico o persistente si los síntomas son más o menos permanentes y sostenidos con exacerbaciones periódicas.

3.1.6 Clasificación según edad • Asma del lactante. La gran mayoría son de origen viral, por los mismos virus que

causan las Bronquiolitis.

• Asma de la edad escolar. Afecta sobre todo a varones, y se asocia con alergia a Neumoalérgeno en la mayor parte de los casos.

• Asma de la adolescencia. Se caracteriza por la negación de síntomas y de regímenes terapéuticos, y es el rango de edad con mortalidad más alta.

• Asma del adulto

EL asma en el laboratorio

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3.1.7 Características en función de la edad de presentación 3.1.7.1 Asma del Lactante: a) Características clínicas:

− Tos seca o bronca y disnea sibilante en episodios.

− 3 ó más episodios antes de los 2 años de edad.

− HRB congénita/hereditaria/ Adquirida.

b) Factores desencadenantes:

− Infecciones virales (VRS, ADV, VP-1 y 2, RV...)

− Tabaquismo pasivo

− Aumento de la tasa de IgE en el embarazo

− Aumento infecciones respiratorias

− Irritación receptores bronquiales por humo

− Estimulación S.N. no adrenérgico-no colinérgico (neuropéptidos, etc)

− Condiciones atmosféricas (Niebla, Ozono, Frío (mecanismos inespecíficos)

c) Formas clínicas:

− Tos nocturna / diurna (ejercicio, risa, llanto) - "Sibilante feliz"

− Procesos de repetición tipo bronquiolitis viral

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3.1.7.2 Asma edad escolar "Asma de transición"

Cambios en geometría vías aéreas y tejido elástico

Predominio masculino (de 2:1 a 4:1, según los grupos de edad)

Pruebas cutáneas positivas a neumoalérgenos (ácaros, fundamentalmente)

Repercusión sobre el niño (cambios de carácter, tendencia a sobrepeso, etc).

3.1.7.3 Asma adolescencia Negación de síntomas y regímenes terapéuticos

Inicio en hábitos tóxicos y actividades de riesgo

Crisis potencialmente graves: Grupo de edad con mayor mortalidad.

3.1.8 Síntomas más frecuentes Tos: Generalmente seca al inicio, y

progresivamente flemosa, puede ocurrir en forma esporádica ó por accesos y puede llegar a producir fatiga ó vómitos de flemas. Casi siempre es el primer síntoma de una recaída.

Dificultad Respiratoria: Esta aparece en forma progresiva y puede llegar a ser muy severa, con sensación de ahogo ó "falta de aire"; Sin embargo, es necesario recalcar que no es imprescindible su presencia para el diagnóstico de asma bronquial.

Sibilancias: Es el ruido silbante que se produce al sacar ó meter aire en los pulmones debido al estrechamiento interno de las vías bronquiales ("hoguillo"). Puede no ser percibido por la persona afectada y detectarse sólo en la revisión médica.

Flemas: Son las secreciones bronquiales que al producirse en forma abundante en las vías aéreas, suenan al paso del aire como ronquidito ó estertores. Son generalmente muy sueltas y se desprenden con los accesos de tos, y a veces producen náusea y vómito al toser.

Otras molestias: Generalmente son menos frecuentes: dolor torácico, dolor abdominal, sensación de opresión en el pecho, angustia, cianosis (coloración azulada de labios ó uñas), sudoración profusa, manos y pies fríos, palidez, Erupción cutánea, etc.

Frecuentemente, las alergias a las plantas producen erupción cutánea y, normalmente, las alergias a medicamentos comprometen todo el cuerpo

En la mayoría de los casos se presentan también molestias nasales (aunque no se consideran realmente parte del ataque asmático); inclusive se presentan antes de los síntomas bronquiales, "anunciando" su llegada. Estas molestias son: estornudos, moco claro ó escurrimiento nasal, obstrucción nasal (mormada) y comezón de nariz y ojos. Pueden no aparecer ninguno de ellos y ser asintomático.

EL asma en el laboratorio

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De forma atípica, puede existir exclusivamente tos persistente, opresión torácica sin otros síntomas acompañantes, o bien estar oculto como bronquitis de repetición en niños, siendo solo un proceso de tos y flemas, sin fatiga al respirar. En todas las formas es característico el predominio nocturno de los síntomas.

3.1.8.1 Factores que afectan a las vías respiratorias Una crisis asmática responde a tres cambios importantes que afectan las vías

respiratorias:

Hinchazón de las paredes de las vías respiratorias. Exceso de mucosidad, que provoca congestión y formación de tapones mucosos que quedan atrapados en las vías respiratorias estrechadas. Bronconstricción: la contracción de los músculos que rodean las vías respiratorias.

La suma de estos tres factores —la hinchazón, el exceso de mucosidad y la broncoconstricción— estrecha las vías respiratorias, lo cual dificulta el paso del aire (como cuando respiramos a través de una pajita). Durante una crisis asmática, un niño puede tener tos, resuello (un sonido sibilante en el pecho cuando respira), opresión en el pecho, aceleración de la frecuencia cardíaca, sudoración y falta de aire.

3.1.8.2 Diagnóstico del asma Para el diagnóstico del asma, serian importante las pruebas de función pulmonar,

pruebas de alergia, exámenes de sangre, radiografía del pecho y senos paranasales.

3.2 Medicamentos usados

Broncodilatadores: Estos medicamentos ayudan a respirar porque relajan los músculos tensos alrededor de las vías respiratorias. Este tipo de medicamento podría venir dentro de un dispositivo llamado inhalador. Un inhalador (son dispositivos que administran en forma de un rocio o polvo) administra su medicamento en forma de un rocio. También podrían ser administrados por una máquina llamada nebulizador, que convierte el medicamento líquido en forma de rocío o vapor. Hay diferentes tipos de inhaladores y nebulizadores

Esteroides: Estos medicamentos ayudan a disminuir la inflamación y abrir sus vías

aéreas para que usted pueda respirar mejor. Pueden ser inhaladas, u orales. Dosis de pequeña a medianas, se usan para el asma moderada persistente. Esteroide oral junto con dosis más grandes de esteroide inhaladas (asma severa persistente).

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3.2.1 Tipos de inhaladores Inhalador de dosis fija: Este es un dispositivo pequeño en forma de tubo que contiene

el medicamento de asma. Para usarlo, aguante la parte abierta dentro de su boca. Cuando se aprieta el botón, el medicamento líquido sale en forma de un roció, se respira el roció en su boca y este llega a las vías respiratorias y a sus pulmones.

Nebulizador: Este tipo de inhalador convierte el medicamento de asma líquido en un roció. Un tubo largo va del medicamento a una cámara pequeña (recipiente) que contiene el medicamento de asma.

3.2.2 Medicamentos preventivos Los medicamentos preventivos son todos aquellos que sirven para disminuir la

inflamación eosinófila de la mucosa y con ello mejorar la evolución y la frecuencia de las crisis de asma.

3.2.3 Medicamentos antiinflamatorios • Los Corticoides Inhalados. Constituyen en la actualidad la terapia de primera línea,

proporcionando beneficios sintomáticos, disminuyendo la HRB y la necesidad de broncodilatadores.

• Las Cromonas. El cromoglicato (Intal®, Frenal®) inhibe la degranulación de mastocitos y es capaz de controlar el asma en algunos pacientes. Las Cromonas son inocuas pero su efecto antiinflamatorio es mucho menor que los esteroides inhalados (Están indicados por vía inhalatoria en el asma leve, sobre todo en la infancia. No son útiles en las fases agudas, como una crisis de asma. Reducen la hiperreactividad bronquial mejorando así la respuesta asmática frente al ejercicio y los alérgenos. También son útiles vía tópica en las conjuntivitis y rinitis alérgicas leves).

• Los Inhibidores de leucotrienos. Antiinflamatorios específicamente dirigidos contra la síntesis o la acción de los leucotrienos (mediadores lípidos broncoconstrictores y proinflamatorios) en el árbol bronquial.

3.2.3.1 Medicamentos ante Crisis agudas de Asma Estos medicamentos se utilizan de forma ocasional cuando los síntomas de la

enfermedad aumentan, con el objetivo de disminuir los síntomas en unas horas o días.

Llamados ß-2 miméticos selectivos, por su actuación sobre estos receptores, que producen la relajación del músculo bronquial.

Los betamiméticos de larga duración se han indicado como asociación a los preventivos antiinflamatorios (esteroides inhalados)

Los anticolinérgicos (Bromuro de Ipratropio) ,en las crisis de asma en la infancia.

Las teofilinas (aminofilina, teofilina) actúan como broncodilatadores con mecanismo desconocido.

Esteroides. Son medicamentos antiinflamatorios hormonales, a pesar de su gran eficacia en el asma, sólo se usan en casos rebeldes a otros tratamientos o en las crisis.

EL asma en el laboratorio

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3.3.Algoritmo del diagnóstico de asma

UNIDAD DIDÁCTICA IV INMUNOTERAPIA

EL asma en el laboratorio

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4.1 Inmunoterapia

Popularmente conocida como "vacunas", es el único tratamiento etiológico capaz de disminuir la respuesta del individuo alérgico frente al alérgeno y cambiar, así, el curso natural de la enfermedad alérgica.

Consiste en la administración de cantidades crecientes de alérgeno a un sujeto sensibilizado al mismo, para disminuir la respuesta alérgica, mejorar la sintomatología y reducir el uso de medicación sintomática.

4.2 Formas de actuación

Se basa en diferentes mecanismos: modifica el perfil de linfocitos T helper de Th2 (característico de la inflamación alérgica) a Th1 (implicado en la defensa de procesos infecciosos clásicos). En consecuencia:

reduce los niveles de la inmunoglobulina E

inhibe la activación de los eosinofilos (elementos clave en el desarrollo de la reacción alérgica)

disminuye el número y activación de otras células inflamatorias (como los mastocitos y basófilos)

aumenta la producción de otras inmunoglobulinas (IgG) de posible efecto bloqueante sobre el alérgeno modifica los niveles de diferentes moléculas como el CD40 (que permite la unión del linfocito B al T) o el CD23 (receptor de baja afinidad para la IgE), favoreciendo también el descenso de IgE.

4.2.1 Tipos de inmunoterapia De acuerdo con diversos criterios:

a) Por el método de preparación:

Acuosos: Tienden a usarse cada vez menos.

Depot: Se liberan lentamente en el sitio de la inyección, precisándose así un número menor de dosis. Son los más usados actualmente.

Modificados: Sometidos a modificación química para intentar disminuir los efectos secundarios.

b) Por la vía de administración: La más empleada es la inyección subcutánea. En los últimos años también se han desarrollado extractos para administración vía sublingual. Otras opciones (tópica nasal, bronquial y oral) no están suficientemente comprobadas.

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c) Por el tipo de pauta:

Preestacional: En pacientes alérgicos al polen se realiza de acuerdo al calendario de polinización, de modo que se suspende al iniciarse dicha polinización.

Perenne: Se administra durante todo el año y se emplea con alérgenos presentes todo el año o en pacientes polínicos en los que no se suspende el tratamiento durante la polinización.

4.2.2 Contraindicaciones Las contraindicaciones de la inmunoterapia son relativas. Así, el alergólogo debe

valorarlas en cada paciente y, para ello, habitualmente se tienen en cuenta las siguientes condiciones:

o Niños menores de 5 años, excepto en el caso de hipersensibilidad a veneno de himenópteros.

o Embarazo: No está contraindicada la continuidad de la inmunoterapia pero no se debe comenzar su administración durante la gestación.

o Enfermedades inmunopatológicas e inmunodeficiencias severas.

o Enfermedades tumorales.

o Trastornos psicológicos severos.

o Asma grave o mal controlado.

o Cualquier enfermedad o situación que contraindique el uso de adrenalina.

o Mal cumplimiento terapéutico.

4.2.2.1 Efectos secundarios Son la aparición de nódulos subcutáneos en la zona de inoculación tras tratamientos

prolongados, (secundariamente al aluminio con el que se prepara) y posibles reacciones alérgicas con el extracto administrado, que pueden ser:

Reacciones locales: Son las más frecuentes (15%) y pueden ser inmediatas (en los primeros 30 minutos) o tardías (al cabo de varias horas). Aparecen en forma de eritema e induración en torno al punto de inyección, con un diámetro mayor de 5 cm (en el primer caso) o de 10 cm (en las segundas).

Reacciones sistémicas: Son excepcionales y menos frecuentes que las reacciones alérgicas de ciertos medicamentos comúnmente empleados. Casi siempre ocurren dentro de los primeros 30 minutos tras la administración del extracto. La mayoría suelen ser leves (urticaria, rinoconjuntivitis, asma leve), pero en ocasiones son más intensas (crisis de asma grave, anafilaxia). Deben ser tratadas de forma inmediata con adrenalina, corticoides y/o antihistamínicos, según el caso.

Las posibles causas de estas reacciones suelen ser la concentración o estandarización inadecuada del extracto, falta de cumplimiento de las indicaciones y contraindicaciones recomendadas, y los errores en la administración.

EL asma en el laboratorio

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4.2.3 Cambios inducidos en los anticuerpos circulantes y las células efectoras A) Cambios humorales.

En las fases iniciales del tratamiento se observa un aumento en las concentraciones séricas de IgE alérgeno-específica, para producirse posteriormente una disminución gradual de los mismos hasta valores generalmente por debajo de los existentes inicialmente.

B) Cambios celulares

B1) Linfocito T

Las principales características de la respuesta alérgica inflamatoria son la activación de mastocitos y basófilos dependiente de IgE y la eosinofilia tisular.

B2) Células efectoras

La ITE también actúa a nivel de las células efectoras de la respuesta alérgica (mastocitos, eosinófilos) reduciendo el reclutamiento de células inflamatorias su activación y la liberación de mediadores.

4.2.4 Efectos clínicos de la inmunoterapia • Rinoconjuntivitis

• Asma

UNIDAD DIDÁCTICA V MUESTRAS PARA EL LABORATORIO

EL asma en el laboratorio

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La prevalencia de las enfermedades alérgicas en todo el mundo, aumenta a cada año, a pesar de las medidas de control y tratamiento. En algunos países, uno de cada cuatro individuos tiene asma u otra enfermedad alérgica. Tecnológicamente se ha progresado de forma considerable en el desarrollo de nuevos métodos diagnósticos de las enfermedades alérgicas. No obstante la historia clínica es fundamental en la sospecha de estas enfermedades, la identificación de los alérgenos no es posible sino a través de las pruebas diagnósticas auxiliares, hay varios métodos para su diagnóstico. Son métodos con especificidad y sensibilidad reconocidas; la seguridad de éstos está directamente relacionada con la habilidad técnica profesional, la calidad del material utilizado, el que debe ser estandarizado, y la correcta interpretación de los resultados. Además de su finalidad diagnóstica, las pruebas en alergia también tienen como objetivo la indicación y el control de tratamiento específico.

5.1 Recogida de muestras

Cada examen de laboratorio clínico debe ser realizado a los pacientes de forma individual, guiándose siempre por los parámetros profesionales y éticos. Básicamente, el trabajo en el laboratorio clínico se clasifica en tres grandes grupos temático

1. Toma de muestras. 2. Análisis de las muestras.

3. Entrega de resultado

En cada uno de estas etapas, se requiere una gran medida de atención y cuidado, con el

fin de minimizar al máximo los errores factibles de ser cometidos en la práctica diaria. Se debe enfatizar que el trabajo en el laboratorio clínico, como cualquier tipo de trabajo, es realizado por seres humanos y no se está exento de cometer equivocaciones. Pero estas equivocaciones pueden ser erradicadas de los laboratorios clínicos, si se mantienen eficientes actitudes éticas, profesionales y de procedimiento. Lo primero que se hace es verificar que tiene petición medica, si hay suficiente volumen, así como los test que debemos analizar a la muestra.

5.1.1 Muestras de esputo Consiste en la obtención de una muestra de esputo (secreciones

procedentes de los bronquios del paciente) que posteriormente será conservada en medios adecuados y llevada a analizar al laboratorio.

5.1.1.1 Material - Frasco estéril de boca ancha y hermética.

- Suero fisiológico estéril y nebulizador.

5.1.1.2 Técnica de obtención del producto - Enjuagar la boca con agua destilada estéril o solución salina.

- Obtener el esputo tras una expectoración profunda, preferentemente matinal.

- De no producirse expectoración espontánea, puede inducirse el esputo con nebulizaciones de suero fisiológico estéril (15 ml durante 10 minutos).

5.1.1.3 Volumen mínimo De 2 a 10 ml.

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5.1.1.4 Transporte y conservación − Envío inmediato al laboratorio (no superior a 2 horas).

− Si no es posible, conservar en frigorífico 4ºC.

5.1.2 Muestras de sangre Para una gran cantidad de estudios que requieren muestras sanguíneas, en algunos casos

se debe conservar condiciones de ayuno, el cual puede prolongarse como mínimo seis (6) horas y en ocasiones durante doce (12) horas. En cualquiera de los casos, deben seguirse las siguientes indicaciones generales, a saber:

La sangre debe recolectarse en tubos de vidrio o plástico estériles (preferiblemente tubos al vacío), evitando en todo momento realizar procedimientos bruscos que puedan producir rompimiento de las células sanguíneas (hemólisis).

Al recolectar la sangre, debe permitirse que se coagule, si es el caso, o someter los tubos con la muestra a ciertas maniobras recomendadas para evitar su coagulación.

En otras ocasiones, tan solo se colocan unas pequeñas gotas de sangre en láminas portaobjetos de vidrio, (extendidos de sangre periférica), en capilares de vidrio o en placas de vidrio o plástico de origen comercial para la realización de algunos estudios (Frotis).

5.1.2.1 Tubos de sangre Los tubos deben mezclarse inmediatamente, una vez que la sangre ha entrado en ellos.

Invertir suavemente (10 – 15 veces) o colocarlos en rotores especiales, para así obtener mezclas homogéneas.

Existen códigos de colores internacionalmente conocidos, para las diferentes presentaciones de tubos colectores de nuestras sanguíneas:

Tapa roja…………………….. Sin anticoagulante (Tubo seco).

Tapa violeta…………………. Con EDTA.

Tapa azul…………………… Con CITRATO DE SODIO

Tapa verde o blanca……….. Con HEPARINA.

TUBO CON TAPON ROJO. USO: Química, Inmunología, Banco de sangre. ADITIVO: Ninguno

TUBO CON TAPON ROJO. USO: Química. ADITIVO: Gel - Separador

TUBO CON TAPON MORADO. USO: Hematología. ADITIVO: Anticoagulante EDTA

TUBO CON TAPON CELESTE. USO: Pruebas de Coagulación. ADITIVO: Anticoagulante Citrato de sodio

5.1.2.2 Anticoagulantes Existen múltiples factores involucrados en el proceso de coagulación de la sangre. Los

anticoagulantes son sustancias que previenen la formación de coágulos. Existen diferentes tipos de ellos en polvo o líquidos. Deben seleccionarse siempre el anticoagulante apropiado según el estudio que se quiera realizar. Los anticoagulantes más comunes son:

EDTA: (ETILEN-DIAMINO-TETRA-ACETATO) Este tipo de anticoagulante es utilizado principalmente cuando se realizan estudios en donde se cuentan células.

CITRATO DE SODIO: Generalmente en concentraciones al 3.8 % y ser utiliza comúnmente en estudios de coagulación.

HEPARINA: Se utiliza tanto en algunos estudios de rutina como especializados. Su presentación puede incluir heparina con concentraciones de sodio o litio. En general, la heparina con tilio es utilizada para estudios de química y la heparina sódica se utiliza para estudios de linfocitos.

OXALATOS: Son anticoagulantes menos comunes, utilizados ocasionalmente en las determinaciones de glucosa.

5.1.2.3 Diluciones • Las muestras de suero con niveles de IgE total superiores a 3000 UI/ml deben

diluirse y volverse a analizar para obtener resultados exactos.

• Las muestras de pacientes pueden ser diluidas automáticamente por el sistema o preparadas manualmente. Para las diluciones automáticas, cerciórese de que el Diluyente para IgE sea el adecuado según el aparataje utilizado.

• Se diluirá manualmente las muestras del paciente cuando los resultados del paciente excedan la linealidad del ensayo al usarse una dilución automática o cuando el protocolo del laboratorio requiera una dilución manual.

• Cerciórese de que los resultados se corrijan matemáticamente con respecto a la dilución.

• Si se introduce un factor de dilución al programar la prueba, el sistema calculará automáticamente el resultado.

5.2. Identificación del paciente

Todas las muestras deben ir acompañadas de una solicitud debidamente formulada. La solicitud debe contener la siguiente información:

a) La identificación completa del paciente: Nombre completo, Sexo, Número de seguro social, datos para su localización, número de cama si está hospitalizado, número de teléfono si es ambulatorio.

b) Médico solicitante: Nombre completo, Especialidad, numero de Registro (código de barras).

c) Pruebas que se realizarán.

d) Es deseable que la solicitud incluya información clínica de utilidad

Técnico Superior Sanitario de Laboratorio de Diagnóstico Clínico

46

5.3 Bioseguridad

Son todos los procedimientos (PNT: protocolos de trabajo) y acciones que garantizan una mejor calidad, para el profesional. Utilizando las medidas o métodos de BARRERA: Bata. Guantes. Gafas. Mascarillas.

5.3.1 Consideraciones Todas las muestras de especímenes biológicos deben

considerarse potencialmente infecciosas.

Procurar no producir "salpicaduras" con la muestra obtenida. Debe limpiarse y desinfectarse cualquier superficie contaminada por algún espécimen biológico.

Lavarse las manos correctamente, después de haber tenido contacto con cada paciente y al concluir cualquier procedimiento.

No deben ingerirse comidas, bebidas, goma de mascar o fumar durante los diferentes procedimientos en el Laboratorio.

Vigilar que los elementos de trabajo están en perfectas condiciones físicas. Algún elemento en mal estado, podría causarle una herida.

5.4 Manipulación de las muestras Para estos ensayos, el tipo de muestra recomendado es suero, las recomendaciones para

la manipulación y el almacenamiento de muestras de sangre:

Todas las muestras de sangre deben recogerse de conformidad con las precauciones universales de venopunción.

Debe dejarse que las muestras coagulen adecuadamente antes de la centrifugación.

Los tubos deben mantenerse siempre tapados y en posición vertical.

No deben utilizarse muestras que hayan sido almacenadas a temperatura ambiente durante más de 8 horas.

Si el ensayo no se completa en el transcurso de 8 horas, las muestras deben taparse bien y refrigerarse a una temperatura entre 2 y 8 °C.

Si las muestras no se analizan en el transcurso de 48 horas, deben congelarse a una temperatura inferior o igual a -20 °C.

Las muestras sólo deben congelarse una vez, y deben mezclarse a conciencia después de descongelarlas.

Antes de colocar las muestras en el sistema se debe verificar que:

− Las muestras no contengan fibrina ni otra materia

− Las muestras no contengan burbujas.

EL asma en el laboratorio

47

Se pueden utilizar las muestras de suero y plasma (EDTA o heparina) de sangre capilar o venosa.

Tomar las muestras de sangre empleando los procedimientos estandar

Mantener las muestras a temperatura ambiente (TA), únicamente para envíos (laboratorios externos) almacenar a una temperatura de entre 2 y 8º C, sino se enviaran a - 20 ºC.

5.4.1 Transporte de la muestra Una vez que se haya colectado la muestra sanguínea,

ésta debe ser llevada pronto al laboratorio para su procesamiento.

Algunas pruebas exigen que el suero sea separado cuanto antes del coágulo sanguíneo, para evitar alteraciones en la composición o niveles de algunos metabolitos.

De más está decir que la muestra debe ser acompañada por su correspondiente formulario de solicitud de examen.

5.5 Ventajas de las pruebas de alergia en la sangre

Son cómodas y convenientes para el paciente.

Solo es necesario una muestra de sangre.

Se puede realizar en el laboratorio, no es necesario la presencia prolongada del paciente.

Reducen tiempo requerido para el diagnóstico.

No es necesario que el Paciente deje sus medicamentos de alergias para realizar las pruebas.

Se pueden utilizar para el control de tratamientos con Vacunas, aplicadas por el médico alergólogo.

La prueba en el Laboratorio tiene un estricto control de calidad, además se utilizan extractos alergénicos estandarizados, lo que incrementa la confiabilidad en el resultado.

Interpretación cuantitativa de los resultados.

Se pueden identificar reacciones cruzadas entre alérgenos que están relacionados.

La prueba se realiza con alérgenos inhalatorios seleccionados de acuerdo a la geografía.

UNIDAD DIDÁCTICA VI DATOS PARA EL DIAGNOSTICO

EL asma en el laboratorio

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6.1 Muestra esputo

6.1.1 Secreción nasal Pedir al paciente que se suene la nariz en un papel encerado o plástico (15x15); colocar

un portaobjetos sobre el moco o aplicar y extender la muestra sobre el portaobjetos desde el papel, mediante un bastoncillo o asa recubierta en su extremo con algodón. También puede introducirse el bastoncillo en la cavidad nasal anterior (lo más posterior posible) y dejarlo en ella durante 2-3 minutos, para luego extraerlo y extender el moco así obtenido en el portaobjetos.

6.1.2 Esputo Debemos asegurarnos que la muestra de esputo es fruto de un acceso de tos profunda y

vigorosa. Si no es factible, es preferible prolongar el período de recolección para incluir varias expectoraciones forzadas en un lapso de 30-60 minutos.

• Si el examen del esputo se va a realizar de forma inmediata (que es lo preferible), no es necesario añadir conservantes ya que la morfología celular se mantiene intacta en el medio húmedo natural.

• Se recomienda la recogida del esputo de la primera hora de la mañana justo después de levantarse. El esputo deberá ser depositado desde la boca hasta un recipiente estéril específico para la recogida de la muestra que le será facilitado, una pequeña muestra del tamaño de una cucharadita puede ser suficiente para el estudio. El envase cerrado se analizar en el laboratorio especializado.

• La muestra puede conservarse en el frigorífico dentro el recipiente cerrado específico para ello hasta el momento de trabajarla.

6.1.2.1 Métodos para analizar En líneas generales y en función del tipo de análisis utilizado, el estudio del esputo lo

podemos clasificar en:

Estudio macroscópico: comprende el análisis de las características generales del esputo como color, consistencia...Se trata del estudio básico.

Estudio bioquímico: permite establecer el pH, enzimas, y otros elementos químicos característicos del esputo.

Estudio microscópico que a su vez engloba el estudio citológico (permite la detección de células precancerosas o cancerosas) y el estudio microbiológico (permite la detección de microorganismos patógenos).

Tinciones especiales: Tinción Gram, Tinción de Wright....

6.1.2.2 Tinción de la Muestra • Dejar secar la muestra al aire.

• La muestra puede teñirse con Wright (aunque pueden utilizarse otras tinciones); bañar la preparación con unas gotas de tinción de Wright (eosina y bicarbonato sódico, diluidos en alcohol metílico con azul de metileno) e incubar durante 2-3 minutos.

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52

• Luego añadir tampón de fosfato (pH 6,4) agitar suavemente para mezclar, y dejar en reposo durante 2-3 minutos. Lavar con agua destilada y dejar secar al aire.

• Fundamento: El colorante utilizado es una solución de eosina y una mezcla de azul de metileno (del 50 al 75%) y azur B (del 10 al 25%) junto con otros derivados del alcohol metílico.

Dada la presencia de metanol en la composición del colorante, no es necesario un paso previo de fijación antes de la coloración.

Sólo si se van a guardar las extensiones sin teñir de un día para otro precederemos a su fijación para evitar el deterioro del frotis.

Examen de la Extensión

Examinar al microscopio con una lente de gran aumento o por inmersión.

Debido a la irregular distribución de las células, no es posible hacer una exacta afirmación del % de eosinófilos que hay en la totalidad de los leucocitos. La prueba es por tanto cualitativa o semicuantitativa.

EOSINOFILOS EN MOCO NASAL Método: Tinción de Wright/Microscopía Técnica:

Identifique el lado del porta que contiene la muestra

Teñir las portas según la técnica de Wrigth

Deje secar las laminillas al aire

Realice una lectura a 100 X a cada laminilla, estimando la cantidad de leucocitos presentes:

Escasos: 1 a 5 por campo, Moderados: 6 a 20 por campo.

Abundantes: más de 20 por campo

Realizar un conteo diferencial ( polimorfonucleres, mononucleares y eosinofilos) en 100 celulas

Recorra la cinta adhesiva por encima del portaobjetos

Rango de referencia 0-1%

Los eosinófilos son células fagocitarías que demuestran especial afinidad por los complejos antígeno-anticuerpo por lo que la mayoría de los eosinófilos son atraídos por quimiotaxis. También los eosinófilos pueden ser atraídos por sustancias liberadas de los basófilos como la histamina.

El conteo eosinofílico del esputo es reproducible y la eosinofilia del esputo es altamente específica para distinguir el asma de otras enfermedades obstructivas crónicas si los eosinófilos del esputo son más del 10 % del total de células. A menudo los eosinófilos están aumentados en la sangre y en el esputo de pacientes con asma, usualmente en relación con la severidad del proceso.

EL asma en el laboratorio

53

El porcentaje de eosinófilos en esputo no hace el diagnóstico de asma, pero niveles mayores del 80% (en relación con la proporción de neutrófilos) son muy sugestivos de asma o de bronquitis crónica con dificultad respiratoria.

6.2 Muestra de sangre

Las Pruebas de sangre nos indican si hay infección u otro problema y medir el nivel de IgE. La medida de esta Ig E, se realiza por varios métodos.

6.2.1 Hemograma o hematimetría Se van a cuantificar los diferentes grupos celulares de la sangre (hematíes, leucocitos:

eosinofilos, etc. y plaquetas) otros parámetros relacionados con su cantidad, forma y contenido (hemoglobina, hematocrito, volumen corpuscular medio).

6.2.1.1 Recuento de Eosinofilos Este examen mide la cantidad de eosinófilos (un tipo de glóbulo blanco) en su sangre. Se

usa para evaluar y manejar condiciones alérgicas, enfermedades de sangre y enfermedades infecciosas (incluyendo asma).

Valores normales para estas pruebas: • Adultos:

• Relativo: 0%-8% [7]

• Absoluto: 0-0.45 cells X 109/L [3]

• Bebes de 2 años :

• Absoluto: 0-0.7 X 103células/microL[8]

• Niños, 4 a 10 años:

• Relativo: 2.4%-2.8% [3]

• Absoluto: 0-0.6 X 103células/microL Eosinófilo normal. Coloración: May Grunwald - Giemsa

6.2.1.2 Síndrome hipereosinofílico: La elevación discreta del número de eosinófilos en sangre periférica (0,5-1 x 109/l).

Requiere el cumplimiento de los siguientes criterios:

− Eosinofilia persistente por encima de 1500/μL durante más de 6 meses.

− Exclusión de otras causas conocidas de Hipereosinofilia secundaria como o infecciones virales, enfermedades alérgicas, eosinofilia inducida por fármacos o agentes químicos, hipoaldosteronismo y neoplasias.

− En muchos casos su hallazgo es casual y, la presencia de atopia, el asma extrínseca o la alergia a fármacos.

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54

6.2.2 Estudio de coagulación Consta, además de otros parámetros, de tiempo de protrombina (T.P.) que mide la

integridad de la vía extrínseca del sistema de coagulación sanguínea y el tiempo de tromboplastina activada (APTT) que mide la vía intrínseca.

El asma se asocia con un estado pro coagulante en el espacio bronco alveolar, agravada aún más por el deterioro de las actividades locales de la proteína C anticoagulante y la fibrinólisis.

Receptores de la proteasa están activados lo que implica un vínculo molecular entre la coagulación y la inflamación alérgica.

6.2.3 Gasometría arterial Como objetivo medir los valores en condiciones

prefijadas de parámetros sanguíneos y gases presentes en sangre arterial. Esto ayuda a valorar el estado respiratorio del paciente así como el estado de los órganos reguladores del organismo como los pulmones y el equilibrio ácido-base.

Los parámetros que se miden normalmente son pH, presión de O2, presión de CO2, concentración de ion bicarbonato, saturación de O 2 y exceso de bases.

Hipoxemia -pO2 baja-, hipocapnia inicial y luego hipercapnia -pCo2 alta-

La hipoxemia es la anomalía fundamental del intercambio gaseoso en el asma.

6.2.3.1 Grados de hipoxemia

Severidad Valores (mmHg)

Leve 70 - 61

Moderada 60 - 50

Importante 50 - 40

Severa 40 - 30

Muy Severa <30

6.3 Química hamática 6.3.1 Inmunoglobulinas

Las inmunoglobulinas, también denominadas anticuerpos son sustancias de naturaleza glicoproteica que constituyen el brazo efector de los mecanismos adaptativos humorales. Las inmunoglobulinas son sintetizadas por las células plasmáticas en respuesta a la presencia de un inmunógeno, y son específicas .Las inmunoglobulinas se encuentran en el suero, leche y saliva, y adosadas a membranas mucosas en algunos casos particulares. Existen 5 clases o isotipos principales de inmunoglobulinas, en función del tipo de cadena pesada que presente:

1) Ig G: cadena pesada γ

2) Ig A: cadena pesada α

EL asma en el laboratorio

55

3) Ig M: cadena pesada μ

4) Ig D: cadena pesada δ

5) Ig E: cadena pesada ε

6.3.1.1 Determinación de IgE total Este es un estudio útil para medir cantidad de anticuerpos tipo IgE en la sangre del

paciente. Cuando están elevados en un paciente con asma sugieren la posibilidad de que se trate de un caso de asma de tipo alérgico. Si están normales o bajos no descartan la posibilidad de alergia.

La IgE se compone de dos cadenas pesadas y dos cadenas ligeras, la zona donde se sitúan estas últimas se conoce como región Fab y constituye el área de reconocimiento del alérgeno. La región Fc, constituida exclusivamente por las cadenas largas, aloja el dominio Ce3 punto de unión de la IgE con los receptores de membrana de las diferentes células, especialmente eosinófilos, basófilos y mastocitos.

6.3.1.2 Determinación de IgE específica. Es de uso poco frecuente, este estudio

mide la cantidad de IgE específica contra pólenes, ácaros de polvo casero, hongos o animales. Sirve para encontrar alergias específicas en el asmático y cuando no es posible efectuar test cutáneo por edad, dermatitis atópica o dermografismo. Si la IgE está por encima de 1.000, es muy probable la presencia de aspergilosis broncopulmonar alérgica.

Esquema de la estructura de la inmunoglobulina E (IgE) humana

6.3.1.3 Componente Heredado Marcadores genéticos en el cromosoma 5q31-q33, ligados al locus regulador de los

niveles de IgE total sérica y de la hiperreactividad bronquial. diversos genes que pueden resultar importantes en la regulación del IgE y en el desarrollo o la progresión de la inflamación bronquial asociada al asma en el cromosoma 5q:

− Incluyen genes que codifican varias interleucinas, tales como IL-3, IL-4, IL-5, IL-9, IL-13, factor estimulante de colonias de macrófagos-granulocitos [GM CSF], un receptor para 10 el factor estimulante de colonias de macrófagos [CSF-1R], un factor de crecimiento para fibroblastos ácido, así como otros40.

− Sugiere la conexión genética entre los niveles de IgE en suero y los marcadores de ADN en la región de estos genes candidatos en el cromosoma Sq41, 42.

6.3.1.4 Respuesta tardía Asmática Interleucina 4 (IL-4) se produce en el pulmón después de la respuesta mediada por IgE.

UNIDAD DIDÁCTICA VII MÉTODOS “IN VITRO”

EL asma en el laboratorio

59

7.1 Introducción

Las pruebas biológicas o in vitro son formas de evaluación relativas, que detectan concentraciones comparativas de ciertas clases de inmunoglobulinas (Ig) que podrían estar presentes en algunas alergias.

El caso de las personas alérgicas, éstas producen una cantidad excesiva de un tipo particular de anticuerpo dirigido de manera específica contra el alérgeno: la inmunoglobulina “E” (IgE).

Cuando la IgE (que está sobre unas células productoras de histamina y otros mediadores inflamatorios) y el alérgeno se unen, se produce una liberación de estos mediadores produciendo una dilatación de los vasos sanguíneos y la inflamación del tejido, originando los síntomas alérgicos que, (dependiendo del sitio donde se liberen la histamina y los otros mediadores) se traducen en Asma bronquial, Rinitis alérgica y en otro tipo de alergias (gastrointestinal, alergia de piel, alergia ocular, etc.).

Las alergias se diagnostican realizando una adecuada historia clínica, además de la determinación de la IgE en sangre (IgE total y específica para cada alérgeno).

La alergia es una de las seis patologías más frecuentes que afectan a la población mundial según la O.M.S y que probablemente tendrá en los próximos diez años uno de los crecimientos más importantes en los países desarrollados.

Él laboratorio tiene un papel muy importante en el diagnóstico y control de la evolución de la enfermedad. Hay cientos de sustancias alergénicas más de 600 alérgenos,

Las pruebas del laboratorio "in vitro" tienen la ventaja de que con una sola extracción de sangre se puede hacer una batería de pruebas frente a una gran variedad de alérgenos, ya sea unitario, ya sea mezclas de grupos como pruebas de screening.

Para realizar el diagnóstico diferencial, el clínico se basa en la anamnesis y la exploración del paciente con pruebas "in vivo" e "in vitro".

7.2 Métodos para la detección de IgE

7.2.1 Phadiatop Es la primera prueba de "screening" en la exploración

de una alergia, utiliza la tecnología de fluoroenzimoinmunoensayo para confirmar o excluir la patología atópica a los Neumoalérgeno más comunes, en pacientes con rinitis, conjuntivitis, bronquitis, asma y síntomas respiratorios.

• Una prueba in vitro que ayuda diferenciar la enfermedad atópica de la no atópica.

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60

• Se basa en el estudio de IgE específicas frente a Neumoalérgeno comunes, descartando o incluyendo la patología alérgica por alergia respiratoria.

• Es una prueba in vitro que ayuda diferenciar la enfermedad atópica de la no atópica.

7.2.1.1 La técnica es un inmunoanálisis en sándwich:

Una combinación equilibrada de alérgenos inhalantes relevantes, unida de forma covalente a la fase sólida, reacciona con la IgE específica en la muestra de suero del paciente.

Después de eliminar la IgE no específica, los anticuerpos marcados con enzimas contra IgE se añaden para formar una mezcla.

Después de la incubación, anti-IgE no unido marcado con enzimas se elimina y la mezcla de unión se incuba con un agente de desarrollo.

Después de detener la reacción, se mide la fluorescencia del eluido. Cuanto más elevada sea la fluorescencia, más IgE específica habrá en la muestra.

7.2.1.2 Valores de sensibilización

EL asma en el laboratorio

61

7.2.2 La técnica de Cap System Se basa en el estudio de las IgE específicas del suero del paciente que se unen o no,

dependiendo si existen en el suero o no, covalentemente al alérgeno en estudio.

7.2.2.1 Técnica Colocado en un soporte sólido (cap), ofrece una mayor superficie que un disco y por lo

tanto ofrece más sensibilidad que las técnicas clásicas de RAST.

Después de un primer lavado la IgE no específica es eliminada, se añade un enzima marcado con anticuerpos anti-IgE formando un complejo.

Después de la incubación el enzima-anti-IgE no unida es eliminada mediante otro lavado y el complejo final se incubara con la solución de desarrollo (4-metil-umbeliferil-beta-D-galactosidasa).

Después de parar la reacción se mide la fluorescencia del eluído.

Medidas altas en la respuesta, corresponden a valores altos de IgE específica en el suero del paciente.

Esta técnica de radioinmunoanálisis es la técnica clásica que utiliza el alérgeno en estudio, sobre un soporte sólido (disco) y anticuerpos anti-IgE específica marcado con Iodo 125.

Las pruebas de f5 y Phadiatop, son muy útiles principalmente en Pediatría.

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62

En la alergia del adulto, la mayoría de alergólogos prefieren enfocar el diagnóstico a través de la historia clínica, test cutáneos y soporte del laboratorio para la realización de pruebas de IgE específicas frente a alérgenos concretos.

7.2.3 InmunoCAP Es un moderno sistema de Laboratorio integrado por pruebas In-Vitro con instrumentos

altamente automatizados, proporciona resultados rápidos y precisos de pruebas de alergia, se dispone también de pruebas para el seguimiento del asma y de enfermedades autoinmunes.

El polímero de celulosa con el que trabaja ImmunoCAP, tiene una gran capacidad de unión IgE-alérgeno específico de hasta un 300% más con respecto a los métodos antes disponibles como el tubo de ensaye y el disco de papel (RAST).

Utiliza la tecnología de fluoroenzimoinmunoensayo.

− El sistema de diagnóstico ha supuesto una revolución en cuanto a automatización y velocidad a las que se procesan estas pruebas.

− Con la tecnología ImmunoCAP, con una pequeña muestra de sangre que se analiza en el laboratorio, permite detectar la presencia de IgE específica, un anticuerpo que circula en la sangre cuando el organismo combate a un alérgeno. La determinación específica de IgE frente a uno o varios alérgenos, permite cuantificar In Vitro la sensibilización a éstos.

7.2.3.1 La técnica Se dispone de alérgeno que se presenta en fase sólida y se expone al suero del

paciente.

Si éste tiene IgE específica frente a dicho alérgeno se produce una unión de dicha IgE con el alérgeno.

Esta unión se pone de manifiesto añadiendo un anticuerpo poli o monoclonal anti IgE marcado, que se une al complejo alérgeno – IgE, formado previamente y dando lugar a un nuevo complejo (alérgeno – IgE – anti IgE) que, al estar marcado, emite una señal cuantificable.

La cuantificación convierte a esta determinación en el patrón de oro del diagnóstico de la sensibilización y de la alergia, ya que es capaz de identificar niveles muy bajos de IgE específica, desde 0 hasta 100 kUA/L.

EL asma en el laboratorio

63

7.2.4 Contador de POZO GEIGER (marca AlfaNuclear), Usado para la medición en suero sanguíneo de la cantidad de alergia que el paciente

tiene, expresada por KU/L de Inmunoglobulina E (Ig E), cuyos valores en adultos normales no debe sobrepasar de 100.

El aumento de Ig E, no marca gravedad de proceso alérgico que el paciente acuse (asma, rinitis, eccema) sino la intensidad de su estado de hipersensibilidad.

También esta cifra obtenida, sirve para el monitoreo del tratamiento emprendido, por lo que en ocasiones es necesaria su medición 2 ó 3 veces al año.

7.2.4.1 El RAST (Radio Allergo Sorbent Test), Es un procedimiento para cuantificar los niveles de IgE sérica específica, contra un

determinado alérgeno.

Método

Múltiples moléculas de este alérgeno, unidas de forma covalente a un disco de papel, reaccionan con los anticuerpos IgE específicos presentes en la muestra de suero del paciente.

Posteriormente se lava el disco de papel para eliminar todos los componentes del suero, excepto la IgE específica que permanece unida al disco de papel a través del enlace con el alérgeno.

Seguidamente se añaden anticuerpos anti-IgE marcados radioactivamente. Estos se enlazan con la IgE específica, formando un complejo (anti-IgE marcada-IgE específica-alérgeno-disco de papel).

Tras un nuevo lavado del disco para eliminar la anti-IgE radioactiva sobrante (no enlazada), se mide la radioactividad del complejo mediante un contador gamma.

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64

Los recuentos se comparan con unas muestras de referencia estudiadas en paralelo con las muestras problema y de esta forma pueden valorarse los resultados.

Estos se expresan en PRU/ml ; sus valores de RAST en Análisis de Laboratorio son

clase:

7.3 Determinación IgE alérgeno específico

7.3.1 Método de paneles ALLERGY SCREEN • Preparación previa: Preparar el Buffer de lavado y humedecer los paneles con unas

gotas del mismo, luego decantar el liquido tratando de dejar la tira humeda pero sin acumulos o gotas de líquido.

• Agregar el suero del paciente (250 uL) con una pipeta a las tiras e incubar 45 minutos a temperatura ambiente en un agitador horizontal a 120 osc/min.

• Lavar según el siguiente procedimiento: Las membranas de las tiras del test se enjuagan con el buffer por lo menos durante 5 seg. Para ello las tiras se sostienen en forma vertical hacia abajo, para evitar que lleguen salpicaduras a los sueros de las membranas vecinas.

• El chorro de la solución de lavado debe pasarse varias veces por la membrana del test, después se rellena la membrana con buffer de lavado diluido, se mueve varias veces de un lado a otro y se vacía. Finalmente se sostienen las tiras nuevamente inclinadas hacia abajo y se enjuagan durante 5 segundos con el frasco lavador.

• Después proceda a vaciar las membranas y séquelas sobre una superficie absorbente.

• Colocar 5 gotas del anticuerpo detector en cada tira e incubar 45 minutos a temperatura ambiente en un agitador horizontal a 120 osc/min.

• Lavar como indica el paso 2, y colocar 5 gotas del conjugado de estreptavidina en cada tira de reacción. e incubar 20 minutos a temperatura ambiente en un agitador horizontal a 120 osc/min. Utilice como guía las mismas figuras del paso anterior

0 < 0,35 PRU/ml Negativo

1 0,35 - 0,70 PRU/ml Dudoso

2 0,70 - 3,50 PRU/ml Positividad moderada

3 3,50 - 17,50 PRU/ml Positividad elevada

4 > 17,50 PRU/ml Positividad muy elevada

EL asma en el laboratorio

65

• Lavar como indica el paso 2 nuevamente, y colocar 5 gotas de sustrato en cada tira, e incubar 20minutos a temperatura ambiente en un agitador horizontal a 120 osc/min. (Tapado). Utilice como guía las mismas figuras del paso 2 y 3.

• Detenga el desarrollo del color lavando las tiras usando agua corriente, luego secar bien (puede usar un secador de aire caliente como el que se muestra en la imagen), y evalúe los resultados de forma cuantitativa (Software) o cualitativa (con la guía de colores incluida en el kit).

Lectura Visual mediante Tarjeta: (Tarjeta incluida en cada kit)

7.3.2 Test ELECSYS IgE Este inmunoensayo de electroquimioluminiscencia (electrochemiluminescence

immunoassay), utiliza anticuerpos monoclonales dirigidos directamente contra la IgE humana.

7.3.2.1 Principio del TEST: Técnica sándwich con una duración total de 18 minutos.

1° incubación: IgE de 10 µl de muestra, un anticuerpo monoclonal anti-IgE biotinilado y un anticuerpo monoclonal específico anti-IgE marcado con quelato de rutenio forman un complejo sándwich.

2° incubación: Después de la incorporación de micropartículas recubiertas de estreptavidina, el complejo formado se fija a la fase sólida por la interacción entre biotina y estreptavidina.

La mezcla de reacción es trasladada a la célula de lectura donde, por magnetismo, las micropartículas se fijan temporalmente a la superficie del electrodo. Los elementos no fijados se eliminan posteriormente con el reactivo ProCell. Al aplicar una corriente eléctrica definida se produce una reacción quimioluminescente cuya emisión de luz se mide directamente con un fotomultiplicador.

Los resultados se obtienen mediante una curva de calibración. Los resultados se obtienen a partir de una curva de calibración realizada en el sistema mediante una calibración a dos puntos y una curva máster incluida en el código de barras del reactivo.

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7.3.2.2 Reactivos- Contenido y concentraciones IgE, estuche de reactivos Elecsys, 100 tests

M Micropartículas recubiertas de estreptavidina (tapa transparente), 1 frasco, 6,5 ml:

Micropartículas recubiertas de estreptavidina: 0,72 mg/ml, capacidad de fijación: 470 ng de

biotina/mg de micropartículas; conservante.

R1 Anticuerpos anti-IgE~biotina (tapa gris), 1 frasco, 10 ml:

Anticuerpos biotinilados monoclonales anti-IgE (ratón) 2,4 mg/l; tampón fosfato 85 mmol/l,

pH 6,5; conservante.

R2 Anticuerpos anti-IgE~Ru(bpy){ (tapa negra), 1 frasco, 10 ml:

Anticuerpos monoclonales anti-IgE (ratón) marcados con quelato de rutenio 4,8 mg/l; tampón fosfato 85 mmol/l, pH 6,5; conservante.

Preparación de los reactivos

Los reactivos incluidos en el estuche están listos para el uso y forman una unidad inseparable, con los códigos de barras de los reactivos. En posición vertical para asegurar la disponibilidad de todas las micropartículas durante la mezcla automática antes del uso

Conservación y estabilidad: Conservación a 2–8°C.

7.3.3 Las muestras Plasma con heparina (Li, Na), EDTA tripotásico, citrato sódico. En caso de emplear citrato

sódico, corregir los resultados en un +10%.

En caso de emplear fluoruro sódico/oxalato potásico se encuentran valores disminuidos en un 18% respecto de los valores en suero.

Estabilidad: siete días a 2–8°C, seis meses a –20°C. Congelar como máximo 5 veces.

Las muestras conteniendo precipitado deben centrifugarse antes de realizar el test.

Debido a posibles efectos de evaporación, determinar las muestras, controles y calibradores dentro de un lapso de dos horas.

7.3.4 Realización de la técnica Para asegurar el funcionamiento correcto del test, debemos observar las instrucciones de

uso del analizador y comprueba si éste está equipado con todo el material necesario. Las micropartículas se mezclan automáticamente antes del uso.

Los parámetros de test se introducen a través de los códigos de barras impresos en el reactivo. Pero si, excepcionalmente, el analizador no pudiera leer el código de barras, el código numérico de 15 cifras deberá introducirse manualmente.

EL asma en el laboratorio

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Antes del uso, atemperar los reactivos refrigerados a aprox. 20°C y colocarlos en el rotor de reactivos (20°C) del analizador. ( ojo con la espuma) El analizador realiza automáticamente los procesos de atemperar, abrir y tapar los frascos. Guardar en nevera después del uso.

7.3.5 Calibradores Cada reactivo de IgE contiene un código de barras que incluye toda la información

específica necesaria para la calibración del lote de reactivos. La curva máster preestablecida es adaptada al analizador a través del IgE CalSet Elecsys.

7.3.5.1 Intrvalo de calibraciones Efectuar una calibración una vez por lote con reactivo fresco .Se recomienda recalibrar:

Después de un mes (28 días) si se trata del mismo lote de reactivos

Después de siete días (al emplear el mismo estuche de reactivos en el analizador)

Con cada estuche de reactivos

Después de siete días (temperatura ambiental 20–25°C)

Después de tres días (temperatura ambiental 25–32°C)

El límite de detección equivale a la menor concentración medible de IgE que puede distinguirse de cero. Se calcula como la concentración situada a dos desviaciones estándar superiores al estándar más bajo (calibrador máster, Std. 1 + 2 DE, precisión intraensayo, n = 21).

Sensibilidad funcional: 0,50 UI/ml o bien 1,20 ng/ml: es la concentración de IgE cuya medición puede reproducirse con un coeficiente de variación inter ensayo del < 10%.

Especificidad analítica: Los anticuerpos monoclonales empleados están dirigidos con alta especificidad contra la inmunoglobulina E. No se ha detectado reactividad cruzada con las inmunoglobulinas G, A ni M.

El test no se ve afectado por ictericia (bilirrubina < 37 mg/dl), hemólisis (Hb < 1,1 g/dl), lipemia (triglicéridos < 2.200 mg/dl), biotina < 100 ng/ml. (Criterio: recuperación ± 10% del valor inicial).

7.3.5.2 Valores límites recomendados Edad UI/ml ng/ml

Neonatos 1,5 3,6

Lactantes hasta 1 año de edad 15 36

Niños (1–5 años) 60 144

Niños (6–9 años) 90 216

Niños (10–15 años) 200 480

Adultos 100 240

7.3.6 Dilución Las muestras con concentraciones de IgE superiores al intervalo de medición pueden

diluirse con:

Diluent Universal. Se recomienda una dilución de 1:20 automáticamente por el módulo o los analizadores Elecsys 1010/2010 o bien de forma manual.

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La concentración de la muestra diluida debe ser > 60 UI/ml o bien 144 ng/ml. Multiplicar los resultados obtenidos tras dilución manual por el factor de dilución. El software del módulo toma en cuenta la dilución automática al calcular la concentración de las muestras.

7.4 Ventajas de la cuantificación de IgE específica

La determinación de IgE específica es una valiosa herramienta para el tratamiento del paciente alérgico Permite conocer los alérgenos específicos que provocan la alergia y determinar con exactitud la causa de esta afección.

• Niveles altos de anticuerpos IgE indican una reacción alérgica. La cantidad de anticuerpos IgE presentes no predice la severidad de la reacción alérgica. Una persona podría tener o no tener una reacción o un síntoma cuando se expone a la sustancia o alérgeno.

• No se ha comprobado que los anticuerpos IgG para alérgenos específicos sean parte de la patogénesis de la enfermedad. Simplemente, indican que el individuo estuvo expuesto al antígeno que ha sido reconocido por el sistema inmunológico como agente extraño. La presencia de un anticuerpo IgG específico de un alérgeno alimenticio indica solamente la sensibilización por ese alimento.

7.4.1 Valores de los test La concentración total de IgE en suero depende de la edad. Aumenta durante la infancia,

y aproximadamente a los 10 años, el total de IgE en suero alcanza valores que se mantienen durante la edad adulta.

Edad Media geométrica (kU IgE/l)

+ 1 SD (kU IgE/l)

Edad Media geométrica (kU IgE/l)

+ 1 SD (kU IgE/l)

Semanas Años

6 0,6 2,3 2 5,7 23

Meses 3 8,0 32

3 1,0 4,1 4 10 40

6 1,8 7,3 5 12 48

9 2,6 10 6 14 56

12 3,2 13 7 16 63

8 18 71

9 20 78

10 22 85

EL asma en el laboratorio

69

7.5 Otros procedimientos para el diagnóstico

Varios procedimientos de laboratorio pueden ser utilizados como métodos alternativos de diagnóstico de enfermedades alérgicas, pero son menos específicos o de difícil realización, no presentando relevante aplicación clínica algunos de ellos son:

7.5.1 ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay) Técnica de inmunoensayo en la cual un antígeno inmovilizado se detecta mediante un

anticuerpo enlazado a una enzima capaz de generar un producto detectable como cambio de color o algún otro tipo.

7.5.2 El método de ELISA REVERSO (rELISA) Utiliza anticuerpo monoclonal alérgeno-específico para medir IgE específica en suero, es

más sensible que el ELISA convencional (70.8%) y comparable al RAST. Además tiene la ventaja de no utilizar material radioactivo, tornando su realización de menor riesgo y costo.

7.5.3 FAST (fluorescent-allergosorbent test) Esta prueba utiliza el mismo principio que la prueba de RAST, pero utiliza un sistema de

detección enzimático fluorescente.

7.5.4 MAST (múltiple chemiluminescent-allergosorbent test) Esta prueba in vitro para el suero específico IgE utiliza un sistema de detección enzimático

en lugar de una etiqueta radiactiva. Las fibras de la celulosa que se han tratado con diversos alergénicos se arreglan dentro de un compartimiento de la prueba. Durante la incubación del suero del individuo, cualquier IgE que sea presente reaccionará con los alergénicos en las fibras de la celulosa.

En algunos países la cuantificación de óxido nítrico en el gas inhalado ya es una realidad, usada en el control de pacientes asmáticos y riníticos. Todavía es una prueba de alto costo operativo, no siendo utilizada de forma rutinaria.

Las pruebas diagnósticas en alergia son importantes para confirmar el diagnóstico basado en una evidencia clínica, pero cada caso debe ser estudiado de forma individualizada.

Aunque no siempre es posible determinar el mecanismo inmunológico implicado en la manifestación clínica del paciente, con las pruebas diagnósticas en alergia es posible por lo menos determinar (o descartar) un mecanismo de "causa y efecto". Estas tienen aplicación clínica importante en enfermedades alérgicas respiratorias y cutáneas, reacciones alérgicas alimentarias y medicamentosas, donde una vez identificado, se podrá evitar el alérgeno desencadenante del cuadro clínico.

Cuando el paciente con historia de reacción sistémica grave presenta pruebas in vitro y pruebas cutáneas negativas que descartan un proceso alérgico, hay que considerar otros diagnósticos, como procesos no inmunológicamente mediados.

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Tomando en cuenta las variantes habituales en la realización de estas pruebas, como el personal( T.E.L) que las realiza, los métodos y materiales utilizados, variantes ambientales y la sensibilización individual del paciente, se debe considerar la clínica como factor fundamental para analizar y valorar los resultados obtenidos, y concluir el diagnóstico de proceso alérgico.

7.6 Ventajas a cosiderar del PHADIATOP frente IgE total y recuento de eosinófilos

Escasa especificidad diagnóstica de la IgE total, ya que numerosas enfermedades como parasitosis, infecciones generalizadas, neoplasias, inmunodeficiencias y trastornos dérmicos, cursan con elevados niveles de IgE total.

El recuento de eosinófilos posee escasa eficiencia clínica desde la orientación diagnóstica, ya que pueden elevarse en numerosas enfermedades no alérgicas como la neumonía eosinófila crónica, aspergilosis broncopulmonar, parasitosis intestinal, gastroenteritis eosinofílica, dermatitis exfoliativa, dermatitis herpetiforme, etc...

El Phadiatop, como la primera prueba "in vitro" para establecer un diagnóstico diferencial de patología alérgica respiratoria o no, permitiendo avanzar en la instauración de una terapia adecuada mejorando la calidad de vida del paciente y evitando el gasto sanitario que supondría un diagnóstico erróneo.

Una vez confirmado el Phadiatop, Fx5E ó test cutáneos "in vivo" positivos, la siguiente prueba "in vitro" sería determinar individualmente cuales son las pruebas de IgE específicas que son positivas.

Existen amplios paneles con más de mil alérgenos que podemos clasificar en los siguientes grupos:

− IgE Especificas por él Método CAP SYSTEM: Alérgenos (cap system) que cubren los grupos de:

Pólenes de gramíneas, malezas, árboles-arbustos.

Mohos.

Ácaros y polvo de casa.

Epitelios y proteínas de animales.

Alimentos de origen vegetal, pescados, mariscos, moluscos, leche, huevo y carnes.

Venenos e insectos.

Parásitos.

Ocupacionales.

Medicamentos, hormonas y vacunas.

EL asma en el laboratorio

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Mezclas de los anteriores alérgenos.

− IgE específicas frente a medicamentos por radioinmunoanálisis: Realizando una técnica de radioinmunoanálisis:

Antibióticos: beta-láctamicos, aminoglucósidos, macrólidos etc...

Anestésicos locales y totales.

Analgésicos y anti-inflamatorios.

Quimioterápicos.

Contrastes iodados.

Vitaminas.

UNIDAD DIDÁCTICA VIII TÉCNICAS EN VIVO

EL asma en el laboratorio

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8.1 Introducción

Las Técnicas en vivo son aquellas técnicas diagnósticas que se realizan en el propio paciente, bien sea con el fin de determinar el alérgeno responsable de la enfermedad, o bien con el fin de llegar a un diagnóstico clínico.

8.2 Pruebas de función respiratoria

La exploración funcional respiratoria nos sirve para confirmar el diagnóstico de asma, cuantificar la gravedad de la enfermedad, monitorizar la evolución y objetivar la respuesta al tratamiento.

• En cualquier definición que tomemos de asma bronquial, nos habla de la obstrucción al flujo aéreo reversible de forma espontánea o tras broncodilatador. En todo paciente con sospecha de asma bronquial, debería hacerse una prueba de función respiratoria, siempre que la edad del niño lo permita. En concreto, una espirometría basal y tras broncodilatador nos servirá para el diagnóstico funcional de asma bronquial.

• En lactantes y niños pequeños que no cooperan en este tipo de prueba, se utilizaran, si es necesario, otro tipo de pruebas como dilución de gases, pletismografía o el chaleco insuflable; no obstante son de mayor complejidad y precisan de sedación.

• La espirometría es la técnica que mide los flujos y volúmenes respiratorios útiles para el diagnóstico y seguimiento de patologías respiratorias. Puede ser simple o forzada.

• Aire Exhalado: En los asmáticos el aire espirado contiene un exceso de NO (Monóxido de nitrógeno) hasta 7 veces más que en los individuos normales.

8.2.1 Espirometría simple Consiste en solicitar al paciente que, tras una

inspiración máxima, expulse todo el aire de sus pulmones durante el tiempo que necesite para ello. Así se obtiene los siguientes volúmenes y capacidades:

1. Volumen normal o corriente: Vt. Corresponde al aire que se utiliza en cada respiración.

2. Volumen de reserva inspiratoria: VRI. Corresponde al máximo volumen inspirado a partir del volumen corriente.

3. Volumen de reserva espiratoria: VRE. Corresponde al máximo volumen espiratorio a partir del volumen corriente.

4. Capacidad vital: CV. Es el volumen total que movilizan los pulmones, es decir, sería la suma de los tres volúmenes anteriores.

5. Volumen residual: VR. Es el volumen de aire que queda tras una espiración máxima. Para determinarlo, no se puede hacerlo con una espirometría, sino que habría que utilizar la técnica de dilución de gases o la pletismografía corporal.

6. Capacidad pulmonar total: TLC. Es la suma de la capacidad vital y el volumen residual.

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8.2.2 Espirometría forzada Es aquella en que, tras una inspiración máxima, se le pide al paciente que realice una

espiración de todo el aire, en el menor tiempo posible. Es más útil que la anterior, ya que nos permite establecer diagnósticos de la patología respiratoria. Los valores de flujos y volúmenes que más nos interesan son:

1. Capacidad vital forzada (FVC) (se expresa en mililitros): Volumen total que expulsa el paciente desde la inspiración máxima hasta la espiración máxima. Su valor normal es mayor del 80% del valor teórico.

2. Volumen máximo espirado en el primer segundo de una espiración forzada (FEV1) (se expresa en mililitros): Es el volumen que se expulsa en el primer segundo de una espiración forzada. Su valor normal es mayor del 80% del valor teórico.

3. Relación FEV1/FVC: Indica el porcentaje del volumen total espirado que lo hace en el primer segundo. Su valor normal es mayor del 70-75%.

4. Flujo espiratorio máximo entre el 25 y el 75% (FEF25-75%): Expresa la relación entre el volumen espirado entre el 25 y el 75% de la FVC y el tiempo que se tarda en hacerlo. Su alteración suele expresar patología de las pequeñas vías aéreas.

8.3 Técnica de realización de la espirometría

8.3.1 Antes de realizarla Explicar al paciente la razón por la que es preciso hacerla y recordarle que no utilice

medicación en las 6 horas anteriores a la prueba, si utiliza broncodilatadores de acción corta y 12 horas para los de acción prolongada y metilxantinas de acción retardada. Así mismo no debe fumar ni tomar bebidas con cafeína en las horas previas. También se le advertirá que durante su realización oirá órdenes en tono enérgico.

8.3.2 En el momento de llevar a cabo la prueba: El paciente se situará en posición sentada, sin ropa que le ajuste, se le colocará una pinza

nasal y se comprobará que la boca está libre de elementos que impidan una buena colocación de la boquilla (por ejemplo dentadura postiza).

8.3.3 Inspiración Se realizará una inspiración relajada pero máxima, al finalizar la cual se coloca la boquilla

bien sujeta, y el técnico dará una orden enérgica (¡ahora!, ¡ya!) que indica el comienzo de la espiración forzada, que durará, como MINIMO, 6 segundos, durante los cuales el técnico animará al paciente a continuarla, vigilará que expulse el aire continuamente y asegurará que ésta mantiene un flujo constante.

8.3.4 Cuando finalizarla La realización de la espirometría se dará por finalizada, cuando se obtengan 3 curvas

técnicamente satisfactorias, que serán aquellas que duren más de 6 segundos y con diferencias entre los FVC y los FEV1 de las tres curvas inferiores al 5% o 100 ml. El número máximo de curvas a realizar será de 8-9.

EL asma en el laboratorio

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8.3.5 Cálculo de la mejor curva Será aquella en que la suma del FEV1 y de FVC sea mayor.

8.3.6 Cálculo del cociente FEV1/FVC Se realiza utilizando el valor máximo del FEV1 y del FVC en cualquiera de las maniobras

técnicamente satisfactorias, y que no tiene por qué corresponder a una misma gráfica.

8.4 Test de broncodilatación

Se realiza fundamentalmente: Para diagnóstico de asma bronquial.

• En el paciente con EPOC para establecer el grado de reversibilidad de la vía aérea. De todas formas el FEV1 puede verse influenciado por múltiples factores, por lo que, para pacientes con EPOC, no es una técnica excesivamente útil para conocer cuáles serán los que respondan al tratamiento con corticoides inhalados.

• Debe realizarse con el paciente clínicamente estable, sin que hayan utilizado broncodilatadores de acción corta en las 6 horas anteriores o de acción larga en las 12 horas previas.

• Un aumento de 200 ml y 12% del valor absoluto del FEV1, determinará que la prueba broncodilatadora es positiva.

8.5 Pruebas de provocación

Las pruebas de provocación consisten en poner de manifiesto la sintomatología clínica referida por el paciente tras la exposición al alérgeno, cuando no es posible demostrarlo por otras técnicas diagnósticas.

De la propia definición podemos deducir que son pruebas que conllevan un riesgo para el paciente, por lo que hay que tomar todas las precauciones. Este tipo de pruebas las utilizamos cuando por la historia clínica y las diferentes técnicas del laboratorio es difícil encontrar el factor etiológico pese a que éste se sospecha.

Otras veces existe una discordancia entre la historia clínica y los resultados de los test, in vivo e in vitro y es necesario demostrar cuál de los alérgenos tiene repercusión clínica. En ocasiones, este mismo tipo de pruebas las utilizamos con el fin de demostrar una tolerancia al alérgeno.

Las pruebas de provocación pueden ser bronquiales, nasales, conjuntivales u orales, dependiendo del alérgeno que queramos estudiar y del órgano de choque.

8.5.1 Pruebas de provocación bronquial Este tipo de pruebas nos ponen de manifiesto la existencia de hiperreactividad bronquial

(HB), que definimos como "la sensibilidad anormal de la vía aérea, expresada como un incremento de la obstrucción al flujo aéreo tras la exposición a diversos estímulos o agentes farmacológicos, químicos y físicos".

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Un primer tipo de HB es la hiperreactividad bronquial inespecífica, que sería aquella obstrucción al flujo Aéreo desencadenada por estímulos farmacológicos, como la histamina o metacolina, o exposición estímulos no farmacológicos, como el ejercicio físico, soluciones hipo o hipertónicas e hiperventilación con aire frío.

En la práctica diaria en niños, la más utilizada es la prueba de ejercicio y en ocasiones la metacolina/histamina. Pese a ser una prueba de gran utilidad diagnóstica en niños, una determinación aislada de la Hiperreactividad bronquial inespecífica no puede ser considerada ni muy sensible ni específica para el diagnóstico de asma, ya que existen otras patologías pulmonares como la fibrosis quística, incluso sinusitis, que pueden cursar con Hiperreactividad bronquial. Existe ya una evidencia persuasiva de que los mastocitos juegan un importante papel en la respuesta inmediata al alérgeno y el asma inducido por el esfuerzo y el relacionado con alimentos, pero las células responsables de la inflamación crónica que provocan la hiperreactividad bronquial son los macrófagos, los eosinófilos y linfocitos T, todos ellos aparecen activados en el asma.

Un segundo tipo de HB es la hiperreactividad bronquial específica, que es aquella que refleja la respuesta bronquial frente a estímulos específicos (alérgenos), que afectaría exclusivamente a aquellos pacientes asmáticos sensibilizados.

8.5.2 Prueba de flujo máximo Un medidor de flujo máximo es un dispositivo pequeño en forma de tubo que mide el aire

que usted expulsa de sus pulmones. A esto se le llama su flujo exploratorio máximo (PEF). Su PEF indica cuán rápido el aire se mueve fuera de sus pulmones. Durante un ataque de asma, sus vías respiratorias se tensan y usualmente disminuye su PEF.

8.6 Test cutáneos

El test cutáneo de alergia por punctura o "prick test" es una técnica en la que se deposita en la piel una serie de gotas que contienen alérgenos aéreos comunes -substancias que inhaladas pueden provocar una reacción alérgica. En el lugar donde se coloca el alérgeno y por medio de un pequeño raspado, se produce el contacto con las células inmunológicas del individuo.

EL asma en el laboratorio

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Puede ser:

A. Sensibilización de tipo inmediato:

− Mediada por IgE, para lo cual utilizamos la prueba del Prick o la prueba intracutánea como métodos más habituales. La reacción objetivada con estas pruebas está inducida fundamentalmente por la degranulación de los mastocitos cutáneos al contacto con el alérgeno, con la consiguiente liberación de mediadores como la histamina, triptasa, neuromediadores etc., responsables de la respuesta inmediata.

− Podemos encontrar una respuesta tardía a las 6-8 horas, como consecuencia de procesos asociados a la respuesta inicial, ya que muchos de los mediadores liberados por los mastocitos activados son mediadores quimiotácticos que actúan atrayendo hacia el lugar de la reacción células inflamatorias como eosinófilos, neutrófilos macrófagos, que contribuyen a perpetuar la inflamación. Los linfocitos CD4+ juegan un papel en la puesta en marcha y regulación de la respuesta tardía, por la generación y liberación de citocinas.

B. Sensibilización tardía

En la que interviene la inmunidad celular (linfocitos T), para lo que utilizamos las pruebas epicutáneas, también conocidas como pruebas del parche. La reacción alcanza su máxima expresión entre las 24-72 horas y las células que participan en el infiltrado son predominantemente linfocitos del tipo Th1 y monocitos.

8.6.1 Técnica cutánea de PRICK Sirve para estudiar la posibilidad de que exista alguna alergia. Prick-test o pruebas

cutáneas. Consiste en depositar una pequeña gota del alérgeno a identificar y realizar una pequeña escoriación en la piel con una lanceta preparada con una pequeña zona puntiaguda.

• El prick es un técnica in vivo de utilidad en escolares y adolescentes para el diagnóstico de alergia en el asma es mínimamente invasiva y por lo general inocua.

• El prick tiene algunos inconvenientes como son el interferirse con determinadas medicaciones (como los antihistaminicos), depender del estado de la piel (no debe realizarse en presencia de dermatitis extensa, dermografismo o uso reciente de corticoides tópicos) y ofrecer resultados cualitativos

• Sus ventajas son la simplicidad técnica, fácil interpretación, rapidez de realización y alta sensibilidad.

• La elección de alérgenos a testar siempre se realizará basándose en los datos aportados por la historia clínica y el mapa alergénico de la zona.

• En toda prueba se incluirá un control positivo, en general histamina, y un control negativo, el diluyente inerte que vehiculiza los alérgenos.

• La valoración del prick debe realizarse midiendo los dos diámetros y expresando el resultado en milímetros.

En caso de resultar positiva se produce una pequeña inflamación, como un botón, en la zona de inoculación

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8.6.1.1 Test Consiste en la colocación de una gota de extracto alergénico sobre la piel sana del

individuo, puncionando a través de dicha gota con una lanceta especial de 1 mm, con lo que se introduce una parte mínima de dicho extracto en la piel.

• El prick test detecta la IgE específica ligada a los receptores celulares en la superficie de los mastocitos. De tal modo que cuando un paciente está sensibilizado a un determinado alérgeno, la introducción de dicho alérgeno en la zona dérmica repite el proceso de interacción antígeno-anticuerpo (alérgeno-IgE especifica) lo que provoca la desgranulación de los mastocitos y la aparición de un habón y un halo eritematoso circundante.

• El tamaño del habón a los 15-20 minutos, determina el tamaño de la reacción. Debe tenerse en cuenta que una positividad en el prick test no significa necesariamente que el alérgeno positivo sea causante de asma en el paciente.

Interpretación de los resultados La lectura se realizará a los 15 ó 20 minutos tras

la aplicación.

• Se mide la pápula: su diámetro máximo (DM) y el perpendicular (DP); ambas se anotarán en la hoja de registro, de la siguiente forma: DMxDP.

• También puede resultar de interés medir el eritema circundante; aunque el resultado del prick solo se refiere a la pápula o habón.

• El tamaño de la reacción depende de:

Grado de sensibilización al alérgeno

Cantidad del alérgeno aplicado

Capacidad individual de los mastocitos para liberar sus mediadores

• Se considera que la prueba está correctamente realizada cuando el control diluyente no provoca reacción 0x0 mm, y la Histamina tiene un DM igual o superior a 3 mm.

• Una reacción a un alérgeno es considerada como positiva cuando el DM de la pápula sea 3 mm o la superficie sea 7mm². Si existe cierto dermografismo, se consideraran positivos aquellas reacciones cuyo DM sea 3mm o la superficie 7 mm² mayor que el control negativo.

8.7 Técnica de PrickFilm IgE sérica total (automatizado)

Presenta actividad reagínica (se une a mastocitos y basófilos, y media la liberación, desencadenada por el antígeno, de aminas vasoactivas responsables de reacciones alérgicas como la anafilaxia). Para su lectura se usa un programa informático (PrickFilm) que permite mediante un escáner medir rápida y exactamente el área de los habones por planimetría.

EL asma en el laboratorio

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8.7.1 Método Colocamos el dispositivo de

aplicación al antebrazo mediantes tiras autoadhesivas. Por medio de los orificios de su capa guía superior, ponemos la gota de Alérgeno justo en el centro de cada ventana de lectura de la capa inferior. Una vez hechas las punciones, la lamina secante sirve para retirar el exceso de alérgeno.

Debe realizarse una prueba con solución de histamina (10 mg/ml) como control positivo. Esto sirve para demostrar la reactividad cutánea disminuida que con frecuencia aparecen en ancianos, niños muy pequeños y pacientes que toman antihistamínicos.

Film de lectura: en el momento de leer la prueba, superponemos este film al dispositivo de aplicación, que ha estado en el antebrazo del paciente durante la espera. Nos permite dibujar el contorno del habón sobre el film y transportarlo al espacio codificado de la hoja con la batería de alérgenos programada en analizador Prick-sacan, donde dará un informe completo.

El tiempo de procedimiento varía entre 5 a 30 segundos.

El tiempo de lectura se hará a 15 minutos.

Se rotulan las áreas de los habones producidos. Estas áreas rotuladas se despegan del brazo, se pegan en una hoja codificada mediante código de barras y se escanea. El programa compara el área producido por los alérgenos con las de los controles siguiendo las recomendaciones de la Academia Europea de Alergología (Dreborg, ed. Skin tests used in type I Allergy testing. Position paper. Allergy, 1989;44 (Suppl 10):1-59 ), es decir:

El área del antígeno se resta del área del salino = AA

El área de la histamina se resta de la del salino = AH

El AA se compara con el AH según la siguiente graduación:

Grado % del área de la Histamina - mismo área que el control negativo 1+ 25 2+ 50 3+ 100 4+ 200

Se consideran positivos a partir de 2+, es decir una área resultante (antígeno menos salino) igual a la mitad del área resultante de histamina (histamina menos salino)

Los prick deberían realizarse por duplicado (para evitar hasta un 5% de falsos negativos).

Si la técnica es correcta el Coeficiente de Variación (basado en el área) suele oscilar entre el 15-20% (nunca debe ser mayor del 40%).

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Las pruebas cutáneas se pueden hacer en lactantes de pocos meses, pero son más fiables a partir de los dos años de edad.

8.7.1.1 Interpretación de los resultados

EDAD Media Geométrica [+2 de (U/ml)]

0 días 1

6 semanas 6,12

6 meses 16

12 meses 15

2 años 29

3 años 16

4 años 68

7 años 161

10 años 570

14 años 195

Adultos 122

8.8 Comparación entre pruebas: in vivo – in vitro

8.8.1 Ventajas de las pruebas cutáneas • Menos costosa que las pruebas in vitro

• Los resultados están disponibles en el transcurso de una hora

• Son más sensibles que las pruebas in vitro

• Los pacientes pueden ver los resultados (esto puede incentivarlos a cumplir con las medidas de control ambiental.)

8.8.2 Ventajas de las pruebas en vitro (RAST) • No hace falta una técnica especial para realizar la prueba cutánea

• No requieren una disponibilidad de extractos de alérgenos

• No conllevan riesgo de reacciones generalizadas

• Se pueden realizar en pacientes que están tomando medicamentos que suprimen la respuesta cutánea inmediata (antihistamínicos y antidepresivos)

• Se pueden realizar en pacientes con eccema generalizado

UNIDAD DIDÁCTICA IX SUPUESTO PRÁCTICO

EL asma en el laboratorio

85

El objetivo de dedicar esta última parte del manual a exponer casos prácticos sacados de la práctica diaria es concienciar al técnico del escenario real en el que van a desarrollar su actividad. Es obvio que se trata de una simulación o resumen que en ningún momento puede suplir la realidad cotidiana en el trabajo del Técnico Superior Sanitario, en el que intervienen numerosos factores no reproducibles en el papel. No obstante, creemos de utilidad dedicar una unidad didáctica al análisis de casos prácticos.

En todo caso, los casos prácticos no son baremables, y sólo servirán al alumno para poner en práctica sus conocimientos.

Al final de esta Unidad Didáctica encontrará las respuestas a los supuestos teóricos-prácticos

9.1 Supuesto práctico

Al servicio de Urgencias llega un bebe con tiraje intercostal, después de la exploración médica se observa:

Tos. Retracción o tiraje de la piel entre las costillas al respirar (tiraje intercostal).Dificultad para respirar. Sibilancias que: aparecen en episodios con períodos intermedios libres de síntomas, empeoran en la noche o en las primeras horas de la mañana, por lo general comienzan súbitamente. Pulso rápido.

1. ¿Qué tipo de muestra pediríamos al bebe?

a) Sangre b) Hemocultivo c) LCR

2. ¿Qué es lo primero que debemos realizar cuando llega la muestra al Laboratorio?

a) Registrar la muestra b) Centrifugarla para obtener plasma c) Comprobar la petición medica

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3. ¿Cuál de las siguientes determinaciones es necesario hacer al bebe?

a) Hemograma b) Punción lumbar c) Velocidad de sedimentación

4. Para diferenciar una Alergia de una Anemia ¿Cuál de los siguientes valores debemos determinar?

a) VSG b) Eosinofilos c) VCM

5. Los eosinófilos se suelen cuantificar de forma rutinaria en los análisis de sangre, dentro del

a) Hemograma b) Hemoglobina c) Antitrombina

6. ¿Qué pruebas se le pedirán al bebe para descartar un diagnóstico de Alergia (asma)?

a) pruebas de función pulmonar b) pruebas de alergia c) todas las anteriores

7. ¿Qué otras células responsables de la inflamación crónica que provocan la hiperreactividad bronquial?

a) macrófagos, b) eosinófilos

c) todos ellos aparecen activados en el asma, incluso en pacientes asintomáticos

8. Si teñimos con el método Wright la muestra, ¿de qué color aparecerán los eosinofilos?

a) Se tiñen de color de rosa intenso con las tinciones de Giemsa y de Wright. b) Se tiñen de color de rosa claro con las tinciones de Giemsa y de Wright. c) Se tiñen de color de rojo con las tinciones de Giemsa y de Wright.

9. Las enfermedades relacionadas con el Asma del lactante son de origen:

a) origen cutáneo b) origen asintomático

c) origen viral

10. Si el conteo de eosinófilos, son anormales, decimos que puede haber:

a) Síndrome hipereosinofílico agudo (afección parecida a la leucemia, poco común pero algunas veces mortal) b) Una reacción alérgica y también revelar su severidad c) Todas las anteriores

EL asma en el laboratorio

87

En los estudios realizados al paciente hemos obtenido:

Hemograma normal, pero con aumento de los eosinofilos (eosinofilia).

Bioquímica normal

Gasometría venosa o capilar (habitualmente no se hace arterial por dificultades Técnicas): Crisis moderada: PCO2: > 50-55 mmHg; Determinación de CO2 en aire espirado.

Respiración y/o pulso acelerados (más de 25 respiraciones y 120 pulsaciones por minuto).

11. Según estos datos, pensaremos que el diagnostico de nuestro paciente es:

Asma Bronquiolitis Todas las anteriores

12. Si sospechamos que nuestro paciente tiene Asma (alérgico), ¿cuál de las siguientes pruebas realizaremos?

a) Una espirometría b) Un estudio de hierro c) Un estudio de coagulación

13. Cuando la historia clínica no es convincente de obstrucción bronquial, el diagnóstico de asma se puede objetivar con los test de provocación bronquial.

a) Test de ejercicio. b) Test de metacolina. c) a y b son correctas.

14. ¿Los tipos de asma son?

a) Extrínseco b) Intrauterino c) a y b son correctas

15. ¿Qué relación tiene la atopia con la alergia?

a) La atopia es una predisposición hereditaria. La alergia se asocia con más frecuencia a una base atópica, b) La atopia es una predisposición de base atópica. La alergia se asocia con más frecuencia hereditaria c) La atopia es una predisposición hereditaria y de base atopica. La alergia se asocia con más frecuencia a una base atópica.

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9.2 Respuestas supuesto práctico

1.a) Sangre (pág. 43)

Si sospechamos que el bebe tiene dificulta para respirar, solo debemos recoger una muestra de sangre (arterial, o venosa), el resto de muestras no son necesarias para el diagnostico de la enfermedad.

2.c) Comprobar la petición medica (pág.43)

Lo primero es comprobar que la petición medica esta cumplimentada por el médico, luego será registrada y enviada a la sección correspondiente y se empezara el estudio pedido por el médico.

3. a) Hemograma (pág.22)

Exámenes de sangre, incluyendo conteo de eosinófilos (un tipo de glóbulo blanco).También realizaríamos una Gasometría arterial.

4. b) Eosinofilos (pág.52)

Eosinófilos: presentes en la sangre de 50 a 500 células por mm³ (1-4% de los leucocitos) Aumentan en enfermedades producidas por parásitos, en las alergias y en el asma.

5.a) Hemograma (pág.43-52)

Los eosinofilos son leucocitos (glóbulos blancos, encargados de la defensa inmunitaria) que se diferencian visualmente del resto en que si se colorean antes de observarlos al microscopio tienen apetencia por un colorante ácido llamado eosina que les da un color rojo-carmín, se suelen cuantificar de forma rutinaria en los análisis de sangre, dentro del hemograma, que es una cuantificación morfológica de la celularidad sanguínea.

6. c) todas las anteriores( pág.31 )

Para el diagnóstico del asma, serian importante las pruebas de función pulmonar, pruebas de alergia, exámenes de sangre, radiografía del pecho y senos paranasales

7. c) todos ellos aparecen activados en el asma, incluso en pacientes asintomáticos

(pág.25)

Células responsables de la inflamación crónica que provocan la hiperreactividad bronquial son los macrófagos, los eosinófilos y linfocitos T, todos ellos aparecen activados en el asma, incluso en pacientes asintomáticos

EL asma en el laboratorio

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8. a) Se tiñen de color de rosa intenso con las tinciones de Giemsa y de Wright (pág.52)

Los Eosinófilos tienen actividad fagocítica, es decir que "se comen" a los agentes extraños al organismo. Sus gránulos tienen sustancias para degradar aquello que incorporan. Tienen un papel muy importante en las parasitosis donde con sus gránulos degradan las larvas para que puedan ser ingeridas por los neutrófilos y los macrófagos. El eosinófilo modula y regula las reacciones alérgicas.

Los eosinófilos poseen gránulos específicos y gránulos azurofílicos. Los gránulos específicos son oblongados, y se tiñen de color de rosa intenso con las tinciones de Giemsa y de Wright. Las micrografías electrónicas ponen de manifiesto que los gránulos específicos tiene un centro electrón denso de tipo cristalino, llamado internum, rodeado por un externum menos electrón denso.

9- c) origen viral (pag.28)

10.c) Todas las anteriores (pág.52)

Este examen puede ayudar a diagnosticar: Síndrome hipereosinofílico agudo (afección parecida a la leucemia, poco común pero algunas veces mortal).Una reacción alérgica y también revelar su severidad. Etapas iniciales de la enfermedad de Cushing, Infección por un parásito.

11.c) Todas las anteriores (pág.51-52)

El asma es la enfermedad crónica más frecuente en la infancia y un motivo de consulta común en los Servicios de Urgencias de Pediatría. Es una enfermedad crónica de las vías aéreas, caracterizada por la obstrucción inflamatoria bronquial reversible e hiperreactividad frente a determinados estímulos (el más frecuente en los niños son las infecciones) que condiciona la aparición de episodios recidivantes de tos, sibilancias y disnea. Sin embargo, no todo paciente con dificultad respiratoria aguda tiene asma, sino que debemos plantearnos el diagnóstico diferencial con:

-Bronquiolitis: primer episodio de sibilancias en niños menores de 2 años

-Laringitis: tos, afonía, estridor inspiratorio de inicio brusco

-Neumonía

-Cuerpo extraño bronquial: inicio brusco e historia de atragantamiento previo

-Otros: episodios de hiperventilación (crisis ansiedad, cetoacidosis diabética…), traqueomalacia, fibrosis quística, anillos vasculares etc.

La gasometría arterial constituye una de las herramientas más útiles en la práctica clínica para delimitar la severidad de la insuficiencia respiratoria en los enfermos con asma. Desde un punto de vista práctico podemos considerar la gasometría como un índice (contador) de la reserva de la musculatura respiratoria: la hipocapnia con alcalosis respiratoria sugieren que la fuerza muscular respiratoria es adecuada para la carga que soportan.

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12.a) Un espirometría (pág.73-74)

Consta de una serie de pruebas respiratorias sencillas, bajo circunstancias controladas, que miden la magnitud absoluta de las capacidades pulmonares y los volúmenes pulmonares y la rapidez con que éstos pueden ser movilizados (flujos aéreos). Los resultados se representan en forma numérica fundamentados en cálculos sencillos y en forma de impresión gráfica. Existen dos tipos fundamentales de espirometría: simple y forzada.

13. c) a y b son correctas( pág.75-76)

El diagnóstico de asma se puede objetivar con los test de provocación bronquial. a) Test de ejercicio. El 70% de los niños asmáticos presentan una caída mayor de 15% del valor FEM basal con la carrera libre durante 6 minutos.

b) Test de metacolina. Permite objetivar cuantitativamente el grado de hiperreactividad bronquial y evaluar su evolución en el tiempo con tratamiento antiinflamatorio.

c) Evaluación de la alergia.

* Test cutáneo a aeroalérgenos: de gran utilidad en la demostración de la atopía, son positivos en el 80% de los niños asmáticos a partir de los 4 años de edad, ya que requieren de una madurez inmunológica para hacerse positivo. . Demuestran sensibilidad inmediata (Tipo I), mediada por IgE a través del método del PRICK test.

14.a) a) Extrínseco (pág. 27)

El Asma extrínseco incluye a aquellos pacientes en los que puede demostrarse una reacción antígeno-anticuerpo como desencadenante del proceso. En general esta reacción antígeno-anticuerpo está mediada por IgE (asma extrínseco atópico), mientras que en otros casos generalmente de origen ocupacional no puede demostrarse una reacción de hipersensibilidad tipo I de Gell y Coombs (asma extrínseco no atópico.

15. a) La atopia es una predisposición hereditaria. La alergia se asocia con más frecuencia

a una base atópica. (pág.15)

Son conceptos que a veces se emplean como sinónimos, aunque no son lo mismo. La atopia es una predisposición hereditaria por la que es más frecuente padecer procesos alérgicos, en particular enfermedades alérgicas respiratorias y alergia alimentaria. Típicamente cursa con lesiones cutáneas, tipo eccema, de diversa intensidad (entidad denominada dermatitis atópica o eccema constitucional). Su origen parece multifactorial y se discute el grado de implicación de sensibilizaciones alérgicas concretas (ambientales o alimentarias) en su desarrollo. La alergia se asocia con más frecuencia a una base atópica, pero se puede estar sensibilizado a cualquier agente sin antecedentes personales o familiares sugerentes de atopia. Incluso en el caso concreto de la alergia a fármacos no se ha demostrado ninguna asociación.

UNIDAD DIDÁCTICA X GLOSARIO

EL asma en el laboratorio

93

Glosario2

El Glosario se ofrece, como un complemento a los Temas, con definiciones claras y accesibles de los términos empleados en los mismos, las definiciones que aparecen en el Glosario han sido recopiladas de diversas fuentes.

o ATSDR: ATSDR Glosario de Términos de la ATSDR

o AEMA: Glosario medioambiental multilingüe de la EEA

o American College of Allergy, Asthma & Immunology Allergy-Immunology Glossary, traducido por GreenFacts

o ennstatehershey.adam.com

Acaro: Artrópodo del orden Acarina de aproximadamente 0,3 mm de tamaño productor de

problemas alérgicos, especialmente en zonas de costa.

Adenopatía: Aumento del tamaño de los ganglios linfáticos.

Aeroalérgeno: Alérgeno con capacidad de ser transportado por el aire. Sinónimo: Neumoalérgeno.

Aerógeno: Que se transporta a través del aire ambiental.

AINEs: Familia de medicamentos del tipo de Antiinflamatorios no Esteroideos entre los que se encuentran la Aspirina y derivados

Alérgeno: Sustancia capaz de producir una reacción alérgica

Alergia: Estado de hipersensibilidad adquirida por exposición a un alérgeno particular.

Alergología: Especialidad médica dedicada al estudio de la Alergia.

Alergólogo: Médico especialista en Alergología. Ver. Alergología

Allergy: term definition of allergy

2 Definiciones obtenidas de:

• American College of Asthma, Allergy, and Immunology: http://www.acaai.org • Familydoctor.org: http://www.familydoctor.org • Allergy Asthma Information Association: http://aaia.ca/ • Calgary Allergy Network: http://www.calgaryallergy.ca/

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children. J Investig Allergol Clin Immunol.2007;17:249-256. • Garcia-Marcos L, Lucas Moreno JM, Garde JG. Sublingual specific immunotherapy: state of the art. Inflamm Allergy Drug

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10-year follow-up on the PAT study.Allergy. 2007; 62:943-948.

A

Técnico Superior Sanitario de Laboratorio de Diagnóstico Clínico

94

Alternaria: Hongo aerógeno con capacidad de producir reacciones alérgicas

Anafilaxia: Tipo de reacción alérgica sistémica aguda (en todo el cuerpo).

Angioedema: Sinónimo: Edema angioneurótico. Proceso inflamatorio de la dermis profunda que se manifiesta en forma de hinchazón de piel o mucosas, generalmente acompañado de urticaria

Anticuerpos: Proteínas producidas por el sistema inmune en respuesta a la presencia de un antígeno. Dichas proteínas defienden al organismo de las sustancias identificadas por el sistema inmune como potencialmente dañinas

Antigenicidad: Propiedad de un antígeno que le confiere la capacidad para reaccionar específicamente con anticuerpos y linfocitos específicos, cuya producción fue inducida por dicha sustancia. Ver Anticuerpos y Linfocito

Antígeno: Sustancia que induce la formación de anticuerpos, debido a que el sistema inmune la reconoce como una amenaza. Esta sustancia puede ser extraña, proveniente del ambiente, o formada dentro del cuerpo

Asma bronquial: Proceso inflamatorio bronquial de origen diverso.

Atopia: Predisposición hereditaria a desarrollar una respuesta alérgica.

Atópico: es una enfermedad alérgica inflamatoria de la piel. como eczema atópico o constitucional con brotes y periodos silentes.

Asma: enfermedad crónica que inflama los pulmones y se caracteriza por problemas respiratorios recurrentes que suelen desencadenarse debido a alérgenos.

Asma extrínseca: asma desencadenada por una reacción alérgica, generalmente debido a algo que se inhaló.

Asma intrínseca: asma que no tiene causa externa aparente.

Alervaccine-Microesfera: Alérgeno englobado en vesículas obtenidas con la técnica de Inyección Coaxial Turbulenta que simplifica y garantiza la homogeneidad de las mismas y utilizado en inmunoterapia.

Basófilo: Leucocito granuloso que ejerce un papel importante en la respuesta alérgica,

principalmente de tipo tardío

Beta-lactámicos: Familia de medicamentos de tipo antibiótico entre los que se encuentran las Penicilinas y derivados.

Broncodilatadores: grupo de medicamentos que ensanchan las vías respiratorias en los pulmones.

B

EL asma en el laboratorio

95

Cámaras espaciadoras: Dispositivos de formas y volúmenes variables con los cuales se

administra la medicación inhalada a través de aerosoles presurizados.

Célula cebada :Ver Mastocito

Célula plasmática: Célula derivada de un Linfocito B con capacidad para producir anticuerpos. Ver Linfocito y Anticuerpo.

Celiaquía: Otra denominación para la intolerancia al gluten. Intolerancia permanente a la ingestión de alimentos que contienen gluten.

Complemento: Parte del Sistema Inmune compuesto por una serie compleja de proteínas con capacidad enzimática presentes en el suero capaces de producir la lisis cuando el antígeno es una célula intacta.

Conjuntivitis: Inflamación de la conjuntiva ocular de origen diverso.

Corticoesteroides: grupo de medicamentos antiinflamatorios similares a la hormona corticoesteroide natural producida por las glándulas adrenales.

Cellular Allergen Stimulation Test (CAST). Cuantifica la liberación de los sulfidoleucotrienos (LTC4 y sus metabolitos LTD4 y LTE4) a partir de los leucocitos sanguíneos tras su incubación con los fármacos. Según la opinión de la European Network for Drug Allergy (ENDA), hacen falta más estudios que validen la utilidad del método.

Cytometric Basophil Activation Test (FLOW-CAST o BASOTEST). Se basa en la evaluación citométrica de CD6en basófilos sanguíneos tras la incubación de éstos con fármacos. Son necesarios más estudios que validen la utilidad del método.

Dermatitis: Sinónimo: Eccema. Proceso inflamatorio de la piel

que se manifiesta con una evolución típica desde fases iniciales húmedas hasta fases finales secas. Según el tipo de dermatitis, afecta a diferentes zonas corporales.

Dermografismo Tipo de Urticaria física caracterizada por la aparición de habones lineales tras frotar la piel con cualquier instrumento romo.

Disnea Dificultad respiratoria, sensación de ahogo.

Dermatitis - inflamación de la piel que por lo general provoca enrojecimiento y dolor y, en ciertas ocasiones, comezón.

C

D

Técnico Superior Sanitario de Laboratorio de Diagnóstico Clínico

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Dermatitis atópica-Atopia: La dermatitis atópica es la primera manifestación de la llamada atopia. Esta es una predisposición a presentar unas reacciones exageradas frente a sustancias y estímulos ambientales. Se ha postulado que existe una marcha atópica, que empezaría por la dermatitis, continuando por la rinitis, conjuntivitis, intolerancia alimentaria y desembocando en el asma.

Dermatitis por contacto - erupción o inflamación de la piel causada por el contacto con diversas sustancias.

Descongestionantes: clase de medicamentos para la congestión nasal. Pueden estar disponibles en dosis orales, aerosoles nasales o gotas para los ojos(conjuntivitis) .

Eccema: Ver Dermatitis.

Edema angioneurótico: Ver Angioedema.

Emoliente: Tratamiento hidratante.

Eosinofilia: Incremento en el número de Eosinófilos. Circunstancia frecuente de encontrar en los procesos alérgicos, si bien no es específica de ellos.

Eosinófilo: Leucocito granuloso que se tiñe fácilmente con eosina y que ejerce un papel fundamental en la respuesta alérgica, fundamentalmente de tipo tardío.

Epitopo: Lugar del antígeno con el cual reaccionan los Linfocitos T y B.

Eritema: Lesión básica dermatológica en forma de enrojecimiento cutáneo.

Espirometría Test diagnóstico que mide volúmenes pulmonares.

Etiología: Origen, causa, razón o motivo.

Exantema: Reacción cutánea de origen y tipos diversos.

Extrínseco: De origen o causa externa.

Enfermedad auto-inmunológica - grupo de enfermedades en las cuales el sistema inmunológico del cuerpo se defiende contra sí mismo.

Enfermedad celiaca (también llamada esprúe celiaco o enteropatía sensible por gluten.) - sensibilidad al gluten, una proteína del trigo. Los individuos con esta enfermedad deben evitar los cereales que contengan gluten, entre los que se incluyen todas las formas de trigo, avenas, cebada y centeno.

Enteropatía sensible por gluten (también llamada esprúe celiaco o enfermedad celiaca.) - sensibilidad al gluten, una proteína del trigo. Las personas con esta enfermedad deben evitar los cereales que contienen gluten, entre los que se incluyen todas las formas de trigo, avenas, cebada y centeno.

E

EL asma en el laboratorio

97

Epinefrina (adrenalina) - una de las dos sustancias químicas (la otra es la norepinefrina) liberada por la glándula adrenal que aumenta el ritmo y la intensidad de los latidos cardíacos. Dilata las vías respiratorias para mejorar la respiración y estrecha los vasos sanguíneos de la piel y el intestino y de este modo, aumenta el flujo de sangre que llega a los músculos y les permite hacer frente a las demandas del ejercicio. Es una droga que también puede suministrarse en una emergencia anafiláctica.

Examen ELISA (análisis inmunosorbente ligado a enzima) - examen de laboratorio utilizado para detectar ciertos anticuerpos; a veces, se utiliza para diagnosticar alergias y VIH.

Exámenes de funcionamiento pulmonar - exámenes de diagnóstico que ayudan a medir la capacidad de los pulmones para realizar apropiadamente el intercambio de oxígeno y de dióxido de carbono. Generalmente, estos exámenes se se realizan con aparatos especiales en los que el niño debe respirar.

Fiebre del Heno: Estado alérgico que se presenta anualmente al aproximarse la primavera o el verano y que se caracteriza por conjuntivitis y catarro nasal acompañado de síntomas asmáticos producidos por la inhalación del polen de ciertas plantas. Es sinónimo de polinosis.

Gramíneas: Familia botánica de plantas, universalmente distribuida, con gran capacidad de producir polen y que constituyen la principal causa de polinosis a nivel mundial. Ver Polinosis.

Gliadina: Es el componente del gluten que provoca los síntomas celiacos.

Gluten: Es la parte de la harina que no es soluble en agua.

Habón: Lesión dérmica mácula-papulosa, generalmente pruriginosa y por definición de

carácter fugaz. Sinónimo: Roncha

Hapteno: Sustancia incapaz de producir una reacción alérgica por sí sola, fundamentalmente debido a su pequeño tamaño y que para ello, debe unirse a otra sustancia, generalmente proteínas plasmáticas.

G

H

F

Técnico Superior Sanitario de Laboratorio de Diagnóstico Clínico

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Heparina: Una sustancia química liberada por los basófilos y mastocitos que hace que los tejidos cercanos a hincharse o inflamarse

Himenópteros: Insectos alados entre los que se encuentran las avispas y abejas

Histamina: Sustancia presente en todos los tejidos corporales, en el interior de mastocitos y basófilos. Mediador fundamental en la respuesta inmediata alérgica. Se libera cuando se produce un contacto específico entre un alérgeno y su inmunoglobulina E (como una llave con su cerradura), que se encuentra en la superficie de los mastocitos y basófilos.

Hiperreactividad: la hipersensibilidad de las vías respiratorias, a menudo provocada por el frio, las esencias fuertes y el humo del tabaco. Afecta con frecuencia a los pacientes con asma.

Hipersensibilidad: sensibilidad aumentada a sustancias normalmente inofensivas y que desencadena una respuesta exagerada del sistema inmunitario. La reacción de hipersensibilidad es independiente de los mecanismos inmunológicos implicados.

Idiopático: De Origen desconocido

Idiosincrasia: Reacción adversa no previsible, diferente al efecto farmacológico, sin implicar mecanismo inmunológico, habitualmente determinada por variantes de tipo genético con implicación metabólica-enzimática

Inmunogenicidad: Capacidad de una sustancia para producir una respuesta inmune específica

I

EL asma en el laboratorio

99

Inmunidad: Reacción frente a materiales biológicos "extraños" (antígenos) que dan lugar a una serie de mecanismos específicos por los cuales surge resistencia frente a dichos materiales.

Inmunoglobulina: Proteína con actividad anticuerpo conocida, sintetizada por los linfocitos y que por reconocimiento y combinación con el antígeno, desencadena la serie de acontecimientos secundarios a la unión antígeno-Anticuerpo

Inmunoglobulina E Tipo de Inmunoglobulina implicada, fundamentalmente, en los problemas alérgicos y en la defensa frente a infecciones parasitarias. Ver Inmunoglobulina

Inmunoterapia: En Alergología, dícese del tratamiento con Vacunas antialérgicas.

Intolerancia: Según la última clasificación de la Academia Europea de Alergia e Inmunología Clínica, se entiende como tal a toda reacción adversa no tóxica, de tipo inmunológico aunque no IgE mediado

Intrínseco: El asma intrínseco o no alérgico es aquella forma de asma en que no se encuentran alérgenos como desencadenantes del mismo. De origen o causa interna.

Inmunoglobulina G: La más importante durante la respuesta inmune secundaria (contacto previo con el antígeno) y la más abundante en plasma y líquidos extracelulares.

In vivo: Expresión utilizada para denominar a los estudios que se realizan evaluando la respuesta de un ser vivo, bien animal, un humano sano o un paciente enfermo.

In vitro: Expresión utilizada para denominar a los estudios que se hacen en el laboratorio partiendo de muestras, no sobre seres vivos.

Inmunocap: Tecnología de prueba para la medición de los análisis específicos de alergia en suero o plasma.

Inmunoterapia/Hiposensibilizacion/Vacuna contra la alergia: el alérgeno que provoca la reacción alérgica se inyecta en dosis aumentadas durante un periodo más corto. De este modo , la persona desarrolla tolerancia a ese alérgeno especifico, por tanto experimenta síntomas más leves.

Intradermorreacción. Se utiliza una jeringa desechable de 1 ml con aguja de bisel corto (1×0,4 mm, nº. 7G), que se llena con 0,1 a 0, ml de la solución por probar. Se expulsa completamente el aire de la jeringa y la aguja. La inyección se realiza en la superficie volar del antebrazo, la jeringa en un ángulo de 45º con la superficie cutánea y el bisel hacia abajo, de cara a la piel. El bisel debe penetrar completamente entre las capas de la piel y dejar afuera el resto de la aguja. A continuación, se presiona suavemente el émbolo con lo que, al introducirse el líquido, se formará una pápula que deberá alcanzar unos mm de diámetro.

En el caso de que no se forme pápula o penetre una burbuja de aire, deberá retirarse la aguja e intentar la prueba en otro sitio. El volumen inyectado debe ser de 0,0a 0,05 ml. La lectura se realiza alrededor de 15 minutos después de la inyección. Se compara el tamaño de la pápula producida por el alérgeno con la de los controles de positividad y negatividad.

ImmunoCAP Triptasa. Es un test in vitro que mide el nivel de la triptasa liberada por los mastocitos en el suero humano. Se han encontrado niveles elevados de triptasa en sangre tras anafilaxia por medicamentos.

Técnico Superior Sanitario de Laboratorio de Diagnóstico Clínico

100

Leucocito: Célula o corpúsculo blanco de la sangre que forma parte del sistema defensivo.

Existen diferentes subtipos: Neutrófilos, Basófilos y Eosinófilos.

Leucocitosis: Incremento en el número de leucocitos en sangre. Circunstancia habitualmente concurrente con los procesos infecciosos.

Leucotrienos: Mediadores inflamatorios derivados del metabolismo del ácido araquidónico, importantes, fundamentalmente en el asma y la rinitis.

Linfocito: Leucocito mononuclear que, según el subtipo específico, participa en la inmunidad tanto humoral como célula.

Linfocito B: Clase de Linfocito especialmente implicado en la Inmunidad de tipo humoral.

Linfocito T: Clase de Linfocito especialmente implicado en la Inmunidad de tipo celular. Existen diferentes sublases entre los que destacan los Helper y los Supresores/Citotóxicos.

Liquenificación: Reacción cutánea en forma de placas mal delimitadas, engrosadas, recorridas por surcos que delimitan áreas romboidales brillantes. Generalmente constituye estados evolucionados de dermatitis.

Macrófago: Célula del sistema defensivo con capacidad fagocitaria y presentadora de antígenos. Según el órgano donde se encuentre recibe diversos nombres.

Mastocito: Célula tisular que ejerce un papel primordial en la respuesta alérgica, fundamentalmente en su fase inmediata. Sinónimo: Célula cebada.

Mastocitosis: Acumulación, local o general, de mastocitos en los tejidos. Cuando se disemina por la piel se denomina Urticaria pigmentosa.

Medicamentos antihistamínicos: grupo de medicamentos que bloquean los efectos de la histamina, una sustancia química liberada en los fluidos corporales durante una reacción alérgica.

Medidos de flujo máximo (PFM): dispositivo utilizado para medir la velocidad a la que una persona puede expulsar aire de los pulmones. Durante el ataque de asma u otra enfermedad respiratoria, las vías aéreas principales de los pulmones empiezan lentamente a estrecharse,

M

L

EL asma en el laboratorio

101

disminuyendo la cantidad de aire que deja los pulmones y puede medirse mediante un PFM. Esta indicado para poder evaluar lo bien o mal que se está controlando la enfermedad.

Mucosa: Membrana o túnica que recubre los órganos internos.

Neumoalérgeno: Ver Aeroalérgeno.

Pápula: Lesión básica dermatológica que consiste en un abultamiento cutáneo superficial.

Pitiriasis alba: Placas cutáneas hipo pigmentadas descamativas, debidas a una pérdida parcial pos inflamatoria de la pigmentación. Suele ser transitoria y aunque es frecuente encontrarla en pacientes con Dermatitis atópica, no es específica de ella.

Polinosis: Dícese de la reacción alérgica causada por sensibilización a pólenes.

Prurigo: Reacción cutánea constituida por pequeñas pápulas con vesícula en su cúspide, generalmente en forma lineal y de predominio en miembros. Puede darse de forma aguda, subaguda o crónica. En el primero de los casos también se conoce como urticaria papulosa.

Prurito: Sinónimo: Picor. Hormigueo peculiar o irritación incómoda en la piel que provoca un deseo de rascar el área afectada.

Prueba del pinchazo de la Piel: Una prueba en la que se utiliza una aguja para rascarse la Piel con una pequeña cantidad de alérgeno. El resultado por lo general se verá dentro de los 15 a 20 minutos.

Prueba de provocación: una prueba para confirmar la alergia a la sustancia específica. Un médico le administrará cantidades pequeñas pero crecientes de un alérgeno sospechoso hasta que una respuesta alérgica se nota. Debido al riesgo de anafilaxia, esto sólo debe llevarse a cabo bajo un ambiente controlado.

Puntura. Se coloca una gota del fármaco sobre la piel y, acto seguido, se pasa una lanceta, verticalmente en relación con la superficie cutánea, a través de la gota del fármaco hasta el interior de las capas superficiales de la piel, sin llegar a sangrar, se retira al cabo de un segundo (Normas de la EAACI). Para evitar el sangrado, se utilizan lancetas con punta de 1 mm (lancetas de Morrow-Brown, Østerballe, Dome-Hollister Stier o similares). La lectura se realiza entre 10 y 15 minutos después de su realización. Habitualmente, se miden (directamente o tras transferencia a papel mediante cinta adhesiva) el diámetro mayor y su perpendicular por el punto medio y se calcula la semisuma de ambos.

P

N

Técnico Superior Sanitario de Laboratorio de Diagnóstico Clínico

102

Para mayor precisión, puede marcarse el contorno de la pápula con un rotulador de punta fina y transferirlo a papel mediante cinta adhesiva (Scotch Magic, M). Según la normativa de la EAACI, se considera una prueba positiva si este valor es igual o superior a mm.

Rinomanometría: Test diagnóstico que mide flujos y resistencias nasales

Reagina: Anticuerpo del tipo de la IgE que desencadena una respuesta alérgica.

Radioallergosorbant Test (RAST): Un Análisis de sangre que mide la Cantidad de Anticuerpos IgE alérgeno específico contra la ONU.

Senos para-nasales: Cavidades aéreas revestidas de mucosa, localizadas en los huesos craneales que se comunican con la cavidad nasal. Tienen por función el calentamiento y humidificación del aire respirable antes de su paso a bronquios.

Sensibilización Exposición inicial de un individuo a un antígeno específico, de la cual se origina, ante sucesivos contactos con el mismo antígeno, una reacción inmune.

Sinusitis: Inflamación de la mucosa de los senos para nasales. Ver Senos para nasales

Súper-antígeno: Sustancia capaz de activar los Linfocitos T de manera inespecífica.

Sibilancias: Pitidos o silbidos en el pecho

Sinusitis: Inflamación de las mucosas de los senos paranasales. Ver Senos paranasales

SAO: síndrome de alergia Oral. Los síntomas son irritación e inflamación leve de los labios, lengua, garganta. El SAO se desencadena inmediatamente después de la ingestión de frutas de hueso debido a la reactividad cruzada con ciertos pólenes.

Test de Provocación: Pruebas de provocación en mucosas (nasal, conjuntival y bronquial)

con alérgenos. Consiste en la aplicación de extractos alergénicos directamente en las membranas mucosas.

S

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T

EL asma en el laboratorio

103

Test de Degranulación de Basófilos (TDB). Cuando se incuban basófilos de pacientes alérgicos, con el alérgeno específico al que están sensibilizados, se produce una degranulación, y puede cuantificarse el porcentaje de basófilos degranulados. Actualmente, no es una técnica en uso.

Test de Liberación de Histamina (TLH). Cuando se incuban basófilos de pacientes alérgicos, con el alérgeno específico al que están sensibilizados, se produce una degranulación y, por tanto, una liberación de mediadores, entre ellos la histamina, que puede ser medida por métodos fluorimétricos o de radioinmunoanálisis. El elevado coste del equipo, unido a que, en la mayoría de las ocasiones, los fármacos actúan como haptenos hace que no se utilice en la práctica clínica diaria.

Test de Transformación Linfoblástica (TTL). Se basa en la proliferación de linfocitos tras su incubación con los fármacos supuestamente responsables de la reacción adversa.

Urticaria: Reacción inflamatorio de la dermis superficial que se caracteriza por la aparición de

habones. Ver habón.

Urticaria papulosa: Ver prurigo.

Xerosis: piel seca.

Zona retronasal: se trata de la rinofaringe, que se encuentra sobre el velo del paladar y

después de las fosas nasales.

U

X

Z

UNIDAD DIDÁCTICA XI BIBLIOGRAFÍA

EL asma en el laboratorio

107

11.1 Bibliografía

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Técnico Superior Sanitario de Laboratorio de Diagnóstico Clínico

108

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3. http://www.seicap.es/que-es-la-alergia-imp.asp.

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7. www.cun.es/la-clinica/servicios-medicos/alergologia/pruebas-diagnosticas/test-activacion-basofilos

8. www.cun.es/la-clinica/servicios-medicos/alergologia/pruebas-diagnosticas/microarrays

9. www.inmunotek.com/?seccion=general&sub=alergia&csb=tipos-alergia

UNIDAD DIDÁCTICA XII CUESTIONARIO

EL asma en el laboratorio

111

Cuestionario

1- Define marcha atópica o marcha alérgica.

a) cuando las personas suelen empezar a desarrollar alergia desde muy temprana edad y una alergia detrás de otra

b) es una enfermedad vírica c) se puede definir como una reacción ante una medicación

2- Síntomas del asma son:

a) tos, sibilancias b) vómitos y diarreas c) dolor de estómago

3- ¿A que llamam os Alérgeno?

a) a una molécula b) a sustancias capaces de provocar respuestas alérgicas. c) a una prueba de bioquímica

4-¿Qué cantidad de componentes contiene generalmente un extracto alergénico de pólenes de Gramíneas?

a) entre 100 y 200 componentes b) entre 5 y 7 componentes c) entre 30 y 40 componentes

5- Dentro de los alérgenos de animales la fuente del alérgeno es:

a) sangre b) piel, saliva, suero u orina c) semen

6- Los procedimientos de trabajo que garantizan una calidad al profesional, se encuentran dentro del apartado:

a) Bioseguridad b) Petición del solicitante c) Petición de las pruebas a realizar

7. El asma es una enfermedad:

a) crónica del sistema respiratorio b) crónica del sistema circulatorio c) crónica del sistema muscular

Técnico Superior Sanitario de Laboratorio de Diagnóstico Clínico

112

8. El asma provoca síntomas tales como:

a) respiración sibilante b) falta de aire (polipnea y taquipnea) c) todas son correctas

9. Las causas que provocan el asma bronquial y motivan la respuesta de los mecanismos principalmente inmunológicos se clasifican en:

a) Extrínsecas b) Intrínsecas o idiopática c) Todas son verdad

10. ¿Cuál es la causa del asma?

a) El asma tiene una base genética b) El asma tiene una base piraminica c) El asma tiene una base helicoidal

11. El asma bronquial es considerada como un síndrome inflamatorio crónico de las vías aéreas, la mayoría de las veces de origen alérgico, que incluye la participación de numerosas células, entre ellas:

a) Mastocitos, b) Basófilos y linfocitos T c) Todas son verdaderas

12. Los Cromonas están indicados por vía inhalatoria en

a) el asma leve b) el asma fase aguda c) en la crisis asma

13. Se conoce como inmunoterapia a:

a) La inmunoterapia, o las comúnmente llamadas vacunas de alergia b) La inmunoterapia, o las comúnmente llamadas vacunas de alegría c) La inmunoterapia, o las comúnmente llamadas vacunas de ancianos

14. La histamina se encuentra en:

a) La histamina es una sustancia que se encuentra en el interior de unas células denominadas mastocitos b) La histamina es una sustancia que se encuentra en el interior de unas células denominadas cayados c) La histamina es una sustancia que se encuentra en el interior de unas células denominadas plaquetas

15. El estudio del Esputo se puede clasificar en:

a) macroscópico b) bioquimico c) todas son correctas.

EL asma en el laboratorio

113

16. ¿Cuántos tipos antiinflamatorios hay?

a) corticoides inhalados. b) inhibidores leucotrienos c) a y b son correctas

17. La determinación de la IgE específicas son:

a) La determinación de estas IgE específicas son la base de la mayoría de las pruebas de laboratorio para la alergia b) La determinación de estas IgE específicas son la base de la mayoría de las pruebas hepáticas c) La determinación de estas IgE específicas son la base de la mayoría de las pruebas cardiacas

18. ¿Los bronquios en el asma están?

a) Inflamados b) Humedecidos c) Amarillentos

19. Qué significa atópico?

a) Es la característica de algunas personas de responder exageradamente a los agresiones del medio ambiente produciendo altos niveles de anticuerpos IgE b) Es la característica de algunas personas de no responder exagerada mente a las agresiones del medio ambiente produciendo altos niveles de anticuerpos IgE c) Es la característica de algunas animales de responder exagerada mente a las agresiones del medio ambiente produciendo altos niveles de anticuerpos IgE

20. ¿La espirometría es?

a) La espirometría es un estudio indoloro del volumen y ritmo del flujo de aire dentro de los pulmones b) La espirometría es un estudio indoloro del volumen y ritmo del flujo de aire dentro del corazón c) La espirometría es un estudio indoloro del volumen y ritmo del flujo de aire dentro de los riñones

21 ¿Cómo podríamos definir las técnicas in vivo?

a) aquellas técnicas diagnósticas que se realizan delante del paciente. b) aquellas técnicas diagnósticas que se realizan en el propio paciente. c) aquellas técnicas diagnósticas que se realizan al aire libre.

22. Podríamos clasificar los test cutáneos según el tipo de sensibilización en:

a) Sensibilización tardía. b) Son ciertas a y c c) Sensibilización de tipo inmediato.

Técnico Superior Sanitario de Laboratorio de Diagnóstico Clínico

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23. La exploración funcional respiratoria nos sirve para.... Una de estas respuestas no es cierta.

a) Confirmar el diagnóstico de asma. b) Cuantificar la gravedad de la enfermedad. c) Broncodilatar al paciente.

24. El test Elecsys IgE es un inmunoensayo de:

a) De agua o de campana b) De magnitudes. c) De electroquimioluminiscencia

25 ¿La inmunoglobulina E es un?

a) Anticuerpo b) Una sustancia c) Todas son correctas

26. Se llama alérgeno a

a) sustancia causante de la alergia b) sustancia causante de la reacción de hipersensibilidad c) a y b son correctas

27. Las reacciones alérgicas resultan de:

a) la interacción entre la IgE fijada a células (mastocitos y basófilos) b) un alérgeno específico c) a y b son verdad

28. La reacción Anticuerpo-Alérgeno es responsable:

a) de los síntomas b) del color c) del movimiento

29. Entre las pruebas in vitro se encuentran

a) proteína catiónica de eosinofilos b) phadiatop c) todas son correctas

30. ImmunoCAP IgE Total es una prueba:

a) cuantitativa del total de anticuerpos que circulan en una muestra sanguínea. b) cuantitativa del total de anticuerpos que sobresale de una muestra sanguínea c) cuantitativa del total de anticuerpos que redondean una muestra sanguínea