DEFINICIONES BÁSICAS

BACTERIOSTÁTICOBACTERIOSTÁTICO

BACTERICIDA

BACTERIOLÍTICO

(a) Bacteriostáticos…Inhiben el crecimiento del microorganismo

(b) Bactericidas…Matan a los microorganismos sin necesidad de destruirlos o lisarlos

(c) Bacteriolíticos…Matan a los microorganismos por lisis

ANTIMICROBIANOSANTIMICROBIANOS

ANTISÉPTICOANTISÉPTICO

AGENTE QUÍMICO UTILIZADO SOBRE TEJIDO

VIVO

DESINFECTANTEDESINFECTANTE

AGENTE QUÍMICO UTILIZADO EN LA DESINFECCIÓN

NORMALMENTE SOBRE OBJETOS INANIMADOS

Agente que controla y reduce la presencia de microorganismos potencialmente patógenos sobre piel y/o mucosas

Agente que elimina la carga microbiana de objetos

inanimados

ASEPSIAPROCEDIMIENTO QUE PREVIENE O REDUCE LA TRANSMISIÓN DE MICROORGANISMOS

PROCEDIMIENTO QUE PREVIENE O REDUCE LA TRANSMISIÓN DE MICROORGANISMOS

DESINFECCIÓN

PROCEDIMIENTO QUE CONSIGUE LA REDUCCIÓN DEL NÚMERO DE MICROORGANISMOS PRESENTES PERO NO LA DESTRUCCIÓN TOTAL

PROCEDIMIENTO QUE CONSIGUE LA REDUCCIÓN DEL NÚMERO DE MICROORGANISMOS PRESENTES PERO NO LA DESTRUCCIÓN TOTAL

Importancia del control microbiano

Los microorganismos se eliminan, inhiben o matan por:

- agentes físicos- procedimientos físicos o- agentes químicos

Para:1. Prevenir la trasmisión de la infección y la enfermedad2. Prevenir la contaminación o la proliferación de microorganismos perjudiciales3. Prevenir el deterioro o destrucción de materiales por los microorganismos

Causa daño celular y muerte de muchas bacterias La luz de color rojo, anaranjado y amarillo no son nocivos Las radiaciones >300um: poco poder bactericida (luz

visible, luz infrarroja). Las radiaciones RUV son bactericidas.

Mecanismo - Cuando los fotosensibilizadores absorben luz son

activadas y llevadas a un nivel de mayor energía y cuando transfieren la energía a otro componente celular ocasiona daño en la célula.

ALTAS TEMPERATURAS Mecanismo de acción:

Calor seco: oxidación Calor húmedo: desnaturalización de proteínas

Eficacia: Húmedo>Seco Mayor poder de penetración. Son microbiocidas

BAJAS TEMPERATURAS- Microbiostáticas- Conserva cultivos microbianos, alimentos

OPTIMA TEMPERATURA- Crecimiento

PRESIÓN OSMÓTICAMecanismo de acción:

Inhibición bacteriana por plasmólisis

Usa:

- Elevadas concentraciones de sal: 10-15%

- Elevadas concentraciones de azúcar. 50-70%

Radiaciones no ionizantes

Características:Baja energía, sin poder ionizanteSin poder penetranteSin poder penetranteMáxima eficiencia biocida a 260nmRUV (220 a 300 nm)

Mecanismos de acción:Sitio blanco ADNFormación de dímeros de timina

Usos:Desinfección de superficiesDesinfección de aire y aguaProducir mutantes

Actividad antimicrobiana

RUV

Dímeros de timina

RADIACIONES ionizantes

• Son los rayos X y g,

y los radiosótopos; Co60 y Cs137

• Efectos son letales y mutagénicos.

• Muy penetrantes• Ionizan átomos y

moléculas 

Actividad antimicrobiana

ALCOHOLES: ETANOL E ISOPROPANOL• Mecanismo de acción: Desnaturalización de proteínas Alteraciones en la membrana

Desorganiza la estructura fosfolipídica de la membrana

• Escasa toxicidad

• Usos: – Antisépticos cutáneos en

forma de sol. acuosa al 50-70%

– Desinfectantes de objetos semicríticos y no críticos

YODO Y YODÓFOROS: POVIDONA YODADA

• Mecanismo de acción:

• Halogenación de tirosina en las

enzimas

• Inactiva proteínas y enzimas por

oxidación de los grupos –SH a S-S

• Poco tóxicos

• Usos: Antisépticos de mayor uso

(piel intacta, heridas, colutorios,

lavado quirúrgico de manos,...)

R: HSO4 verde brillanteR: Cl verde de malaquita

Violeta de genciana

Bloquean la conversión del ácido UDP-acetilmurámico en UDP acetilmuramil-péptido

INTERFIEREN LOS PROCESOS DE OXIDACION CELULAR

CLORO Y SUS DERIVADOS

Actúan sobre proteínas y acidos nucleicosOxidan grupos –SH y atacan grupos aminos

Forma ácido hipocloroso:

Cl2 + H2O --------- HCl + HClOHClO------------------- HCl + O (oxidante celular)

ETILENO

Agente alquilante de enzimas y proteínasSe une a compuestos con hidrógenos lábiles como los que tienen grupos carboxilos, aminos, sulfhidrilos

H2C------CH2 + Enzima –SH (activa) O

E-S-CH2-CH2OH inactiva

Usa en la esterilización gaseosa en industria farmacéutica

PASTEURIZACIÓN

LHT (Low temperature holding)30 minutos a 62,8ºCHTSHT (high temperature short time) 15 segundos a 71,6ºC

Sólo destruye patógenos (Coxiella burnetti, M. tuberculosis, etc) y reduce la flora de deterioroNO ES UN PROCESO DE ESTERILIZACIONUso: leche, lácteos, jugo de frutas

LHT (Low temperature holding)30 minutos a 62,8ºCHTSHT (high temperature short time) 15 segundos a 71,6ºC

Sólo destruye patógenos (Coxiella burnetti, M. tuberculosis, etc) y reduce la flora de deterioroNO ES UN PROCESO DE ESTERILIZACIONUso: leche, lácteos, jugo de frutas

TYNDALIZACIÓN• 100ºC 30 min, 3 días sucesivos•Proceso discontínuo con períodos de incubación intercaladas•Usos:•Esterilización de productos de baja resistencia térmica, cuando no exista otra opción

Jhon Tyndall

DESECACIÓN

Produce: - Detención de la actividad mecánica - Declinación de la población viable Eficacia - La desecación al aire con 50% de humedad relativa Ejemplos -Muy sensibles : gonococos, meningococos (hrs) -En esputos secos : M. tuberculosis (viable varios meses) -Permanecen viables indefinidamente: esporas Causa de la muerte - Aumento intracelular de sales que conlleva a efectos

tóxicos y desnaturalización de proteínas - Daños por oxidación

LIOFILIZACIÓNDefinición - Es la desecación al vacío de una muestra

congelada. Proceso - Al cultivo bacteriano se adiciona leche o

suero. - Se congela sobre nieve carbónica (-78ºC). - En bomba al vacío se realiza la desecación. - Se guarda en ampollas cerradas de vidrio Usos - En bacterias conserva la viabilidad por años.

Desinfectantes y antisepticos

DESINFECTANTE Productos utilizados para matar microorganismos en

objetos o superficies.

ANTISEPTICO Producto que destruye o inhibe el crecimiento de

microorganismos dentro o en tejidos vivos

Características Actividad antimicrobiana Solubilidad Estabilidad No deberá ser tóxico Homogeneidad No reaccionar con material orgánico extraño capacidad de penetración No deberá corroer ni teñir

MECANISMOS DE ACCIÓN de los desinfectantes

Desnaturalización de proteínas.

Oxidación

Reacciones de sustitución

Alterando la permeabilidad de la membrana

EFICACIA DE LOS DESINFECTANTESMicroorganismos presentes.Condiciones Físico-Químicas:

Tiempo Concentración Temperatura pH

Materia Orgánica

MATERIA ORGANICA

• Puede captar e inactivar al desinfectante (Ej. Derivados del Cl)

• Puede dificultar el contacto del desinfectante con los microorganismos

Imprescindible limpiar material antes de la desinfección!!!

Desinfectantes: ESPECTRO DE Acción

Efectivos frente a bacterias vegetativas.

Eficacia variable frente a virus y hongos.

Ineficaces frente a esporas.

DESINFECTANTES MAS USADOS

1. Alcoholes

2. Agentes oxidantes (Cloro,

Yodo, Ac. Paracético, H2O2)

3. Agentes surfactantes

4. Derivados fenólicos

5. Aldehídos

6. Oxido de etileno

1. Alcoholes

Etanol, Isopropílico, n-popanol contra bacterias, virus y hongos

No son esporicida

Mecanismo -Desnaturalizan las proteínas

-Disuelven los lípidos

-Deshidratantes

Usos-Reducen flora bacteriana de la piel

-Desinfección de termómetros

2. Agentes oxidantes

Yodo: Yodóforos (povidona yodada). Antiséptico Cloro: Lejías: tratamiento de aguas. lecherías utensilios

HIPOCLORITO DE SODIO EN SOLUCION ACUOSA

• Mecanismo de acción: Oxidación

• Alto o bajo nivel (en función de la concentración)

• Muy tóxico y corrosivo

• Usos:

– Tratamiento de aguas

– Desinfección de superficies ambientales en gen

Peróxido de hidrógeno

• Mecanismo de acción: Oxidación

• Potencia variable (en función de la concentración y

Tª)

• Soluciones concentradas son tóxicas y corrosivas

• Usos: – Desinfección de lentes de contacto (3%)– Desinfección de equipos médicos limpios (6%)– Esterilización con PLASMAGAS

3. AGENTES SURFACTANTES:

DERIVADOS DE AMONIO

• Mecanismo de acción: Alteración de la

membrana

• Bajo nivel

• Poco tóxicos

• Uso: Antisépticos

4. DERIVADOS FENOLICOS

• Mecanismo de acción: Alteración de la

membrana y coagulación de proteínas

• Usos:– Descontaminación ambiental

– Antisépticos:

– Hexaclorofeno

– Triclosan

5. ALDEHIDOS: glutaraldehido y formaldehido

• Mecanismo de acción: Agentes alquilantes

• Alto nivel y esterilizantes

• Muy tóxicos y potencialmente

carcinogénicos

• Usos:– Esterilización de materiales no resistentes al

calor (glutaraldehído)

– Desinfección de cabinas de seguridad biológica (formaldehído)

6. OXIDO DE ETILENO• Mecanismo de acción: Oxidación y alquilación

• Alto nivel y esterilizante con rapidez de

efecto

• Muy tóxico (cámara hermética y posterior aireación)

• Usos: Esterilización de materiales no resistentes al calor

ni a la humedad

ANTISEPTICOSClorhexidinaTriclosánHexetidinaSanguinarinaFluoruro de estañoCloruro de cetilpiridonioAceites esenciales (timol, eucaliptol)

ESTERILIZACIÓN

Proceso mediante el cual células vivas, esporas viables y virus son destruídos

AGENTES FÍSICOSCALOR:

Seco Húmedo

RADIACIONES: Luz Ultravioleta Radiaciones Ionizantes

AGENTES MECÁNICOS: Filtración Ultrasonidos

CALOR SECOHorno Pasteur: 160-

170oC; 2-3 horas.

Flameado a la llama.

Incineración.

ESTERILIZACION POR CALOR HUMEDO EBULLICION:

• Pº atmosférica, 100ºC

AUTOCLAVE

• 121ºC, 10-15 min., 1 Atm.

• Vapor de agua a saturación(vapor fluente)

• Más rapido y efectivo que el calor seco

AUTOCLAVE

PUERTA

Fuente de calor

Medio de cultivo

VAPOR DE AGUA

Válvula de drenaje

Resistencia al calor

PrionesEndosporas bacterianasMycobacteriaVirus sin envoltura lipídicaHongosBacteriasVirus con envoltura lipídica

RESISTENCIA

Luz ultravioleta

FILTRACION

Para materiales termolábiles y

sensibles a radiaciones.

- Tamaño del poro: 0.005-1 µ.

- Los virus no son retenidos

Filtros de

membrana

Filtros HEPA

Usos: ciertos medios de

cultivo, azúcares,

soluciones de antibióticos

ULTRASONIDOS - Vibraciones de alta frecuencia

(poca penetración).

- Desnaturalizar las proteínas y

componentes bacterianos.

- Se emplean en un baño de agua

para limpieza de material

AGENTES QUÍMICOSOxido de etileno

EsterilizanteMateriales termosensibles

CONTROL DEL PROCESO DE ESTERILIZACION

- Radiaciones: vigilancia de las lámparas

- Filtración: cambio periódico de filtros

- Calor

1. Indicadores físicos: termómetro y manómetro

2. Indicadores químicos: tiras colorimétricas (Tª, Pº,

T)

3. Indicadores biológicos: (esporas de Bacillus)

CONSERVACION DEL MATERIAL ESTERIL

1. Embalajes apropiados

2. Protección de la envoltura externa

3. Manipulación aséptica

4. Ambiente limpio y controlado

5. Cabina de flujo laminar