Aislamiento e Identificacion de Listeria monocytogenes
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8/19/2019 Aislamiento e Identificacion de Listeria monocytogenes
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Aislamiento e
identifcación deListeria
monocytogenes
en muestras clínicas
Lic. TM JUAN C. RIVEROS
QUINTANA
HOSPITAL NACIONAL DOCENTE MADRE NIOSAN !ARTOLOME
LA!ORATORIO DE MICRO!IOLO"IA
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• Durante más de 7 a!"s Listeriamonocytogenes #a sid" rec"n"cid"
C"m" un a$ente %at&$en" #uman" 'causa in(ecci"nes %rinci%a)mente ' enmu*eres em+ara,adas - recinnacid"s' tant" c"m" en %acientes c"n
immun"su%resi&n $ra/e c"m" VI0' endia+etes me))itus ' en )a insu1ciencia#e%ática' %acientes c"n tratamient"de cáncer - en #em"diá)isis.
Listeri"sis y Listeria
monocytogenes
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Listeria monocytogenes
Ais)ada en 2345 %"r Murra-' 6e++ -Sann8 Murra-' R. 9. D.' et a). J. :at# ;atc.'43
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En )"s anima)es< A(ecta a) "/in"'ca%rin"s' +"/in"s' a)%acas. LM
%uede causar mastitis en /acas' rar"en cerd"s' %err"s' c"ne*"s ' c"+a-"s'a/es.
:r"duce Ence(a)itis mas (recuentes
en )"s rumiantes' se%sis másc"rriente en )"s r"ed"res - )as a/es.:uede "currir in(ecci&n uterina en )a/aca antes de) s%tim" mes de:re!e,.
Listeria monocytogenes
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Listeria monocytogenes
"R#POS DE RIES"O
Mu*eres em+ara,adas' ne"nat"s' inmun"su%rimid"s
DISTRI!#CI$N DE CASOS @ As"ciad"s a em+ara," 82B4 cas"s2. nacimient"s/i/"s>
Mu*eres em+ara,adas M"rta)idad< :rdida (eta)< 2B4
Ne"nat"s M"rta)idad< #asta 5@
7 Adu)t"s de )"s %acientes s"n ma-"res de 7 a!"s 3 de )"s %acientes tienen en(ermedad su+-acente
M"rta)idad< #asta @
EPIDEMIOLO"%A
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Listeriosis Perinatal
La in(ecci&n se transmite /Fatrans%)acentaria' /Fa ascendente " durante e)
%art". Listeri"sis ne"nata) de inici" tem%ran" %uedetener secue)as c"m" #idr"ce(a)ia " retras"%sic"m"t"r.
Listeri"sis ne"nata) de inici" tardF" es +a*"82 a 4 >. Se re)aci"na c"n )a as%iraci&n deHuid" in(ectad".
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FISIOPATOGENIA
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VFa de in(ecci&n
Transplacentaria - ascendente
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En e) interi"r )a :r(A %asa a estad" acti/ad" 8:r(A> e induce )a e?%resi&n de )"s $enesnecesari"s %ara )ain/asi&n de )a c)u)a #us%ed 8inter)aninas Ln)A - Ln);>' )isis de) (a$"s"ma 8)isteri")isina
O " LLO>'("s(atidi)in"sit") es%ecF1c" de ("s(")i%asa C 8:IB:LC> - ("s(atidi)c")ina 8:CB:LC>'
Listeria monocytogenesMECANISMOS DE :ATO9ENICIDAD
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L.. Monocytogenes sobreviven y se multiplican dentrodel citoplasma de las células y se extienden a células
adyacentes sin dejar el ambiente de citoplasmático(Tilney and Portnoy, 1989, ! "ell #iol! 1$9%1&9'
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Listeria monocytogenes
Ad#esi&n e interna)i,aci&n
MECANISMOS DE
:ATO9ENICIDAD
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)a*ocitosis inicial
End"(a$"cit"sis
/acu")ar
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+isolucin de la membrana del )a*osoma
Lisis de) (a$"s"ma:rimari"
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.ubes del material de /ibrilar (la polimeri0acin de actina
:")imeri,aci&n de Actina - mi$raci&n+acteriana
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"ometas de isteria (la polimeri0acin de actina
:")imeri,aci&n de Actina - mi$raci&n+acteriana
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Proyecciones semejante a Pseudopodos
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"rmaci&n de
i)"%"dias
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isteria )a*ocitada dentro de un)a*osoma de doble membrana
Diseminaci"n ce)u)ar - Lisis /acu")arse$undaria
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Listeria monocytogenes
MECANISMOS DE :ATO9ENICIDAD
Cic)" de Vida intrace)u)ar
2> Ad#esi"n einterna)i,aci"n +acteriana.
4> End"(a$"cit"sis/acu")ar
@> Lisis de) (a$"s"ma:rimari"
=> :r")i(eraci"n +acterianacit"%)asmatica
> :")imeri,aci"n deActina - mi$raci"n+acteriana
5> "rmaci"n de i)"%"dias
7> Diseminaci"n ce)u)ar -Lisis /acu")ar se$undaria.
2
4
@
=
5
7
InlA&Inl!
LLO'PLC(PI
Acta
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Listeri"sis durante e) em+ara,"
act"res<• Mu*eres em+ara,adas tiene 4
/eces mas %r"+a+i)idad dedesarr"))ar )isteri"sis Kue "tr"s
adu)t"s san"s 8CDC' 233>• Un terci" de t"d"s cas"s de
)isteri"sis "curren durante e)em+ara," 8CDC' 233>
• Listeri"sis %ueden causar a+"rt"es%"ntáne" muerte (eta)'en(ermedad $ra/e " )a muerte a)recin nacid" 8Sc#)ec#' 42>.
IM:ORTANCIA CLNICA < INECCIONES EN
0UMANOS
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Listeri"sis durante e) em+ara,"
• De )as in(ecci"nes (eta)es Un"en cinc" resu)ta en m"rtinat".
• L"s sFnt"mas %ara )a madre%ueden ser asint"mátic"seme*ante a $ri%e
• Es de im%"rtancia ca%ita)c"nsiderar siem%re e)
dia$n&stic" de )isteri"sis enem+ara,adas c"n e)e/aci&nde )a tem%eratura de "ri$endesc"n"cid" - tra+a*" de%art" %retrmin".
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Listeri"sis durante e) em+ara,"
El em)ara*o& la fsiolo+ía& , listeriosis• Las mu*eres em+ara,adas s"n más susce%ti+)e
%"rKue< L"s ni/e)es de %r"$ester"na se incrementa en
tercer trimestre de Em+ara," +a*an Las(unci"nes inmunes men"s ries$" de rec#a,"de) (et" ma-"r ries$" de ciertasen(ermedades.
• L"s adu)t"s sa)uda+)es destru-en a LM en e)tract" $astr"intestina) 8,"na di$esti/a>.• LM %uede diseminarse mas (áci)mente en e)
t"rrente san$uFne" en )as mu*eres em+ara,adas.
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Impacto sobre feto y NeonatoPerinatal
2n/eccion intrauterina 3 amnionitis, Trabajo pretermino,aborto espontaneo, mortinato, o in/eccion de inicio tempranoen el neonato!
2n/eccion .eonatal
Listeriosis de inicio temprano
- a in/eccin en 4tero- 5asta ' d6a después del parto -
Pretérmino, bajo peso al nacer ,- 7ayor s6ntoma% epsis!- Puede aber problemas respiratorios, cianosis, apnea,
neumon6a , Micr"a+ces"s diseminad"s8$ranu)"mat"sis
in(antise%ticum>. 7ortalidad alrededor de : 1& 3 &$;
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Impacto sobre feto y Neonato .eonato
• 2n/eccin después del parto % canal de parto,contaminacin /ecal , cuidados ospitalarios, ambientede ospital!
2n/eccin del recién nacido!
Listeriosis de inicio tardio
-< & - ' d6a después del parto - 6ntomamuy importante : menin*itis - Puede aber %/iebre ,pobre alimentacin, irritabilidad,
colitis !- =lto ; de ni>os tendrán secuelas )6sico y neurol*ica- 7ortalidad alrededor de : 1$ 3 ?$; ! e relaciona con la aspiracin de /luido in/ectado!
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Listeri"sis en adu)t"sinmun"c"m%r"metid"s
B ;acteremia Kue %uede c"ntinuar c"nmenin$itis.
B A ni/e) de) SNC se %resentamenin$"ence(a)itis'cere+ritis - a+sces"s.
B Otr"s ti%"s de in(ecci&n inc)u-en artritiss%tica'
"ste"mie)itis' a+sces"s #e%átic"s'
c")ecistitis'
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Ser"ti%i1caci&n
Mt"d" c)ásic" +asad" en antF$en"ss"mátic"s O
- Ha$e)ares 0 ' 2@ ser"ti%"s. de) 3 de )"s ais)amient"s #uman"s%ertenecen
a )"s ser"ti%"s 24a' 24+ - =+
Ser"ti%" =+' de cas"s de )isteri"sis en e)mund".
En )"s cas"s es%"rádic"s %red"minan )"smism"s ser"ti%"s' aunKue )a (recuencia de)
ser"ti%" =+ es men"r Kue )a de )"s ser"ti%"s
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Listeria monocytogenes
IDENTIICACIPN
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"ENERO LISTERIA
• El "enero Listeria inclu,e actualmente seises-ecies.
• L. monocytogenes& L. ivanovii, L.seeligeri,
L. innocua, L. welshimeri, y L. grayi /• Dos de estas es-ecies& L. monocytogenes , L. ivanovii & son -otencialmente -ató+enos/
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Listeria Identi1caci&n
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Listeria monocytogenesDIA"N$STICO
E0AMEN DIRECTO DE LAS M#ESTRAS
• SEC. CERVICALES.• SEC. VA9INALES• LOQUIOS• SAN9RE DEL CORDON.• MECONIO.• SAN9RE.
• LCR.• SEC. CONJUNTIVAL.• LIQ. AMNIOTICO
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Listeria monocytogenes
CULTIVO AISLAMIENTO )uid"s n"rma)mente estri)es 8san$re'
)FKuid" ce(a)"rraKuFde"' )FKuid" amni&tic">
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Incu+aci&n@ C
O+ser/aci"n de crecimient"s en)"s medi"s
Su+cu)ti/" c"n :)acas a uti)i,ar Incu+aci&n @
P R O C E D I M
I E N T O
E N
C A S
O
D E H E M O C #
L T I 1 O S
P O S I T I 1
O S
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Aero)io(Anaero)io2acultati3o
Desarr"))a me*"ren micr"aer&1)ia.Tem-eratura
. B = C. "%tima@7In4uencia de PH O%tim" a 7. n"
desarr"))a .5crece
CONDICIONES DE C#LTI1O
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C")"raci&n 9ram a %artir de) Ca)d"de #em"cu)ti/"
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C#LTI1O EN MEDIO S$LIDO.
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Crecimient" en a$arsan$re
A+ar San+re. Des-u5s de 67 a 78 9oras en estu2a a :;?6 mm de diametro @ des-ues de >?6 dias deincu)ación & rodeados de una *ona de ?9emolisis/
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Listeriamonocytogenes
Streptococcus
agalatiae
Streptococcus pyogenes
Bona de ?9emolisis
• Coco)acilos "ram =@ cortos ue tienen
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Tinci&n de 9ram
• Coco)acilos "ram =@ cortos ue tienentendencia a a-arecer em-ali*ada en cadenascortas de : a ; microor+anismo -resenta unatí-ica dis-osión en di2teroide
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CATALASA8>
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;IOQUIMICA
Cit TSI Urea
M"t 9e) ;i)isBEscu)ina C)Na5.
S6H
= (@
= (@
= (@
= (@
= @
= @
= @
= @
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M"ti)idad 44W C M"ti)idad @7W C
44C
@7C
A d ;
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CAM:
8>
A+ar san+re de carnero ; Ce-a de Staphylococcus
aureus ATCC 6;F6:
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CAM: :"siti/aStreptococcus agalatiae
CAM: :"siti/aListeria monocytogenes
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Anti+i"$rama %ara Listeriamonocytogenes
• E) Gnic" mt"d" /a)idad"%ara )a rea)i,aci&n deanti+i"$ramas en Listeriaes )a micr"di)uci&n en
ca)d".• N" e?iste estandari,aci&n'%unt"s de c"rte nicate$"rFas inter%retati/as%ara rea)i,ar
anti+i"$ramas %"r disc"di(usi&n' %"r )" cua) n" serec"mienda su %ráctica.
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Anti+i"$rama %ara Listeriamonocytogenes
• L"s Gnic"s antimicr"+ian"ssu$erid"s %ara %rue+a in /itr" %"rmicr"di)uci&n en ca)d" s"n<
Am%ici)ina :enici)ina 9 Trimet#"%rimsu)(amet#"?a,")e
L"s ais)amient"s N" susce%ti+)esa :enici)ina 9 - Am%ici)ina de+enser en/iad"s a un )a+"rat"ri" dere(erencia %ara su c"n1rmaci&n.
• AunKue< Ri(am%in' Line,")id'macr&)id"s' AmiXacin'
)u"r"Kuin")"nas' ce(a)"s%"rinas -car+a%enmic"s %udieran a%areceracti/"s Yin Vitr"Z' n" de+en serin("rmadas ante su %"si+i)idad deine1cacia c)Fnica.
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MIC :enici)ina < .24 u$m).
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GRACIAS