Biotecnologías de apoyo al Biotecnologías de apoyo al mejoramiento de plantasmejoramiento de plantas

•Cultivo de tejidos•Rescate de embriones•Embriogénesis somática•Organogénesis somática•Producción de haploides •Fusión de protoplastos

•Trasformación genética•Agrobacterium tumefaciens•Biobalística

Cultivo de tejidos Factores comunes

Composición general de medios de cultivo:• Fuente de Carbono (azúcares)• Macronutrientes (N, K, etc)• Micronutrientes (Fe, Cl, etc)• Vitaminas• Agente gelificante (para medios sólidos)• Reguladores de crecimiento (hormonas vegetales)• Otros compuestos (ej: agentes quelantes)

asepciaasepcia

cultivocultivo

aambientacimbientaciónón

Cultivo de tejidos: Rescate de embriones

Cultivo de tejidos: Embriogénesis somática

Cultivo de tejidos: Organogénesis somática

Propagación masiva •Flores•Frutales•Árboles forestales

Cultivo de meristemas•Saneamiento de virus•Rejuvenecimiento

Cultivo de tejidos: Producción de haploides

Cultivo de tejidos: Fusión de protoplastos

Transformación genética Técnicas básicas

• Enzimas de restricción• Clonación de genes• Secuenciación• Electroforesis de Proteínas, ARN y ADN• Hibridación con anticuerpos (western blot)• Hibridación de ácidos nucleicos (southern, northern)

• Reacción de la polimerasa en cadena (pcr)

Transformación genética Técnicas básicas

Enzimas de restricción

Clonación en plásmidos (vectores)

Transformación genética Técnicas básicas

Clonación en plásmidos (vectores)

Transformación genética Técnicas básicas

Secuenciación

A C G T

Transformación genética Técnicas básicas: Secuenciación

Transformación genética Técnicas básicas

Electroforesis (DNA, RNA,proteinas)

southern

northern

western

Transformación genética Técnicas básicas

Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR)

Transformación genética:A. tumefaciens

Transformación genética:A. tumefaciens

Transformación genética:A. tumefaciens

Transformación genética:Biobalística

Transformación genética:Biobalística

GENES UTILIZADOS Y CARACTER CONFERIDO EN

PLANTAS TRANSGÉNICASTipo de gen utilizado en

transgénesisCaracter que confiere a la

planta

Toxina de Bacillus thuringensis

Proteína de la cubierta viral

Quitinasas, glucanasas de plantas y de otros organismos

Lisozima humana y de cerdo. Otros péptidos bactericidas

Genes cuyos productos afectan la biosíntesis de aminoácidos, o la fotosíntesis

Genes cuyos productos afectan la biosíntesis del etileno, o la formación de pared celular

Resistencia a Insectos

Resistencia a Virus

Resistencia a Hongos

Resistencia a Bacterias

Resistencia a Herbicidas

Retraso maduración de frutos

ALGUNAS LIBERACIONES COMERCIALES DE PLANTAS TRANSGÉNICAS (Birch, 1997)

Cultivo (Fecha liberación)

Nombre Compañía Caraterísticas

Tomate (1994) Flavr Savr Calgene Savor de madurez en rama, largavida

Tomate (1995) Zeneca Consistencia de pasta de tomate

AlgodónPapasMaiz (1996-97)

BollgardNewLeafYieldGuard

MonsantoToxina deBacillus thuringiensis para resistencia insectos

SoyaRapsAlgodón (95-96)

Roundup Ready

MonsantoResistencia a Glifosato (herbicida)

OTRAS PLANTAS QUE HAN SIDO GENÉTICAMENTE MODIFICADAS

AbetoAcelgaAlfalfaAlgodónAlamoArabidopsisArrozArvejaCamoteCaña de azucarCebadaCentenoClavelCrisantemoEspárrago

EucalyptusFrambuesaFrutillaKiwiLechugaLirioMaízManíManzanaMaravillaOrquideaPapaPapayaPetuniaPera

PinoPlátanoPorotoPoroto de soyaRemolachaRepolloRosaSorgoTabacoTomateTulipánTrigoVidesZanahoriaZapallo

Transformación de Plantas

Biobalística o

Agrobacterium

Mejoramiento Genético

Color Postcosecha

Resistencia a Patógenos

MEJORAMIENTO GENÉTICO DE PLANTAS CON TRANSFORMACIÓN GENÉTICA

Insectos

Resistencia a Herbicidas

Esterilidad Sexual

Calidad del Producto

Hongos BacteriasMaterna

Paterna

Roundup

Listo

Glifosato

Bromoxinil

Glifosato