ANTI-D 2

download ANTI-D 2

of 15

Transcript of ANTI-D 2

  • 7/25/2019 ANTI-D 2

    1/15

  • 7/25/2019 ANTI-D 2

    2/15

  • 7/25/2019 ANTI-D 2

    3/15

    A N T I C U E R P O SA N T I C U E R P O S

    P O L I C L O N A L E S - M O N O C L O N A L EP O L I C L O N A L E S - M O N O C L O N A L ESS

  • 7/25/2019 ANTI-D 2

    4/15

    Reactivo Anti-D

    Tipificacin sangunea en bancos de sangre Basado en la aglutinacin de glbulos rojos IgM/IgG

    Anti-A

    Anti-Bneas celulares de !ibrido"a "#rido

    Anti-D $etero!ibrido"a %!u"ano & ratn'

    (nhibridoma

    es una lnea celular !brida obtenida "ediante la fusin de un llinfocitoB productor del anticuerpo especfico de inter)s* con una lnea celular de "ielo"a

    +ue no produce iin"unoglobulina propia, e obtiene as una lnea celular in"ortal

    capa. de epresar el anticuerpo de inter)s* +ue se asla del sobrenadante,

    0usin de c)lulas B in"ortali.adas con 12B a c)lulas de "ielo"a de ratn para dar

    lugar a un !etero!ibrido"a !u"ano-ratn,

    a !ibridi.acin de linfocitos !u"anos !a sido necesaria para producir deter"inados anticuerpos contra

    antgenos eritrocitarios +ue no son reconocidos por el siste"a in"une del ratn %antgenos del siste"a R!',

    http://es.wikipedia.org/wiki/Linfocito_Bhttp://es.wikipedia.org/wiki/Inmunoglobulinahttp://es.wikipedia.org/wiki/Inmunoglobulinahttp://es.wikipedia.org/wiki/Linfocito_B
  • 7/25/2019 ANTI-D 2

    5/15

    3btencin de !etero!ibrido"a productor de anticuerpos "onoclonales de tipo IgM

    contra el antgeno D del siste"a R!,Len G. y Cruz C. Invest 4lin 56%7'8 9: - ;:* eg

    9to da postparto R> R!?

    Separacin diferencial porgradiente de Ficoll-Hypaque

    B sensibili.ados

    4M@

    ?obrenadante de cultivo

    de 4)lulas B9,6

    nea celular linfoblastoide +ue

    proviene de los "onos "ar"oset*

    las cuales estn infectadas con el12B por lo +ue producen &secretan viriones

    Beneficios tecnolgicos y econmicos que representa poder contar con reactivos nacionales de alta calidad para

    la tipificacin de la sangre humana

  • 7/25/2019 ANTI-D 2

    6/15

    79 das despu)sC

    $etero"ielo"a de la lnea ;$;/B9

    2sta lnea fue lograda "ediante la fusin de c)lulas de "ielo"a de ratn

    balb/c deno"inada >9-7-Ag5 & c)lulas de linfo"a nodular !u"ano

    B in"ortali.ados

    ?@2G

    e "antiene en cultivo con Medio de creci"iento8 $ipoantina*

    A"inopterina

    Ti"idina

    3uabana

  • 7/25/2019 ANTI-D 2

    7/15

    A los 75 das E 21A(A4I3> D2 3 @3F3

  • 7/25/2019 ANTI-D 2

    8/15

  • 7/25/2019 ANTI-D 2

    9/15

    as c)lulas contenidas en los po.os con seal positiva

    se epandieron & se clonaron cuatro veces por

    procedi"iento de dilucin l"ite %a ra.n de 7* =*9 &=*

  • 7/25/2019 ANTI-D 2

    10/15

    4aracteri.acin & cuantificacin

    del anticuerpos

    In"unoensa&o en.i"tico

    %2IA'

    2l tipo de cadena liviana se deter"in

    "ediante el ")todo de doble difusin en gel

    de agarosa %3uc!terlon&'

  • 7/25/2019 ANTI-D 2

    11/15

    Expansin de clonesPositivosClon hibido!as Ac"

    P E G

    C#l$las % no &$sionadas

    'eteocaiones

    Cel !ielo!a no &$sionadas

    (ete!inacin de antic$epos ensobenadante del c$ltivo

    )Solo cecen 'ibidos Cel %* !ielo!a+

    M$een en 'AT

    Cel Mielo!aI,- in!otal

    Sobenadante C$ltivo

    M$een en O$abaina

    'AT* Seleccin O$abaina

    'eteohibido!aI," in!otal

    " E%.

    CMSP Cel % lin&oblastoidesI," in!otal

  • 7/25/2019 ANTI-D 2

    12/15

  • 7/25/2019 ANTI-D 2

    13/15

    $2T2R3$IBRID3MA 3BT2>ID3

    7' Anti-D %IgM' %BM-' @otencia 78H< centrifugacinin"ediata* 7867< 79 "in, a TA, Avide. 7= seg,

  • 7/25/2019 ANTI-D 2

    14/15

    2l inter)s por la produccin de AcMo !u"anos tiene al "enos

    tres "otivaciones principales8

    a' a conveniencia de e"plear in"unoglobulinas !u"anas en ")todos

    diagnsticos o terap)uticos,

    b' as li"itaciones en la produccin de AcMo en ratn o rata para algunosantgenos contra los cuales estas especies no producen una respuesta in"une

    !u"oral,

    c' 2l conoci"iento en "a&or detalle de los "ecanis"os de la respuesta

    in"une $u"ana & especfica"ente* su relevancia en el cncer* las

    enfer"edades Autoin"unes* los procesos al)rgicos & las enfer"edades

    infecciosas

  • 7/25/2019 ANTI-D 2

    15/15