Biopsia
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UNIVERSIDAD PUBLICA DE EL ALTO
FACULTAD DE MEDICINA
CARRERA DE MEDICINA
CATEDRA DE CIRUGIA CABEZA Y CUELLO.
FELIPE SALCEDO JAVERCATO
DR. Alejandro Ponce
PROCEDIMIENTO
MÉDICO REALIZADO POR EL MEDICO , EL CUAL CONSISTE EN LA EXTRACCIÓN DE UNA MUESTRA TOTAL O PARCIAL DE TEJIDO PARA
SER EXAMINADA, EL ESTUDIO TANTO MACROSCÒPICO
COMO MICROSCÓPICO QUE ESTUDIA LOS TEJIDOS OBTENIDOS, A FIN
DE
EMITIR UN DIAGNÓSTICO, PRONOSTICO Y SEGUIMIENTO.
BIOS = VIDA OPSIS = VISIÓN
MÉTODOS DE LA ANATOMÍA PATOLÓGICA
• Patología Postmortem. Autopsias
•Patología Quirúrgica (CABEZA Y CUELLO). Biopsias
• Citopatología
• Experimental
• Otros
TIPOS DE BIOPSIA
De órgano Total Parcial
Intraoperatoria Punción Biopsia
Incisional
Excisional
Dirigidas
No dirigidas
TIPOS DE BIOPSIA
DirigidaEndoscopica
Colposcópica
Dermatoscópica
Estereotaxica
No Dirigida
A ciegas
BIOPSIA INCISIONAL
Cuando toma parte de la lesión.
Ej: punch de en lesion extensa de piel
biopsia endoscópica en tumor > 2cm
BIOPSIA ESCISIONAL
Cuando en la muestra se extrae la lesión en su totalidad.
Ej: losange de piel polipectomía
BIOPSIA DE ÓRGANO
Consiste en el estudio de materiales obtenidos
durante un acto quirúrgico, generalmente el
material está representado por todo o parte de un
órgano. El procesamiento se realiza en base a un
protocolo pre establecido que indica pautas que
van desde la apertura de la pieza hasta obtención
de muestras representativas.
ÓRGANO TOTAL
ÓRGANO TOTAL
ÓRGANO PARCIAL
BIOPSIAS DIRIGIDAS
Biopsias endoscópicas: es un tipo de biopsia dirigida que
permite la obtención del material de órganos huecos ( tubo
digestivo, árbol respiratorio, vias urinarias) o cavidades
(pleural, pericardica, abdominal)
BIOPSIAS DIRIGIDAS
Biopsias colposcopicas : se utilizan en lesiones
precursoras de cuello uterino.
BIOPSIAS DIRIGIDAS
Biopsias estereotáxicas: con la ayuda de
métodos imagenológicos se localiza
tridimensionalmente la lesión y se obtiene
tejido. Ej mama y SNC
BIOPSIA DIRIGIDA ENDOSCÓPICA
BIOPSIA INTRAOPERATORIA
Es el estudio del material obtenido durante el acto
operatorio para determinar la naturaleza de la
lesión y emitir un diagnóstico que permita al
cirujano adoptar una conducta quirúrgica adecuada.
BIOPSIA INTRAOPERATORIA
• Requiere de instrumental (criostato) y ambiente adecuados.
• Se utiliza el tejido en fresco.
• Fijador es el frío.
BIOPSIA INTRAOPERATORIA
BIOPSIA INTRAOPERATORIA
BIOPSIA INTRAOPERATORIA
BIOPSIA INTRAOPERATORIA: CONTROL DE
MÁRGENES
BIOPSIA DIFERIDA CONTROL DE MÁRGENES
BIOPSIA POR PUNCIÓN
• Consiste en la obtención de un cilindro de tejido del órgano afectado, utilizando agujas especiales de grueso calibre 0.2cm de diametro.
• Se aplica para el diagnóstico de patologías que afectan a órganos parenquimatosos en forma difusa (cirrosis hepatica, glomerulopatias) o localizada solida (tumor)
• El material obtenido se incluye totalmente y se procesa en forma seriada.
BIOPSIA POR PUNCIÓNPuede realizarse :
• A ciegas: sobre el sitio donde se sospecha que se encuentra la lesión.
• Dirigida: mediante aparatos que permiten visualizar el sitio de punción (ecografía, TAC) Ej: punción biopsia de mama con mammotome.
BIOPSIA POR PUNCIÓN
BIOPSIA POR PUNCIÓN DIRIGIDA
BIOPSIA POR PUNCIÓN
BIOPSIA POR PUNCIÓN
PASOS A SEGUIR
• Recepción del material: todo el material ingresado deberá ir acompañado de los datos personales del paciente, breve resumen de la Historia clínica, tipo y características, motivo del estudio solicitado y diagnóstico presuntivo.
• Fijación: permite preservar la estructura y funcion de los tejidos e impedir la autolisis.Consiste en sumergir el material en una solución de formol al 10 % en recipiente de boca ancha.
PASOS A SEGUIR
• Macroscopía: consiste en la inspección del material y su descripción, lo más semejante a la realidad, indicando los siguientes aspectos:
ÓRGANOS PARENQUIMATOSOS• Tamaño, color, forma, superficie externa• Peso• Consistencia• Hallazgos• Superficie de corte
PASOS A SEGUIR
ÓRGANOS HUECOS• Tamaño, forma, serosa• Peso• Pared (espesor, consistencia, hallazgos)• Mucosa (color, pliegues, aspecto, hallazgos)• Luz
PASOS A SEGUIR
• Existen protocolos de descripción macroscópica tipo.
• Se complementa con la selección de muestras representativas, lo cual también está pre-establecido en los protocolos
PASOS A SEGUIR
• Procesamiento histológico: Los pasos a seguir son: • Deshidratación: pases sucesivos en alcohol 96º, acetato (2) y Xilol (2).
Permite extraer el agua de los tejidos.• Baño e inclusión en parafina• Corte• Coloración
PASOS A SEGUIR
• Diagnóstico: en algunos casos se utilizan protocolos microscópicos o breves
descripciones microscópicas seguidas por uno o más diagnósticos que incluirán
datos de valor pronóstico y de orientación terapéutica.
INFORME ANATOMOPATOLÓGICO
Debe reunir las siguientes condiciones:
• Datos del paciente• Descripción macro y microscópica detallada pero concreta• Protocolo• Diagnóstico jerarquizado• Debe concretarse a los aspectos relacionados con el pronóstico y la terapéutica.
BIBLIOGRAFÍA• Besuschio, S.C.. Patología general. Ed. El Ateneo. Bs As .1992• Cooke, R. A. Stewart, B. Atlas de Anatomía Patológica. Ed.
Doyma.1989.• Cotran R.S.; Kumar, V.y Robbins, S.. Patología estructural y funcional.
4º Ed. 1990• “Guía de Métodos”. Sánchez Segura, M.; Nieman Y.;Cátedra de
Anatomía Patológica, Facultad de Medicina, Universidad Nacional de Tucumán, 2001.
CATEDRA DE CIRUGIA CABEZA Y CUELLO.
FACULTAD DE MEDICINA
CARRERA DE MEDICINA
INFORME ANATOMOPATOLÓGICO
Debe reunir las siguientes condiciones:
• Datos del paciente• Descripción macro y microscópica detallada pero concreta• Protocolo• Diagnóstico jerarquizado• Debe concretarse a los aspectos relacionados con el pronóstico y la terapéutica.
BIOPSIA
• Técnica de rutina: Hematoxilina- eosina• Coloraciones especiales: Giemsa (Helicobacter Pylori) Azul Alcian (Esófago de Barret) Ziehl Nielsen (BAAR) Rojo Congo (Amiloide) PAS (Hongos)
OTROS MÉTODOS
• Microscopía electronica• Inmunofluoresencia• Polarización• Inmunomarcación• Patología Molecular:Captura híbridaPCR
MICROSCOPÍA ELECTRÓNICA
-Alcanza una magnificación de 500.000 aumentos. -Utiliza un haz de electrones. -Se enfoca por campos magnéticos sobre pantalla
fluorescente o placas fotográficas. -Se usa por ej. en patología glomerular para detectar
cambios mínimos en podocitos,membranas basales,mesangio, etc.
INMUNOFLUORESCENCIA
•En tejidos sin fijación.
•Usa coloración fluorescente que debe registrarse microfotograficamente por que se degrada.
•Forma un trípode diagnóstico para las enfermedades glomerulares con la ME y los cortes de rutina con H-E, PAS y Tricrómico
Depósitos lineales de IgG en Riñón. Sindrome de Goodpasture. X 100
POLARIZACIÓN
•Identifica el carácter birrefringente de ciertos tipos de depósito fibrilar colágeno.
•Por ejemplo: amiloide
INMUNOMARCACIÓN
Consiste en la detección de antígenos existentes en células o tejidos
Utiliza anticuerpos monoclonales o policlonales copulados con una enzima (peroxidasa) que se unen con dicho antígeno.
Se visualiza con microscopía óptica mediante coloración marrón del núcleo o citoplasma.
INMUNOMARCACIÓN
Epiteliales: citoqueratina 7 y 20.Mesenquimáticos: vimentina, desmina.Linfoides: antígeno común leucocitario-SNC: S100, PGFA-HMB 45: melanoma
CANCER DE MAMA Inmunomarcación
Estrogénicos Progesterónicos
Catepsina DC-erb B-2 (HER2-neu)
PATOLOGÍA MOLECULAR
•Permite conocer el mecanismo por el cual se origina una neoplasia.
•Aporta información de valor pronóstico.•Predice en algunos casos la respuesta a la terapia.
VALOR PRONÓSTICO
• Cambio cromosómico primario: asociado a los mecanismos moleculares responsables de la neoplasia.
• Cambio cromosómico secundario: la enfermedad sigue un curso más agresivo, haciéndose más resistente a la terapia y difícil de obtener una remisión completa.
• Presencia o ausencia de células normales: La ausencia indica peor pronóstico.
• Presencia de dobles diminutos: confiere mayor resistencia a la terapia.
TÉCNICA DE HIBRIDIZACIÓN IN SITU (HIS)
•Permite detectar y localizar secuencias específicas de ADN o ARN.
•Requiere de una desnaturalización (rotura de los enlaces) de ADN de la muestra y de la sonda utilizada.
•Hibridación de los ADN de la muestra y la sonda por complementariedad de bases.
• Interpretación microscópica de acuerdo a la sonda utilizada.
TIPOS DE SONDA
• Centroméricas: marcan la región centromérica. Puede valorar la presencia o ausencia de alteraciones numéricas.
• De pintado cromosómico: abarcan todo el cromosoma. Para alteraciones numéricas y estructurales en metafase y translocaciones complejas.
• De secuencia única: marcan regiones cromosómicas muy concretas. Para alteraciones numéricas y estructurales en metafase e interfase.
NUEVAS TÉCNICAS DE HIS
• Multicolor FISH: 24 sondas de marcado cromosómico marcados con fluorescencia sobre metafase.
• Mulibanding FISH: alteración estructural dentro de un mismo cromosoma, utiliza células en división.
• Hibridación Genómica comparada (HGC): detecta cambios numéricos de secuencias de ADN en tumores de índice proliferativo bajo.
MICROARRAYS• Son soportes sólidos en los que moléculas de ADN de cadena simple se fijan y
permiten identificar por hibridación la expresión de una multitud de genes de
una muestra biológica.
• Aislamiento de ARN de tejido normal y de una muestra de referencia.
• Síntesis de ADN y marcaje con dos colorantes fluorescentes (Cy3 y Cy5).
• Hibridación sobre el array.
• La diferencia de expresión del ARN entre ambos tejidos se puede evaluar a
partir de la relación Cy3/Cy5 para cada gen.
• El análisis nos permite definir el patrón de expresión génica para cada
muestra concreta.
MICROARRAYS
Principales aplicaciones:
• Clasificación de neoplasias morfológicamente similares pero con comportamiento biológico heterogéneo.
• Evaluación del pronóstico.
• Respuesta al tratamiento.
PCR
• Preparación y dosaje de ácidos nucleicos (ADN-ARN) por reacción en cadena de polimerasa (PCR), técnica de amplificación in vitro de secuencias conocidas del genoma, que permite la detección de deleciones, mutaciones o rearreglos cromosómicos
PCR
NO OLVIDAR
• Conocer datos clínicos y exámenes complementarios del paciente.
• Seleccionar el tipo de biopsia a realizar según la patología y órgano afectado.
• Envío del material en óptimas condiciones y con los datos pertinentes.
• Fijación y procesamiento adecuados.
• Descripción macroscópica.
• Diagnósticos microscópicos.
• Aspectos relacionados con el pronóstico y terapéutica.
BIBLIOGRAFÍA
• Besuschio, S.C.. Patología general. Ed. El Ateneo. Bs As .1992• Cooke, R. A. Stewart, B. Atlas de Anatomía Patológica. Ed. Doyma.1989.• Cotran R.S.; Kumar, V.y Robbins, S.. Patología estructural y funcional. 4º Ed. 1990• XXII Congreso de la SEAP. Curso largo de Patología Molecular. 2005• XXII Congreso de la SEAP. Aplicaciones diagnósticas del FISH en Patología. 2005• XXII Congreso de la SEAP. Seminario del club de Inmunohistoquímica y Patología
Molecular. 2005
GRACIAS