Cariotipo, alteraciones cromosómicas numéricas de la cromatina. Este bandeo puede ser a su vez...
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Cariotipo, alteraciones
cromosómicas numéricas
Dra. Elena Alvarado León
Dpto de Morfología Humana UNT
Es el
ordenamiento de
los cromosomas
de acuerdo al
tamaño y a la
localización del
centrómero
CARIOTIPO
E
F
NOMENCLATURA; MUJER: 46,XX VARON: 46,XY
CLASIFICACION DE LOS CROMOSOMAS HUMANOS
Cromosomas grandes
Grupo A, (cromosomas 1, 2 y 3), 1 y 3meta; 2 submetacéntrico
Grupo B, (cromosomas 4 y 5), submetacéntricos
Cromosomas medianos
Grupo C, (cromosomas 7, 8, 9, 10, 11, 12 y además los
cromosomas X), submetacéntricos
Grupo D, (cromosomas 13, 14 y 15) acrocéntricos
Cromosomas pequeños
Grupo E, (cromosomas 16, 17 y 18) 16 meta; 17 y 18
submetacéntricos
Grupo F, (cromosomas 19 y 20) metacéntricos
Grupo G, (cromosomas 21, 22 y Y) acrocéntricos
¿CUÁNTAS METAFASES ESTUDIAR
Analizar al menos dos cultivos primarios (independientes) con técnicas de
bandas.
Contar 15 a 20 metafases. De estas al menos 6 han de ser analizadas y 2
han de ser cariotipadas. Se recomienda que el estudio sea realizado por dos
personas.
El tiempo de entrega de los
resultados para:
cariotipos en sangre: es de 4 días.
Cariotipos en líquido amniótico y
restos fetales: 10 días.
ENTREGA DE RESULTADOS
EN QUE CASOS SE RECOMIENDA
UN CARIOTIPO
-ESTERILIDAD DE CAUSA DESCONOCIDA.
-CONSANGUINIDAD.
-CROMOSOMOPATÍA FAMILIAR.
-INFERTILIDAD.
-UNO DE LOS PROGENITORES TIENE CROMOSOMOPATÍA.
-HIJO PORTADOR DE CROMOSOMOPATÍA.
•Diagnóstico.
•Seguimiento de la enfermedad:
desaparición del clon después
del tratamiento y/o remisión,
recaída, fase aguda.
APLICACIONES
IDIOGRAMARepresentación gráfica de
un cariotipo. Util para
resaltar alguna
característica importante
del cariotipo
TECNICAS DE BANDEO
Contribuyen a identificar los
cromosomas individuales y las
anomalías estructurales de los
cromosomas.
•Densidad de genes
•Tiempo de replicación
•Composición de bases
•Secuencias repetidas dispersas
•Organización genómica
•Conformación de la cromatina
Significado de las bandas
cromosómicas
Los bandeos dinámicos: Son técnicas que implican la incorporación de una base análoga, bromo-deoxi-uridina (BrdU), en el ADN durante la fase S.. Se denomina también bandeo de replicación debido a la relación existente entre el tiempo de incorporación del BrdU y el patrón de replicación.
Bandeo morfológico: se obtiene basándose en técnicas inherentes a la heterogeneidad de la cromatina.
Este bandeo puede ser a su vez clasificado en: técnicas de tinción diferencial, métodos de tinción selectiva, coloraciones con fluorocromos específicos aislados o combinados con colorantes no fluorescentes, y tinciones con anticuerpos fluorescentes.
Tipos
TECNICAS DE BANDEO DIFERENCIAL
Bandeo G
Bandeo R
TECNICAS DE BANDEO SELECTIVO
Bandeo C
Bandeo Nor
Bandeo T
C L A S I F I C A C I O N DE LOS
BANDEOS MORFOLOGICOS
Nomenclatura de bandeos morfológicos.
QFQ: Bandas Q por fluorecencia usando quinacrina: Regiones ricas en A-T.Se traduce en diferencias de intensidad fluorescente que se emite bajo la luzUV.
GTG: Bandas G con tripsina utilizando Giemsa. Coincide con el Q
RFA: Bandas R por fluorecencia usando naranja de acridina. Coincide conzonas ricas en G-C y a zonas de replicación temprana
CBG: Bandas C por hidróxido de bario utilizando Giemsa. Sirve para detectarheterocromatina constitutiva, derivándose que ésta se encuentra cerca delcentrómero y telómero y en mayor concentración en cromosomas sexuales.
RHG: Bandas R mediante desnaturalización térmica utilizando Giemsa.
THG: Bandas T por desnaturalización térmica empleando Giemsa.
Nomenclatura de bandeos dinámicos.
GBG: Bandas G por incorporación de BrdU utilizando Giemsa.
RBA: Bandas R por incorporación de BrdU empleando naranja deacridina.
RBG: Bandas R por incorporación de BrdU utilizando Giemsa.
GB-AAu: Bandas G por incorporación de BrdU empleandoanticuerpos específicos unidos a partículas de oro coloidal.
RB-AAu: Bandas R por incorporación de BrdU usando anticuerposespecíficos unidos a partículas de oro coloidal.
6p21.3
Xp21
Oscuras
Comparativamente ricas
en AT
Insensibles a la DNAsa
Condensación temprana
Replicación tardía
Baja densidad génica
Ricas en secuencias
repetidas
Claras
Comparativamente ricas
en GC
Sensibles a la DNAsa
Condensación tardía en
el ciclo celular
Replicación temprana
Alta densidad génica
Pobres en secuencias
repetidas
BANDAS G
BANDAS C
REVELA LA
HETEROCROMATINA
CONSTITUTIVA
CENTROMERICA, UBICADA
EN LOS CENTROMEROS,
UTILIZA SOLUCIONES
SALINOS DE BaOH; Y
COLOREA CON GIEMSA.
DAPI FISH DE INTERFASE
FISH DE SECUENCIA UNICA
OTRAS TECNICAS
DE COLORACION
DE CROMOSOMAS
FISH EN CENTROMEROS
CARIOTIPO ESPECTRAL
UTILIZA LA TECNICA
DE FISH
(HIBRIDACION IN SITU
POR
FLUORESCENCIA)
MARCANDO CADA
CROMOSOMA CON
SONDAS
RADIACTIVAS
ESPECIFICAS
MONOPLOIDÍA
Afectan al número normal de
dotaciones cromosómicas
Afectan al número de alguno
de los cromosomas
ALOPOLIPLOIDÍA
Incorporan un juego
de otra especieTRIPOLIDES (3n)
TETRAPLOIDES (4n)
POLIPLOIDES (Xn)
POLIPLOIDÍA
Existe un solo
cromosoma de
cada par (n).
Contienen más
de un juego
completo de
cromosomas.
EUPLOIDÍAS
SÍNDROME
TRIPLO X
Carecen de un
cromosoma de una
pareja de homólogos
SÍNDROME
DE TURNER
MONOSOMÍAS
Poseen un
cromosoma de más
SÍNDROME
DE DOWN
En autosomas
CARIOTIPO
XYY
SÍNDROME DE
KLINEFELTER
En cromosomas
sexuales
ANEUPLOIDÍAS
TRISOMÍAS
ALTERACIONES CROMOSOMICAS NUMERICAS
Alelo E4: en madres de individuos con síndrome Down
resultantes de errores en la meiosis I y no de la meiosis II.
Genes de la pre-senilina participan en la no disyunción
cromosómica en madres de individuos con síndrome Down
que presentaron errores en la meiosis II.
Localización nuclear de las pre-senilinas, en centrómeros
y cinetocoros,
ETIOLOGIA: NO DISYUNCION
Alteraciones numéricas: euploidías
Poliploidía: Presencia de varios grupos completos de cromosomas.
Origen: Polispermia o por no disyunción en la primera
división meiótica, afecta a aproximadamente el 2 % de las concepciones.
Elevadísima tasa de mortalidad intrauterina
Triploidía humana, 69 XXY
Alteraciones numéricas aneuploidía
Monosomías: pérdida de un
cromosoma
Trisomías: ganancia de un
cromosoma
Aneuploidía autosómica
monosomías: no se conocen trisomías: sólo de los cromosomas 13, 18 y 21
trisomía 13: síndrome de Patau (47, XX, +13)
Frecuencia: 1/10.000 nacidosFenotipo: mútiples anomalías,no alcanzan el mes de vida.Bajo peso, retraso mental, sordera, defectos cardíacos,microcefalia, labio leporino
Aneuploidía autosómica
trisomía 18: síndrome de Edwards (47, XY, +18)
Frecuencia: 1/6.000 nacidosFenotipo: mútiples anomalías,no alcanzan el mes de vida.Bajo peso, retraso mental,características faciales propias, problemas infecciosos,defectos cardíacos y respiratorios
Aneuploidía autosómica
trisomía 21: síndrome de Down (47, XX, +21)
Frecuencia: 1/ 800
Fenotipo: ojos oblicuos, retraso mental, cabeza ancha, cara redondeaday mas: obstrucción del duodeno, infecciones respiratorias, leucemias, defectos cardíacos, esterilidad, sordera, alteraciones oculares y Alzheimer juvenil.
Causas del síndrome de DownEl 94% son debidos a una no disyunción durante la 1ª división meiótica en los gametos que provienen de la madre. Son 47, XX, +21 ó 47, XY, +21El 2% son debidos a mosaicismo 47, XX, +21/ 46, XX El 4% son debidos a translocación del cromosoma 21 al 14
46, XX der(14;21)(q10;q10), +21
es muy importante determinar la causa en cada caso
Óvulo con dos cromosomas X
XYY XXX XXY
Hombre (Trisomía XYY)
Superhembra (Síndrome triplo X)
Hombre (Síndrome de Klinefelter)
Trisomías en los cromosomas sexuales
Espermatozoide con dos cromosomas Y
Óvulo normal
Espermatozoides normales
Aneuploidía de los cromosomas sexuales
Trisomía del X (47, XXX)Frecuencia: 1:1000Fenotipo: Benigno, aunque estériles.
La causa que explica la existencia de talla alta es la presencia de un cromosoma X extra.
Mosaicos 46,XX/47,XXX presentan una talla normal. Pueden sufrir de trastornos menstruales,
esterilidad y menopausia precoz.
Síndrome XYY (47. XYY)Frecuencia: 1:1000Fenotipo
Varones altos, con retraso mental y encarcelados, creándose un estereotipo para estos
individuos de tener alteraciones de conducta, con agresividad física y violencia . La talla alta en los varones 47,XYY está relacionada con la existencia
de genes extra de crecimiento en el cromosoma Y adicional:SHOX y GCY (gen del crecimiento específico del cromosoma Y)
Aneuploidía de los cromosomas sexuales
Síndrome de Klinefelter (47, XXY)Frecuencia 1:1000
Causas 50%
50%
Variantes; (48, XXYY) (48, XXXY) (48, XXXY) (49, XXXXY)FenotipoAl nacer, apariencia normal, pero el defecto comienza anotarse cuando éste llega a la pubertad y las característicassexualessecundarias no se desarrollan o lo hacen de manera tardía, yse presentancambios en los testículos que producen esterilidad en lamayoría de los afectados.
Frecuencia:1/4.000 nacidas vivasFenotipo: baja estatura, cuello ancho,
infantilismo sexual, defectos cardiacos y renales, no retraso mental.y problemas en la percepción espacial.
50% son 45, X030% son mosaicos 46, XX/45, X u otra alteración
20% son 46, XX con anomalías en el cromosoma X
Aneuploidía de los cromosomas sexuales
Monosomía del cromosoma X: Síndrome de Turner (45, X)
shox (Xp22, Yp11) codifica un factor de transcripción, cuya
monodosis provoca la talla reducida.
Genes implicados