Congreso mundial de genética 11SEP

Conocer los pasos para realizar la construcción de una nueva

molécula de ADN para combinar la información genética de 1 o

más especies

Construcción de una molécula de ADN recombinante

Situación problemática

• ¿QUÉ ES EL ADN RECOMBINANTE?• ¿QUE ES UN VECTOR?• ¿PARA QUÉ SE PRODUCEN MOLÉCULAS

DE ADN RECOMBINANTE?• ¿QUÉ ES UN PLÁSMIDO?• ¿QUÉ SON LAS ENZIMAS DE

RESTRICCIÓN? • EXPLICA LOS PASOS EN FORMA DE

DIAGRAMA DE FLUJO

MATERIAL:1 Tijera (representa la enzima de restricción) 4 cajas plásticas con tapa (representan las células a las cuales le vamos a introducir el gene de interés) 4 Limpia pipas (alambres felpados) de 3 colores diferentes: - un fragmento pequeño amarillo de una pulgada (representa el gen de interés) - cuatro fragmentos color rojo de una pulgada cada uno (secuencia reconocida por la enzima de restricción) -1 limpia pipas grande de color azul (representa el plásmido)

MÉTODO• 1. Obtener el gen deseado. Este ADN se

conoce como el ADN pasajero. Se • representa por el fragmento amarillo

pequeño. • 2. Se prepara el ADN pasajero: a los dos

extremos del fragmento de ADN • pasajero se le coloca la secuencia de

nucleótidos que reconoce la enzima de • restricción. (Con la tijera se corta por la mitad

uno de los fragmentos rojos. Cada • mitad que se genera se le añade a los

extremos del fragmento amarillo) • 3. El ADN pasajero es unido al plásmido o

vector. Para esto el plásmido que es • circular debe tener una secuencia que

reconoce la enzima de restricción que • estamos usando. Se abre el plásmido con

esta enzima y se le añade el ADN • pasajero. Por complementaridad de las

nucleotidos del ADN los extremos de • uno se unirán al otro. El resultado es una

molécula de ADN recombinante. (El • fragmento azul se une por un extremo al

fragmento rojo y se forma un círculo. El • plásmido constará de una región roja que

reconoce la tijera. • La tijera corta en el centro de la región roja.

Se unen las regiones rojas del • plásmido con el del ADN pasajero. La

molécula quedará como un círculo de • color azul---rojo—amarillo—rojo--azul)

• 4. Las moléculas recombinantes son introducidas a la célula huésped (un

• proceso llamado transformación). Esto puede hacerse con un choque de

• temperatura o utilizando una pistola genética o por microinyección. (Colocamos

• las cuatro cajas en el piso y tratamos de encestar nuestra molécula de ADN

• recombinante). • 5. Se necesita la identificación de las

célula con el ADN recombinante. Muchos • de estos plásmidos poseen genes que

otorgan resistencia antibióticos. Las • bacterias suelen crecerse en medio de

cultivo con antibiótico. De esta forma las • células transformadas (que poseen el

plásmido con el ADN recombinante) son • las que sobreviven. Las que no poseen

el plásmido modificado genéticamente • mueren en presencia del antibiótico. La

caja que obtenga el plásmido con el • ADN recombinante se le coloca la tapa

que representa la protección del • antibiótico. • 6. La colonia de células que contienen el

gen de interés es escogida o • separada del resto de las célula.

MATERIAL DE LAB.• 150 GR DE CHÍCHARO

SECO O CONGELADO ( NO ENLATADO)

• JABÓN DE TRASTOS LÍQUIDO

• ABLANDADOR DE CARNE

• 1 LICUADORA CON VASO

• 1 COLADERA DE PLÁSTICO

• POR PERSONA

• FOTOCOPIA DE LA PRÁCTICA

• PREREPORTE• CONTESTAR

CUESTIONARIO