BIOPROCESOS II- CURVA DE CALIBRADO PARA AZUCARES REDUCTORES (DNS)

I. OBJETIVOS-Conocer la preparacin y uso adecuada del reactivo DNS (Acido 3,5 dinitrosalicilico).-Construccin de una curva de calibrado para la determinacin de azcares reductores por el mtodo del DNS. II. MARCO TERICO Azucares ReductoresFrank Bradley Armstrong, Thomas Peter Bennett dijeron: La mayora de disacridos son azucares reductores porque uno de sus dos carbonos anomricos (grupo aldehdo o cetona reductor) de sus estructuras no est formando enlace glucosidico. Una excepcin es la sacarosa (azcar no reductor) que, tiene los dos carbonos anomricos formando parte del enlace que une los dos carbonos monosacridos.En el libro Diccionario de la Qumica se manifiesta diciendo: Azucares reductores: Monosacridos o disacridos que puede ceder electrones a otras molculas y puede, por tanto, actuar como agente reductor. Azucares no reductores: Azcares que no son capaces de ceder electrones a otras molculas y, por tanto, no pueden actuar como agentes reductores. Acido 3,5 dinitrosalicilico (DNS)El Ing. Qumico Ramn Mndez, de la Universidad Autnoma de Mxico, menciona que: Para la determinacin de azucares reductores se emple el mtodo colorimtrico del DNS. Este mtodo se basa en que los azucares reductores reaccionan con el cido 3,5-dinitrosalicilico, reducindolo bajos ciertos condiciones y generando un color rojizo-amarronado. Curva de CalibracinLa Ing. Bioqumica Silvia Quesada Mora expresa, en su libro: Si se diluye sucesivamente una sustancia coloreada y, de cada dilucin, se mide el valor de absorbancia a una longitud de onda optima, al representar grficamente estos valores (A vs B), se obtiene una curva de calibracin de la sustancia. A partir de esta, es posible conocer la concentracin de una muestra; para ello, se mide su absorbancia a la misma longitud de onda y, con base en ese valor, se interpola la concentracin. EspectrofotometraCarmen Silva Garca Y Jos Garca Bermejo mencionan en su libro: La espectrofotometra de absorcin consiste en la medida de la radiacin que llega a un detector tras producirse un fenmeno de absorcin de luz por parte de una sustancia absorvente.Harold Frederic Walton, Jorge Reyes expresan: Un modo de aumentar la exactitud de las determinaciones fotomtricas, especialmente en los casos en que las soluciones presentan fuerte absorbancia, consiste en comparar la intensidad de la luz que pasa por la solucin con la intensidad de un haz de luz de la misma lmpara o foco luminoso, que atraviesa una segunda solucin cuya concentracin es conocida exactamente y que es un poco menor que la de la muestra que se determina.

RESULTADOSCurva de Calibrado para Glucosa Se trabaj con los siguientes datos:

TubosAgua destiladaSolucin madre[C] g/LAbs 540 nm

150 ml.00

241ml.0.040.1222

332ml.0.080.2468

423ml.0.120.4126

514ml.0.160.5287

605ml.0.20.6966

CONCLUSIONES Se desarroll con eficacia un procedimiento para determinar la concentracin de (azcares reductores) por el mtodo del cido 3,5 dinitro saliclico (DNS); la determinacin de estos azcares se realiz para obtener una curva de calibracin, con este reactivo (DNS) que tiene capacidad de oxidar a los azcares reductores dando resultados colorimtricos que sepueden medir con una longitud de onda de 540nm en el espectrofotmetro. Las grficas muestran resultados satisfactorios ya que el valor de obtenidos tanto en la prueba de azcares para Glucosa y fructuosa fueron 0.997 y . respectivamente. REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS Frank Bradley Armstrong, Thomas Peter Bennett (1982), Bioqumica. Silvia Quesada Mora (2007), Manual de experimentos de laboratorio para bioqumica. Carmen Silva Garca, Jos Garca Bermejo, Luis Del Castillo Torres, Jos Manuel Ania Palacio Y Domingo Gmez Martnez (2006), Tcnicos Especialistas de Laboratorio del servicio Vasco de Salud. Jos Garca Bermejo, Francisca Colom Valiente Y Juan Antonio Jaramillo Snchez (2003), Manual Del Auxiliar de Laboratorio. Carmen Silva Garca Y Jos Garca Bermejo (2006), Tcnico Especialista en Laboratorio de Atencin Primaria Del Instituto Cataln de la Salud. Harold Frederic Walton y Jorge Reyes (1983), Anlisis qumica e instrumental moderno. Ramn Mndez Pampn (2007), Produccin limpia en la industria de curtiembre.