ENZIMAS RECOP 2011
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Enzimas
Dr. Andres Aguirre Cruz
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g z
CONTENIDO
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Enzimas
² Catalizadores
² Clasificación
² Tipo de reacción
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Enzimas① Oxidorreductasas② Trasfereasas③ Hidrolasas④ Liasas⑤ Isomerasas
⑥ Ligasas
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Enzimas² Grupos prostéticos
² Cofactores
² Coenzimas
Función importante
M o l é c u l a s n
o p r o t e i c a s
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Grupos prostéticos
Son molécula de origen no proteicocon actividad biológica.
Fosfato de piridoxal (B6)Hemoglobina
Globina (proteína)Grupo hemo
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Enzimas
Sitio activo
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Mecanismo de Ping pong para
la trasnominaciónα-cetoácido
+aminoácidoNH3
NH3
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Modelo de adaptación inducidadel sitio activo de una Liasa
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Estructura del NAD+ y NADP+
o NAD+, R = H
o NADP+, R =PO2−3
Nicotinamida
Adenina
Dinucleótido
Nicotinamida
Adenina
Dinucleótido
Fosfato
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Sustrato dipeptídico
Glisil tirosina
Carboxipeptidasa A
Sitio activo
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MECANISMOS DE
CATÁLISIS ENZIMÁTICA
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Las enzimas
v Se emplean en muchos mecanismos.
v Facilitar la catálisis.
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La catálisis
Es el proceso por el cual se aumenta o disminuye la
velocidad de una reacción química, debido a la
participación de una sustancia llamada catalizador .
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Mecanismos de reacción
① Catálisis por proximidad
② Catálisis acido básica
③ Catálisis por tensión
④ Catálisis covalente
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Catálisis mediantefructosa −2,6− bifosfatasa
Sustrato
① Estabilizar carga delsustrato.
② Ataque del nucleófilo al g.fosforilo−enzima.
③ Ataque del nucleófilo delH2O.Glu 327 actúa como una
b a s e è f o s f o r oinorgánico.
④ Liberación de ortofosfato inorgánico a partir de Arg257 y Arg 307.
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Secuencia de aminoácidos
² Vecindad de los sitios catalíticos.
² Proteasas bobinas.
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División del DNA
catalizado por unaendonucleasa de restricción
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Espectros de absorción
NADH
NAD+
NADP+
NADPH
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Valoración de la enzimática acopladapara la actividad de hexosinasa
Enzimas• Transferir • Grupo fosfato
• Transferir • Grupo fosfato
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Glucosa-6-fosfato deshidrogenasa (G6PD)
v Cataliza la 1a reacción
v Vía de la pentosa fosfato
v Ruta metabólica que provee
v NADPH
v Pentosas
v Para la síntesis de ácidos nucleicos.
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Principales enzimas séricasutilizadas en el diagnostico clínico
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Modelo Normal Patológico de isozimadel Lactato deshidrogenesa (LDH)
• LDH• Separada del suero• Visualizadas• Electroforesis en G.
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Electroferograma de las isozimsa
de lactato deshidrogenasa
Isozimas especificas
Ataque la miocardio
Normal
Enfermedad apática
Suero
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Electroforesis en Gel
Es un grupo de técnicas empleadas para separar moléculas basándose en propiedades como eltamaño, la forma o el punto isoeléctrico.
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Electroforesis en Gel
v Propósitos analíticos
v Purificar parcialmente moléculas
v Antes de aplicar
v Espectrometría de masas
v PCR (reacción en cadena de la polimerasa)
v Clonación o secuenciación de ADN.
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Uso de las proteínas de fusión
Glutatión−s−trasnferasa(GST)
§ Purificar § Proteínas recombinantes§ GSH, Glutatión