Materia: Biologa del desarrolloPRCTICA No. 1ESPERMATOBIOSCOPIA

Tabla de contenido Fundamento Hiptesis Gametognesis Marco terico Espermatognesis Morfologa de los espermatozoides Nuevos valores para el espermiograma OMS 2010 Alteraciones morfolgicas del espermatozoide Pruebas bioqumicas a muestra de semen Anlisis macroscpicos El factor cervical en esterilidad Infertilidad masculina Desarrollo de la prctica Material Material biolgico Procedimiento Observaciones Conclusiones: Bibliografa

FundamentoUno de los dilemas que afrontan los especialistas en biologa de la reproduccin humana, es la dificultad para evaluar adecuadamente la capacidad frtil de los gametos. Hay que reconocer que en los ltimos aos se han producido progresos importantes en el rea de androloga diagnstica, al incorporar pruebas ms precisas que los parmetros tradicionales de estudio del semen. El resultado de la aplicacin de test, permite un conocimiento adicional de los mecanismos involucrados en la infertilidad masculina, especialmente en aquellos smenes con caractersticas convencionales normales pero con capacidad fertilizante reducida.[endnoteRef:1] [1: Manual de prcticas de biologa del desarrollo; coordinacin mdicos cirujano; Agosto 2015, UAEM ]

HiptesisAl observar con el microscopio podemos observar claramente las partes de un espermatozoide, su motilidad y hacer diversas pruebas con la muestra de semenMarco tericoGametognesis Es la formacin de gametos por medio de la Meiosis a partir de clulas germinales. Mediante este proceso el material gentico de cada clula se reduce a la mitad. As, el nmero de cromosomas que existe en las clulas germinales se reduce de diploide (doble) a haploide (nico). Si el proceso tiene como resultado producir espermatozoides se le denomina espermatognesisEspermatognesis La espermatognesis es el proceso mediante el cual se desarrollan los gametos masculinos. Inicia en la adolescencia y se lleva a cabo en los tbulos seminferos.. Las clulas de Sertoli se encuentran tambin en los tbulos seminferos y se encargan de dar sostn y nutrir a los gametos en diferenciacin, de igual manera forman la barrera hematotesticular, necesaria para proveer un sitio de inmunoprivilegio para los gametos. Los eventos ms importantes de ste proceso sern nombrados a continuacin: Reduccin del tamao nuclear. Condensacin del material gentico por la sustitucin de las histonas por protaminas. Formacin de la vescula acrosmica a partir del aparato de golgi. Crece un flagelo a partir de la regin centriolar. Las mitocondrias se acomodan en la parte proximal del flagelo. El citoplasma se reduce y se separa formando el cuerpo residual.[endnoteRef:2] [2: Bruce M. Carlson. Embriologa Humana y Biologa del Desarrollo. Ed. Mosby. Tercera edicin.]

Morfologa de los espermatozoidesEl espermatozoide normal tiene: Una Cabeza ovalada de cerca de 5m de largo y 3m de ancho. Una cola flagelar larga que mide alrededor de 45 m de longitud. El acrosoma debe abarcar alrededor de la mitad de la cabeza y cubrir cerca de los dos tercios del ncleo en el extremo apical de la cabeza. El cuello une la cabeza con la cola y el segmento intermedio, esta es la parte ms gruesa de la cola porque est rodeada por una vaina mitocondrial que produce la energa requerida para la movilidad de la cola. [endnoteRef:3] [3: Embriologia clnica, Keith L. Moore, McGraw- Hill Interamcaneria, pp 33- 35]

Nuevos valores para el espermiograma OMS 2010[endnoteRef:4] [4: http://www.scielo.cl/pdf/rmc/v139n4/art20.pdf Luis Sarabia1, Mara Jos Munuce, Presidente del Programa Latinoamericano para la Estandarizacin del Anlisis Seminal (PLEAS), Universidad de Chile. Santiago de Chile.]

Alteraciones morfolgicas del espermatozoideLos defectos de nacimiento pueden deberse a anomalas en el numero o en la estructura de los cromosomas, pero tambin de la mutacin de un nico gen. Aproximadamente, el 7% de los principales defectos congnitos se deben a anomalas cromosmicas, mientras que un 8% se debe a una mutacin gentica.Alteraciones numricasA nivel de cabeza Espermatozoides sin cabeza, a nucleados, en cabeza de alfiler o decapitados, se trata de espermatozoides acfalos, por lo tanto sin su material gentico, Estos espermatozoides cuando se observan in vitro pueden presentar movilidad progresiva Espermatozoides bicfalos: espermatozoides con dos cabezas y un solo flagelo, normalmente la pieza intermedia aparece engrosada.A nivel de la cola o flagelo Espermatozoides sin flagelo, se observan solamente cabezas de espermatozoides aisladas con ausencia total de cola. Espermatozoides con flagelos mltiples, anomala de estructura que impide la direccin y movimiento del espermatozoide.Alteraciones de formaA nivel de cabeza Espermatozoides con cabezas alargadas o tapering, en este caso la cabeza de los espermatozoides posee la forma de una elipse en la que existe un marcado predominio del eje longitudinal (5 a 6 m) por el eje transversal (2 a 3 m) Espermatozoides con cabezas redondas, a diferencia del caso anterior, aqu ambos ejes tienden a ser similares lo que le da un aspecto esferoide.A nivel de la pieza de conexin: Espermatozoides con implantacin axial anmala del flagelo. En estos casos observamos una estrangulacin a nivel de la pieza intermedia. Espermatozoides con pieza intermedia marcadamente engrosada, en ocasiones se observan espermatozoides cuya pieza intermedia puede incluso superar el tamao ceflicoA nivel de la cola o flagelo: Espermatozoides con enrollamiento total de la cola con o sin restos citoplasmticos englobndola. Espermatozoides con enrollamiento parcial de la cola. Espermatozoides con flagelos truncado, los flagelos tienen en la parte principal angulaciones de diferentes grados[endnoteRef:5] [5: http://embriomon.blogspot.mx/2014/02/morfologiaespermatica_25.html;EQUIPOEMBRIO;2014]

Pruebas bioqumicas a muestra de semenEl estudio del lquido seminal, desde el punto de vista bioqumico, es una determinacin analtico-clnica de gran importancia en los estudios de infertilidad en el hombre. Un anlisis seminal completo nos informa sobre las propiedades del semen, tanto de la produccin de espermatozoides como de la funcin de las glndulas sexuales accesorias.Los estudios que se realizan al semen con el propsito de diagnosticar la presencia de algn problema de fertilidad son los siguientes: Espermiograma Espermocultivo Recuperacin de espermatozoides motiles Prueba de la viabilidad Prueba de la integridad del acrosoma Determinacin de anticuerpos anti espermticosCondiciones que debe tener el paciente para la realizacin de un espermiograma son las siguientes: Tener de 3 a 5 das de abstinencia sexual : Ideal: 3 das Minimo.2 das Mximo: 6 das Tener de 3 a 5 das de abstinencia alcohlica Sin fiebre, gripe, ni ningn proceso viral o bacteriano. Tomar la muestra por masturbacin en un colector estril. Entregar la muestra en el laboratorio en un periodo no mayor a 1 hora de haber sido tomada la muestra.El semen se considera anormal cuando tiene: Ausencia de espermatozoides: Azoospermia Disminucin del nmero de espermatozoides: Oligozoospermia Disminucin de la movilidad: Astenozoospermia Alteracin de la morfologa: Teratozoospermia Alteracin de los tres parmetros: OligoastenoteratozoospermiaAnlisis macroscpicos

Prctica no. 1Espermatobioscopia2

ASPECTO LICUEFACCION VOLUMEN COLOR pH CONSISTENCIA

Anlisis microscpicos MotilidadSe agrega una pequea cantidad de semen (menos de 10 L) en un portaobjeto y se procede a cubrirlo con un cubreobjetos, luego se deja estabilizar la muestra por 1 min. Antes de ser estudiada.a-motilidad progresiva rpida.27%b- motilidad progresiva lenta..15%c- motilidad no progresiva.48%d- inmvil20%Recuento de los espermatozoidesSe prepara una dilucin 1/10, es decir, 1 ml de muestra y 9 ml de la solucin diluyente. Luego con la muestra diluida se llena el hematimetro y se deja reposar por 5 min. Se hace el conteo de espermatozoides completos con el objetivo de 100x. MorfologaSe utilizan extendidos teidos con diferentes mtodos: Giemsa, tincin de Bryan-leishman o tincin de shorr. Viabilidad[endnoteRef:6] [6: Informe de Control de Calidad; Universidad de oriente, Ncleo bolvar; Escuela de ciencias de la salud; Departamento de Bioanalisis, rea: bioqumica clnica]

El factor cervical en esterilidad.En sentido amplio se entiende por factor cervical en esterilidad cualquier alteracin anatmica o funcional del crvix que pueda impedir o dificultar el ascenso espermtico hacia el lugar de la fecundacin. Dentro de las funciones que desempea el crvix podemos destacar: Receptibilidad del esperma cercano a la ovulacin e inhibicin de la entrada en fecha no frtil. Proteccin del esperma del medio hostil de la vagina. Soporte de requerimientos energticos para la motilidad espermtica. Accin de filtro de los espermas anormales. Almacenaje de espermas para mantener el ascenso al tracto reproductor superior. Participacin en el proceso de capacitacin espermtica.Las propiedades fisicoqumicas del Moco cervical son: PH: en la fase preovulatoria es de 7,3 a 8. La cristalizacin La viscosidad La filancia CelularidadFunciones fisiolgica del moco cervical: Funcin de reserva: la alcalinidad del moco cervical preovulatorio representa un refugio vital para los espermatozoides. Mantenimiento y capacitacin de los espermatozoides: la fase lquida proporciona aportes energticos: hidratos de carbono, hexosaminas y oxgeno. Limpieza: a mitad del ciclo, la gravedad y el movimiento de los cilios crean un flujo descendente que drena hacia la vagina las bacterias, los leucocitos y los espermatozoides muertos. Proteccin de los espermatozoides frente a la fagocitosis por los leucocitos: drenados por el flujo descendente y empujado por el movimiento de los cilios, los leucocitos se alejan de las paredes y forman una columna en el centro del conducto endocervical. Barrera qumica contra la infeccin: es a mitad del ciclo cuando la actividad antibacteriana es ms eficaz, tanto la de la lisozima como de la lactoferrina y la de la peroxidasa.[endnoteRef:7] [7: Manual de Laboratorio de la OMS para el examen del semen humano y de la interaccin entre el semen y el moco cervical, Editorial panamericana, 2010; PDF]

Infertilidad masculinaPuede deberse a: Una disminucin de la cantidad de espermatozoides. Espermatozoides que resultan bloqueados y no pueden ser liberados. Defectos en los espermatozoides. La infertilidad masculina puede ser causada por: Defectos congnitos Tratamientos para el cncer, por ejemplo quimioterapia y radiacin Exposicin a mucho calor durante perodos prolongados Consumo compulsivo de alcohol, de marihuana o de cocana Desequilibrio hormonal Impotencia Infeccin Consumo de ciertos frmacos, como cimetidina, espironolactona y nitrofurantoina Obesidad Edad avanzada Eyaculacin retrgrada Cicatrizacin a raz de enfermedades de transmisin sexual, lesin o ciruga Tabaquismo Toxinas en el medioambiente Vasectoma o falla de la vasovasostoma[endnoteRef:8] [8: American Society for Reproductive Medicine. Diagnostic evaluation of the infertile female: a committee opinion.Fertil Steril; Traduccin y localizacin realizada por: DrTango, Inc; actualizacin 2014]

Desarrollo de la prctica Material Porta objetos de cristal Cubre objetos de crista Azul de metileno Microscopio fotnico/luz Contenedor recolector de muestra

Material biolgico Muestra de semenProcedimiento1. En un porta objetos, coloque una gota de muestra de semen y cbralo con un cubre objetos otro porta objetos coloque una gota de muestra de semen y aplique una gota de colorante azul de metileno, cubra con un cubre objetos y observe al microscopio. Realice sus anotaciones2. En otro porta objetos coloque una gota de muestra de semen y aplique una gota de colorante azul de metileno, cubra con un cubre objetos y observe al microscopio. Realice sus anotaciones. Observaciones

Conclusiones:Se pudieron apreciar las partes de un espermatozoide adems de poder realizar las pruebas macroscpicas sin ningn problema.

BIBLIOGRAFA