Bacteriófagos como alternativa a los antimicrobianosSeminarios Yachay Tech

31 de julio de 2015

Defunciones del Viernes 8 de agosto de 1892 en Guayaquil

Ángela García, 18 días, fiebre

María Herrera, 7 meses, fiebre

Juan torla, 5 meses, fiebre

Carmelina Aboleda, 9 días, fiebre

Hermano Hilario, 19 años, fiebre

Manuela Reyes, 60 años, pulmonía

José M. Surita, 35 años, pulmonía

Lucas Llerena, 60 años, vejez

¿Cómo era el mundo preantibiótico?

Las defunciones de niños eran tan frecuentes que parte del trabajo de los fotógrafos de entonces era retratarlos

Felix d'Herelle descubrió en 1917 un microbio invisible, antagónico del

bacilo de disentería"

Wollman 1883-1943D'Herelle 1873-1949

Giorgi Eliava fundó en 1923 el primer instituto dedicado a la terapia con fagos en Tiblisi, Rep. de Georgia, 20 años más tarde

era asesinado por la KGB

Eliava 1892-1937

El descubrimiento de la penicilina eclipsó el desarrollo de la fagoterapia

La era antibiótica

Los blancos para los antibióticos son limitados

1

2

3

Cada vez hay menos antibióticos aprobados por la FDA y la EMA

¿Por qué aparecen resistencias a los antibióticos?

Mutación

Transferencia horizontal

El ADN cuando se transmite de generación en generación acumula errores que pueden dar lugar

a mutaciones que confieran resistencia a los antibióticos. Además las bacterias son capaces

de intercambiarse genes

Comparación de los antibióticos vendidos para uso humano y para uso en granjas

Era post-antibiótica

El abuso de los antibióticos nos ha llevado a la era postantibiótica

¿Cómo será el mundo sin antibióticos?

Las cirugías volverán a ser operaciones de alto riesgo

Le diremos adios a los trasplantes de órganos.

El periodo de jubilación volverá a acortarse. Antes de los antibióticos, una persona de 60 años que cogiese una neumonía tenía más probabilidades de morir que de superarla.

Sin antibióticos la mortalidad asociada a los partos volvería a ser elevada, así como los abortos.

La mortalidad de las personas encamadas se elevaría. Sin antibióticos sería prácticamente imposible curar las úlceras de los encamados, infecciones urinarias o de pulmón.

Enfermedades infantiles como la neumonía, escarlatina o fiebres reumáticas volverían de nuevo a diezmar a los menores de dos años.

¿Jugamos a la ruleta rusa? O ¿Cómo no aburrirte si estás

inmunodeprimido en un hospital?16%

33%

En 2011 Escherichia coli enterohemorrágica (EHEC) que produjo la muerte de al menos 32 personas en Alemania

y más de un millar de infectados

Otras opciones aparte de los antibióticos

1. Higiene

2. Vacunas

3. Terapia con fagos

4. Enzibióticos

5. Bacteriocinas

6. Péptidos antimicrobianos MRSA in 2007.(www.earss.rivm.nl)

Desde 1923 hasta hoy los georgianos han mantenido el Instituto Eliava a pesar del colapso postsoviético y de las dos guerras civiles sufridas

4.5 veces menos población 4 veces menos territorio 2.5 veces menos PIB per cápita

Los bacteriófagos y los virus de mamífero tienen formas distintas de entrar en la célula

Los fagos “inyectan” su ADN en unas células que tienen una presión interna de

entre 5-25 atmósferas

Los fagos son específicos mientras que los antibióticos son de amplio

espectro

Los fagos son específicos de un tipo o de varios tipos de bacterias

Los antibióticos son de amplio espectro, matan a todas las bacterias

Los fagos son estructuras altamente complejas comparadas con una molécula de antibiótico y

por esa razón su farmacocinética es tan complicada

De media hay 50 millones de fagos en 1 ml de agua de más. En muestras de suelo las cantidades son más

elevadas. Se calcula que existen 1031 fagos en el mundo

Genes para caracterizar patotipos de E. coli AB resist

Sta Elt Eae DaaC Vt1 Vt2 Agg Ipa-H Amp Nitrofuran Trimeto/Sulfam Cipro Levo

1 - - + - + - - - Enterohemorragica

2 - - + - + + - - Enterohemorragica

3 - - + - + - - - Enterohemorragica

4 - - + - + + - - Enterohemorragica

5 - - + - + + - - Enterohemorragica

6 - - + - + - - - Enterohemorragica +

7 - - + - + - - - Enterohemorragica +

8 - - + - - - - - EPEC

9 - - + - - - - - EPEC

10 - - + + - - - - Difuso-Adherente +

11 - - + - - - - - EPEC

12 - - + - - - - - EPEC

13 - - + - - - - - EPEC + + + +

14 - - + - - - - - EPEC + + + + +

15 - - + - - - - - EPEC +

16 - - + - - - - - EPEC

17 - - + - - - - - enterobacteria

18 - - + + - - - - Difuso-Adherente

19 - - + + - - - - Difuso-Adherente +

20 - - + - - - - - EPEC

21 - - + - - - - - EPEC +

22 - - + + - - - - Difuso-Adherente

23 - - + - - - - - EPEC

24 - - + - - - - - EPEC +

25 - - - - - - - - Enterobacteria

26 - - - + - - - - Difuso-Adherente

Aislamos 18 fagos distintos frente a 12 cepas de E. Coli enteropatogénicas del Ecuador

1 2 3 4 5 6 10 14 15 21 22 25 264Q1 - + - +++ - - - + - ++4Q2 - - +++ - - - - - -4Q3 - +/- - +++ - - +/- - - +4Q13 - + - +++ - - - - - +5Q1 - + + +++ - - - - - +5Q5 - + +/- +++ + +++ - - - ++ ++5Q6 - +/- +++ ++ +++ - +++ - - ++5Q7 - + - +++ - ++ - - - ++ +/-5Q9 - ++ - +++ ++ +++ +++ - - -5Q13 - - +/- +++ ++ +++ - + - +++ +5Q15 +/- - - +++ - +++ - + - +++ +/-5Q16 +/- - +/- +++ +++ ++ - - - +++ +/-5Q18 - ++ +/- +++ + ++ +++ +++ - +++ ++5Q19 - + + +++ - +++ ++ - ++ +5Q20 + - - +++ - +++ - + - ++ +/-5Q24 + ++ - +++ - ++ + - + -6Q1 ++ - ++ +++ - - ++ - -6Q7 +++ - ++ +++ - - +++ - -

Absorbancia de los cultivos de E. coli enteropatogénica #14 multirresistente a los antibióticos, infectada con el fago 5Q18 (línea roja) o no (línea azul). El

cultivo infectado lo fue a los 150 min. (flecha) con una concentración de fagos de 109 UFC/ml, este inóculo supone un MOI = 2,5. Los datos reflejan el promedio de tres experimentos independientes, la barra de error representa

la desviación estándar de esos experimentos

Tiempo en minutos

Abs600nm

0 100 200 300 400 500 6000

0.5

1

1.5

2

2.5

3

Reducción de las unidades formadoras de colonias de la bacteria E. coli enteropatógena #14 multirresistente a

los antibióticos en salchicha tratadas con el fago 5Q18 y con una concentración bactericida del 2% de ácido láctico. Se observa una reducción en el número de bacterias de 1.0 log10 con el fago ligeramente más

efectiva que la reducción observada por el ácido láctico, un producto químico empleado en la industria cárnica.

Control Water Lactic acid 2% 5Q181E+4

1E+5

1E+6

Control Agua Ácido láctico Fago 5Q5 Fago 5Q13100.0E+2

100.0E+3

100.0E+4

0 2 4 6 8 10 120

0.5

1

1.5

2

2.5

E. coli

5Q5

5Q13

1.0 log10 de reducción de E. coli enterohemorrágica con

los fagos 5Q5 y 5Q13

Inhibición del crecimiento de la cepa #5 de E. coli

enterohemorrágica a 25ºC en medio líquido (LEM). Los

fagos fueron añadido a las dos horas en una

concentración de 109 PFU/ml

Tiempo en horas

Den

sida

d óp

tica

a 60

0 nm

Las fotografías de microscopía electrónica de los fagos nos muestran un fago de tallo largo no contráctil lo que nos permite clasificarlo

como perteneciente al orden Caudoviral familia Siphoviridae.

5Q5

5Q13

XbaI

El País ha publicado una entrevista al científico Peter Lawrence que es oro puro

"Nos hemos vuelto la gallina de los huevos de oro. En las universidades británicas, se espera de los científicos que traigan dinero a la institución para pagar al personal administrativo".

“los administradores, los gestores políticos, los funcionarios adventicios como los de recursos humanos, relaciones públicas y especialistas bibliométricos, han ganado seguridad, confianza, tiempo y salarios, y han ganado poder sobre los científicos”

“solicitar dinero se ha convertido en la principal ocupación de los investigadores”

“tienen que confeccionar sus publicaciones, hacer a medida su trabajo para que los artículos encajen en los parámetros bibliométricos adecuados”

“En una estancia posdoctoral típica de tres años, los científicos jóvenes tienen que pasar la mitad de su tiempo intentando negociar su futuro, entonces ¿cuándo investigan?”

Los fagos pueden mejorar la seguridad de los alimentos

OmniLytics Announces USDA/FSIS Allowance of Bacteriophage Treatment of Salmonella on Poultry

PhagoBioDerm: un producto para tratar infecciones bacterianas multirresistentes en quemaduras producido por el Instituto Eliava

Bacteriofagos en PhagoBioDerm™ ayudan a limpiar la herida de S. aureus Multirresistente a antibióticos. Fuente: Intl. J. Dermatology, 2002, 41: 453-458

La composición es este producto es: Ciprofloxacina (un antibiótico), benzocaína (un anestésico), los fagos, α-Quimotripsina (proteasa que destruye el tejido necrótico) y por último el polímero biodegradable.

Klebsiella convierte la melamina a ácido cianúrico. De los 300.000 niños 6 murieron por fallo renal. En la biopsia se encontró ácido cianúrico

las bacterias del género bacteroides protegen a los ratones contra las consecuencias de la acumulación de grasa corporal.

Las bacterias del niño sano eran capaces de procesar los aminoácidos que contienen sulfuro. Los niños con Kwashiorkor carecían de estas bacterias y sufrían de malnutrición

Cuando aumentaban la presencia de Akkermansia municiphila en sus intestinos se observaba una pérdida de peso y un mejor control de la insulina

En 2013 aparecieron pruebas que relacionan la bacteria intestinal con Fusobacterium en la estimulación de los tumores colorectales

Prevotella copri se ha asociado con la artritis reumatoide. En ratones que poseen Lactobacillus johnsonii en su flora intestinal están mucho mejor protegidos contra las alergias y el asma.

Fischetti en 2001 demostró que las enzimas líticas purificadas son agentes terapeuticos eficaces para reducir la colonización de las

mucosas por neumococos en ratón

Enzibióticos son enzimas que actúan como antibióticos

Se usan aplicados directamente como:

Espray

Lociones

Enjuague bucal

Tampones

Supositorios

Catéteres

Inhaladores

Vendas

Colirios

Cualquier tecnología siempre ha tenido un uso militar

Lederberg ganó con 33 Años el premio Nóbel

Ken Alibek trabajóEn armas biológicasEn la URRS

bacteriasactuaciencia.blogspot.com.es/

Jordy LarcoPablo Egas

Fernando VillavicencioLiliana Ushiña

Dr. Gabriel Trueba