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  • 8/17/2019 Guia Practica Vdrl-1

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    GUÍA DE PRÁCTICAS DE LABORATORIOINSTITUCIÓN: “UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZO”FACULTAD: CIENCIAS DE LA SALUD

    CARRERA: MEDICINAPERÍODO ACADÉMICO:DOCENTE: Dra. Cristina Tina!r"ASIGNATURA:SEMESTRE:TERCER SEMESTRE FEC#A DE LA PRÁCTICA N$MERO DE LA PRÁCTICA:#ORA: DURACIÓN: %:&ORAS

    NOMBRE DE LOS

    ESTUDIANTESPARTICPANTES

    TITULO DE LA UNIDAD: RESPUESTA INMUNE FRENTE A MICROORGANISMOS

    TEMA DE LA PRÁCTICA: PRUEBA DE VDRL

    OB'ETI(O GENERAL:• Realizar una prueba serológica con sensibilidad y

    especificidad para determinar y complementar un

    diagnóstico de sífilis

    OB'ETI(OSESPECÍFICOS :

    • Medir los anticuerpos que aumentan cuando se tienen

    infecciones ocasionadas por treponemas, es decir, la

    sífilis.

    • Descartar enfermedades tales como: sífilis, tuberculosis,

    neumonía, varicela, sarampión, paludismo, lepra, entre

    otras.

    • Medir sustancias, llamadas anticuerpos, que se pueden

     producir en repuesta al Treponema pallidum, la bacteria

    que causa la sífilis.

    • dentificar los valores normales referenciales para

    identificar sífilis.

    FUNDAMENTO TEÓRICO

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    !a t"cnica de #.D.R.!. $#enereal Disease Researc% !aboratory& est' basada en la capacidad de los

    anticuerpos reagínicos $autoanticuerpos generados por la infección& de reaccionar con un fosfo(

    lípido llamado cardiolipina. )l procedimiento se basa en colocar el suero del paciente en contacto

    con el sustrato antig"nico. *i los anticuerpos est'n presentes en el suero, "stos se unen al sustrato

    antig"nico produciendo la floculación del mismo. *i el suero evaluado no contiene anticuerpos no

    se producir' la floculación.

    )l antígeno #.D.R.!. *)+** $& es un antígeno no trepon"mico. onsiste en una modificación de

    la emulsión de antígeno de #.D.R.! y contiene entre sus componentes cloruro de colina que

    aumenta la reactividad de las reaginas en los sueros que no %an sido inactivados por tratamiento

    t"rmico. )sta característica constituye una venta-a del producto porque la muestra de suero a

    utilizar no tiene que ser inactivada.

    MATERIALES) E*UIPOS + REACTI(OS MUESTRA: *uero, plasma o líquidocefalorraquídeo $!R&

    MATERIALES:

    gotero

    /gitador rotativo a-ustable a 01 rpm.

    +laca de vidrio transparente con sectores de 2 mm de di'metro cada uno.

    Micropipetas para medir los vol3menes indicados. Microscopio

    ronometro

    REACTIVOS: Reactivo A: suspensión acuosa de antígeno de cardiolipina y lecitina purificados, en buffer 

    fosfatos con cloruro de colina y )DT/ de acuerdo a las indicaciones de la 4.M.*.

    *olución fisiológica $para la prueba semicuantitativa&.

    *olución de cloruro de sodio 1 g5dl $para la t"cnica en líquido cefalorraquídeo&.

    )l antígeno #.D.R.!. *)+**

     

    EQUIPOS: MICROSCOPIO

    PROCEDIMIENTO:

    • Metodología:

    Muestra: suero sin inactivar.

     6o traba-ar con sueros %emolizados, lip"micos o contaminados. !os sueros

    congelados deben tomar temperatura ambiente antes de realizar el ensayo.

    REACCIÓN CUALITATIVA EN PLACA

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    • )n dos celdas de una policubeta de 7line o similar colocar 81 9l de suero *6

    6/T#/R en la primera celda y 81 9l de suero diluido 51 $diluido con

    solución fisiológica& en la segunda celda.

    • /gregar una gota $528 ml& de suspensión de antígeno #.D.R.!. *)+** acada celda.

    • Rotar la placa durante 2 minutos con movimiento circular, sobre una

    superficie plana, a velocidad aproimada ;1 r.p.m. en forma manual o 01

    r.p.m. en el agitador mec'nico.

    • !eer de inmediato al microscopio empleando 11 aumentos

    • nterpreta los resultados obtenidos.

    GRÁFICOS + RESULTADOS: . y ?arzón, @., 6eA and improved antigen suspension for rapid reagin tests for syp%ilis.

    +ublic Bealt% Rep. C8:08(00 $E1&

    • +ortnoy, >. FossaG, B.6., Halcone, #.B. y Barris, /.: Rapid reagin test Ait% un%eated and neA

    improved antigen suspension. +ublic Bealt% Rep. CE:II(I8 $E&

    • Manual de reacciones serológicas para el diagnóstico de la sífilis. 4rganización mundial de la

    salud. $8&.

     

    Manual de reacciones serológicas para el diagnóstico de la sífilis. 4rganización mundial de la

    salud. $C8&.

    FIRMA DEL DOCENTE DIRECTOR DE CARRERA