HISTOGRAMA-HMC
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INTERPRETACION DE HISTOGRAMASSANGUINEOS
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AUTOMATIZACIN EN HEMATOLOGA* Exactitud* Precisi!
* Ra"ide#* Sta!dari#aci!* Scree!i!$
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TOMA DE MUESTRA % PROCESAMIENTO
*Sa!$re e!tera&EDTA'()
* +,-u.e! re/uerid,* Pr,cesa.ie!t, de!tr, de -as 0 1* C,!ser2ar re3ri$erada* Te."eratura a.4ie!te
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5CMO DI6ERENCIAR LOSDI6ERENTES TIPOS DE LEUCOCITOS7
Uti-i#a!d, sus di3ere!tes caracter8sticas9 TAMA:O %
COMPLE;IDAD CELULAR
Para eso utilizaremos cuatro tecnologas combinadas:* Citometra de Flujo* Dispersin de Laser* Tincin Citoqumica* Impedancia l!ctrica
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IMPEDANCIA &RESISTENCIA ELECTRNICAPRINCIPIO DE COULTER
C!lulas malas conductoras de electricidad
l principio de impedancia en el recuento dec!lulas se basa en la deteccin " medicin decambios en la resistencia el!ctrica producida
por las c!lulas cuando atra#iesan una peque$aabertura%
Las c!lulas suspendidas en un dilu"enteconductor de la electricidad& se 'acen pasar atra#!s de una apertura (ori)icio& el paso decada c!lula indi#idual aumenta transitoriamentela impedancia (resistencia el!ctrica entre doselectrodos que est+n situados a cada lado de laapertura causando un cambio en el #oltaje entrelos dos electrodos proporcional al cambio de laresistencia " as& al #olumen de la c!lula que
pasa a tra#!s de la apertura%
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LA AMPLITUD DEL PULSO DE +OLTA;E GENERADO ES DIRECTAMENTEPROPORCIONAL AL TAMA:O DE LA PARTCULA%
EL NMERO DE PULSOS ES PROPORCIONAL AL NMERO DECLULAS CONTADAS.
l tama$o de la apertura para los,- " PL. es m+s peque$o paraaumentar la sensibilidad del
recuento plaquetario
LO
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CONDUCTI+IDAD EL=CTRICA
La radiofrecuencia (RF) o la resistencia a la corriente electromagntica de alto voltaje
a veces se utiliza junto con la la resistencia a la corriente continua de bajo voltaje.
C/--I0T C/0TI012(CC: altura del pulso 3 #olumen celular-2DI/F-C10CI2 (-F: altura del pulso 3 tama$o " densidad nuclear
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M=TODOS PTICOSPRINCIPIO DE LA CITOMETRA DE 6LU;O
las c!lulas de la muestra son alineadas para que una a una pasen a tra#!s de 4laregin sensora5 donde interceptan un 'az de luz )ocalizado generando se>a-es "ticas (que corresponden a distintas par+metros )sicos obioqumicos de cada c!lula de dis"ersi! " 3-u,resce!cia% las cuales son con#ertidas en pulsos el!ctricos proporcionales9 digitalizadas "almacenadas en la PC%
l n6mero de pulsos generado es directamente proporcional al n6mero de c!lulas queatra#iesan la zona de sensora (recuento celular
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EN6O
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Todo equipo automatizado& suministra dos tipos de resultados: un in)ormenum!rico " un in)orme gra)ico%2 partir de las se$ales generadas por los detectores " procesadas autom+ticamentese presentan en pantalla las representaciones gr+)icas de las distintas poblacionescelulares mediante citogramas e 'istogramas%Los 1ist,$ra.as son gr+)icos de un solo par+metro que proporcionan in)ormacinsobre el n6mero de c!lulas " la intensidad del par+metro medido (eje 8%Cit,$ra.as o dis"ers,$ra.as relacionan 9 o par+metros% Intensidad delpar+metro ; (eje
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E ?PCT-/=T-@2 2A?/-CIB0 : C/1LT-(-ACI0DIC =2TI=ET-IC/? PLT GAC A* I=PD20CI2 > -2DI/F-C10CI2 >?PCT-/=T-@2 D 2A?/-CIB0: DIFF* I=PD20CI2 > -2DI/F-C10CI2 >?PCT-/=T-@2 > DI?P-CIB0 DL1HFL1/-?C0CI2 /T-2 : .1IP/? J DIFF
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* -apidez K M;JM 'emogramas'ora* ;N9JN par+metros 'ematolgicos* ;MMMM c!lulas e7aminadas* OMMM ul de muestra* Carr"o#er ausente* O a -eacti#os utilizados
* n general con 9 tecnologas: Impedancia&Citoqumica&/ptica& L+serCitometra de )lujo&-adio)recuencia& QC?%* istogramas
ANALIZADORES HEMATOLGICOS
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EC(MAN COULTERPrincipios de =edicin
=edicin directa:
R-AC ImpedanciaRGAC Impedancia& en)oque 'idrodin+micoRPlaq% Impedancia (99M )lRb Cianometamoglobina modi)icado (J9Jnm
R=CQ media del #olumen de -AC('istograma=edicin indirecta:Rct& =CC& " =C (calculados
-DG " =PQ (CQ de sus respecti#os'istogramas
GAC Di)erencialRQC? #olumen& conducti#idad& dispersin
-eticulocitosRColoracin ?upra#ital (nue#o azul demetileno
RQC?
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S%SMEBPrincipios de =edicin
=edicin directa:R-AC Impedancia& en)oque 'idrodin+micoRGAC Impedancia& en)oque'idrodinamicoRPlatelets Impedancia& en)oque'idrodinamicoRb ?L?b (JJJ nm (o7i'emoglobina >
sodio lauril sul)atoRt Deteccin de pulsos acumulati#os
=edicin indirecta:R=CQ& =CC " =C (calculados
-DG " =PQ(CQ de sus respecti#os
'istogramasGAC Di)erencialRDeteccin con DC-FRmplea lsis di)erencial
-eticulocitos
RColorante ?upra#ital (2ramina /RDeteccin Fluorescente
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AOTTPrincipios de =edicin
=edicin directa:
R-AC ImpedanciaRGAC Dispersin ptica (primaria&Impedancia (secondariaRPlaquetas Impedancia (9M )lRb Cianomet'emoglobina modi)icada(JOM nmR=CQ #olumen medio de -AC('istograma
=edicin Indirecta:Rct& =CC " =C (calculados
-DG (#alor relati#o equi#alente al CQ
GAC Di)erencialR=2P??
-eticulocitosRColoracin proprietariaRDispersin =ulti+ngulo
RDeteccin Fluorescen
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SIEMENSPrincipios de =edicin
=edicin directa:R-AC n)oque 'jdrodin+mico& l+ser de bajo
" alto +nguloRGAC n)oque 'jdrodin+mico& dispersinptica " absorpcinRPlatequetas n)oque 'idrodin+mico& l+serde +ngulo bajo " alto(;M )LRSb Cianomet'emoglobina modi)icada (JO
nmR=CQ #olumen medio de -AC ('istograma
=edicin indirecta:Rt& =CC " =C (calculados
-DG " =PQ (CQ de sus respecti#os
'istogramasGAC Di)erentialRQC? #olumen& conducti#idad& dispersin
-eticulocitosRColoracin ?upra#ital (/7azina JM
RDispersin ptica de bajo " alto +ngulo
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Peso ombres =ujeres
JMM
;M
;NM
A$ru"ar
INTRODUCCININTRODUCCIN
Mtodo automatizadoMtodo automatizado
I?T/,-2=2? Uqu! sonV
s una gr+)ica de la distribucin de un conjunto de medidas%
Toma datos #ariables (peso& estatura& tiempo& tama$o& etc% "
despliega su distribucin%
Los procesos inusuales o sospec'osos pueden indicar que
un proceso necesita in#estigacin%
Sociedad Latinoamericana para la Calidad, 2001
P,4-aci! Gra3icar
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Histogramas ! "a #itomtr$a %m&ti#aHistogramas ! "a #itomtr$a %m&ti#a
Indican en general:
R La distribucin de las c!lulas seg6n su tama$o%
R Promedio del tama$o de las c!lulas dentro de una
poblacin espec)ica%R La presencia de subpoblaciones clnicamentesigni)icati#as%
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RECUENTO DE GLULOS RO;OS % PLA
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HISTOGRAMA DE ERITROCITOS
-AC: 2ppro7% 9J 9JM )LLD (LoWer Discriminator: 9J a J )LUD (1pper Discriminator: 9MM 2 9JM )L %
ALERTAS PUEDEN DEERSED?QI2CIB0 2 L2 IH.1I-D2-AC )ragmentos
Plaquetas gigantes=icrocitos
D?QI2CIB0 2 L2 D-C2GAC )ragmentos=acrocitos
Crioaglutininas
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6UENTES DE ERROR
A$-uti!i!as 3r8asRAajos contajes de -AC " altos =CQ puedenser causados por las aglutininas de los'emates% ?i est+n presentes& tambi!n el'ematocrito " los =CCs pueden ser tambi!nincorrectos%
RPueden presentarse en la mononucleosisin)ecciosas " en las in)ecciones porm"coplasma (neumona%R?i se obser#an -AC aglutinados en el )rotis desangre peri)!ricas& calentar la muestra a XC&mezclarla " analizarla mientras est! caliente
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*-AC )ragmentados o microcticos:
* Pueden causar conteos bajos de -AC " pueden darun a#iso en el conteo de las plaquetas puesto que se#uel#en mu" cercanas al tama$o de las plaquetas "pueden originar un 'istograma plaquetario anormal%
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* 2c6mulo de plaquetas " satelitosis:* sto causa un conteo )alsamente disminuidode las plaquetas " se puede con)irmar re#isando
el )rotis% ?iempre tratar de e7aminar el bordedel )rotis cuand se tienen contajes bajos deplaquetas%
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* Plaquetas gigantes:* ?e apro7iman al tama$o de un 'emate%Pueden causar que la cola derec'a del'istograma permanezca ele#ada " pueda #ersea la izquierda del 'istograma de los -AC%
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RC Nuc-ead,sstos pueden inter)erir con los GAC enalgunos instrumentos " ser contados comoleucocitos(lin)ocitos
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HISTOGRAMA DE PLA
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I?T/,-2=2 D PL2.1T2?
1n gr+)ico que siga la lnea roja debeinterpretarse como posible agregacinplaquetaria (el origen intra oe7tra#ascular de la misma no puededeterminarse o con un aumento en el
n6mero de plaquetas grandes&)ragmentos celulares (membranas deglbulos rojos1n gr+)ico que siga la lnea #erde debeinterpretarse como inter)erenciaproducida por microcitosis marcada&
glbulos rojos de menos de M )l%(recordar que tanto plaquetas comoglbulos rojos se miden por impedanciaen una misma c+mara " de manerasimult+nea%
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I?T/,-2=2 D PL2.1T2?
1na agregacin plaquetaria lle#aconsigo una disminucin en eln6mero de plaquetas (9 o m+splaquetas agregadas son contadascomo una de ma"or tama$o%Por lo tanto cada #ez que se
encuentre una alteracin en la )ormadel 'istograma de plaquetas& debein#estigarse microscpicamente lamuestra en busca de agregacinplaquetaria%
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