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H OSPITAL P ROVINCIAL N EUQUÉN 24/07/2012 1 LABORATORIO Hemogramas - Hemostasia - 1 Manual de Derivaciones, sector HEMOGRAMAS Teléfono: 0299 – 4490800 int. 297 Consulta de resultados, interno 265 Bioquímicos: Montané, Jorge Mora, Juan Andrés Ramirez, Jorge Técnicos: Melo, Aníbal Parada, Omar HEMOSTASIA Determinación (*) Tipo de Muestra Anticoagulante Cantidad mínima (**) Temperatura 771 TP (Tpo de protrombina) Plasma Citrato de sodio 3.2% (1+9) 1.0 ml Refrigerar 887 APTT Plasma Citrato de sodio 3.2% (1+9) 1.0 ml Refrigerar 345 Fibrinógeno Plasma Citrato de sodio 3.2% (1+9) 1.0 ml Refrigerar 344 PDF (productos de degradacion del fibrinógeno Plasma Citrato de sodio 3.2% (1+9) 0.5 ml Refrigerar DD Dímero D Plasma Citrato de sodio 3.2% (1+9) 1.0 ml Refrigerar 773 TT (tiempo de trombina) Plasma Citrato de sodio 3.2% (1+9) 1.0 ml Refrigerar CCPN Prueba de corrección con plasma normal Plasma Citrato de sodio 3.2% (1+9) 1.0 ml Refrigerar HEPA Heparina bajo peso molecular (HBPM) Plasma Citrato de sodio 3.2% (1+9) 1.0 ml Refrigerar F5 Factor V Plasma Citrato de sodio 3.2% (1+9) 1.0 ml Refrigerar F7 Factor VII Plasma Citrato de sodio 3.2% (1+9) 1.0 ml Refrigerar F2 Factor II Plasma Citrato de sodio 3.2% (1+9) 1.0 ml Refrigerar F8 Factor VIII Plasma Citrato de sodio 3.2% (1+9) 1.0 ml Refrigerar F9 Factor IX Plasma Citrato de sodio 3.2% (1+9) 1.0 ml Refrigerar F10 Factor X Plasma Citrato de sodio 3.2% (1+9) 1.0 ml Refrigerar F11 Factor XI (discontinuado) Plasma Citrato de sodio 3.2% (1+9) 1.0 ml Refrigerar F12 Factor XII (discontinuado) Plasma Citrato de sodio 3.2% (1+9) 1,0 ml Refrigerar FVW Factor von Willebrand (cuantitativo) Plasma C Citrato de sodio 3.2% (1+9) 1,0 ml Refrigerar AT3 Antitrombina III Plasma Citrato de sodio 3.2% (1+9) 1.0 ml Refrigerar PROS Proteína S libre Plasma Citrato de sodio 3.2% (1+9) 1.0 ml Refrigerar PROC Proteína C Plasma Citrato de sodio 3.2% (1+9) 1.0 ml Refrigerar * Antes de proceder a la derivación de determinaciones especiales, consultar disponibilidad de reactivo. ** Volumen mínimo requerido para determinaciones simples.
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HOSPITAL PROVINCIAL NEUQUÉN 24/07/2012 1LABORATORIO
Hemogramas - Hemostasia - 1
Manual de Derivaciones, sector H E M O G R A M A S
Teléfono: 0299 – 4490800 int. 297
Consulta de resultados, interno 265
Bioquímicos: Montané, Jorge
Mora, Juan AndrésRamirez, Jorge
Técnicos:Melo, AníbalParada, Omar
HEMOSTASIA
Item Determinación (*) Tipo deMuestra
Anticoagulante Cantidadmínima (**)
Temperatura
771 TP (Tpo de protrombina) Plasma Citrato de sodio 3.2%(1+9)
1.0 ml Refrigerar
887 APTT Plasma Citrato de sodio 3.2%(1+9)
1.0 ml Refrigerar
345 Fibrinógeno Plasma Citrato de sodio 3.2%(1+9)
1.0 ml Refrigerar
344 PDF (productos dedegradacion delfibrinógeno
Plasma Citrato de sodio 3.2%(1+9)
0.5 ml Refrigerar
DD Dímero D Plasma Citrato de sodio 3.2%(1+9)
1.0 ml Refrigerar
773 TT (tiempo de trombina) Plasma Citrato de sodio 3.2%(1+9)
1.0 ml Refrigerar
CCPN Prueba de correccióncon plasma normal
Plasma Citrato de sodio 3.2%(1+9)
1.0 ml Refrigerar
HEPA Heparina bajo pesomolecular (HBPM)
Plasma Citrato de sodio 3.2%(1+9)
1.0 ml Refrigerar
F5 Factor V Plasma Citrato de sodio 3.2%(1+9)
1.0 ml Refrigerar
F7 Factor VII Plasma Citrato de sodio 3.2%(1+9)
1.0 ml Refrigerar
F2 Factor II Plasma Citrato de sodio 3.2%(1+9)
1.0 ml Refrigerar
F8 Factor VIII Plasma Citrato de sodio 3.2%(1+9)
1.0 ml Refrigerar
F9 Factor IX Plasma Citrato de sodio 3.2%(1+9)
1.0 ml Refrigerar
F10 Factor X Plasma Citrato de sodio 3.2%(1+9)
1.0 ml Refrigerar
F11 Factor XI (discontinuado) Plasma Citrato de sodio 3.2%(1+9)
1.0 ml Refrigerar
F12 Factor XII (discontinuado) Plasma Citrato de sodio 3.2%(1+9)
1,0 ml Refrigerar
FVW Factor von Willebrand(cuantitativo)
Plasma C Citrato de sodio 3.2%(1+9)
1,0 ml Refrigerar
AT3 Antitrombina III Plasma Citrato de sodio 3.2%(1+9)
1.0 ml Refrigerar
PROS Proteína S libre Plasma Citrato de sodio 3.2%(1+9)
1.0 ml Refrigerar
PROC Proteína C Plasma Citrato de sodio 3.2%(1+9)
1.0 ml Refrigerar
* Antes de proceder a la derivación de determinaciones especiales, consultar disponibilidad de reactivo. ** Volumen mínimo requerido para determinaciones simples.
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Hemogramas - Hemostasia - 2
Item Determinación (*) Tipo deMuestra
Anticoagulante Cantidadmínima (**)
Temperatura
APCR Resistencia a proteína Cactivada
Plasma Citrato de sodio 3.2%(1+9)
1.0 ml Refrigerar
LA Anticoagulante lúpico Plasma condoblecentrifugac.
Citrato de sodio 3.2%(1+9)
2.0 ml Refrigerar
AB2 Anticuerpos anti2 Glicoproteína I (IgG,IgM)
Suero --- 0.5 ml Refrigerar
ACL Ac. anticardiolipinas(IgG, IgM)
Suero --- 0.5 Refrigerar
156 Homocisteína plasmática Ver Anexo I
* Antes de proceder a la derivación de determinaciones especiales, consultar disponibilidad de reactivo. ** Volumen mínimo requerido para determinaciones simples.
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Hemogramas - Hemostasia - 3
HEMATOLOGIA
Item Determinación (*) Tipo deMuestra
Anticoagulante Cantidadmínima (**)
Temperatura
475 Hemograma Sangre entera(+ 2 frotis)
EDTA 2.0 ml Refrigerar
466 Hematocrito Sangre entera(o capilares)
EDTA 1.0 ml (o trescapilares)
Refrigerar
470 Hemoglobina Sangre entera EDTA 1.0 ml Refrigerar746 Plaquetas Sangre entera
(+ 2 frotis)EDTA 1.0 ml Refrigerar
433 Grupo sanguíneo Sangre entera EDTA 0.5 ml Refrigerar
813 Factor Rh Sangre entera EDTA 0.5 ml Refrigerar
184 Prueba de CoombsDirecta
Sangre entera EDTA 1.0 ml Refrigerar
185 Prueba de CoombsIndirecta
Suero --- 1.0 ml Refrigerar
* Antes de proceder a la derivación de determinaciones especiales, consultar disponibilidad de reactivo. ** Volumen mínimo requerido para determinaciones simples.
CITOMETRIA, PLAN NACIONAL HIV / SIDA
Item Determinación (*) Tipo deMuestra
Anticoagulante Cantidadmínima (**)
Temperatura
400 Linfocitos T CD4 yCD8; rto. de.
Sangre entera EDTA 2.0 ml Temperatura ambiente
* Antes de proceder a la derivación de determinaciones especiales, consultar disponibilidad de reactivo. ** Volumen mínimo requerido para determinaciones simples.
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Hemogramas - Hemostasia - 4
ANEXO IConsideraciones preanalíticas importantes y del envío de muestras, por determinación
En términos generales para las determinaciones hematológicas y de hemostasia, es suficiente un ayuno de8 horas, sin estrés ni esfuerzo físico previo a la extracción, ni consumo de alcohol o cigarrillos.
El momento ideal de toma de muestra es por la mañana entre las horas 8:00 y 10:00 hs.
Las muestras para estudios de coagulación deben obtenerse con el menor éstasis venoso posible(torniquete por menos de 1 minuto), evitando el ingreso de aire a la jeringa, la formación de espuma ycontaminación con líquido tisular. Posterior agitación suave e inmediata.Se aconseja NO emplear el sistema Vacutainer por no respetar las condiciones anteriores.
Muestras obtenidas de catéter resultan frecuentemente contaminadas por heparina.La presencia de hemólisis visible también es motivo de resultados erróneos en estudios de hemostasia.Si existiera un coágulo en la muestra o la sola presencia de una malla de fibrina, hará a la misma no aptapara el análisis, aunque se obtuvieran resultados normales. Una muestra en dichas condiciones puedepresentar tiempos falsamente acortados por liberación se sustancias tromboplásticas, tiempos prolongadospor consumo de factores, o una combinación de ambos efectos.
El anticoagulante indicado para estudios de coagulación es citrato de sodio en concentración de 3,2%, en larelación de 1 volúmen de anticoagulante, y 9 volúmenes de sangre.
En casos donde el hematocrito del paciente sea conocido que se encuentre por debajo de 25% o porencima de 55%, en las muestras para coagulación, se deberá ajustar previamente la relaciónanticoagulante/sangre empleando la siguiente fórmula:
sgre entera (ml) = 9 x citrato de sodio (ml) x 55 / (100 – Hto)
La muestra de sangre para estudios de coagulación de rutina debe centrifugarse por 10 minutos a 1500 –2000 g (aprox. 3000 rpm).
Para la evaluación de estados trombofílicos se recomienda no estudiar al paciente durante el episodioagudo del evento trombótico, sino luego de 3 meses como mínimo (esta condición no aplica para estudiospor biología molecular; no realizados en este centro).
La muestra indicada en estos casos es el plasma pobre en plaquetas (PPP). Ver a continuación comoobtener el PPP.
Obtención de plasma pobre en plaquetas (PPP):
Se obtiene por doble centrifugación a alta velocidad. Entre 2000 – 2500 g (aproximadamente 4500 rpm) porel lapso de 10 minutos cada vez.
Primero se centrifuga la muestra de sangre en el tubo primario en dichas condiciones, luego se separa elplasma sobrenadante, sin remover ni arrastrar elementos de la interfase plasma/paquete celular, con pipetade plástico nueva, a un contenedor limpio (idealmente un tubo seco, nuevo) y se centrifuga otra vez de lamisma manera. El sobrenadante es PPP (< 10.000/ul). Debe separarse con pipeta plástica nueva, sinremover el pellet de plaquetas y fraccionarse en tubos tipo Eppendorf nuevos, los cuales son aptos para lapronta derivación, en un medio refrigerado.
Si el paciente estuviera recibiendo anticoagulación oral, los niveles de Proteína C y S estarániatrogénicamente disminuídos, como así también el de los factores II, VII, IX y X. Los mísmos se consideraque recuperan los valores habituales en el paciente luego de 7 días de suspendida la medicación.
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Hemogramas - Hemostasia - 5
En los casos en que se requiera estudiar a pacientes bajo tratamiento con heparina no fraccionada, oheparina de bajo peso molecular, considerar un período post suspensión, de al menos 12 hs.
Siempre detallar en la orden de derivación el tipo de medicación que estuviera recibiendo el paciente.Adjuntar a la orden de derivación un resumen de historia clínica y antecedentes tanto personales comofamiliares por los cuales se solicita el estudio.
Anticoagulante lúpico:
Se requiere plasma citratado pobre en plaquetas (ver obtención de PPP).
Enviar refrigerado con geles tipo ICEPACK, de manera tal que asegure la conservación de la muestra hastasu llegada a destino. Estas condiciones son indispensables para la obtención de resultados confiables.
Coordinar el envío para acortar el máximo posible el tiempo de transporte de la muestra. Evitar los viernes,feriados y fines de semana.
Homocisteína plasmática: (recordar consultar previamente por disponibilidad de reactivo)
Se requieren 500 uL de plasma con EDTA, refrigerado. Es importante la pronta preparación de la muestradebido a inestabilidad del analito. Inmediatamente a la extracción colocar la muestra anticoagulada conEDTA en baño de agua/hielo hasta el momento de centrifugar. La muestra debe conservarse en frío en todomomento. Centrifugar antes de los 30 minutos a 2000-3000 rpm, durante 10 minutos. Alternativamente sepodrá usar suero, separado en las mismas condiciones de celeridad y conservación que mencionadaspreviamente.Separar el plasma/suero asépticamente en tubos tipo Eppendorf . Refrigerar inmediatamente y proceder a laderivación lo antes posible.Enviar refrigerado con geles congelados de manera tal que asegure la conservación de la muestra hasta sullegada a destino. Esta condición es indispensable para satisfacer los requerimientos de la metodología.Coordinar el envío para acortar el máximo posible el tiempo de transporte de la muestra. Evitar los viernes,feriados y fines de semana.
CD4 y CD8, por citometría de flujo:
Se requiere un tubo conteniendo un mínimo de 2ml de sangre entera anticoagulada con EDTA (si no fueraposible tal volumen, consultar previamente). Mantener todo el tiempo a temperatura ambiente. Se sugiereno refrigerar la muestra. La muestra debe llegar al laboratorio del HPN los días miércoles teniendo menosde 24 hs de extraída. Adjuntar, si se dispone, el dato de recuento de leucocitos totales y porcentaje delinfocitos.
En cuánto al código que identifica al paciente y muestra se recuerda que se construye con los datos delsexo (M/F); las dos primeras letras del primer nombre de pila; las dos primeras letras del primer apellido, y lafecha de nacimiento. En caso de tratarse de una paciente embarazada, debe indicarse con la letra E al final.Por ejemplo, si una paciente se llamara María Laura Figueroa, se encontrara embarazada, y hubieranacido el día primero de enero del año 1980; el código de identificación sería: F MAFI 01011980 E.
E-mails:
Jorge Montané: [email protected]
Jorge Ramirez: [email protected]
Juan Mora: [email protected]
