Informe de

UNIDAD EDUCATIVA “BOLÍVAR”

PROGRAMA DEL DIPLOMA DEL BACHILLERATO INTERNACIONAL

PRACTICA N° 7

DATOS INFORMATIVOS.Nombre y Apellido: Kevin ProañoCurso: 2do Paralelo: Bachillerato InternacionalFecha: 07 / 12 / 2015 / CALIFICACIÓN

Normativa de Laboratorio de Biología Uso de mandil blanco y limpio es obligatorio. Absolutamente prohibido comer en el laboratorio. Considerado indebido bajo cualquier circunstancia pipetear con la boca. Leer cuidadosamente la guía que corresponda previo la práctica. Mantener limpio el puesto de trabajo durante el desarrollo de la práctica, y una vez

finalizada limpiarlo completamente. Cumplir con los horarios puntuales de entrada al laboratorio. Entregar el informe correspondiente en las fechas indicadas sin atraso. Las prácticas serán evaluadas mediante los criterios de evaluación del BI

Tema: Extracción de ADN (Hígados de Pollo)

Objetivo: Extraer el ADN de un tejido animal para poder observar su estructura fibrilar y su composición.

MATERIALES Y EQUIPOS:

Hígado de pollo Microscopio Porta y cubreobjetos Arena Trozo de tela para usar como filtro Varilla de vidrio Vasos de precipitado Probeta Embudo Mortero

REACTIVOS Y SUSTANCIAS:

Alcohol de 96°



Cloruro Sódico 2M

SDS (cualquier detergente concentrado) Eosina

INFORMACIÓN PREVIA: Sobre el tema de la practica

El ADN por las siglas de Acido Desoxirribonucleico, es una molécula de gran tamaño que guarda y transmite de generación en generación toda la información necesaria para el desarrollo de todas las funciones biológicas de un organismo. El ADN está formado por la unión paralela de dos cadenas, cada cadena se encuentra conformada por 4 diferentes nucleótidos. Lo que hace que el ADN sea tan variado (por ejemplo, de peces, plantas, bichos, humanos etc.) es la posición y la cantidad de estos cuatro nucleótidos a lo largo de las dos cadenas, a esta secuencia se le llama código génico o genético, o bien genoma. El ADN de todos los organismos vivos está formado por solo éstos cuatro nucleótidos. (¿Qué es ADN?, 2013)

La estructura del ADN es una pareja de largas cadenas de nucleótidos. La estructura de doble hélice del ADN fue descubierta en 1953 por James Watson y Francis Crick. Una larga hebra de ácido nucleico está enrollada alrededor de otra hebra formando un par entrelazado. (Extracciónde ADN)

PROCEDIMIENTO:

1. Trituramos el hígado de pollo en el mortero. Para esto añadimos un poco de arena para que cuando trituremos se rompan bien las membranas y queden los núcleos sueltos.

2. Añadir 20 ml de agua y remover hasta hacer una especie de puré.3. Filtrar en una probeta sobre una tela para separar los restos de tejidos que hayan quedado

por romper.4. Medir el volumen del filtrado con una probeta.5. Añadir al filtrado un volumen al cloruro sódico 2M para producir el estallido de los núcleos

para que queden libres las fibras de cromatina. Luego lo vertemos todo en el vaso de precipitación.

6. A continuación, se añade 1ml de SDS. La acción de este detergente es formar un complejo con las proteínas y separarlas del ADN. Así nos quedará el ADN libre de las proteínas que tienen asociadas.

7. Añadir mediante una probeta 25- 50 centímetros cúbicos de alcohol de 96°. Hay que hacerlo de forma que el alcohol resbale por las paredes de vaso y se formen dos capas. En la interface, precipita el ADN.

8. Introducir una varilla de vidrio e ir removiendo en las mismas direcciones; en la varilla se van adhiriendo unas fibras blancas, visibles a simple vista, que son el resultado de la agrupación de muchas fibras de ADN.



9. Luego añadimos la eosina a una pequeña muestra de las fibras añadiendo una gota del colorante y dejando reposar por unos 10 minutos. Observamos en el microscopio.

REGISTRO DE OBSERVACIONES:

Durante el proceso de trituración podemos notar una especie de mezcla con la apariencia de sangre coagulada, esto se produce por el rompimiento de las venas y los vasos sanguíneos que se encuentran en los hígados.

Podemos notar que el alcohol hace efecto con el detergente líquido y el cloruro de sodio, cuando se forman una especie de telas grumosas que no duran mucho tiempo en formarse.

Una vez extraída la muestra, podemos observar en el microscopio la forma del ADN.

RESULTADOS:

Al realizar el procedimiento adecuadamente, resulta que las fibrillas de ADN comenzaron a salir, de un color blanco precipitado sobre el alcohol.

Al observar en el microscopio podemos darnos cuenta de la composición del ADN, siendo una especie de fibras alargadas.

Al combinar la trituración con varias sustancias podemos separar el ADN de las proteínas lo que nos permitirá observar en el microscopio solo fibras de ADN.

CUESTIONARIO:

¿De qué está formada la cromatina?La cromatina es el conjunto de ADN, histonas, proteínas no histónicas y ARN que se encuentran en el núcleo de las células eucariotas y que constituye el genoma de dichas células.

¿Para qué añadimos arena al triturado?Para moler de mejor manera el hígado y poder romper las membranas para que los núcleos queden sueltos.

¿Para qué añadimos alcohol a la mezcla?El ADN se precipita en el alcohol fuera de la solución, donde puede ser visto. Además de permitirnos ver el ADN, el alcohol separa el ADN de otros componentes celulares, los cuales son dejados en la solución acuosa.

¿Cuáles son los mecanismos que se utiliza en la extracción del ADN?La reduplicación, la transcripción y traducción.



¿En qué consiste la electroforesis? La electroforesis es un método de laboratorio en el que se utiliza una corriente eléctrica controlada con la finalidad de separar biomoléculas según su tamaño y carga eléctrica a través de una matriz gelatinosa.

OBSERVACIONES Y DIBUJOS:

CONCLUSIONES:

Podemos darnos cuenta de que el ADN se encuentra en los indicios biológicos como en los huesos, el cabello, la saliva y en nuestro caso la sangre del hígado.

El producto que obtuvimos de la extracción no es ADN puro ya que, entremezclado con él, hay fragmentos de ARN.

El ADN tiene las instrucciones para que nuestro organismo crezca, se desarrolle, las células se reproduzcan y, finalmente, muera. Además, es el código de las proteínas, complejas moléculas necesarias para el correcto funcionamiento del cuerpo.



RECOMENDACIONES:

Puede haber complicaciones con la forma de poner el alcohol de manera que cayera por las paredes del tubo de ensayo por esto debemos de hacerlo con mucha cautela y paciencia.

El hígado de pollo debe estar bien conservado y fresco para obtener fibras de ADN en buenas condiciones, de lo contrario la practica resultara un fracaso.

Debemos de tener en cuenta los miligramos de las sustancias que vamos a combinar con la mezcla de la trituración ya que de lo contrario podemos obtener una mezcla que será completamente diferente a la que deseada.

BIBLIOGRAFIA:

¿Qué es ADN? (2013). Obtenido de Syngenta: http://www.syngenta.com.mx/que-es-adn.aspx

Extracción de ADN. (s.f.). Obtenido de Jpimentel: http://www.jpimentel.com/ciencias_experimentales/pagwebciencias/pagweb/la_ciencia_a_tu_alcance_II/quimica/Experiencias_quimica_extraccion_de_adn.htm



ANEXOS:

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