CURVAS DE TITULACIN Y PUNTO ISO-ELECTRICO DE AMINOACIDOS TITRATION CURVES AND ISO ELECTRIC POINT AMINO ACID

Autores: Buitrago L, Ariza C, Snchez N.Corporacin Tecnolgica de Bogot Departamento de Regencia de farmacia FitoqumicaBogot ColombiaOBJETIVOS

Determinar mediante las curvas de titulacin, los valores pKa de los grupos ionizables de la glicina.

Hallar el punto isoelctrico de la Glicina.RESUMENLos aminocidos son especies anfteras es decir comportamientos acido base cuando estn en solucin, esto es debido a que el grupo amino posee caractersticas bsicas gracias a sus electrones libres, el cual crea un enlace de coordinacin y el grupo acido carboxlico posee un protn el cual da la caracterstica acida del aminocido.Para realizar una titulacin de punto isoelctrico es necesario, determinar volmenes exactos los cuales muestren con exactitud el pH, utilizando la deduccin matemtica para determinar los valores de pH y concentraciones.Al momento de realizar la titulacin hay que tener en cuenta que los puntos de amortiguacin se da por las especies ionizables del aminocido que se dan por la formacin de sus aniones y cationes.Por ltimo se analiz los volmenes de la titulacin en puntos tericos utilizando el mtodo de regresin lineal.

Palabras clave: Punto isoelctrico, puntos de amortiguacin, regresin lineal.ABSTRACTAmino acids are amphoteric species that is based acid behavior when in solution, this is due to the amino group has basic features thanks to its free electrons, which creates a coordination bond and the carboxylic acid group has a proton which gives the amino acid feature.

To perform a titration required isoelectric point, which determine the exact volumes accurately displayed pH, using the mathematical derivation to determine the pH values and concentrations.

At the time of the qualification must take into account the points buffer is given by the ionizable amino acid species that occur by the formation of their anions and cations.

Finally titration volumes discussed in theoretical points using the linear regression method.

Keywords: isoelectric point, points buffer, linear regression.INTRODUCCIN

Los aminocidos son estructuras que constan de un carbn alfa el cual se une a un R, un H, un grupo amino y un grupo cido.

NH2(CHR)COOH, donde R puede ser un hidrogeno como el nico caso de la Glicina, en bioqumica se estima que hay ms de 300 aminocidos en la naturaleza las cuales son sintetizadas por los organismos vivos.

Los aminocidos tienen una caracterstica especial que los aminocidos que tienen pH cido precipitan, a pH cidos la Glicina precipita a un pH acido pero en el caso de la histidina es un amino acido de carcter bsico precipita a un pH bsico, todo esto es respecto al anlisis de punto isoelctrico.MATERIALES Y MTODOS Hidrxido de sodio NaOH. cido clorhdrico HCl GlicinaGravimetra, es el proceso por el cual se estandariza la precipitacin o el punto isoelctrico agregando un exceso de base.

Regresin, lineal consiste en trazar una tangente en una funcin cuando es cuadrtica para poder dejar valores constantes. RESULTADOS Y DISCUSIN DE RESULTADOSSe tomaron en el laboratorio 0.750 gr de Glicina, para ser diluida en 100 mL de agua con el fin de llegar a una concentracin de 0.1 Molar, luego se tom una alcuota de 10 mL, luego con dos gotas de cido clorhdrico (HCl) son usados con dos fines ajustar el pH de la solucin del aminocido y protonar el grupo amino, despus se procede con la titulacin con hidrxido de sodio (NaOH) a una concentracin de 0.25 Molar, la titulacin concluir cuando el pH de la alcuota llegue 12.pHVol NaOHmilimol

71.00 mL0.25

91.5 mL0.375

122.00 mL0.50

Tabla Numero 1 primera titulacin.pHVol NaOHmilimol

5.91.00 mL0.25

91.50 mL0.375

122.00 mL0.50

Tabla nmero 2 duplicado de la TitulacinDespus se procedi a realizar una regresin lineal planteando las siguientes ecuaciones.

XmL * 1 L/ 1000 mL = X L * 0.25 mol/L = X mol * 1000 milimol/ 1 mol = X milimol

X mL 9/2 mL

Donde X mL: es remplazado por volmenes tericos de NaOH, con el fin de hallar milimoles de NaOH.

Siguiendo el orden de estos modelos matemticos se realiza una tabla con datos tericos de pH versus milimoles, planteando la siguiente tabla con valores tericos.

pHMilimol NaOHVol mL

000

1.20.050.2

2.40.10.4

3.60.150.6

4.2 (7) (5.9)0.20.8

60.251.0

7.20.31.2

8.4 (9) (9)0.351.4

9.60.41.6

10.80.451.8

12 (12) (12)0.52.0

Tabla Nmero 3 valores tericos lanzados por las ecuaciones anteriores, con resultados en parntesis los cuales muestran los valores experimentales para comparar.La titulacin concluyo para ambos casos en 2 mL, comparando los valores tericos reportados en los libros es el siguiente.NH2(CH2)COOH + HCl = NH3(CH2)COOH+1 + NaOH = NH3(CH2)COO- 0 + NaOH = NH2(CH2)COO-1

La tercera ecuacin qumica muestra el punto isoelctrico del aminocido analizado el cual es la Glicina, su valor terico es de valor pH 6.1, analizando los pKa siguientes.

2.4 pKa amin + 9.8 pKa acido carboxlico / 2 igual a pH 6.1, segn los datos reportados del laboratorio, el punto isoelctrico esta en valores de 1 mL y 1.2 mL y segn el valor terico el punto isoelctrico est en un volumen de 1.01 mL, lo cual es muy cercano al valor experimental.(Archivo anexo grafica) la grfica muestra los puntos de amortiguacin en valores de pH 6 cuando la concentracin milimolar es de 0.25 ya hay un equilibrio de cargas de NH3+ y COO- esto es el punto isoelctrico y hay otro punto de amortiguacin cuando la carga es -1, a 8.4 el valor de pH y 0.34 milimoles y el primer punto de amortiguacin se da cuando se acidifica la solucin por la formacin de NH3+. CONCLUSIONESDurante la prctica se determin experimentalmente que el punto isoelctrico se encuentra en pH 6 a una concentracin milimolar 0.25 en el cual estn las dos especies ionizables NH3+ y COO- estn en equilibrio y se precipitan o se balancean sus cargas.En la grfica se observ que los puntos de amortiguacin, se dan cuando se acidifica la solucin, en el punto isoelctrico y cuando la carga queda negativa en la solucin.

Bibliografa Robert Bohinsky, (1991), Bioquimica, Editorial Wesley Iberoamaricana, quintaedicin, Mexico, Ciudad de Mexico D. F.Anexo 1 grafica de titulacin pH versus concentracin milimolar.