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<ul><li> 1. Laboratorio de Toxicologa 5to de Bioqumica y Farmacia A Todo es veneno, nada es veneno. Todo depende de la dosis. Pgina1 UNIVERSIDAD TECNICA DE MACHALA FACULTAD DE CIENCIAS QUIMICAS Y DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUIMICA Y FARMACIA LABORATORIO DE TOXICOLOGA NOMBRE: Brenda Estefana Espinoza Blacio CATEDRTICO: Bioq. Carlos Garca. MsC. CURSO: 5to Ao de Bioqumica y Farmacia A GRUPO: N 2 FECHA DE ELABORACION: Lunes, 2 de Junio del 2014 FECHA DE ENTREGA: Lunes, 9 de Junio del 2014 TRIMESTRE: Primero PRCTICA N1 1. Tema: INTOXICACIN POR CIANURO. 2. Animal experimentado: Cobayo. 3. Va de administracin: Parenteral (intraperitoneal) 4. Objetivos: 1) Determinar la presencia del txico (cianuro) en el organismo del animal mediante reacciones de identificacin cualitativa. 2) Observar los signos y reacciones que presentan los animales en experimentacin luego de la administracin de txicos (cianuro). 5. Materiales: Sustancias: Balanza Jeringa Cronometro Probeta Equipo de diseccin Tabla de diseccion Bistur Vaso de precipitacin Erlenmeyer Equipo de destilacin Tubos de ensayo Mechero Cocineta Pipetas Guantes de ltex Mascarilla Mandil 10 Calificacin Agua destilada Cianuro Hidrxido de Sodio 0.1 N Acido Tartrico al 20% Cristales de sulfato ferroso Acido sulfrico Cloruro frrico Acido clorhdrico Sulfato de cobre Fenolftalena Acido pcrico Yoduro de plata Yodo </li> <li> 2. Laboratorio de Toxicologa 5to de Bioqumica y Farmacia A Todo es veneno, nada es veneno. Todo depende de la dosis. Pgina2 6. Procedimiento: 1. Tomamos las respectivas medidas de Bioseguridad en el laboratorio. 2. Pesar el cobayo 3. Preparar 1.06 de CNNa + 20ml de agua destilada . 4. Administrar el toxico preparado, 13ml CNNa al 5% por va peritoneal. 5. Colocar al cobayo en la campana. 6. Observar las manifestaciones que se presentan y en qu tiempo hasta su muerte. 7. Con la ayuda del bistur procedemos abrir el cobayo. 8. Colocando las vsceras (picadas lo ms finas posibles) en el recipiente adecuado (Vaso de precipitacin). 9. Preparar 2gr de acido tartrico en 50ml de agua destilada. 10. Aadir la solucin de acido tartrico a las vsceras, con la finalidad de acidular. 11. Luego de este tiempo se filtra, y se destila. 12. El residuo de la destilacin, despus que se ha eliminado por completo el cianuro, se recoge con hidrxido de sodio, en el cual se practican las diferentes reacciones de reconocimiento. Reacciones de reconocimiento en medios biolgicos: 1. Azul de prusia - Una pequea porcin del destilado (despus de comprobar su alcalinidad) se le agregan unos pocos cristales de sulfato ferroso, un exceso de cido sulfrico diluido y unascuantas gotas de solucin diluida de cloruro frrico, se calienta y se agita levemente y se acidifica con cido clorhdrico diluido, obtenindose un color azul intenso llamado azul de Prusia. + + 2 2 + 4 4 4 + ()2 2 + ()4 4 ()6 4 ()6 + 43 12 + 4[()6]3 2. Reaccin de la fenolftalena.- Se agregan a una pequeaporcin de destilado unas gotas de solucin de sulfato de cobre (1:2000) y previamente unas gotas de fenolftalena con lo que le producir un intenso color rojo debido a la oxidacin de la fenolftalena a fenolftalena. 3. Transformacin de Cianuros a Sulfocianuros.- Se alcaliniza la muestra con hidrxido de sodio o potasio y se adiciona hiposulfuro de amonio recientemente preparado. Se evapora a bao mara y se recoge el residuo con cidoclorhdrico. Se filtra para eliminar el azufre que eventualmente pudiera estar presente y se agrega solucindiluida de cloruro frrico. En caso positivo aparece un color rojo sangre por formacin de sulfocianato frrico. + (4)2 2 + (4)2 3 + 2 ()3 + 3 </li> <li> 3. Laboratorio de Toxicologa 5to de Bioqumica y Farmacia A Todo es veneno, nada es veneno. Todo depende de la dosis. Pgina3 4. Reaccin de la Bencidina.-Una pequea cantidad de muestra se agrega a una solucin de bencidina en cido actico mezclada con solucin de sulfato de cobre, produce color azul si en la. muestra se encuentra el cido cianhdrico. 5. Con el cidoPcrico.- Una pequea porcin de la muestra, se le agregan. unas gotas de cido Pcrico al 2 %; en case positivo el color amarillo del reactivo se toma anaranjado. 6. Con Yoduro de Plata Si agregamos unas gotas de la solucin de la muestra sobre un precipitado de yoduro de plata se producir la solucin del precipitado en caso positivo. 7. Con Solucin de Yodo.- Al adicionar unas cuantas gotas de la muestra sobre una solucin de yodo, se producir la decoloracin del yodo en caso positivo. 7. Reacciones y conducta post-administracin: 8:54am = administracin. 9:00am = convulsiones. 9:04am = perdida de movimiento. 9:11am= segunda dosis (3ml). 9:29am=tercera dosis (5ml). 9:32am= hipoxia. 9:36am = deceso. 8. Grficos Pesamos 1.06 Administrar al cuy Observamos reacciones Deceso de CNNa Colocamos al cuy en la Hacemos una incisin Extraemos vsceras Picamos finamente tabla de diseccin Colocamos en una baln Aadimos acido tartrico destilamos Recibimos destilado en NaOH y hacemos las Respectivas reacciones. </li> <li> 4. Laboratorio de Toxicologa 5to de Bioqumica y Farmacia A Todo es veneno, nada es veneno. Todo depende de la dosis. Pgina4 9. Reacciones de reconocimiento. ANTES DESPUES 1) Reaccin de azul de Prusia: (-) negativo. (No hubo coloracin azul). 2) Reaccin de fenolftalena: (+) positivo, caracterstico (color violeta). 3) Reaccin con cido pcrico: negativo (+)positivo, caracterstico color (anaranjado) </li> <li> 5. Laboratorio de Toxicologa 5to de Bioqumica y Farmacia A Todo es veneno, nada es veneno. Todo depende de la dosis. Pgina5 4) Reaccin con solucin de yodo: (+) positivo no caracterstico color (decoloracin). 10. Observaciones. 1) Debido a la toxicidad y a las propiedades qumicas del txico se recomienda usar mascarilla con filtros de celulosa. 2) Instalar adecuadamente los materiales de vidrio sobre las nueces y los soportes. 3) Usar cinta aislante sobre las uniones de cada abertura y unin del material de vidrio para evitar fugas y accidentes. 4) El cianuro en el organismo del animal se pudo percibir en el momento de la autopsia. 5) Los reactivos para la reacciones de reconocimiento deben encontrarse en optimas condiciones. 11. Conclusiones. En conclusin determinamos mediante la prctica de laboratorio el alto nivel de toxicidad del cianuro sobre organismos vivos y adems constamos la presencia aunque en poca concentracin del toxico en el organismos del animal que pudo deberse a una fuga de los vapores en el equipo de destilacin. CUESTONARIO Cules son las manifestaciones clnicas de la intoxicacin por cianuro? El cianuro se une a la citocromooxidasa de forma reversible, inhibe la fosforilacin oxidativa y daa aquellos tejidos que ms dependen de ella, como el miocardio y el sistema nervioso central. Dada su afinidad por el hierro (Fe +3) oxidado, presente en la cadena respiratoria de la clula (citocromooxidasa), se une a este elemento bloqueando dicha cadena y, por ende, la respiracin. El centro respiratorio puede estar inicialmente estimulado por la acidosis metablica, pero finalmente se inhibe en las intoxicaciones graves; dicha estimulacin se debe adems a un efecto de estimulacin directa de quimiorreceptores en los centros respiratorio y cardaco. Cules son las dosis letales del cianuro? </li> <li> 6. Laboratorio de Toxicologa 5to de Bioqumica y Farmacia A Todo es veneno, nada es veneno. Todo depende de la dosis. Pgina6 Las dosis letales para las sales de cianuro son 200-300 mgr mientras que para el cido ciandrico es de 50 mgr. Tratamiento para la intoxicacin por cianuro Administrar oxgeno al 100%.Si el paciente est en paro respiratorio intubarlo. Canalizacin venosa inmediata. Realizar lavado gstrico exhaustivo con solucin salina y descartar el contenido rpidamente por el riesgo de intoxicacin inhalatoria del personal de salud. Suministrar carbn activado 1 gr/Kg de peso corporal en solucin al 25% por sonda nasogstrica. Antdotos: El cianuro tiene mayor afinidad por los nitritos, luego por el tiosulfato desodio y por la hidroxicobalamina. GLOSARIO. Cianuro El cianuro se encuentra en el reino vegetal formando parte de numerosos glucsidos capaces de liberar cido cianhdrico (HCN) al reaccionar con las enzimas hidrolticas apropiadas. El cido cianhdrico es un txico potente y de rpido efecto, ya que bloquea la respiracin celular al combinarse el ion cianuro (CN-) con una enzima indispensable para tal proceso. Hipoxia Es un estado en el cual el cuerpo completo (hipoxia generalizada), o una regin del cuerpo (hipoxia de piel loca), se ve privado del suministro adecuado de oxgeno. Destilacin La destilacin es la operacin de separar, mediante vaporizacin y condensacin en los diferentes componentes lquidos, slidos disueltos en lquidos o gases licuados de una mezcla, aprovechando los diferentes puntos de ebullicin de cada una de las sustancias ya que el punto de ebullicin es una propiedad intensiva de cada sustancia, es decir, no vara en funcin de la masa o el volumen, aunque s en funcin de la presin. Voltil La volatilidad desde el punto de vista qumico, fsico y de la termodinmica es una medida de la tendencia de una sustancia a pasar a la fase vapor. Se ha definido tambin como una medida de la facilidad con que una sustancia se evapora. A una temperatura dada, las sustancias con mayor presin de vapor se evaporan ms fcilmente que las sustancias con una menor presin de vapor. Dosis letal Es la cantidad de txico que puede producir la muerte. </li> <li> 7. Laboratorio de Toxicologa 5to de Bioqumica y Farmacia A Todo es veneno, nada es veneno. Todo depende de la dosis. Pgina7 BIBLIOGRAFIA KLAASSEN CD y WATKINS JB.Fundamentos de Toxicologa Casarett y Doull. (2005) (Madrid, McGraw Hill Interamericana) pg. 53-69. WEBGRAFIA: http://www.slideshare.net/lorenasenzanocastro/intoxicaciones-por-cianuro-dra- lorena http://www.estrucplan.com.ar/Producciones/entrega.asp?IdEntrega=47 Revisado Da Mes Ao Machala, 9 de Junio del 2014 __________________________________ ________________________________ Brenda E. Espinoza B. Bioq. Carlos Garca. Mg. Sc. Estudiante Catedrtico </li> <li> 8. Laboratorio de Toxicologa 5to de Bioqumica y Farmacia A Todo es veneno, nada es veneno. Todo depende de la dosis. Pgina8 UNIVERSIDAD TECNICA DE MACHALA FACULTAD DE CIENCIAS QUIMICAS Y DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUIMICA Y FARMACIA LABORATORIO DE TOXICOLOGA NOMBRE: Brenda Estefana Espinoza Blacio CATEDRTICO: Bioq. Carlos Garca. MsC. CURSO: 5to Ao de Bioqumica y Farmacia A GRUPO: N2 FECHA DE ELABORACION: Lunes, 9 de Junio del 2014 FECHA DE ENTREGA: Lunes, 16 de Junio del 2014 TRIMESTRE: Primero PRCTICA N2 12. Tema: INTOXICACIN POR FORMALDEHIDO. 13. Animal experimentado: Cobayo. 14. Va de administracin: Parenteral (intraperitoneal) 15. Objetivos: 3) Aprender a manipular y administrar txicos (Formaldehido) en animales de experimentacin. 4) Observar los signos y reacciones que presentan los animales en experimentacin luego de la administracin de txicos (Formaldehido). 5) Determinar la presencia del Formaldehido en el organismo del animal mediante reacciones de identificacin cualitativa. 16. Materiales: Sustancias: Vaso de precipitacin Tubos de ensayo Mechero Cocineta Pipetas Guantes de ltex Mascarilla Mandil 10 Calificacin Aceite mineral + formol Aceite mineral + diluyente Agua destilada Permanganato de potasio cido sulfrico puro Fushinabisulfatada Cloruro de fenilhidracina al 4 % Nitroprusiato de sodio al 2.5% Hidrxido de sodio Cloruro de fenil hidracina Ferricianuro de potasio al 5 10% Solucin sulfrica de morfina cido sulfrico Leche Cloruro frrico </li> <li> 9. Laboratorio de Toxicologa 5to de Bioqumica y Farmacia A Todo es veneno, nada es veneno. Todo depende de la dosis. Pgina9 17. Procedimiento 1. Tomamos las respectivas medidas de Bioseguridad en el laboratorio. 2. Preparamos la muestra de Formaldehido. 3. Se realizan las reacciones de reconociendo en medios biolgicos. Reacciones de reconocimiento en medios biolgicos: 1. Reaccin de Schiff: A una pequea porcin de la muestra, se aade 1ml de permanganato de potasio al 1% despus de mezclar se adiciona unas gotas de cido sulfrico puro, se deja reposar por tres minutos y agregan algunas gotas de solucin saturada de cido oxlico (hasta que decolore la mezcla); la mezcla adquiere un color madera que se decolora totalmente luego de agregarle nuevamente algunas gotas de cido sulfrico puro. Finalmente se le aade 1ml de fushinabisulfatada (Reactivo de Schiff), con lo cual se produce un intenso color violeta en caso de positivo. 2. Reaccin de Rimini: A 5 ml de destilado se agregan 10 gotas de cloruro de fenilhidracina al 4 %, 4 gotas de solucin de nitroprusiato de sodio al 2.5% recin preparado y 1ml de solucin de hidrxido de sodio, se produce una coloracin azul intensa. 3. Con la Fenilhidracina: En un medio fuertemente acidificado con cido clorhdrico a una pequea cantidad de muestra se agrega un pedacito de cloruro de fenil hidracina, 2-4 gotas de solucin de ferricianuro de potasio al 5 10% y algunas gotas de hidrxido de potasio al 12% se obtiene una coloracin rojo grosella. 4. Reaccin de Marquis: Se toma 1ml de destilado y se agregan 5ml de cido sulfrico concentrado, se agita luego con una solucin sulfrica de morfina (0.2 gr de cloruro de morfina en 10ml de cido sulfrico concentrado), se obtiene enseguida o despus de algn tiempo un color violeta. 5. Con el cido Cromotrpico: Con este cido en un medio fuertemente acidificado con cido sulfrico, el formaldehido produce una coloracin roja despus de calentarla ligeramente. 6. Reaccin de Hehner: Se mezcla una gota de destilado con algunos mililitros deleche, se estratifica con cido sulfrico concentrado al que se le han agregado trazas de cloruro frrico (5 gotas de cloruro frrico en 500ml de cido sulfrico); en caso positivo, en la zona de contacto se produce un color violeta o azul violeta. </li> <li>...</li></ul>