INMUNOHEMATOLOGIA UPLA 2010

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1 INMUNOHEMATOLOGIA APLICADO A MEDICINA TRANSFUSIONAL TM. EFRAIN MONTES HIJAR HOSPITAL IV ESSALUD HUANCAYO UPLA FARMACIA Y BIOQUIMICA 2010

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INMUNOHEMATOLOGIAAPLICADO A MEDICINA TRANSFUSIONAL

TM. EFRAIN MONTES HIJARHOSPITAL IV ESSALUD HUANCAYO UPLA FARMACIA Y BIOQUIMICA 2010

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GRUPOS SANGUINEOSAPLICACIONES

CLÍNICATransfusiones

Incompatibilidad materno-fetal - EHRN

Transplantes

MEDICINA LEGALExclusión de paternidad

Investigaciones forenses (manchas de sangre, semen)

ANTROPOLOGÍAMarcadores antropológicas de migraciones

En estudios de poblaciones antiguas

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Consideraciones generales

Documentacion y archivo

Tiempo de archivoDocumento de

identificacion del paciente

SolicitudNecesidades

individuales

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OBJETIVOS

Transfusión ABO Compatible

Detectar Anticuerpos en el Receptor

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documentacion

Fecha y hora recepción

Fecha y hora de las pruebas

Identificacion del personal profesional

Componentes sanguineos

Sistema computarizado Sistema ABO,Rh,

problemas de anticuerpos,historia transfusional

Los resultados e interpreatacion deben ser documentados en hojas de trabajo manuales

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LIMITACIONES

No Garantiza– Sobrevida de GR

Transfundidos– Inmunización del

Receptor– Errores en tipaje

ABO– Errores tipaje Rho

No Previene– Reacciones

hemoliticas tardías

– Reacciones febriles

– errores secretariales

– Acs leucocitarios, plaquetarios o plasmaticos

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Fases de P.C.

Identificación del Paciente y colección muestra

Estudio ReceptorSelección de SangrePruebas CruzadasReidentificacion

Receptor y control de la Transfusión

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Requisitos de la muestra

Tipo de muestra

suero: neutralizacion

plasma: coagulos de fibrina

la formacion de pilas celulares

Se recomienda: sueros de muestras coaguladas obtenidas con tubos lisos siliconizados, sin gel para separar suero.

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aspecto

Hemolisis

la utilizacion de suero con hemolisi puede enmascarar hemolisis inducida por anticuerpos.

Lipemia: raramente causa dificultades no es causa de rechazo en una prueba pre tansfusional.

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Antigüedad de la muestra

Según AABB( Menitove 1997)Todas las pruebas deben ser completadas

dentro de las 72 horas.El requerimiento de una nueva muestra de

prueba cruzada en pacientes transfundidos y embarazos es bastante representativos despues de 72 horas.

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Almacenamiento de la muestra

Toda muestra pretransfusional deben ser almacenadas de 1 a 6°c durante al meenos 7 días despues que las pruebas se han completado.

Esto para repetir o realizar pruebas adicionales del donante o el receptor

P ejemp. Anemia hemolítica retardada u otro efecto adverso.

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Seguridad en el laboratorio

cumplir con normas de bioseguridad.

Guardar todos los resultados de qc. De reactivos, componentes sanguineos,

Pruebas de escrutinio de agentes infecciosos.

Actas de eliminación de unidades infestadas

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METODOS

Equipamiento:

portaobjetos o tablas,tubos de ensayo,placas de microtitulación,o técticas de microtipificacion en gel.

Estos procedimientos pueden ser:

Semi automáticos, o completamente automáticos

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incubacion

Muchas pruebas de rx Ag –Abs requieren

incubacion a 37°c rutinariamente}

Normalmente el tiempo es de 15 minutos

Sin potenciadores se realiza en 60 minutos

El uso de solucion liss pueden reducir el tiempo de incubacion de 5 a 10 minutos

.

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centrifugacion

Es el paso finalEl tiempo se determina previa

estandarizacion y calibracion del equipoLa velocidad debe ser controlado

periodicamente.

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Identificación Receptor

Paciente debe ser identificado

Muestras rotuladas a pie de cama

Muestras No deben proceder de líneas de infusión

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Estudio del Receptor

Verificar paso anterior Determinar ABO -Rho Test de Coombs Directo Test de Coombs Indirecto Ver Registros anteriores

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Primera Segunda Tercera0 0A A 0A2 A2 0B B 0

AB AB A o B 0A2B A2B A2 o B 0

Grupo Receptor

Alternativas

SELECCIÓN DE SANGRE PARA TRANSFUSION

* Debe respetarse el Factor Rho** La serología debe ser No Reactiva*** Realizar el TCD y guardar piloto

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PRUEBAS CRUZADAS

PRUEBA CRUZADA MAYOR– Glóbulos rojos del Donate

Vs Suero del Receptor

PRUEBA CRUZADA MENOR– Glóbulos Rojos del

Receptor Vs Suero del Donante

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PRUEBA DE COOMBS DIRECTA

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PRUEBA DE COOMBS INDIRECTA

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REIDENTIFICACION Y CONTROL TRANSFUSION

Historia TransfusiónVerificar identidad

receptor Inspeccionar

componenteFirmar hoja

transfusión control 15 min.

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OTRAS CONSIDERACIONES

Situaciones Especiales: EmergenciasTransfusión MasivaTransfusión Intrauterina y Recién NacidosPrueba Cruzada Menor

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RECOMENDACIONES PARA EL LABORATORIO DE INMUNOHEMATOLOGIA

En punciones de dedo: limpiar con agua, realizar un corte profundo para que la sangre fluya fácilmente.

Usar material bien limpio y desengrasado.

Controlar la temperatura de trabajo.

Utilizar antisueros de título elevado.

Sistema ABO: realizar pruebas directa e inversa.

Sistema Rh: realizar la determinación por duplicado, por técnicos diferentes.

Recordar que el uso de GR lavados, aunque técnicamente más laborioso, permite eliminar interferentes.

Prueba de secretores puede ayudar a confirmar resultados.

Interferencia de hemólisis: incubar los sueros a 56°C, 30 min, para inactivar el complemento.

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ANOMALÍAS EN LAS DETERMINACIONES DE GRUPOS SANGUINEOS

EN PRUEBA DIRECTA (ABO y RH):· Resultados falsos: GR modificados por enzimas bacterianas (ausencia de Ag), Ag

distintos de ABO (Prueba inversa con panel de GR)

· a) Células de cordón umbilical: interferencia de proteína de Wharton. b) Disproteinemias (mielomas) o proteínas anómalas

(Células lavadas o prueba de hialuronidasa)

· Autoaglutinación: enfermedades autoinmunes, GR sensibilizados (Control de GR en su propio plasma o suero, Prueba de Coombs directa)

a) Subgrupos débiles, en particular, los de A o AB. b) Antígenos debilitados por procesos patológicos (pérdida de características en procesos neoplásicos, mutaciones en enfermedades mieloproliferativas)

(Pruebas en tubo, utilización de técnicas más sensibles, estudio de secreciones)

· Elevada concentración de sustancias A o B solubles en el suero de pacientes con carcinoma de estómago (neutralización del suero tipificador con producción de reacciones muy débiles).

(Células lavadas)

· Herencia anormal (Estudio familiar)

· Problemas técnicos: inadecuada temperatura de reacción, escasos GR, lectura después del tiempo recomendado, presencia de elementos extraños, antisueros vencidos

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EL PRESENTE Y FUTUROType and ScreeningPrueba Cruzada ElectrónicaEmpleo de Substitutos eritrocitarios

– O-poly Hb, FluorocarbonosEmpleo de Anticuerpos monoclonalesModificación Bioquímica de Grupo

SanguíneoUtilización Tecnología recombinante