8/18/2019 La Cromatografía en Columna Utiliza Una Columna de Vidrio Vertical Que Se Llena Con Un Soporte Sólido Adsorbe…

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La cromatografía en columna utiliza una columna de vidrio vertical que se llena con un

soporte sólido adsorbente (fase estacionaria: los más utilizados son gel de sílice (SiO2)

al!mina ("l2O#))$ La muestra que se quiere separar se deposita en la parte superior 

de este soporte$ %l resto de la columna se llena con el eluente (disolvente que

constitue la fase móvil) que& por efecto de la gravedad& 'ace mover la muestra a

travs de la columna$ Se establece un equilibrio entre el soluto adsorbido en la faseestacionaria el disolvente eluente que flue por la columna$ ebido a que cada uno

de los componentes de una mezcla establecerá interacciones diferentes con la fase

estacionaria la móvil& serán transportados a diferentes velocidades se conseguirá

su separación$ "sí& de manera similar a otros tipos de cromatografía& las diferencias en

las velocidades de desplazamiento a travs del medio sólido se corresponden con

diferencias en los tiempos de elución por la parte inferior de la columna para cada uno

de los componentes de la muestra original& que se recogerán en fracciones diferentes$

La polaridad del eluente afecta las velocidades relativas con las que los diferentes

componentes de la mezcla se mueven en la columna$ Los disolventes polares

compiten más eficientemente con las molculas polares de una mezcla por los lugarespolares del adsorbente$ *or lo tanto& un disolvente polar desplazará las molculas&

incluendo las más polares& rápidamente a travs de la columna$ Si el disolvente es

mu polar la elución será mu rápida generalmente 'abrá poca separación de los

componentes de la mezcla$ Si por el contrario el disolvente es mu apolar& no eluirán

los compuestos de la columna$ *or lo tanto& la elección del eluente es crucial para el

+ito de la cromatografía en columna$ " menudo se utiliza un gradiente creciente de

polaridad para la elución$ La ,,- se utiliza para determinar elegir el sistema

solvente adecuado para cada separación$. 

BIBLIOGRAFIA

1 Immaculada A ; Núria C ; Amparo C ;ImmaculadaD ; Núria L ; DiegoM ; Erneso N ;Lluisa !; Gloria Rosell ;" #Operaciones Basicas En ElLa$oraorio De %u&mica"# '(p)**+++"u$"edu*o$l,*o$l,-./casellano*cromaogra0a"(ml"

. Ro$er 2(ornon Morrison3 and Ro$er Neilson Bo4d3 QuímicaOrgánica 5!earson Educaci6n3 17789"

 "l agregar etanol a la muestra donde se encuentra el azul de metileno naran/a demetilo& va a darse una elusión del colorante azul de metileno por la atracción que tiene

Ilustración 1. Estructura química del Naranja de metilo y azúl de metileno.

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la amina por el 'idrogeno del etanol& esto 'ace que este colorante sea más a fin con la

fase móvil se de primero su elusión& el naran/a de metilo no reacciona porque el

grupo cromóforo azo ( 0 1 1 0 ) 1o siente afinidad por la fase móvil si esta tiene un

p3 alcalino$2 

Reacción 1. Reacción del azúl de metileno con etanol.

Se agregó agua luego de la completa elusión del azul de metileno& para e+pulsar de la

columna cualquier residuo de etanol que pueda reaccionar con el acido actico& el cualserá adicionado posteriormente a la columna así evitar la formación de un ester no

deseado en el análisis cromatográfico$2

 "l agregar ácido actico se dio lugar a la elusión del naran/a de metilo debido a la

afinidad que siente el grupo cromóforo azo por el 'idrógeno en medio ácido$ %sta

reacción en p3 #$4 'ace que el naran/a de metilo se muestre en un color ro/o como se

pudo ver en la práctica$2

Reacción . Naranja de metilo reacciona con ácido ac!tico.

BIBLIOGRAFIA

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1 Immaculada A ; Núria C ; Amparo C ;ImmaculadaD ; Núria L ; DiegoM ; Erneso N ;Lluisa !; Gloria Rosell ;" #Operaciones Basicas En ElLa$oraorio De %u&mica"# '(p)**+++"u$"edu*o$l,*o$l,-./casellano*cromaogra0a"(ml"

. Ro$er 2(ornon Morrison3 and Ro$er Neilson Bo4d3 QuímicaOrgánica 5!earson Educaci6n3 17789"

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