MANUAL DE USUARIOEspañol

TEUS00006-00-ESPNoviembre-2003

Apreciado cliente,

Gracias por adquirir nuestro fotómetro. Usted dispone ahora de uno de los fotómetrosde manejo más sencillo del mercado actual y estamos seguros de que sus caracte-rísticas lo convertirán en un instrumento valioso para su laboratorio. Aunque puedeser manejado de una manera lógica y sencilla a través de sus opciones por menús,le recomendamos la lectura detallada de este manual. Ello le ayudará tanto en lainstalación como en el correcto mantenimiento del aparato y le permitirá obtener elmáximo rendimiento de sus múltiples posibilidades.

TABLA DE CONTENIDO1. INTRODUCCIÓN ............................................................................................ 72. DESCRIPCIÓN DEL INSTRUMENTO .......................................................... 8

2.1. Descripción del teclado .................................................................... 82.1.1. Teclas de función ........................................................................ 82.1.2. Teclas numéricas ........................................................................ 82.1.3. Teclas de cursor .......................................................................... 82.1.4. Pulsador bomba .......................................................................... 8

2.2. DESCRIPCION DE LA PANTALLA .................................................... 92.3. DESCRIPCION DE LAS COMUNICACIONES ................................... 92.4. IMPRESORA........................................................................................ 92.5. SISTEMA DE ASPIRACION.............................................................. 10

2.5.1. Ciclo de aspiración.................................................................... 102.5.2. Elementos del circuito de aspiración ..................................... 10

2.6. MEDIDAS CON CUBETAS NORMALES O CON TUBOS .............. 112.7. MODO DE OPERACION POR MENUS ............................................ 11

2.7.1. Visión de un menú en la pantalla y selección de una opción112.7.2. Selección de un trabajo. Ruta de selección .......................... 122.7.3. Finalización de un trabajo ........................................................ 12

2.8. POSICIONES DE MEMORIA PARA PROGRAMAR TECNICAS .... 132.9. ENTRADA DE DATOS ...................................................................... 13

2.9.1. Entrada alfanumérica ................................................................ 132.9.2. Entrada numérica ...................................................................... 142.9.3. Opciones seleccionables de una lista predefinida............... 142.9.4. Teclas de funciones especiales .............................................. 14

3. METODO GENERAL DE OPERACIÓN ...................................................... 153.1 INICIO DE LA OPERACION. MENU PRINCIPAL .............................. 153.2. CONCENTRACION............................................................................ 163.2.1.Modificación temporal de parámetros ....................................... 173.2.2. Procedimientos multicalibrador ................................................. 173.2.3. Procedimientos multiensayo ...................................................... 193.2.4. Resolución en las medidas, pantalla, impresora y cálculos .. 203.3. ABSORBANCIA ................................................................................. 203.4. UTILIDADES...................................................................................... 20

3.4.1. Servicio ....................................................................................... 203.4.2. Cargar un nuevo programa ..................................................... 213.4.3. Programar filtros ....................................................................... 213.4.4. Reloj calendario ......................................................................... 223.4.5. Ajustar bomba ............................................................................ 223.4.6. Revisión del ajuste del volumen de muestra ......................... 223.4.7. Ajuste manual ............................................................................. 223.4.8. Ajuste automático ...................................................................... 23

3.4.9. Test de sensibilidad .................................................................. 233.4.10. Recuperar técnicas borradas: .............................................. 243.4.11. Valores por defecto ................................................................. 24

3.5. CONFIGURACION ............................................................................. 243.5.1. Idioma .......................................................................................... 243.5.2. Contraste pantalla ..................................................................... 243.5.3. Impresora activa ........................................................................ 253.5.4. Contraste impresora ................................................................. 253.5.5. Listado cabecera ....................................................................... 253.5.6. Zumbador.................................................................................... 253.5.7. Precalentamiento ....................................................................... 253.5.8. Modos de lavado ....................................................................... 253.5.9. Código de paciente ................................................................... 263.5.10. Introducir datos laboratorio ................................................... 263.5.11. Comunicaciones ...................................................................... 26

3.6. PROGRAMACION ............................................................................. 263.6.1. TECNICAS ................................................................................... 263.6.2. Cómo programar parámetros .................................................. 273.6.3. Menú de salida. .......................................................................... 323.6.4. Revisar una técnica ................................................................... 323.6.5. Borrar una técnica..................................................................... 323.6.6. Crear una técnica nueva .......................................................... 323.6.7. Copiar una técnica .................................................................... 323.6.8. Mover una técnica ..................................................................... 32

3.7. UNIDADES ......................................................................................... 323.7.1. Tabla de unidades ..................................................................... 323.7.2. Revisar una unidad ................................................................... 333.7.3. Borrar una unidad ..................................................................... 333.7.4. Crear una unidad nueva ........................................................... 33

3.8. CONTROL DE CALIDAD .................................................................. 333.8.1. Programar controles ................................................................. 333.8.2. Listados y graficas .................................................................... 33

3.9. CÓDIGO DE OPERADOR ................................................................. 334. PROCEDIMIENTOS DE MEDIDAS Y CALCULOS ................................... 34

4.1. PUNTO FINAL ................................................................................... 344.1.1. Cálculos en el modo de punto final0 ...................................... 354.1.1.1. Lecturas bicromáticas ........................................................... 354.1.1.2. Cálculos con factor ................................................................ 354.1.1.3. Cálculos con un calibrador único ........................................ 354.1.1.4. Cálculos con varios calibradores ........................................ 354.1.1.5. Replicados ............................................................................... 354.2. DIFERENCIAL................................................................................. 364.2.1. Cálculos en el modo diferencial .............................................. 364.2.1.1. Cálculos con factor ............................................................... 36

4.2.1.2. Cálculos con un calibrador único ....................................... 364.2.1.3. Cálculos con varios calibradores ....................................... 364.2.1.4. Replicados .............................................................................. 374.3. TIEMPO FIJO ................................................................................ 374.3.1. Cálculos en el modo de tiempo fijo ........................................ 374.3.1.1. Cálculos con factor ............................................................... 374.3.1.2. Cálculos con un calibrador único ....................................... 374.3.1.3. Cálculos con varios calibradores ....................................... 384.4. CINETICA....................................................................................... 384.4.1. Cálculos en el modo cinético .................................................. 384.4.1.1. Cálculos de velocidades y comprobación de linealidad . 384.4.1.2. Cálculos con factor ............................................................... 384.4.1.3. Cálculos con un calibrador único ....................................... 394.4.2. Cinéticas múltiples ................................................................... 394.4.2.1. Cálculos con factor ............................................................... 394.4.2.2. Cálculos con un calibrador único ....................................... 394.5. MODO COCIENTE ........................................................................ 394.5.1. Cálculos en el modo cociente................................................. 394.5.2. Replicados ................................................................................. 394.6. VALOR DISCRIMINANTE (CUT-OFF) .......................................... 404.6.1. Lecturas bicromáticas ............................................................. 404.6.2. Reacción directa ....................................................................... 404.6.3. Reacción inversa ...................................................................... 40

7

1. INTRODUCCIÓN

Este fotómetro es un instrumento diseñado para realizar Diagnóstico In Vitro, por lo que suuso debe ser exclusivamente profesional. Su funcionamiento se basa en la medida de laconcentración del analito presente en la muestra mediante la medida de su absorbanciatras el uso de uno o varios reactivos.

A pesar del gran número y la complejidad de tareas que este fotómetro puede llevar acabo, su utilización es extraordinariamente sencilla a través del sistema de menús y de sulógica de interacción, de tal forma que se establece un diálogo entre el usuario y el aparatomuy fácil de asimilar.

Además de la gran fiabilidad de su óptica, este aparato ofrece una gran versatilidad en losdispositivos de lectura: micro-cubetas de flujo, cubetas normales o micro-cubetas, y tubos.Las cubetas son termostatizadas de forma rápida y precisa mediante un sistema peltier,sin necesidades de conexiones para circulación de agua.

Su sofisticado software permite la programación de hasta 39 parámetros diversos, quedefinen una técnica determinada. Puede almacenar hasta 100 técnicas diferentes. Porotra parte, la programación es sencilla y viene facilitada por la existencia de comandos de“copiar” y “mover”. Aparte de las técnicas, pueden programarse muchas otras funcionesdel instrumento, tales como: nombre del laboratorio, idioma, filtros adicionales, modo delavado, contenido de la cabecera de impresión, comunicaciones, etc.

La funcionalidad de este fotómetro viene completada por una serie de modos automáticosde cálculo que cubren la mayor parte de posibilidades de análisis fotométrico: punto final,modo diferencial, tiempo fijo, cinética, modo cociente, cut-off así como técnicas no linea-les. Los cálculos permiten también utilizar estandar, factor y la lectura bicromática.

ATENCIÓNEste fotómetro está diseñado y construido exclusivamente para uso profesional. El usuariodebe tener formación adecuada para trabajar en un laboratorio de análisis clínicos ypara la utilización de un fotómetro de diagnóstico in vitro. Debe leerse cuidadosamenteeste manual y respetar todos los avisos y precauciones que en él se detallan.

8

Manual de usuario

2. DESCRIPCIÓN DEL INSTRUMENTOLa función principal del fotómetro es medir la concentración de analitos presentes en unamuestra.El fotómetro succiona la muestra a través de un tubo de teflón, para ello utiliza una bombaperistáltica controlada por el microprocesador. Una vez la muestra está posicionada den-tro de la cubeta de flujo, si la técnica lo requiere, el programa la termostatiza a la tempera-tura programada. Un haz de luz monocromado atraviesa la muestra a medir, e incidesobre el fotodiodo que convierte la luz en corriente.La absorbancia es una medida relativa, o sea, que se realizan dos medidas, una la de lamuestra y la otra de referencia (generalmente se toma agua destilada).

La absorbancia se calcula con la siguiente relación:

La concentración del analito de la muestra será proporcional a su absorbancia medida.

2.1. Descripción del teclado

2.1.1. Teclas de función (1)

ENTER. Se usa para confirmar opciones del menú, datos introducidos.ESC. Se usa para abandonar un trabajo, dirigiéndose al paso previo del programa, o

abortar un proceso.PAPER. Esta tecla está destinada al avance manual del papel de la impresora. El papel

avanza mientras la tecla se mantiene apretada.WASH. Esta tecla permite operar la bomba independientemente del programa, permitien-

do realizar lavados de los tubos y de la cubeta en cualquier momento.TECLA DE FUNCION ACTIVA El teclado dispone de cinco teclas de función cuya utiliza-

ción depende del punto de programa que se está ejecutando. En la parte inferior dela pantalla se indican en cada momento las funciones activas disponibles.

1

2

3

Absorbancia=log Corriente muestra Corriente referencia

9

2.1.2. Teclas numéricas (2)El teclado numérico está formado por las teclas 0 a 9, junto al punto decimal y la tecla C.

2.1.3. Teclas de cursor (3)El teclado dispone de cuatro teclas de cursor, los cursores verticales (tecla de arriba yabajo) y los cursores horizontales (tecla derecha e izquierda).

2.1.4. Pulsador bombaEn el frontal izquierdo del fotómetro hay un pulsador cuya función es activar la bombaperistáltica cuando se precisa una aspiración de muestras.

2.2. DESCRIPCION DE LA PANTALLALa pantalla es de cristal líquido (LCD) y consiste en 320 x 240 puntos de resolución.

La pantalla del programa se divide en cuatro secciones: encabezamiento, sección de tra-bajo, línea de mensajes y sección de funciones activas.

El encabezamiento corresponde a las dos primeras líneas de la pantalla. En ellas se dainformación de carácter general, como el nombre del menú en que se encuentra el progra-ma, la fecha, la hora e información adicional sobre la técnica que se está modificando oejecutando. En la sección de trabajo, que ocupa las 15 siguientes líneas, se muestra lainformación de la ejecución de las técnicas, los menús, las gráficas, etc. La línea de men-sajes aparece en vídeo inverso, y en ella se muestran mensajes de utilidad para guiar alusuario.Las sección de funciones activas ocupa las dos últimas líneas de la pantalla. Enella se indican las funciones activas en las teclas de función situadas debajo de la pantalla.La funcionalidad de estas teclas depende de la parte de programa que se está en ejecu-ción.

2.3. DESCRIPCION DE LAS COMUNICACIONESEn la parte posterior del aparato puede verse un conector en un cajetín marcado COM1.Las líneas de control y los niveles eléctricos del canal de comunicaciones serie son com-patibles con el standard E.I.A. RS-232. La figura 2.2 describe las señales del conector.

RxD: Recepción de datos.TxD: Transmisión de datos.GND: Masa (0 voltios).

PIN SEÑAL

1 NC2 TXD3 RXD4 NC5 GND6 NC7 NC8 NC9 NC

1 5

6 9

PUERTO SERIECOM1

10

Manual de usuario

2.4. IMPRESORAEl fotómetro tiene incorporada una impresora térmica que permite la impresión rápida ysilenciosa del texto. La impresora trabaja en forma bidireccional, optimizando el recorridode la cabeza de impresión y por tanto el tiempo. El avance de papel se realiza con rapidezpor medio de un motor independiente. La impresión del texto se realiza en cuarenta colum-nas.

2.5. SISTEMA DE ASPIRACIONEl sistema de aspiración tiene la función de manejar las muestras. Es una de las partesmás delicadas del instrumento y debe ser tratado con el máximo cuidado. Este apartadoexplica el funcionamiento de dicho circuito, sus elementos constitutivos y los parámetrosque lo controlan.

2.5.1. Ciclo de aspiraciónEste ciclo consiste en la aspiración de la muestra a leer y su transporte hasta la cubeta deflujo. Está formado por tres pasos consecutivos:

ASPIRACION: La muestra es aspirada por el tubo de teflón hasta el volumen programado.

RETARDO DE LA BOMBA: Es el tiempo de espera desde que termina la aspiración hastaque inicia el posicionamiento. Durante este tiempo el recipiente que contiene la muestradebe ser retirado del tubo de aspiración.

POSICIONAMIENTO: La bomba se activa otra vez, transportando la muestra hasta lacubeta y situándola de forma adecuada para su lectura. Las muestras ya leídas sontransportadas hacia el frasco de residuos cuando se aspiran nuevas muestras o biencuando se lleva a cabo un lavado.

2.5.2. Elementos del circuito de aspiracióna) El TUBO DE ASPIRACION de teflón que va desde la cubeta hasta el exterior del apara-

to a través de un tubo guía metálico, al cual está fijado mediante un conector de silicona.Este tubo tiene una longitud predefinida y debe ser de la calidad apropiada, por lo quesiempre deben emplearse tubos originales. No debe tener plegamientos ni grietas. Entales casos, debe reemplazarse.

b) El RACORD DE ENTRADA para fijar el tubo de teflón a la cubeta.

c) La CUBETA DE FLUJO, donde tienen lugar las lecturas. Debe ser la cubeta original,para la cual se ha diseñado y ajustado el sistema óptico. En caso de rotura o pérdida,contactar con el Servicio de Asistencia Técnica para adquirir una nueva de característi-cas adecuadas. Para evitar la rotura, mantenerla siempre en el porta-cubetas o bien enel alojamiento situado a la izquierda para tal fin.

d) El RACORD DE SALIDA al cual se conecta el tubo dosificador.

e) El TUBO DOSIFICADOR que conecta la cubeta de flujo con el racord de residuos.

11

f) La BOMBA PERISTALTICA, que es el mecanismo que, junto con el tubo dosificador,lleva a cabo el trabajo de aspiración y transporte de las muestras. Es operada por unmotor paso a paso de baja tensión, con una resolución de 1/100 de vuelta, el cualgarantiza una excelente funcionamiento y una alta precisión.

2.6. MEDIDAS CON CUBETAS NORMALES O CON TUBOSPueden usarse cubetas normales para lecturas. Las cubetas pueden ser macro, semi-micro o micro, de vidrio o de plástico, teniendo en cuenta que algunas de estas últimas noson adecuadas para reacciones en las que el control de la temperatura debe ser estricto,ya que el líquido está lejos de las paredes del porta-cubetas y que el plástico actúa comoaislante. El sistema óptico de este fotómetro está diseñado para poder realizar lecturascon tubos de ensayo de un diámetro de 12 mm. Su altura no debe ser superior a 75 mm yaque de lo contrario no podría cerrarse la tapa de acceso al compartimento de las cubetas.Para leer con tubos de ensayo, sacar la cubeta de flujo, colocarla en el alojamiento desti-nado a tal fin e insertar el adaptador de tubos en el porta-cubetas.

2.7. MODO DE OPERACION POR MENUSEl programa del fotómetro se base en el uso de menús para realizar las diferentes accio-nes. Un menú es una serie de opciones agrupadas en forma de una lista y numeradas. Lalista siguiente es un ejemplo de menú, en este caso correspondiente al llamado MENUPRINCIPAL.

2.7.1. Visión de un menú en la pantalla y selección de una opciónLos menús se visualizan en la pantalla encuadrados en ventanas. Cada línea correspondea una opción del menú y está precedida por un número de orden. La opción seleccionadaes la que aparece dentro de un recuadro negro. La selección de las distintas opciones demenú se efectúa mediante las teclas de CURSORES VERTICALES. Cada vez que sepulsa una de estas dos teclas, la barra de selección se desplaza arriba o abajo según elcaso, cambiando así la opción seleccionada. Al pulsar ENTER se activa dicha opción. Un

MENU PRINCIPAL 05/05/99 16:23:45

0 CONCENTRACION1 ABSORBANCIA2 UTILIDADES3 CONFIGURACION4 PROGRAMACION5 CONTROL DE CALIDAD6 CODIGO DE OPERADOR

ACERCA DE

ATENCIONEl fotómetro está ajustado para cubetas cuadradas de 10 mm, de forma que losvalores absolutos de absorbancia leídos usando tubos de ensayo no coincidirán conlas lecturas de la misma muestra realizadas con cubetas de 10 mm. Por tal motivo,sólo deben usarse tubos en técnicas con CALIBRADOR.

12

Manual de usuario

modo rápido de entrar dentro de una opción es pulsando el número que precede a laopción.

2.7.2. Selección de un trabajo. Ruta de selecciónAl seleccionar una opción en el MENU PRINCIPAL aparece un nuevo menú en pantalla.Este es un menú de SEGUNDO NIVEL. Al seleccionar una opción en este menú de segun-do nivel, puede aparecer otro menú (TERCER NIVEL) en la pantalla. A veces, existen másniveles de menús interconectados. En todos los casos, las opciones son seleccionadassimplemente pulsando la tecla correspondiente al número de la opción. Siguiendo con elejemplo del MENU PRINCIPAL, si se selecciona la opción 4 (PROGRAMACION), apare-cerá el siguiente menú:

Y si se selecciona la opción 0 (TECNICAS) aparecerá la siguiente pantalla:Nota: la funcionalidad de esta opción de menú se explica en el capítulo siguiente.

Al seleccionar la opción 0 (o pulsando ENTER en la opción resaltada en negro) se llega alfinal del proceso de selección, en el cual se ejecuta un trabajo (en este ejemplo, modificarlos parámetros de una técnica).

Para comenzar este trabajo, ha sido necesario seleccionar tres opciones consecutivas. Ala expresión: MENU PRINCIPAL / PROGRAMACION / TECNICAS / nombre de la técnicaformada por las opciones seleccionadas, se le llama CAMINO. A partir de este punto y a lolargo de este manual, ésta será la forma de indicar el conjunto de opciones consecutivasen los menús interconectados que deben ser seleccionadas para alcanzar el trabajo quese explica. En ocasiones, aparecerán puntos suspensivos en medio de un camino (OP-CION / ... / OPCION), para indicar que es necesario introducir un parámetro entre ambasopciones.

2.7.3. Finalización de un trabajoLa forma normal de salir de un trabajo es usando la tecla de función SALIR. A través deella se retorna al paso previo del programa (generalmente un menú). La tecla ESC sirvepara interrumpir tareas y operaciones en ejecución, o abandonar modificaciones restau-rando los valores originales.

MENU PRINCIPAL 05/05/99 16:23:45

0 CONCENTRACION1 ABSORBANCIA2 UTILIDADES3 CONFIGURACION4 PROGRAMACION5 CONTROL DE CALIDAD6 CODIGO DE OPERADOR

ACERCA DE

13

2.8. POSICIONES DE MEMORIA PARA PROGRAMAR TECNICASExisten 100 posiciones de memoria para la programación de técnicas analíticas. Cadaposición contiene un cierto número de parámetros que dependerán del MODO DE ANALI-SIS seleccionado.Cada posición puede contener una técnica con cualquier procedimiento de medida y pue-de ser almacenada de forma permanente. El contenido de cada posición puede ser borra-do, copiado o movido. En la pantalla, el listado de técnicas se muestra en páginas de 10técnicas por página. Para pasar de una página a otra, utilizar las teclas de función AVAN-CE PAGINA y RETROCEDE PAGINA, o bien mediante las teclas de CURSORES VERTI-CALES (ARRIBA y ABAJO), las cuales desplazarán en el sentido seleccionado el cursorde selección. Las páginas cambian automáticamente al llegar el cursor de selección a losextremos superior o inferior de la pantalla. Los símbolos y que aparecen en dichos extre-mos indican que hay más páginas accesibles en la dirección indicada. El nombre de cadatécnica va precedido por dos dígitos separados por un punto. El primero de ellos indica lapágina que se está visualizando y el segundo el número el orden dentro de la lista. Unmodo rápido de acceder a una técnica es usar las teclas de función AVANCE PAGINA yRETROCEDE PAGINA, hasta tener visible la página en la que se encuentra la técnicadeseada y pulsar entonces su número de orden (segundo dígito).

2.9. ENTRADA DE DATOSTres tipos diferentes de datos pueden ser introducidos en el fotómetro: alfanuméricos,numéricos y selecciones por lista.

2.9.1. Entrada alfanuméricaCuando el programa requiere la introducción de un texto alfanumérico, el cursor de escri-tura se posiciona automáticamente en la primera posición. Para introducir los datosalfanuméricos, proceder como sigue:

a) Usando los CURSORES VERTICALES, pueden seleccionarse letras, números y sím-bolos en forma cíclica y siguiendo el orden de la tabla ASCII. Seleccionar el carácterdeseado en la pantalla encima del cursor de escritura.

b) Pasar a la siguiente posición usando el CURSOR DERECHO y seleccionar otra vez uncarácter alfanumérico usando los CURSORES VERTICALES. Repetir este paso tan-tas veces como sea necesario para completar el texto. Cuando el cursor se desplazahacia una posición libre a la derecha, en la nueva posición aparece repetido el últimocarácter seleccionado.

c) Usando ambos CURSORES HORIZONTALES, puede pasarse de un extremo a otrodel texto, y es posible modificar los caracteres en cualquier posición tantas veces comosea necesario.

d) Si se quiere borrar todo el texto, apretar la tecla C. En caso de que se quiera abando-nar el proceso, pulsar ESC y el texto no será considerado.

e) Para aceptar el texto pulsar ENTER. El texto quedará almacenado de forma perma-nente. En la entrada alfanumérica, los CURSORES tienen la función de repetición. Si

14

Manual de usuario

se mantienen apretados por un periodo superior a un segundo, avanzanautomáticamente.

Para comodidad del usuario, aparecen dos teclas de función (LETRAS, SIMBOLOS) quesitúan el cursor en la primera letra del alfabeto (según idioma seleccionado) o en la zonade símbolos especiales de la tabla.

2.9.2. Entrada numéricaSe utiliza cuando el programa requiere valores de parámetros numéricos. Para introducirestos valores se utilizan las TECLAS NUMERICAS y el PUNTO DECIMAL del teclado. Elprograma limita en cada caso el número de dígitos a introducir. El cursor de escrituraaparece en la primera posición y se desplaza a la siguiente al introducir un número (o unpunto decimal). Si se quiere corregir un número antes de su confirmación, pulsar la tecla Cy se borrará el número completo. Para aceptar el número (y abandonar el proceso) pulsarENTER. El número será almacenado de forma permanente. A menudo, aparecen en lapantalla los siguientes títulos: Valor actual: es el valor que el parámetro tiene en ese mo-mento (dato introducido previamente o valor por defecto). Valor nuevo: es el valor que esintroducido y que será almacenado al pulsar ENTER.

2.9.3. Opciones seleccionables de una lista predefinidaEn ocasiones, el usuario debe escoger un elemento o un valor de una lista predefinida.Cuando aparece en la pantalla la ventana con la lista correspondiente, mediante losCURSORES VERTICALES se efectúa la selección del elemento. Para confirmar la selec-ción, debe pulsarse ENTER.

2.9.4. Teclas de funciones especiales

AVANCE PAGINA: Cuando una lista no cabe entera en la pantalla, aparece esta tecla defunción que permite visualizar los siguientes elementos de la lista.

RETROCESO PAGINA: Cuando una lista no cabe entera en la pantalla, aparece estatecla de función que permite visualizar los elementos anteriores de la lista.

CONTROL 1: esta función aparece si la técnica tiene programado los controles de cali-dad. Permite indicar al programa que la muestra a introducir debe ser tomada comoun Suero Control 1.

CONTROL 2: esta función aparece si la técnica tiene programado los controles de cali-dad. Permite indicar al programa que la muestra a introducir debe ser tomada comoun Suero Control 2.

IMPRIMIR: Permite imprimir los diferentes listados, dependiendo de que parte del progra-ma se está ejecutando. Está función aparece si la opción IMPRESORA del menúCONFIGURACION está activada.

PARAR IMPRIMIR: Sirve para interrumpir un listado que está en proceso.MAS OPCIONES: Está función aparece cuando hay más de un juego de funciones activo

disponibles. Sirve para cambiar de un juego de funciones a otro.SALIR: Regresa al menú o pantalla anterior.

15

3. METODO GENERAL DE OPERACIÓN

3.1 INICIO DE LA OPERACION. MENU PRINCIPALCuando se conecta el fotómetro, se muestra la pantalla como la siguiente:

El programa comprueba si existe algún tipo de error o alteración en las informaciones que secitan a continuación, e indica «Pasa» si la comprobación es correcta y «No pasa» si se haproducido algún error o alteración.

Información comprobada:

Monitor: Programa Monitor.Programa: Programa de aplicación.Configuración: Personalizaciones del usuario, unidades y filtros.Técnicas: Técnicas programadas.Ajustes: Ajustes fotométricos, de termostatación y de aspiración.

Si se detecta un error de Monitor o Programa, el funcionamiento del instrumento puede verseafectado.Si el error es en Configuración, Técnicas o Ajuste, el instrumento funcionará correctamentepero pueden haber datos erróneos en alguna de las informaciones anteriores. En cualquiercaso se recomienda avisar al Servicio de Asistencia Técnica.Una vez finalizado el autotest, pulsando ENTER aparece una pantalla de presentación en lacual se muestra el modelo de instrumento, su número de serie y la versión del programainstalado. Pulsando ENTER de nuevo se accede al menú principal.

Seleccionar una de estas opciones, dependiendo del trabajo que quiera realizarse.

- CONCENTRACION: Para medir concentraciones de acuerdo con una técnica definida pre-viamente, que ha sido programada en una posición de memoria.

- ABSORBANCIAS: Para medir absorbancias.- UTILIDADES: Para ejecutar operaciones de interés para el usuario, por ejemplo, cambiar la

configuración de la rueda de filtros, programar la fecha y la hora, ajsutar la bomba peristáltica,etc.

- CONFIGURACION: Para personalizar la configuración del instrumento.

TEST CHECKSUMMonitor 0x377A71 PASAProgram 0x9ec8d1 PASAConfiguracion 0x00034d PASATecnicas 0x0045f6 PASAControles 0x004e39 PASA

Apretar ENTTER para continaur

Manual de usuario

16

- PROGRAMACION: Para programar técnicas u otros parámetros que controlan las diferen-tes funciones del aparato.

- CONTROL DE CALIDAD: Para trabajar con el programa de control de calidad.- CODIGO DE OPERADOR: Para introducir un código de operador, el cual saldrá impreso en

los listados de resultados de concentración.

3.2. CONCENTRACIONEsta opción permite el cálculo de concentraciones utilizando cualquiera de las TECNICASprogramadas previamente y almacenadas en las 100 posiciones de memoria disponibles. Se-leccionando esta opción, aparece una pantalla con la lista de las técnicas programadas:

Una vez confirmada la selección, el aparato imprimirá o no una cabecera con datos relativos ala técnica, en función de como esté programada la opción LISTADO CABECERA del menúCONFIGURACION.Al iniciar la ejecución, el aparato solicitará la entrada de una línea de base para ajustar elCERO (lo habitual es realizar dicho ajuste con agua destilada).Hecho el ajuste del CERO, en la pantalla aparece la información de los valores memorizadosde blanco de reactivo y calibradores y la fecha en que se realizaron.A partir de ahí, el programa guía al usuario durante la ejecución de la técnica mediante losdistintos mensajes que van apareciendo en la pantalla. La introducción de muestras, blancosde reactivo y calibradores se inicia a través de las teclas de función. Si se está utilizando lacubeta de flujo, para activar la aspiración de la muestra, presionar el pulsador BOMBA queestá en la parte frontal izquierda del fotómetro. Para leer cubetas normales, pulsar ENTER.Cada vez que se efectúa una lectura se muestra el valor de la absorbancia leída (en caso dehaber más de un replicado, se calcula la media). Si hay programados valores límites, por

MENU PRINCIPAL 05/05/99 16:23:45

0 CONCENTRACION1 ABSORBANCIA2 UTILIDADES3 CONFIGURACION4 PROGRAMACION5 CONTROL DE CALIDAD6 CODIGO DE OPERADOR

ACERCA DE

CONCENTRACION 05/05/99 16:23:45

2.0 - FAL AMP2.1 - FAL DEA2.2 - GLUCOSA2.3 - PHOSPHOROUS2.4 - GGT2.5 - IRON2.6 - LDH2.7 - MAGNESIUM2.8 - SERUM PROTEINS2.9 - URINE PROTEINS

PAG SALIR

17

ejemplo límite de blanco, éstos se muestran en pantalla; si el valor de la absorbancia es supe-rior o inferior a este parámetro (dependiendo de si es creciente o decreciente respectivamen-te), se muestran unas flechas que indican que la lectura está fuera del límite.Finalizada la lectura de todos los replicados, al pulsar F1 (siempre que haya más de uno) sepueden activar y desactivar, recalculándose la media de las absorbancias cada vez. Se finalizala edición de replicados pulsando la tecla ACEPTAR. Una vez finalizada la introducción detodos los replicados se imprimen los resultados.Si la técnica tiene programados los CONTROLES, durante el proceso de introducción demuestras aparecen activas las teclas de función CONTROL 1 y CONTROL 2. Al pulsarlas, elprograma toma la muestra que va ha introducirse como suero-control 1 y 2 respectivamente.El programa indica en cada momento el replicado de la muestra o control a introducir. Si elparámetro Límite de Linealidad está programado a un valor diferente de cero, el programaindicará si el resultado de la concentración está fuera de este límite de linealidad medianteunas flechas en el valor de la absorbancia media.Si el código de paciente está activada, el fotómetro pedirá antes de introducir cada muestradicho código, el cual identificará a la muestra en los listados.

3.2.1.Modificación temporal de parámetrosAntes de introducir la línea de base, aparece activa la tecla de función MODIFICAR, la cuálpermite efectuar una modificación temporal de los parámetros de la técnica. Las modificacio-nes efectuadas de este modo se pierden en el momento de salir de la técnica.

3.2.2. Procedimientos multicalibradorEn estos modos de cálculo se utilizan varios puntos para hacer la curva de calibración. En laprogramación de la técnica se programa el número de calibradores, así como el valor de laconcentración de cada calibrador.Una vez introducida la línea de base, en la pantalla se presentan los valores memorizados,incluyendo la última curva de calibración memorizada (si la hay).Si se desea utilizar estos valores, pulsar la tecla de función MUESTRA para iniciar la introduc-ción de muestras.

Si se desea introducir un nuevo blanco, pulsar la tecla de función NUEVO BLANCO. Si no sedesea utilizar la curva de calibración presentada y se desea introducir una nueva, pulsarNUEVO CALIBR. Se pasa entonces a la pantalla de introducción de los nuevos calibradores.

El programa solicita al usuario la introducción de cada uno de los nuevos calibradores y calculala media si hay más de un replicado. Una vez introducidos, para aceptar los datos mostradosen la pantalla pulsar SALIR. Para rechazarlos pulsar ESC.

Una vez aceptados, el programa regresa a la pantalla anterior mostrando la gráfica de loscalibradores con sus absorbancias leídas. El usuario, a través de las teclas de cursor, puededesplazar un cursor gráfico por los diferentes puntos de la curva (con sus correspondientesreplicados). En la parte derecha de la pantalla se visualizan los valores para cada calibrador(concentración, absorbancia media, etc.).Al pulsar la tecla ENTER sobre cualquiera de los puntos de absorbancia se pasa al modoedición, en el cual se puede anular el valor o volver a activarlo si ya estaba anulado.

Manual de usuario

18

Si se pulsa otra vez F2 se regresa a la pantalla de introducción de los valores de calibración,pudiendo editar cualquier valor introducido anteriormente mediante F1, y utilizando luego lasteclas de cursor. Se regresa a la pantalla de la gráfica pulsando F5.Una vez se decide que la curva es correcta, pulsar F1 para memorizar la gráfica. Una vezmemorizada, solamente se presentan los valores medios de los replicados y ya no se puedeanular ningún punto.El programa puede detectar los siguientes errores en la curva de calibración:

POLIGONAL

LIN

LIN LIN

LIN

SPLINE

RECTA DEREGRESION

LIN

LOG

LOG

LOG

PARÁBOLA DEREGRESION

19

Mensajes de error Causa del error SoluciónGráfica no memorizada No hay ningún valor Realizar las medidas

memorizado. Aparececuando se ejecuta porprimera vez la técnicao se cambia su número decalibradores en laprogramación de parámetros.

Valores X no crecientes Los valores de concentración Revisar los valores de conen la programación de la centración en la programa-técnica no son crecientes ción de la técnica

Valores Y no monótonos Los valores de absorbancia de - Volver a leer lalos calibradores no son absorbancia de loscrecientes o decrecientes calibradores.de acuerdo con la programación - Cambiar el modo dede la técnica (creciente o interpolación o el valor dedecreciente). los ejes x e y

Valores Y negativos Los valores de absorbancia -Hay alguna burbuja de airedan resultado negativo. en la cubeta de flujo

-Repetir la lectura

Al pulsar MAS OPCIONES, aparece un nuevo juego de funciones activas:·F1 para cambiar el eje X de lineal a logarítmico y viceversa.·F2 para cambiar el eje Y de lineal a logarítmico.·F3 para cambiar el modo de interpolación: poligonal, recta de regresión, parábola de regre-sión y spline..

3.2.3. Procedimientos multiensayoEste tipo de procedimientos se aplica en el caso de ensayos de muestras, cuya incubación serealiza de forma simultánea fuera del fotómetro, y que requieren dos o más lecturas de lamisma muestra.Las absorbancias se leen de forma secuencial, y las lecturas se repiten para las mismasmuestras y en el mismo orden, a intervalos de tiempo fijos. De esta forma se llevan a cabo doslecturas (multi-tiempo fijo) o más (multi-cinética) para una serie de muestras, a intervalos detiempo programados.Una vez hecho el cero, el aparato solicita el número de muestras a procesar. Este númerodebe estar dentro del margen indicado en la pantalla, que es función del tiempo de espera y elnúmero de intervalos programados. Entrar el número y pulsar ENTER.El proceso multi-ensayo comienza al pulsar ENTER nuevamente. La pantalla indica el númerode la muestra a introducir y el aparato avisa, con una señal acústica “beep”, el momentopreciso en que debe ser aspirada; una vez transcurrido el tiempo de espera, el instrumentosolicita la segunda muestra y así sucesivamente hasta que se haya realizado la primera medi-da de todas las muestras. En ensayos que utilizan calibrador, éste se solicita y se procesa alprincipio del proceso, como en los procedimientos de un único ensayo.El instrumento espera a continuación hasta que transcurra el intervalo de tiempo programadopara realizar la segunda lectura de la primera y sucesivas muestras, mostrando un mensaje deespera en la pantalla. A continuación, aparecerá nuevamente el número de muestra y sonará

Manual de usuario

20

la señal de aviso en el momento en que debe ser aspirada. Se realiza así una segunda lecturade todas las muestras.

En el caso de la multi-cinética, el proceso continua hasta que se completa el número deintervalos programado.Al final del proceso de medida, el instrumento muestra por la pantalla e imprime los resultadosobtenidos para cada muestra. Los resultados para las diferentes muestras y los valores indivi-duales de “delta” pueden obtenerse utilizando los CURSORES VERTICALES.

3.2.4. Resolución en las medidas, pantalla, impresora y cálculosLas absorbancias se miden con una resolución de 0,0001A, aunque se muestran en la pantallay en la impresora redondeadas al tercer decimal. Los cálculos se realizan tomando lasabsorbancias medidas con una resolución de 0,0001A.. El número de decimales con que seexpresa la concentración es programable dentro de los parámetros de la técnica.

3.3. ABSORBANCIACon esta opción es posible la lectura directa de absorbancias. El programa muestra unapantalla como la siguiente:

La sección de trabajo está dividida en dos partes. En la superior se muestran los parámetroscon los cuales se efectuarán las lecturas, y son programables (el fotómetro siempre memorizay muestra los últimos utilizados); en la parte inferior se muestran los resultados.Una vez efectuada la línea de base, el programa pide la introducción de las muestras. Duranteel proceso de introducción de muestras, F4 permite al usuario volver a la modificación deparámetros para cambiar el valor de los mismos.

3.4. UTILIDADESEsta opción de menú permite ejecutar una serie de operaciones de utilidad general, las cualesse describen con detalle en los siguientes puntos.

3.4.1. ServicioEsta opción es solamente de interés para el personal técnico especializado. Su acceso estárestringido a través de una palabra de paso (password).

ABSORBANCIA 05/05/99 16:23:45

Modo lectura: MONOCROMATICOFiltro lectura: 340Volumen muestra: 400Tiempo estabilizacion: 2Temperatura: 37

ABS. = 1.234

LINEA BASE PROGRA. SALIR

21

3.4.2. Cargar un nuevo programaEsta opción permite instalar nuevas versiones de programa a través de un ordenador personal.Para realizar la instalación debe conectarse el fotómetro a un ordenador personal mediante uncable serie y disponer del programa de instalación adecuado. Las instrucciones a seguir sefacilitan en dicho programa.Al seleccionar esta opción entras en un programa especial del fotómetro, con una pantallaparecida a esta:

A través de F1 se puede configurar algunos parámetros del fotómetro, únicamente para estaopción. Los parámetros a configurar son: contraste de pantalla, idioma y del puerto de comuni-caciones el baud rate, el time-out y el número de terminal.Luego el fotómetro queda a la espera de recibir la nueva versión de programa enviado desde elordenador.Por pantalla va indicando el número de bytes recibidos. Una vez terminada la transmisiónaparece el mensaje:

End Communication

Y al pulsar F5 para salir, el fotómetro se reinicializa para comenzar con la nueva versión.Este proceso puede durar varios minutos.

3.4.3. Programar filtrosEl tambor de filtros del sistema óptico permite el alojamiento de un máximo de nueve filtros.Cada filtro está montado en un portafiltros, que puede ser colocado en cualquiera de las nueveposiciones del tambor. El usuario puede modificar la posición de los filtros, o añadir más si espreciso. La referencia a los filtros a lo largo del programa (por ejemplo, al programar unatécnica) se hace por la LONGITUD DE ONDA del filtro. Para que el fotómetro pueda usar elfiltro apropiado, es necesario programar en qué posición se encuentra cada filtro en el tambor.

ATENCIÓNSi por alguna razón ocurriera cualquier percance durante la transmisión del programa,como un corte de suministro eléctrico, y el fotómetro no responde; hay un modo de resta-blecer el control del mismo. Apague y vuelva a encender el fotómetro teniendo pulsado labotón de PUMP, y aparecerá en la pantalla de CARGAR UN NUEVO PROGRAMA. Habrá devolver a repetir el proceso de transmisión del programa.

COMUNICACIONES 05/05/99 16:23:45

Bytes recibidos

Preparado para recibir

CONFIGURA IDIOMA SALIR

Manual de usuario

22

Las posiciones de los filtros con que está equipado el aparato son programadas en la fábrica yaparecen en la tabla 3.3.

La introducción de un nuevo filtro se realiza introduciendo directamente el valor de la longitudde onda en la posición donde se ponga el filtro.La tecla de función BORRAR permite eliminar un filtro de la tabla.

3.4.4. Reloj calendarioEsta opción permite modificar la fecha y la hora programadas. Para cambiar la fecha pulsarF1, y para cambiar la hora pulsar F2. Se requieren dos cifras para todos los campos. En casode introducir una sola cifra anteponer un 0. Pulsar ENTER para aceptar el cambio o ESC pararechazarlo.

3.4.5. Ajustar bombaEsta opción permite ajustar el caudal de la bomba peristáltica y el posicionamiento de lamuestra en la cubeta de flujo. El tubo dosificador de la bomba peristáltica sufre, con el propiouso y con el paso del tiempo, una ligera deformación que puede conducir a que el volumen dela muestra no sea exactamente el programado. Por tal motivo, es recomendable ajustar periódi-camente la bomba peristáltica, así como después de un cambio de dicho tubo.

Al elegir esta opción aparece una pantalla como la siguiente:

3.4.6. Revisión del ajuste del volumen de muestraEsta opción permite entrar un VOLUMEN DE MUESTRA entre 100 y 5000 ml, y realizar ciclosde aspiración para comprobar los parámetros programados. Al entrar en esta opción, introdu-cir el VOLUMEN DE MUESTRA y pulsar ENTER.A partir de este momento, al presionar el pulsador PUMP se inicia un ciclo de aspiración yposicionamiento.Finalizado el ciclo, comprobar que el volumen aspirado es el programado, y que la muestra estransportada correctamente a la cubeta.

3.4.7. Ajuste manualEste modo de ajuste permite realizar un ajuste manual de la bomba, introduciendo por tecladolos parámetros que a continuación se explican.

AJUSTE BOMBA 05/05/99 16:23:45

VOLUMEN MUESTRA (uL)

VALOR ACTUAL NUEVOVOLUMEN MUESTRA 18000POSICION 800RETARDO 2

PROBAR MANUAL AUTOMATIC.. SALIR

23

VOLUMEN DE MUESTRA: Corresponde al ajuste del volumen aspirado. Entrar el número depasos que la bomba debe realizar para aspirar 5 ml y pulsar ENTER. El valor teórico es 18340,equivalente a 0,2725 ml por cada paso. El número a introducir es estimativo y debe determinar-se por el método de «prueba y error» utilizando la función PROBAR.

POSICIONAMIENTO: Corresponde al ajuste del posicionamiento de la muestra. Entrar elnúmero de pasos necesarios para que la muestra se posicione en la cubeta quedando sólo 5mm (0-10) mm de cola de muestra sin entrar en la cubeta y pulsar ENTER. El valor teórico esde 600 pasos. El número a introducir es estimativo y debe determinarse por el método de«prueba y error» utilizando la función PROBAR.

RETARDO BOMBA: Corresponde al tiempo que transcurre entre el ciclo de aspiración y el deposicionamiento en la cubeta de flujo. Entrar el número de segundos (recomendado 2) y pulsarENTER.

3.4.8. Ajuste automáticoPara realizar el ajuste de la bomba de modo automático (recomendado), proceder como sigue:a) Pulsar la tecla de función VOLUMEN MUESTRA. En la línea de mensajes aparece «Ponga

tubo con 5 ml agua y pulsar BOMBA».b) Pipetear con exactitud 5 ml de agua destilada en un tubo de ensayo y colocarlo a la entrada de muestra de forma que la punta del tubo de teflón quede en el fondo del tubo y pulsar el

botón BOMBA.c) El fotómetro aspira unos 4 ml de agua a velocidad normal y luego lo hace lentamente. En

este momento aparece en pantalla el mensaje: «Al aspirar la última gota pulsar ENTER».Observar atentamente el fondo del tubo y cuando la última gota se introduzca en el tubo deaspiración pulsar ENTER.

d) Pulsar la tecla de función POSICION. En la línea de mensajes aparece «Ponga tubo conagua y pulsar BOMBA».

e) Colocar un tubo con agua destilada a la entrada de muestra y pulsar BOMBA. La bomba esaccionada y al cabo de unos segundos aparece en pantalla el mensaje: «Retire el tubo ypulsar ENTER». Seguir estas instrucciones. La bomba es accionada y el instrumento calcu-la el posicionamiento. Durante este proceso el instrumento realiza lecturas fotométricas porlo que debe mantenerse la tapa del portacubetas cerrada. El proceso dura unos 70 segun-dos.

Finalizado este proceso, el sistema de aspiración habrá sido ajustado automáticamente. Serecomienda realizar una prueba, pulsando la tecla de función PROBAR.

3.4.9. Test de sensibilidadPermite conocer la cantidad de corriente que genera el fotodiodo para una cantidad de luzrecibida, lo que permite conocer la sensibilidad del instrumento para cada filtro.El fotómetro lee la sensibilidad para cada uno de los filtros programados en la tabla de filtros yvisualiza en pantalla la sensibilidad de cada filtro.Si pulsamos ENTER, realiza otra vez el test.Este test puede realizarse sin cubetas (sensibilidad al aire) o con cubetas. En caso de utilizarcubeta de flujo es imprescindible llenarla con agua destilada (puede utilizarse la tecla WASHpara tal objeto).

Manual de usuario

24

3.4.10. Recuperar técnicas borradas:En esta opción se permite recuperar aquellas técnicas que se han borrado desde el menú deprogramación. Aparece una lista con todas las técnicas borradas que es posible recuperar.Mediante los cursores se selecciona la técnica a recuperar y se pulsa ENTER para restaurar-la.

3.4.11. Valores por defectoEsta opción permite restablecer la tabla de técnicas original preprogramada en fábrica asícomo los valores de configuración originales (filtros, unidades y personalización).Dado que una vez ejecutada la operación no es posible volver atrás, esta opción debe utilizarsecon mucha precaución y solamente cuando se esté seguro que desean perderse todos losdatos programados por el usuario y restablecer los de fábrica.También hay la opción de borrar los valores de concentración memorizados. Cada vez querealizamos una medida de concentración el resultado es memorizado. Si no leemos los resulta-dos mediante el programa de PC, estos se van acumulando en la memoria del fotómetro. Lamemoria tiene una capacidad para 2000 resultados de concentración que una vez alcanzadodicha capacidad se pierde el primer valor realizado. A partir de este momento el proceso dememorización es un poco lento con lo cual hay está opción para poder borrar todos losresultados memorizados.

3.5. CONFIGURACIONEsta opción permite al usuario adaptar el fotómetro a sus preferencias personales en algunosaspectos.

3.5.1. IdiomaEl usuario puede seleccionar mediante esta opción, de entre los idiomas disponibles, el que elfotómetro va a utilizar tanto para comunicar a través de la pantalla como para imprimir textos.Para seleccionar el idioma, primero pulsar ENTER sobre la opción IDIOMA, y después selec-cionar de la lista desplegable.

Nota:La correcta correspondencia de nombres (técnicas, unidades, etc.) al cambiar de idiomasolamente es posible entre idiomas occidentales o en el caso de cambiar de un idioma occi-dental a otro oriental.Esto quiere decir que, por ejemplo, estando seleccionado un idioma oriental, si se edita elnombre de una técnica (aunque se utilicen caracteres occidentales o simplemente entrando enmodo edición y saliendo sin modificar nada), al cambiar de dicho idioma oriental a otro occi-dental, en el lugar del nombre de la técnica se visualizará una secuencia de caracteres impre-decible.

3.5.2. Contraste pantallaEsta opción permite ajustar la intensidad (contraste) de la pantalla. La intensidad de la pantallase define por un número del 1 al 10, que puede variarse mediante los CURSORES VERTICA-LES, después de pulsar ENTER sobre la opción. El efecto producido se observa inmediata-mente después de cada pulsación en los CURSORES VERTICALES.

25

3.5.3. Impresora activaMediante esta opción el usuario puede activar o desactivar la impresora. Al pulsar ENTERsobre la opción aparece una ventana con las opciones ACTIVADA / DESACTIVADA que seseleccionan mediante los CURSORES VERTICALES y pulsando ENTER sobre la opciónseleccionada.

3.5.4. Contraste impresoraEsta opción permite ajustar la intensidad de la impresión sobre el papel térmico de tal formaque puedan compensarse pequeñas variaciones en la calidad del papel. La intensidad de laimpresión (contraste) se define por un número del 1 al 10, que puede variarse mediante losCURSORES VERTICALES, después de pulsar ENTER sobre la opción. La tecla de funciónPROBAR (F1) imprime una línea de asteriscos de forma que puede comprobarse la intensidadseleccionada.

3.5.5. Listado cabeceraCuando va a realizarse la medida de absorbancias o concentraciones, se imprime de maneraautomática una cabecera. El usuario puede, mediante esta opción, seleccionar la informaciónque se imprime en los listados durante la ejecución de las técnicas. Al pulsar ENTER sobre laopción, aparece una ventana con las siguientes tres opciones:

RESUMIDA: Se imprimen solamente algunos datos relativos a la técnica, como su nombre, lafecha y hora de ejecución, los valores memorizados si los hay (factor, blanco, calibrador) y losvalores normales (si están programados)..ESPAÑOL

COMPLETA: Se imprime todos los parámetros de la técnica, incluidos sus valores programa-dos.

NINGUNA: No se imprime nada.

3.5.6. ZumbadorEl usuario puede mediante esta opción activar o desactivar el pitido indicador de que una teclaha sido pulsada. Al pulsar ENTER sobre esta opción, aparece una ventana con las opcionesACTIVADO /DESACTIVADO.

3.5.7. PrecalentamientoSi esta opción está ACTIVADA, al encender el fotómetro se realiza un ciclo de precalentamientode 20 minutos, durante el cual se espera a que la lámpara y la electrónica interna se estabilicenen su temperatura nominal de trabajo. Es altamente recomendable dejar que el fotómetro reali-ce el precalentamiento antes de iniciar cualquier procedimiento de medida. Al pulsar ENTERsobre esta opción, aparece una ventana con las opciones ACTIVADO / DESACTIVADO.

3.5.8. Modos de lavadoLa tecla WASH se utiliza para hacer circular una solución de lavado o agua a través delcircuito de aspiración, con objeto de lavarlo, al final de una serie de medidas o bien entremuestras. Mediante esta opción es posible programar el volumen (entre 100 y 5000 mL) desolución de lavado que se aspirará cada vez que se pulse la tecla WASH. Si se deja en esta

Manual de usuario

26

opción el valor 0, se efectuará un lavado continuo, es decir, la bomba funcionará mientras latecla WASH permanezca pulsada.

3.5.9. Código de pacienteSi está activado, cada vez que se introduzca una muestra, el programa solicitará un código depaciente. Al pulsar ENTER sobre esta opción, aparece una ventana con las opciones ACTIVA-DO /DESACTIVADO.

3.5.10. Introducir datos laboratorioEsta opción permite programar un título de hasta 30 caracteres alfanuméricos (15 si el idiomaseleccionado es oriental). Una vez introducido el título, pulsar ENTER para aceptar, o ESCpara rechazar.El texto introducido se imprime cada vez que se encienda el fotómetro.

3.5.11. ComunicacionesPermite programar ciertos parámetros para efectuar las comunicaciones con un ordenadorpersonal.a) Baudios: Selecciona la velocidad de transmisión entre una de las siguientes: 110, 150, 300,

600,1200, 2400, 4800, 9600, 19200.b) Timeout: Es un tiempo de espera entre intentos de comunicación si se produce un error

durante la misma. Programable entre 0 y 255 segundos.c) Nº de terminal: Nº de identificación del fotómetro. Si se conectan varios instrumentos a un

mismo ordenador, deberán tener números de terminal distintos (entre 0 y 15).

3.6. PROGRAMACIONEste menú está formado por dos opciones: una para programar las técnicas y la otra paraprogramar la tabla de unidades.

Atención:Las Técnicas que vienen preprogramadas son compatibles con reactivos Biosystems. Tambiénpodrán utilizarse aquellos reactivos cuyos procedimientos de medida, descritos en las instruc-ciones de uso sean compatibles con las especificaciones del instrumento.

3.6.1. TECNICASEsta opción permite programar los parámetros de una técnica, en cada una de las 100 posicio-nes disponibles en el fotómetro.Al entrar en la opción TECNICAS, aparece un listado con las técnicas disponibles y un juegode funciones activas con las distintas operaciones disponibles:

AVANCE PAGINA: Visualiza la página de listado con las 10 técnicas siguientes.RETROCEDE PAGINA: Visualiza la página de listado con las 10 técnicas anteriores.SALIR: Sale al menú anterior.MAS OPCIONES: Presenta un nuevo juego de funciones en la pantalla.MOVER: Utilidad para cambiar el orden de presentación de las técnicas.BORRAR: Permite borrar técnicas.AÑADIR: Permite crear técnicas nuevas.

27

COPIAR: Permite crear una técnica nueva, copiando todos los parámetros de la técnica selec-cionada, excepto el nombre.IMPRIMIR LISTA: Imprime una lista con los nombres de todas las técnicas programadas.IMPRIMIR CONTENIDO: Lista el contenido de las técnicas seleccionadas previamente.

3.6.2. Cómo programar parámetrosEn este apartado se explica la entrada o modificación de los parámetros que constituyen lastécnicas, los cuales dependerán del modo de análisis seleccionado. Al modificar o crear unatécnica, solamente serán visibles los parámetros que tengan sentido en el modo de análisisseleccionado.

PARAMETRO MODO DE CALCULO PF C CM MD TF TFM MC CO

NOMBRE TECNICA * * * * * * * *UNIDADES * * * * * * * *MODO DE ANALISIS * * * * * * * *TIPO DE REACCION * * * * * *MODO DE LECTURA * *FILTRO DE LECTURA * * * * * * * *FILTRO DE REF. * *VOL. DE ASPIRACION * * * * * * * *TEMPERATURA * * * * * * * *DECIMALES * * * * * * * *REPL. BLANCO * * *REPL. MUESTRA * * * *TIEMPO ESTABILIZ. * * *TIEMPO INCUBACION * * * *TIEMPO LECTURA * * * *RETARDO * *NUMERO DE DELTAS *ABS. INICIAL * * * *CALIBRACION * * * * * *FACTOR * * * * * *NUMERO CALIBR. * * *CONC. CALIBR. 1 * * * * * *CONC. CALIBR. 2 a 8 * * *REPL. CALIBRADOR * *FACTOR DE DILUCION * * *FUNC. CALCULO * *ESCALAS * *COEF. NUMERADOR *COEF. DENOMINADOR *VALOR DE CUT-OFF *MARGEN INDETERM. *LIMITE LINEALIDAD * * * * * *LIMITE DEL BLANCO * * *

Tabla 3.1 Parámetros de los modos de cálculo

Manual de usuario

28

POSICION DE MEMORIALa posición de memoria en la cual se guarda la técnica no es un parámetro programable por elusuario. La gestión de las posiciones de memoria se realiza automáticamente por el programa.Cuando se añade una técnica nueva, se coloca siempre en la última posición de la lista,siempre y cuando haya una de libre. Si no la hay, el programa buscará la primera libre deentre las borradas (caso de haberlas). No obstante, el usuario puede personalizar el orden dela lista de técnicas visualizada mediante la tecla de función MOVER.

NOMBREEl nombre de la técnica puede ser cual-quier título compuesto de una o varias pala-bras, peroconteniendo un máximo de 20 caracteresalfanuméricos (10 si el idioma selecciona-do es oriental).

UNIDADESEl título correspondiente a cada unidad sehalla en una tabla programable. Al pulsarENTER sobre esta opción, el programamuestra una ventana con la tabla de unida-des programada. Debe seleccionarse unade ellas mediante las teclas de CURSORESVERTICALES y pulsar ENTER sobre la uni-dad seleccionada.

MODO DE ANALISISAl pulsar ENTER sobre esta opción, el pro-grama muestra una ventana con los modosde análisis posibles.

TIPO DE REACCIONAl pulsar ENTER sobre esta opción, el pro-grama muestra una ventana con las siguien-tes dos posibilidades : CRECIENTE / DE-CRECIENTE. Indican si la absorbancia dela técnica programada crece o decrece conel tiempo o la concentración.

MODO DE LECTURASolamente en los modos de PUNTO FINALy CUT-OFF. Al pulsar ENTER sobre estaopción, el programa muestra una ventanacon las siguientes dos posibilidades :MONOCROMATICA: Se realiza una única

lectura de cada muestra a la longitudde onda seleccionada.

BICROMATICA: Se realizan dos lecturas decada muestra (fig. 4.1.). Una a la lon-gitud de onda y otra a la longitud deonda secundaria o de referencia.El valor de absorbancias utilizado paralos cálculos es en este caso la dife-rencia entre ambas absorbancias:A = Aprincipal - Areferencia

FILTRO DE LECTURAEs la longitud de onda en nanometros a lacual se desea realizar las lecturas. En elmodo BICROMATICA se refiere a la longi-tud de onda principal (figura 3.1.). La tabla

Nº UNIDADES0 mg/dL1 U/L2 g/L3 mkat/L4 mmol/L5 mmol/L6 mg/L7 nkat/L8 g/dL9 mg/dL10 UI/mL11 %

Tabla 3.2. Unidades preprogramadas

PF: PUNTO FINALC: CINETICACM: CINETICA MULTIPLEMD: MODO DIFERENCIALTF: TIEMPO FIJOTFM:TIEMPO FIJO MULTIPLEMC: MODO COCIENTECO: CUT-OFF

29

3.3. muestra los filtros con que está equi-pado normalmente el fotómetro, y sus res-pectivas posiciones.

Tabla 3.3. Tabla de filtros

FILTRO DE REFERENCIASólo en el modo de lectura BICROMATICA.Es la longitud de onda secundaria o de re-ferencia. La tabla 3.3. muestra los filtros conque está equipado normalmente el fotóme-tro, y sus respectivas posiciones.

VOLUMEN DE ASPIRACIONEs el volumen (en mL) de muestra, blancoy/o calibrador que debe ser aspirado paralas lecturas. El margen permitido es de 100a 5000 mL. Debe tenerse en cuenta que,cuanto menor sea el volumen aspirado,mayor será la contaminación de arrastreentre dos muestras consecutivas. La tabla3.4. muestra una evaluación de arrastre paradiferentes volúmenes de muestra (dichosvalores pueden depender fuertemente de lanaturaleza del líquido medido).

Tabla 3.4 Contaminación.

REPLICADOS DE BLANCOEs el número de replicados de blanco quese solicitarán durante la ejecución de la téc-nica. El margen permitido es de 1 a 3.

REPLICADOS DE MUESTRAEs el número de replicados de muestra quese solicitarán durante la ejecución de la téc-nica. El margen permitido es de 1 a 3.

TIEMPO DE ESTABILIZACIONEs el tiempo que se deja transcurrir entre elfinal del ciclo de aspiración y la lectura enlos modos PUNTO FINAL, DIFERENCIALy COCIENTE. Normalmente es de un se-gundo, si bien pueden programarse otrosvalores, permitiendo así que la lectura seretrase hasta que el líquido se homogeneiceperfectamente en el interior de la cubeta,especialmente cuando se trabaja con líqui-dos muy viscosos.

TIEMPO DE INCUBACIONEs el tiempo que se deja transcurrir desdela pulsación de PUMP hasta la primera me-dida en los modos CINETICA y TIEMPOFIJO.

TIEMPO DE LECTURAEn las Cinéticas simples es el periodo detiempo durante el cual se toman lecturas yen las múltiples es el tiempo entre deltas.En los Tiempos Fijos es el periodo de tiem-po entre T1 y T2.

NUMERO DE DELTASSolamente en el modo CINETICA MULTI-PLE. Es el número de intervalos deseado yequivale al número total de medidas menosuno (deltas).

RETARDOEs el tiempo entre muestras en las técnicasmúltiples.

ABSORBANCIA INICIALSólo en los modos CINETICA y TIEMPOFIJO. En caso de reacción creciente, es elvalor máximo de absorbancia admisible parala primera lectura. En caso de reacción de-creciente, es el valor mínimo de absorbanciaadmisible para la primera lectura.

POSICION FILTRO1 3402 4053 4204 4505 5056 5467 5788 6709 libre

VOLUMEN DE CONTAMINACION (%)MUESTRA150mL 2.25 - 2.70250mL 0.75 - 1.50400mL 0.05 - 0.25

Manual de usuario

30

TEMPERATURAEs la temperatura a la que se deseatermostatar la cubeta. Es programable en-tre 23 y 40ºC con una resolución de un gra-do. Si no se desea termostar, dejar 0.

DECIMALESNúmero de decimales con que se fuerza lapresentación de los resultados de concen-tración.

CALIBRACIONAl pulsar ENTER sobre esta opción, el pro-grama muestra una ventana con las siguien-tes dos posibilidades : CALIBRADOR / FAC-TOR. Determina si el cálculo de la concen-tración se realiza con calibradores o confactor.

FACTORSólo aparece si en CALIBRACION está se-leccionado FACTOR. Es el valor a utilizaren los cálculos para transformarabsorbancias en concentraciones expresa-das en las unidades seleccionadas.

FACTOR DE DILUCIONSólo aparece en los modosMULTICALIBRADOR. Se utiliza cuando to-das las muestras son diluidas pero loscalibradores no.

AbsAp

Arl

A= Ap - Ar

principal l referencia l

Nº CALIBRADORESAparece sólo en los modosMULTICALIBRADOR. Indica el número to-tal de calibradores a utilizar por la técnica.

CONCENTRACIONSólo aparece en las técnicas con calibrador.Es la concentración de cada calibrador.

FUNCION DE CALCULOSolo en los modos MULTICALIBRADOR.Es el tipo de función gráfica a la cual seasociará el cálculo de la curva de calibra-ción. Hay cuatro posibilidades a elegir:

POLIGONALSPLINERECTA DE REGRESIONPARABOPLA DE REGRESION

EJE XSólo en el modo MULTICALIBRADOR. Se-lecciona el tipo de representación de datosen el eje X. Hay dos posibilidades a elegir:

LINEALLOGARITMICA

EJE YSólo en el modo MULTICALIBRADOR. Se-lecciona el tipo de representación de datosen el eje Y. Hay dos posibilidades a elegir:

LINEALLOGARITMICA

REPLICADOS CALIBRACIONEs el número de replicados que se solicita-rán de cada calibrador.El margen permitido es de 1 a 3.

CONTROL 1Con está opción elegimos si activamos ono el control número 1.Las dos posibilidades son: SI / NO.Si se selecciona SI, durante la ejecuciónde la técnica queda habilitada una tecla defunción para introducir el suero-control 1.

Figura 3.1

31

NOMBRE CONTROL 1El nombre del suero-control 1 puede sercualquier título compuesto de una o variaspalabras, pero conteniendo un máximo de16 caracteres alfanuméricos (8 si el idiomaseleccionado es oriental).

LOTE CONTROL 1La referencia del suero-control 1 puede sercualquier título compuesto de una o variaspalabras, pero conteniendo un máximo de16 caracteres alfanuméricos.

CONTROL 1 MAXIMOValor máximo previsto para el suero-con-trol1.

CONTROL 1 MINIMOValor mínimo previsto para el suero-con-trol1.

CONTROL 2Con está opción elegimos si activamos ono el control número 2.Las dos posibilidades son: SI / NO.Si se selecciona SI, durante la ejecuciónde la técnica queda habilitada una tecla defunción para introducir el suero-control 2.

NOMBRE CONTROL 2El nombre del suero-control 2 puede sercualquier título compuesto de una o variaspalabras, pero conteniendo un máximo de16 caracteres alfanuméricos (8 si el idiomaseleccionado es oriental).

LOTE CONTROL 2La referencia del suero-control 2 puede sercualquier título compuesto de una o variaspalabras, pero conteniendo un máximo de16 caracteres alfanuméricos.

CONTROL 2 MAXIMOValor máximo previsto para el suero-con-trol2.

CONTROL 2 MINIMOValor mínimo previsto para el suero-con-trol2.

LIMITE DE LINEALIDADValor límite de linealidad. Si se rebasa di-cho límite el programa da un mensaje deaviso. Si no se desea comprobar, dejar 0.

LIMITE ABSORCION BLANCOValor límite de absorbancia que puede to-mar un blanco. Si se rebasa dicho límite elprograma da un mensaje de aviso. Si no sedesea comprobar, dejar 0.

LIMITE MAXIMO DE NORMALIDADValor máximo para los valores normales. Di-cho valor se imprime con los resultados yaparece en pantalla. Si no se desea queaparezca, dejar 0.

LIMITE MINIMO DE NORMALIDADValor mínimo para los valores normales. Di-cho valor se imprime con los resultados yaparece en pantalla. Si no se desea queaparezca, dejar 0.

COEFICIENTE REACTIVO 1Sólo en el modo COCIENTE. Es el coefi-ciente multiplicador para el reactivo 1.

COEFICIENTE REACTIVO 2Sólo en el modo COCIENTE. Es el coefi-ciente multiplicador para el reactivo 2.

VALOR CUT-OFF (UMBRAL DE DETECCIÓN)Sólo en el modo CUT-OFF. Mínima con-centración de mensurando que origina uncambio físico o señal en un procedimientocualitativo.

MARGEN INDETERMINACIÓNSólo en el modo CUT-OFF. Es el valor parala zona de indeterminación en el umbral dedetección (cut-off).

Manual de usuario

32

3.6.3. Menú de salida.Después de programar todos los parámetros de la técnica, para salir pulsar la tecla de funciónSALIR. En la línea de mensajes se muestra el aviso “¿Memorizar valores?” y en el centro de lapantalla una ventana con las opciones SI / NO. Para aceptar y memorizar los cambios y/onuevos valores introducidos, seleccionar el valor de SI.

3.6.4. Revisar una técnicaPara revisar una técnica, mediante los CURSORES VERTICALES seleccionarla en la lista detécnicas y pulsar ENTER.

3.6.5. Borrar una técnicaPara borrar una técnica, mediante los CURSORES VERTICALES seleccionarla en la lista detécnicas y pulsar la tecla de función BORRAR. El programa solicita confirmación antes deproceder al borrado.

3.6.6. Crear una técnica nuevaPara crear una técnica nueva, pulsar la tecla de función AÑADIR y a continuación programarlos parámetros que la determinan.

3.6.7. Copiar una técnicaEsta opción es útil cuando se desea crear una nueva técnica muy parecida a alguna yaexistente. Se puede proceder como sigue: mediante los CURSORES VERTICALES seleccio-nar la técnica modelo en la lista de técnicas y pulsar la tecla de función COPIAR. El programacrea una nueva técnica con todos los parámetros de la técnica original, excepto el nombre.

3.6.8. Mover una técnicaEsta opción permite cambiar de posición en la lista de presentación una técnica. Para ello,proceder como sigue: mediante los CURSORES VERTICALES seleccionar la técnica quedesea moverse, y pulsar la tecla de función MOVER. A partir de este momento, cada vez quese pulse un CURSOR VERTICAL, el nombre de la técnica se desplazará hacia arriba o haciaabajo, según el cursor pulsado. Para dejar la técnica en la posición deseada, pulsar ENTER.

3.7. UNIDADESLos valores de concentración obtenidos al ejecutar las diversas técnicas deben expresarse ensus correspondientes unidades. Con objeto de que el usuario no tenga ningún tipo de restric-ción, el instrumento permite la programación de las unidades deseadas. Cada unidad estáformada por un texto de ocho caracteres como máximo y se almacena en una tabla de hasta 50posiciones (22 si el idioma seleccionado es oriental).

3.7.1. Tabla de unidadesEsta opción permite programar la tabla de unidades, en la cual hay 50 posiciones disponibles(22 si el idioma seleccionado es oriental).Al entrar en la opción TABLA DE UNIDADES, se visualiza la tabla completa de unidadesprogramadas en forma de columna.

33

3.7.2. Revisar una unidadPara revisar una unidad, seleccionarla en la lista mediante los CURSORES y pulsar la teclaENTER.

3.7.3. Borrar una unidadPara borrar una unidad, seleccionarla en la lista de mediante los CURSORES y pulsar la teclade función BORRAR. El programa solicita confirmación antes de proceder al borrado.

3.7.4. Crear una unidad nuevaPara crear una unidad nueva, seleccionar mediante los CURSORES una posición libre en latabla, pulsar ENTER y entrar la nueva unidad utilizando el método de entrada alfanumérica. Launidad puede ser cualquier título formado por un máximo de 8 caracteres alfanuméricos.

3.8. CONTROL DE CALIDADEsta opción de menú da acceso al programa gestión del control de calidad, basado en lasgráficas de Levey-Jennings y en las reglas de Westgard.Al entrar en el control de calidad se presentan las dos siguientes opciones:

PROGRAMAR CONTROLESLISTADOS Y GRAFICAS

El fotómetro guarda un histórico de hasta 30 valores por cada control y técnica.

3.8.1. Programar controlesEsta opción presenta una lista con los nombres de las técnicas programadas. Una vez selec-cionada una técnica, se pueden activar / desactivar los controles y programar sus valores (delmismo modo que se procede en la programación de técnicas).A través de las teclas de función SIGUIENTE y ANTERIOR se visualizan los parámetroscorrespondientes a la técnica siguiente y anterior respectivamente sin tener que salir del modode edición de parámetros.Las teclas de función BORRAR HISTORICO 1 y BORRAR HISTORICO 2 borran los históri-cos respectivos de la técnica seleccionada.

3.8.2. Listados y graficasEsta opción presenta una lista con los nombres de las técnicas programadas. Una vez selec-cionada una técnica, al pulsar ENTER sobre ella se muestran en pantalla los 30 últimos contro-les en forma gráfica de Levey-Jennings aplicando las reglas de Westgard si es posible.Mediante las teclas de función CONTROL 1 y CONTROL 2 se selecciona la visualización de losdatos correspondientes al control 1 y al control 2 respectivamente.La tecla de función IMPRIMIR LISTADO imprime un listado con los valores del control, y la deIMPRIMIR GRAFICA imprime la gráfica.

3.9. CÓDIGO DE OPERADORPermite activar o desactivar la petición de un código de operador cada vez que se enciende elinstrumento. Desde esta opción de menú también se puede modificar el último código entrado.

Manual de usuario

3 4

4. PROCEDIMIENTOS DE MEDIDAS Y CALCULOSEste capítulo revisa los diferentes procedimientos de medida de acuerdo con el modo deanálisis y los cálculos que son realizados para obtener los valores de concentración. Se indi-can las diversas fórmulas utilizadas. Los procedimientos de medida son los mismos para blan-cos, calibradores, controles y muestras. Los controles son tratados como muestras en todoslos cálculos.

En las fórmulas se utilizan las abreviaciones siguientes:

Aλ principal Absorbancia a la longitud de onda principal.Aλ referencia Absorbancia a la longitud de onda de referencia.Ablanco Absorbancia del blanco.Acalibrador Absorbancia del calibrador.Amuestra Absorbancia de la muestra.AR2 Absorbancia del blanco, calibrador o muestra con el reactivo 2 (reacción global).AR1 Absorbancia del blanco, calibrador o muestra con el reactivo 1 (reacción del blan-

co de muestra).AT1 Absorbancia del blanco, calibrador o muestra medida después de la incubación 1.AT2 Absorbancia del blanco, calibrador o muestra medida después de la incubación 2.AFRAC Absorbancia de la fracción.ATOTAL Absorbancia total.∆A/min Velocidad de cambio de absorbancia del blanco, calibrador o muestra.Cmuestra Concentración de la muestra.Ccalibrador Concentración programada del calibrador.n Número de replicados.F Factor de calibración programado.TR Factor fijo dependiente del tipo de reacción; su valor es (+1) para reacciones

crecientes y (-1) para reacciones decrecientes.Coef1 Coeficiente del numerador.Coef2 Coerficiente del denominador.Vcut-off Valor de cut-offId Intervalo dudoso∑∆m Sumatorio de deltas de la muestra∑∆cal Sumatorio de deltas del calibradorN Número de intervalosT Tiempo de intervalo (en segundos)

4.1. PUNTO FINALLa absorbancia de la mezcla de reacción es medida una única vez. La absorbancia puedemedirse a una (monocromática) o dos (bicromática) longitudes de onda. La calibración sebasa en el uso de calibradores (uno o varios) o de un factor programado.

3 5

4.1.1. Cálculos en el modo de punto final04.1.1.1. Lecturas bicromáticas

El valor de absorbancia utilizado en los cálculos para el blanco, los calibradores y las muestrases la diferencia entre la absorbancia leída a la longitud de onda principal y la absorbancia leídaa la longitud de onda de referencia.

Amuestra, Acalibrador, Ablanco= Aλ principal - Aλ referencia

4.1.1.2. Cálculos con factorLas concentraciones de cada muestra son calculadas mediante la siguiente fórmula:

Cmuestra= (Amuestra - Ablanco)·F·TR

4.1.1.3. Cálculos con un calibrador únicoLa concentración de cada muestra se calcula usando la misma fórmula indicada anteriormen-te, pero F se obtiene como sigue:

CcalibradorF =

(Acalibrador - Ablanco )

4.1.1.4. Cálculos con varios calibradoresLa concentración de cada muestra se calcula usando una curva de calibración obtenida me-diante la función de cálculo y los ejes seleccionados. Se prepara una curva de calibración apartir de los valores de concentración programados de los calibradores y de las absorbanciasmedidas para cada uno de ellos:

(Acalibrador - Ablanco)·TR

La concentración de las muestras se calcula por interpolación de sus absorbancias en lacurva:

(Amuestra - Ablanco)·TR

4.1.1.5. ReplicadosPueden programarse hasta 3 replicados para cada blanco, para cada muestra, o para cadacalibrador. Los replicados son tratados en los cálculos como sigue:

a) Se calcula primero el valor medio de absorbancia del blanco de reactivo:

ΣAblanco1n i=1

Ai=

Manual de usuario

3 6

b) La absorbancia media del blanco es restada de cada absorbancia individual medida para loscalibradores y las muestras. Los valores obtenidos se utilizan en el cálculo de las concentracio-nes.

Acalibr ador, muestra= Acalibrador, muestra - Ablanco

c) En cálculos con calibradores, se obtiene el valor medio de absorbancia para cada calibrador:

4.2. DIFERENCIALEste modo de análisis requiere de dos reactivos para cada muestra, calibrador e incluso parael blanco de reactivo. El reactivo 1 corresponde al «buffer» o diluyente del reactivo de «traba-jo» y el reactivo 2 es el reactivo de «trabajo (buffer + cromóforo). La calibración puede basarseen el uso de calibradores o en un factor programado.

4.2.1. Cálculos en el modo diferencial4.2.1.1. Cálculos con factorLa concentración de cada muestra se calcula utilizando la siguiente fórmula:

Cmuestra= ((AR2 muestra - AR1 muestra)-(AR2 blanco - AR1 blanco))·F·TR

4.2.1.2. Cálculos con un calibrador únicoLa concentración de cada muestra se calcula utilizando la misma fórmula mostrada arriba,pero F se obtiene como sigue:

4.2.1.3. Cálculos con varios calibradoresLa concentración de cada muestra se calcula usando una curva de calibración obtenida utili-zando la función de cálculo y los ejes seleccionados. Se prepara una curva de calibración apartir de los valores de concentración programados de los calibradores y de las diferencias deabsorbancia obtenidas para cada uno de ellos:

(( AR2Calibrador- AR1Calibrador ) - ( AR2Blanco - AR1Blanco ))·TR

La concentración de las muestras se calcula por interpolación de sus diferencias de absorbanciaen la curva:

(( AR2Muestra- AR1Muestra ) - ( AR2Muestra - AR1Muestra ))·TR

=n

n i=1ΣAcalibrador

n(Acalibrador - Valor medio Ablanco)

1

FCcalibrador=

(AR2 calibrador - AR1 calibrador)-(AR2 blanco - AR1 blanco)

3 7

4.2.1.4. Replicados

Pueden programarse hasta 3 replicados para cada muestra, para cada calibrador y para cadablanco. Los replicados son tratados en los cálculos como sigue:a) Se calcula primero el valor medio de la diferencia de absorbancias del blanco:

b) Se calcula la diferencia de absorbancia para el calibrador (cuando se utiliza) o replicado demuestra

AR2 calibrador o muestra - AR1 calibrador o muestra

c) La diferencia de absorbancia media del blanco es restada de cada diferencia de absorbanciaindividual medida para el calibrador (cuando se utiliza) y las muestras. Los valores obtenidosse utilizan en el cálculo de las concentraciones.

AR2 calibrador o muestra- AR1 calibrador o muestra - (AR2 calibrador o muestra- AR1 calibrador o muestra )

d) En cálculos con calibrador, se obtiene el valor medio de absorbancia para el calibrador:

4.3. TIEMPO FIJOLa absorbancia de la mezcla de reacción es leída a dos tiempos. La calibración puede basarseen el uso de calibradores (uno o varios) o en un factor programado.

4.3.1. Cálculos en el modo de tiempo fijo4.3.1.1. Cálculos con factor

La concentración de cada muestra se calcula utilizando la siguiente fórmula

Cmuestra= (AT2 muestra - AT1 muestra)·F·TR

4.3.1.2. Cálculos con un calibrador únicoLa concentración de cada muestra se calcula mediante la misma fórmula indicada arriba, peroF se obtiene como sigue:

1n

Σn

i=1

(AR2 calibrador- AR1 calibrador)-(AR2 blanco - AR1 blanco)=Acalibrador

(AT2 calibrador - AT1 calibrador)F

Ccalibrador=

1n

Σn i=1(AR2 blanco- AR1 blanco)i=(AR2 blanco - AR1 blanco)

Manual de usuario

3 8

4.3.1.3. Cálculos con varios calibradores

La concentración de cada muestra se calcula usando una curva de calibración obtenida utili-zando la función de cálculo y los ejes seleccionados. Se prepara una curva de calibración apartir de los valores de concentración programados de los calibradores y de las diferencias deabsorbancia obtenidas para cada uno de ellos:

(AT2 calibrador - AT1 calibrador)·TR

La concentración de las muestras se calcula por interpolación de sus diferencias de absorbanciaen la curva:

(AT2 muestra - AT1 muestra)·TR

4.4. CINETICA

El modo cinético se utiliza para medir la concentración de una actividad enzimática. Laabsorbancia de la mezcla de reacción es medida en 31 ocasiones durante el periodo deincubación programado. La calibración puede basarse en el uso de un calibrador o de unfactor programado.

4.4.1. Cálculos en el modo cinético

4.4.1.1. Cálculos de velocidades y comprobación de linealidadLa actividad enzimática se mide por la velocidad de reacción que corresponde a la pendientede la curva de absorbancia frente al tiempo, y que se calcula por el método de regresión lineal.La dimensión de la pendiente es DA/min.

Durante el periodo de lectura se obtienen 31 valores de absorbancia a intervalos regulares.Con cada conjunto de datos se lleva a cabo una búsqueda lineal para encontrar las porcionesde linealidad de los datos. Los valores de absorbancia se dividen en tres segmentos, compren-diendo los valores de A0 hasta A10, A10 hasta A20, y A20 hasta A30. Las pendientes de cadasegmento, así como la del conjunto de todos los datos, se calculan por regresión lineal, y secompara cada segmento con el resultado obtenido para todos los datos. Los segmentos queoriginan pendientes superiores o inferiores en un 20 % o más a la pendiente del conjunto soneliminados del cálculo final. Finalmente, la pendiente se calcula por regresión lineal de todoslos valores comprendidos en los segmentos no desechados. Si los tres segmentos hubieransido eliminados, se conservará para los cálculos la pendiente global.

4.4.1.2. Cálculos con factor

La concentración de la muestra se calcula mediante la fórmula siguiente:

Cmuestra= ∆A/minmuestra ·F·TR

3 9

4.4.1.3. Cálculos con un calibrador único

La concentración de cada muestra se calcula utilizando la fórmula indicada arriba, pero F seobtiene como sigue:

4.4.2. Cinéticas múltiples

Para calcular la concentración en las cinéticas múltiples se utiliza el cálculo por deltas. Se llevaa cabo, para cada muestra, una primera lectura de la absorbancia frente a la LINEA DE BASE,después de un periodo de incubación programado. A continuación, se realizan nuevas lectu-ras a intervalos definidos de tiempo. La concentración se calcula multiplicando la media deincrementos (o decrementos) de absorbancia por minuto por un factor o con referencia a uncalibrador.

4.4.2.1. Cálculos con factor

La concentración de la muestra se calcula mediante la fórmula siguiente:

4.4.2.2. Cálculos con un calibrador único

La concentración de cada muestra se calcula utilizando la fórmula siguiente:

4.5. MODO COCIENTE

Este modo de análisis requiere el cálculo de la relación entre dos fracciones de una muestra.

4.5.1. Cálculos en el modo cociente

La concentración de la muestra se calcula mediante la fórmula siguiente:

FCcalibrador=

∆A/mincalibrador

Σ=Cmuestra

∆m

Ν

60t

·F·

Σ=Cmuestra

∆ m·Ccal

Σ ∆cal

=Cmuestra Coef2·ATOTAL

Coef1·AFRACF·

Manual de usuario

4 0

4.5.2. Replicados

Se pueden programar hasta 3 replicados. En este caso, la fórmula de cálculo es la siguiente:

4.6. VALOR DISCRIMINANTE (CUT-OFF)

La absorbancia de la mezcla de reacción es medida una única vez. La absorbancia puedemedirse a una (monocromática) o dos (bicromática) longitudes de onda. El resultado dependedel tipo de reacción: directa o inversa.

4.6.1. Lecturas bicromáticas

El valor de absorbancia utilizado es la diferencia entre la absorbancia leída a la longitud deonda principal y la absorbancia leída a la longitud de onda de referencia.

Amuestra= Al principal - Al referencia

4.6.2. Reacción directa

Los resultados siguen el criterio establecido en la siguiente tabla:

4.6.3. Reacción inversa

Los resultados siguen el criterio establecido en la siguiente tabla:

=Cmuestra Coef2

Coef1F· ·Σ

1

3

c=1AFRAC

3

Σ13

c=1ATOTAL

3

Condición ResultadoCmuestra > Vcut-off + Id -Cmuestra < Vcut-off – Id +Vcut-off – Id < Cmuestra < Vcut-off + Id ?

Condición ResultadoCmuestra > Vcut-off + Id +Cmuestra < Vcut-off – Id -Vcut-off – Id < Cmuestra < Vcut-off + Id ?