Medios de Cultivo
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MEDIOS DE CULTIVO
MEDIOS SELECTIVOS Permiten seleccionar un tipo de microorganismo contiene inhibidores para algunos microorganismos permitiendo el crecimiento de otros.
SSEELLEECCTTIIVVOOSS MMAANNIITTOOLL SSAALLAADDOO
MMAACC CCOONNKKEEYY SSAABBOOUURRAAUUDD GGLLUUCCOOSSAADDOO
TTCCBBSS
CCAARRBBOOHHIIDDRRAATTOO Manitol Lactosa Glucosa TioSulfato de Sodio, Citrato de Sodio, Bilis
y Sacarosa IINNHHIIBBIIDDOORR Cloruro de
Sodio 7 a 7,5 % pH
Sales Biliares y Cristal Violeta
IINNDDIICCAADDOORR Rojo de Fenol Rojo Neutro Azul de Timol – Azul de
Bromotimol CCOOLLOORR DDEELL MMEEDDIIOO Rojo Rojo Púrpura Ámbar Claro Verde Claro
VVIIRRAA Amarillo Rosado (Lactosa + o A/A)
Amarillo
MMIICCRROOOORRGGAANNIISSMMOOSS Estafilococos Staphylococcus
aureus, Staphylococcus
epidermidis (rojo)
Enterobacterias Escherichia coli
(rojo halo turbio), Klebsiella
pneumoniae (rosado mucoso)
Hongos Patógenos y Saprofitos
Vibrios
SSEELLEECCTTIIVVOOSS S-S (Salmonella – Shiguella)
Ruiz Castañeda
XLD (Xilosa Lisina
Desoxicolato)
AAggaarr LLoowweennsstteeiinn -- JJeennsseenn
CCAARRBBOOHHIIDDRRAATTOO LLaaccttoossaa XXiilloossaa,, LLaaccttoossaa yy SSaaccaarroossaa
CCoonnttiieennee HHuueevvoo yy GGlliicceerriinnaa
((CCrreecciimmiieennttoo ddee MMiiccoobbaacctteerriiaass))
IINNHHIIBBIIDDOORR Sales Biliares y el Verde Brillante
DDeessooxxiiccoollaattoo ddee SSooddiioo
VVeerrddee ddee MMaallaaqquuiittaa
IINNDDIICCAADDOORR RRoojjoo NNeeuuttrroo RRoojjoo ddee
FFeennooll
CCOOLLOORR DDEELL MMEEDDIIOO Rojo
MMeeddiioo BBiiffáássiiccoo ((LLííqquuiiddoo yy SSóólliiddoo)) DDeell HHeemmooccuull ttiivvoo ssee
iinnooccuullaa aa RRuuiizz CCaassttaaññeeddaa..
EEnn la mayoría de los procesos
agudos, tras incubar el medio 2-4 días, es posible observar
en la fase sólida pequeñas colonias RRoojjoo VVeerrddee
anaranjado que se deslizan por el agar en forma que recuerdan las lágrimas de cera resbalando por la
vela. VVIIRRAA TTrraannssppaarreennttee
((nnoo uussaann llaa llaaccttoossaa))
Una pequeña proporción de casos
presenta el crecimiento entre
los 5-15 días, y sólo de forma
excepcional, éste se retrasa hasta
pasados 30-45 días.
AAmmaarriilllloo CCoolloonniiaass CCrreemmaass ppaarraa
MM.. ttuubbeerrccuulloossiiss
MMIICCRROOOORRGGAANNIISSMMOOSS Salmonella – Shiguella
Brucellas Enterobacterias –
Coprocultivos
(Descarboxilación de la Lisina con
Producción de H2S
MMiiccoobbaacctteerr iiaass
Manitol Salado.-
• Los estafilococos coagulasa positiva hidrolizan el manitol acidificando el medio; las colonias aparecen rodeadas de una zona amarilla brillante.
• Los estafilococos coagulasa negativos, presentan colonias rodeadas de una zona roja o púrpura. Las colonias sospechosas, se repicarán en un medio sin exceso de cloruro de sodio para efectuarles, posteriormente, la prueba de la coagulasa.
• Los estafilococos coagulasa positiva fermentan el manitol y se visualizan como colonias amarillas rodeadas de una zona del mismo color.
• Los estafilococos que no fermentan el manitol, se visualizan como colonias rojas, rodeadas de una zona del mismo color o púrpura.
SSEELLEECCTTIIVVOOSS EE..MM..BB..
CCAARRBBOOHHIIDDRRAATTOO LLaaccttoossaa yy SSaaccaarroossaa
IINNHHIIBBIIDDOORR Eosina y Azul de Metileno
IINNDDIICCAADDOORR
CCOOLLOORR DDEELL MMEEDDIIOO MMaarrrróónn CCllaarroo
VVIIRRAA
MMIICCRROOOORRGGAANNIISSMMOOSS Enterobacterias y Algunas Bacterias Gram -, Candidas
MEDIOS ENRIQUECIDOS Medios Comunes a los que se añaden un suplemento nutritivo que le proporciona los factores de crecimiento.
EENNRRIIQQUUEECCIIDDOOSS AAGGAARR SSAANNGGRREE ((55 %% DDee SSaannggrree ddee CCaarrnneerroo oo SSaannggrree ddee
HHuummaannoo)) ((5500 ooCC))
AAGGAARR CCHHOOCCOOLLAATTEE ((8800 ooCC)) ppoorr 1100’’
MMÜÜLLLLEERR HHIINNTTOONN
CCAARRBBOOHHIIDDRRAATTOO Infusión de Músculo Cardíaco
(Corazón)
Cerebro-Corazón-Peptona
IINNHHIIBBIIDDOORR IINNDDIICCAADDOORR
CCOOLLOORR DDEELL MMEEDDIIOO Rojo Cereza Pardo Chocolate Ámbar VVIIRRAA
MMIICCRROOOORRGGAANNIISSMMOOSS Enterobacterias, Estafilococos, Estreptococos,
Neisseria Neisseria Meningitidis, Staphylococcus aureus (Beta), Streptococcus Pyogenes (Beta)
Enterobacterias, Estafilococos, Estreptococos,
Neisseria Neisseria gonorrhoae
Para Antibiogramas y Bacillus subtilis
Caldo Selenito Para Coprocultivo
MUELLER HINTON Y AGAR NUTRITIVO SIRVEN PARA PREPARAR AGAR CHOCOLATE Y AGAR SANGRE
MEDIOS DIFERENCIALES Son los que permiten distinguir a simple vista 2 ó más tipos de Bacterias, este comportamiento diferencial se traduce en el viraje de color de una sustancia indicadora.
TSI (Triple Sugar Iron)
SSEELLEECCTTIIVVOOSS TTSSII CCAARRBBOOHHIIDDRRAATTOO LLaaccttoossaa 1100 gg//LL,, SSaaccaarroossaa 1100 gg//LL yy
GGlluuccoossaa 11 gg//LL IINNHHIIBBIIDDOORR
IINNDDIICCAADDOORR RRoojjoo ddee FFeennooll
CCOOLLOORR DDEELL MMEEDDIIOO RRoojjoo
VVIIRRAA AAmmaarriilllloo ((MMeettaabboolliizzaa llooss HHiiddrraattooss ddee CCaarrbboonnoo))
MMIICCRROOOORRGGAANNIISSMMOOSS EEnntteerroobbaacctteerr iiaass
¡Si Crecen en todas son Bacterias Facultativas!
LIA (Lisina Hierro Agar)
SSEELLEECCTTIIVVOOSS LLIIAA CCAARRBBOOHHIIDDRRAATTOO GGlluuccoossaa
IINNHHIIBBIIDDOORR
IINNDDIICCAADDOORR PPúúrrppuurraa ddee BBrroommooccrreessooll
CCOOLLOORR DDEELL MMEEDDIIOO VViioolleettaa
VVIIRRAA
MMIICCRROOOORRGGAANNIISSMMOOSS SSaallmmoonneell llaa sspppp..,, PPrrootteeuuss mmiirraabbii ll iiss,, KKlleebbssiieell llaa ppnneeuummoonniiaaee,,
EEsscchheerriicchhiiaa ccooll ii
Simmons Citrato
SSEELLEECCTTIIVVOOSS CCiittrraattoo CCAARRBBOOHHIIDDRRAATTOO
IINNHHIIBBIIDDOORR
IINNDDIICCAADDOORR AAzzuull ddee BBrroommoottiimmooll
CCOOLLOORR DDEELL MMEEDDIIOO VVeerrddee
VVIIRRAA AAzzuull
MMIICCRROOOORRGGAANNIISSMMOOSS EEnntteerroobbaacctteerr iiaass
Úrea (CU)
SSEELLEECCTTIIVVOOSS ÚÚrreeaa CCAARRBBOOHHIIDDRRAATTOO EEll AAlliimmeennttoo eess eell EExxttrraaccttoo ddee
LLeevvaadduurraa yy ccoommoo SSuussttrraattoo llaa ÚÚrreeaa IINNHHIIBBIIDDOORR
IINNDDIICCAADDOORR RRoojjoo ddee FFeennooll
CCOOLLOORR DDEELL MMEEDDIIOO AAmmaarriilllloo AAnnaarraannjjaaddoo
VVIIRRAA RRoojjoo
MMIICCRROOOORRGGAANNIISSMMOOSS PPrrootteeuuss sspppp
SIM (SULFURO-INDOL-MOTILIDAD)
SSEELLEECCTTIIVVOOSS SSIIMM AAMMIINNOOÁÁCCIIDDOO TTrriippttóóffaannoo ((NNaattuurraall)) TTrriipptteeíínnaa
((SSiinnttééttiiccoo)) IINNHHIIBBIIDDOORR
IINNDDIICCAADDOORR
CCOOLLOORR DDEELL MMEEDDIIOO ÁÁmmbbaarr
VVIIRRAA
MMIICCRROOOORRGGAANNIISSMMOOSS KKlleebbssiieell llaa ppnneeuummoonniiaaee,, PP.. mmiirraabbii ll iiss,, EE.. ccooll ii
SIM CONTIENE LA MÁS ALTA CONCENTRACIÓN DE H 2S • Cepas móviles: producen turbidez del medio, que se extiende más
allá de la línea de siembra. • Cepas inmóviles: el crecimiento se observa solamente en la línea de
siembra. • Cepas H2S positivas: ennegrecimiento a lo largo de la línea de
siembra o en todo el medio. • Cepas H2 S negativas: el medio permanece sin cambio de color. • Cepas indol positivas: desarrollo de color rojo luego de agregar el
reactivo de Kovacs o de Erlich. • Cepas indol negativas: sin cambio de color.
Rojo de Metilo / Voges-Proskauer Estas dos pruebas forman parte de las pruebas colimetrías y permiten la diferenciación dentro de las enterobacterias del grupo coli y aerógenes. Las enterobacterias son anaerobios facultativos que utilizarán la glucosa en dos fases: primero la metabolizarán aerobiamente (respiración oxibióntica) consumiendo rápidamente el oxígeno del medio, para, en segundo lugar, continuar metabolizándola por vía anaerobia (fermentación). Ésta puede ser de dos tipos:
• Fermentación ácido mixta: La realizan las bacterias del grupo de E.coli y los productos finales son ácidos orgánicos (ácidos fórmico, acético, láctico y succínico) que provocan un fuerte descenso del pH inicial del medio. Puede detectarse por el viraje del indicador de rojo de metilo que permanece amarillo por encima de pH 5,1 y rojo por debajo de 4,4.
• Fermentación butilén glicólica: La realizan las bacterias del grupo Klebsiella-
Enterobacter (antiguo aerógenes). Los productos finales son compuestos neutros como el butanodiol y el etanol, produciéndose acetoína como intermediario que podrá ser detectada añadiendo al medio KOH (reactivo A de Voges-Proskauer) y alfa-naftol (reactivo B de Voges-Proskauer) que reaccionarán con este compuesto produciendo un color rojo característico.
Para la realización de estas dos pruebas se cultiva el microorganismo en caldo RMVP (medio de Clark y Lubs) y se incuba a 30ºC durante un periodo de 3 días como mínimo y 5 como máximo. Al revelar las pruebas, se separa el cultivo en dos porciones de unos 2,5ml que servirán para cada uno de los ensayos. Rojo de Metilo: A uno de los tubos se le añade:
• Unas gotas (4-5) de solución indicadora de Rojo de Metilo.
• Se agita para homogeneizar y se observa la coloración. Se considera positiva si vira al rojo y negativa si permanece amarillo.
Voges-Proskauer: A la otra porción de cultivo se le añade:
• 0,6ml del Reactivo A de Voges-Proskauer (alfa-naftol 5% en etílico absoluto). El medio adquiere un aspecto lechoso.
• 0,2ml del Reactivo B de Voges-Proskauer (KOH 40%). Desaparece el aspecto lechoso y se agita fuertemente.
Si la prueba es positiva, antes de cinco minutos aparece un color rosado-violáceo, más o menos intenso, que se inicia en la parte superior del tubo. Si la prueba es negativa no aparece coloración alguna.
BILIS-ESCULINA
SSEELLEECCTTIIVVOOSS SSIIMM CCAARRBBOOHHIIDDRRAATTOO
IINNHHIIBBIIDDOORR SSaalleess BBiilliiaarreess
IINNDDIICCAADDOORR
CCOOLLOORR DDEELL MMEEDDIIOO Ámbar u oscuro ligeramente opalescente. El medio con esculina
tiene un tinte azulado VVIIRRAA VVeerrddee OOlliivvaa hhaassttaa NNeeggrroo
MMIICCRROOOORRGGAANNIISSMMOOSS EEnntteerrooccooccooss ((EEssttrreeppttooccooss ddeell GGrruuppoo DD))
MEDIOS DE TRANSPORTE
• CARY BLAIR
Medio Semi-Sólido ¾ del tubo (Para Coprocultivos con Hisopos)
• STUART
Todo tipo de Secreciones
• SUERO FISIOLÓGICO
• CALDO MULLER HINTON
No Tiene Agar, No Cuaja
• TIOGLICOLATO Bacterias Anaeróbicas OTROS
• MICOBIÓTICO Es el Agar Sabourad conteniendo antibiótico y antimicótico (Cicloheximida y Cloranfenicol) (Crecen los Dermatofitos. Aspergillus, Microsporum, Candida, Tricophyton m.).