Métodos cuantitativos para el conteo de población microbiana en alimento (Conteo Directo)
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MICROBIOLOGIA DE LOS ALIMENTOS
UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE NICARAGUA MANAGUA
Recinto Universitario ¨Rubén Darío¨
Instituto Politécnico de la Salud
Dr. Luis Felipe Moncada
Tema: Métodos cuantitativos para el conteo de población microbiana en alimento (Conteo Directo)
Carrera: Microbiología IV año
Modalidad: Presencial
Integrantes:
Mercado Latino Alexander Antonio.
Rugama Rivera Kelvin Josué.
Sirias Palacios Eduardo Francisco.
Sequeira Arostegui Ecker Luis.
Solís Soza Carlos Antonio.
Profesora: Lic. Roberto Enrique Flores Díaz.
Managua, Jueves 28 de enero del 2016.
IntroducciónEl crecimiento es el incremento ordenado de todos los componentes de un microorganismo dando lugar a la multiplicación de ellos y conduciendo el aumento del número de individuos generando una población en un cultivo.
El recuento directo dependerá del estado o tipo de muestra que se vaya a estudiar y de las características propias de la población microbiana obtenida.
Objetivos• Detallar los diferentes métodos de conteo directo
• Mencionar las diversas técnicas empleadas en el recuento en el microscopio y en placa.
• Señalar los medios de cultivo primordiales en la microbiología de los alimentos.
• Puntualizar la clasificación de los medios de cultivo según su utilización.
Conteo directo
Este procedimiento se basa en colocar un volumen determinado de células sin fijar y realizar el conteo utilizando microscopio con el fin de saber la carga de microorganismo que posee dicha muestra.
Determina el número total de células presentes (viables y no viables).
Ventajas Desventajas
Equipo sencillo No distinción de microorganismos vivos de muertos
Rápidos resultados Tedioso
Económico Recuento de población de baja concentración
Conteos al Microscopio
Cámara Breed
Aplicaciones
•Calidad de la leche
•Diagnostico de mastitis bovina
Procedimiento •Dibuje un cuadro en el centro del portaobjeto•Homogenice la muestra problema•Colocar un gota de la muestra en el cuadro y extenderlo•Seque y fije a calor •Cubre con azul de metileno o cristal violeta durante 1 min•Lave con agua y seque •Observe al microscopio en 100x•Cálculos R de Mos= N° x FD x RM
Cámara de Petroff-
Hauser o de Neubauer
Aplicación
Calidad de Agua
Procedimiento •Homogenizar la muestra con el colorante (azul de metileno)•Colocar una gota en la cámara•Extender el liquido con el cubrecamara•Reposar por minutos •Observar en el microscopio con el lente de 10x•Cálculos N°cel/ml= X cel x 25 x 50 x 1000
Cámara de Howard
Aplicaciones
Identifica filamentos de hongos en alimentos caseros o
industrializados (enlatados)
Recuento en Placa
Filtración por membrana
Medios de cultivo
Agar Azul de Metileno (EMB)Este medio se utiliza para aislamiento y diferenciación de enterobacterias y Escherichia coli. Los colorantes contenidos en su formula inhiben a muchos gérmenes Gram Positivos de acompañamiento.
Aplicación
•Control de calidad de sustancias:
• Agua
• Jugos
Agar Dicloran Rosa de Bengala Cloranfenicol (DRBC):• Se utiliza para el
aislamiento y enumeración de mohos y levaduras en alimentos.
• Aplicación
• Control de calidad :
• frutas
• panes
• Derivados de la leche
• Alimentos salozonados y encurtidos
Agar Mac Conkey-sorbitol (SMAC)
Contiene sorbitol como azúcar fermenstescible e inhibidores de flora no entérica. Las colonias son sorbitol negativas y aparecen pálidas, comparadas con las rosadas brillantes que son sorbitol positivas.
Aplicación
Control de calidad:
•Agua
•Productos lácteos
•Carne
Caldo lactosadoEs rico en nutrientes y no contiene inhibidores. Posee extracto de carne y la peptona y lactosa
Se lo usa también como medio de preenriquecimiento, porque permite recuperar células injuriadas, diluye sustancias tóxicas o inhibitorias y favorece el desarrollo de Salmonella con respecto a otras bacterias.
Aplicaciones
•Agua
•Productos lácteos
•Refrescos naturales
Conclusión Los métodos empleados en la microbiología de los alimentos proporcionan datos contundentes acerca de la calidad del producto antes de ser comercializado y así no generar epidemias alimentarias producto de irresponsabilidades. Uno de ellos es el conteo directo que a pesar de sus limitaciones , este proporciona datos contundentes acerca de la carga microbiana que posee el producto.
Los medios de cultivo presenta las características físicas y bioquímicas de la población microbiana. Por lo tanto, se debe de brindar las condiciones apropiadas a estos microorganismos según su característica para que este pueda proliferarse en el medio y así facilitar el recuento.
Muchas Gracias