Metodos de dilucion
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MTODOS DE DILUCIN
Microbiologa De Los Alimentos
Q.F.B Gabriela Mayanin Mendoza OrozcoIsmael Daz Molina
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MTODOS DE DILUCIN
SON UTILIZADOS PARA MEDIR LA ACTIVIDADIN VITRODE UN AGENTE ANTIMICROBIANO SOBRE UN MICROORGANISMO ESPECFICO, UTILIZANDO DIFERENTES CONCENTRACIONES DEL AGENTE Y UN INCULO CONOCIDO DE LA CEPA BACTERIANA.
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Las pruebas pueden ser realizadas por dilucin en caldo o en agar, de esta forma es posible determinar la concentracin. Inhibitoriamnima(CIM) despus de la incubacin por 24 horas a 35 C.
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CONCENTRACIN INHIBITORIAMNIMA(CIM):Hace referencia a la menor concentracin de una dilucin seriada de un agente antimicrobiano que inhibe el crecimiento visible de una bacteria. Las CIM obtenidas son interpretadas como susceptible, intermedio o resistente, basado en los criterios del CLSI.
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MTODOS DE MACRODILUCINUtiliza 8 a 10 concentraciones decrecientes de una solucion en caldo Mueller-Hinton en tubos de vidrio (macrodilucin en caldo) o cajas de Petri con agarMueller-Hinton(dilucin en agar). A cada dilucin se le agrega un inculo bacteriano ajustado a la escala 0.5 de McFarland.
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Se incuba durante 18-24 horas a 35 C y se determina la CIM mediante la observacin de la menor dilucin del antibitico en la que se observa inhibicin del crecimiento visible bacteriano.
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MTODOS DE MICRODILUCINEl procedimiento es similar al de macrodilucin. Se realiza utilizando un plato con micropozos realizando 8 a 10 diluciones en caldo a las que se les adiciona un inculo bacteriano estandarizado (concentracin final en cada pozo 5 x 105UFC/mL).
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Este mtodo tiene la ventaja de utilizar pequeos volmenes de los materiales empleados. Para bacterias exigentes se utilizan los medios y condiciones de crecimiento recomendados por la CLSI: Para ambos mtodos los procesos de seleccin de colonias para la preparacin de del inculo son los mismos que los descritos para el mtodo de difusin en disco