MICROBIOLOGÍA DE ALIMENTOS. TÉCNICAS DE ANÁLISIS MICROBIOLÓGICO EN FRUTAS Y HORTALIZAS FRESCAS...
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MICROBIOLOGÍA DE ALIMENTOS.
TÉCNICAS DE ANÁLISIS MICROBIOLÓGICO EN FRUTAS Y HORTALIZAS FRESCAS
UNIVERSIDAD AUTONOMA DE CHIHUAHUA.
FACULTAD DE CIENCIAS QUIMICAS.
Dr. Iván Salmerón.Nolbertha Corral Soriano
Erwinia carotovora.
Pertenece a la familia de las Enterobacteriaceae. Siendo estas del grupo de los coliformes. NOM-112-SSA1-1994 Bienes y Servicios. Determinación de
bacterias coliformes. Técnica del numero mas probable (NMP)
Proporciona una estimación estadística de la densidad microbiana presente en los tubos con crecimiento
positivo
Densidad esperada es 1 bacteria X 10ml de
liquido o X g de alimento solido
FUNDAMENTO.
Bacterias coliformes Fermentan la lactosa
Incubadas a 35 ± 1°C durante 24 a 48 horas.
Resultando una producción de ácidos y gas el cual es manifestado en forma de turbidez.
Bacilos Gram negativos, no esporulados, aerobios o anaerobios facultativos.
REACTIVOS.
Solución reguladora de fosfatos.
Caldo lactosado
Caldo lauril sulfato triptosa
Caldo lactosa bilis verde brillante
Medio selectivo de mayor concentración.
Medio selectivo de enriquecimiento.
Medio confirmativo.
Preparación de muestra
PROCEDIMIENTO.
10 ml de Caldo lactosado.
1ml de la dilución primaria inicial NOM -110
10 ml de Caldo lauril sulfato triptosa.
Incubar a 35 ± 0,5 °C por 24 ± 2 horas
PRUEBA PRESUNTIVA.
10 ml de la dilución primaria inicial (NOM- 110)
Realizar diluciones según se necesite.
PROCEDIMIENTO.
Tubos con presencia de gas
10 ml de caldo lactosa bilis verde brillante.
PRUEBA CONFIRMATIVA.
Incubar a 35 ± 0,5 °C por 24 ± 2 horas
Después del tiempo de incubación de la prueba presuntiva
Dilución 10-1
Dilución 10-2
Dilución 10-3
Índice del
NMP/100ml
0 0 1 3
0 1 0 3
1 0 0 4
1 0 1 7
1 1 0 7
1 1 1 11
1 2 0 11
2 0 0 9
2 0 1 14
2 1 0 15
Los resultados se expresan como numero de bacterias /g o ml
De los tubos positivos, se puede sembrar en el agar selectivo MacConkey e incubar a 37 ºC por 24 h.
Este medio se utiliza para el aislamiento de bacilos Gram negativos, aerobios y anaerobios facultativos.
Todas las especies de la familia Enterobacteriaceae en este agar.
FUNDAMENTO DEL AGAR.
Peptona
Lactosa
Sales biliares y cristal violeta
Desarrollo de los microorganismos.
Hidrato fermentable
Inhibidores de Gram positivos
Agar MacConkey
Agar MacConkey con Erwinia carotovora
Pequeñas colonias de color rojo o rosa
profundo