Mini Manual de Bio (1)
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5.- Metabolismo Energético celular:
Se ponen en un tubo de ensayo los pigmentos fotosintéticos extraídos de la hoja de cardenal. Cabe destacar que los pigmentos fotosintéticos fueron hervidos con alcohol, por lo tanto en la mezcla están presente tanto los pigmentos como el alcohol de 95º.
Al tubo de ensayo se le agrega un volumen, inferior al del extracto de pigmentos, de Bencina blanca.
Como sabemos, la Bencina blanca es un compuesto de tipo apolar o Hidrofóbico y por lo tanto se unirán a él, moléculas de tipo apolar. En cambio, el alcohol etílico es de tipo polar, es decir, hidrofílico y por ende se unirán a él todos los componentes polares.
BENCINA BLANCA
PIGMENTOS FOTOSINTETICOS
ANTES DE BATIR..1*Experimento Presencia de
pigmentos Fotosintéticos
Cloroplastos
Propósito: Observar los cloroplastos
Tinción: S/T
Descripción: Se ven los cloroplastos pegados o muy cerca a la pared celular esto porque esta la gran vacuola que tira a los cloroplastos a los extremos, llama la atención que son una gran cantidad de cloroplatos.
VACUOLA
PARED CELULAR
CLOROPLASTOS
¡¡¡Mini Manual de Biología!!! ¡¡¡Mini Manual de Biología!!!
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Apoptosis NecrosisMecanismo
Restos Celulares
Fragmentación celular
Fragmentación del DNA
Orgánulos
Membrana
Tamaño celular
Programada Genéticamente Accidental
Son reconocidos y fagocitados Inducen inflamación local
En cuerpos apoptóticos por membrana
Los contenidos de los orgánulos se liberan
Temprana, Fragmentos oligonuclesomales
Tardía, Fragmentos grandes
Se preservan Se desintegran
Se mantiene Se rompe
Disminuye Aumenta
Tabla Comparativa entre Apoptosis y Necrosis
1.- Microscopia……………………………………………………………………………..1
2.-Morfología de los seres vivos…………………………………………………...3
3.-Métodos de estudio de biología celular……………………………………10
4.- Organización celular Eucarionte…………………………………………….14
5.- Metabolismo energético celular…………………………………………….21
6.- Ciclo celular y Apoptosis……………………………………………………….28
7.- Meiosis …………………………………………………………………………………34
8.- Gametogénesis……………………………………………………………………..36
Índice:
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• Nombre preparación : Aplastado de Meristemo de Cebolla
• Propósito : Observación de nucleolos
• Tinción: Argéntica (Sales de plata)
• Aumento Total: 400X
• Descripción : Se observan células de color café claro, con hasta cuatro nucléolos y un núcleo café oscuro. Las células alargadas son producto del mismo aplastado. Las células se ven cuadradas y bien definidas gracias a su pared celular.
CITOPLASMA
NÚCLEO
NÚCLEOLO
La Mayoría de las células están en interfase, esto se sabe por la presencia de nucléolos.
Las células pueden tener uno o varios nucléolos en su núcleo, esto por la necesidad de síntesis de proteínas. Depende del momento de interfase en el que se encuentre.
• Nombre preparación : Aplastado de Meristema de Cebolla
• Propósito : Observación de estadíos Mitóticos
• Tinción: Orceína Acética 2%
• Aumento Total: 400X
• Descripción: Se ve interfase, profase, metafase, anafase, telofase e incluso una citocinesis. Los cromosomas se distinguen de un color violeta, mientras que el contenido citoplasmático es calipso.
CELULAS EN
MITOSIS
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• Nombre preparación : C.T. de lombriz de tierra
• Propósito : Fase “S” (inicial o terminal)
• Tinción: H/E con técnicas de radioautrografia y sales de plata
• Aumento Total: 400X
• Descripción : Se ven regiones de color negro que corresponden a la presencia de la fase S. Se reconoce gracias a la Timidina Tritiada, pues reconoce a su base complementaria en el ADN y actúa como un marcador. Como sabemos, la fase S es aquella en la que se sintetiza material genético
FASE S iniciand
o
FASE S terminan
do
A la lombriz se le inyecto Timidina
Triteada en exceso (Timina marcada con
tritio H3)
G1
S
G2
M
2C
2C
4C
4C
ANAFASE
INICIAL
TELOFASE
FINAL
METAFASE
TELOFASE
INICIAL
PROFASE
INICIAL
PROFASE FINAL
INTERFASE
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• Nombre preparación : C.T. de Prostata de rata
• Propósito : Observar células Apoptóticas
• Tinción: Hematoxilina Férrica
• Aumento Total: 400X
• Descripción : Se indujo apoptosis de la célula, en donde se observa el contenido celular deteriorado y cuerpos apoptóticos, los cuales son fagocitados por células vecinas y degradados por los lisosomas de éstas. Las células se observan de color negro, ya que la hematoxilina férrica reconoce la cromatina.
CELULAAPOPTÓT
ICA
La Célula en apoptosis se encuentra rodeada de una
porción blanca y tiene puntitos más oscuros(el núcleo)
Prometafase
Quiasma de Diploteno
Paquiteno
Cigoteno (bouquet)
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7.- Meiosis:• Nombre preparación : C.T. del Lilium
• Propósito : Observación de las etapas de Profase I (Leptonema, Paquinema y Diplotema) y Metafase I
• Tinción: Hematoxilina Safranina
• Aumento Total: 400X
• Descripción : Hay células de la periferia que se tiñen de color calipso, en las cuales se observan núcleos de color morado, mientras que hacia el lumen, están las células violeta, en las cuales fijaremos nuestra atención. Estas células miden cerca de 15 micrones y en su interior podemos ver las distintas etapas de la profase: Leptoteno, paquiteno, diploteno.
PAQUINEMA
LEPTONEMA
DIPLONEMA
8.- Gametogénesis:
• Nombre preparación : C.T. de Testiculo de rata
• Propósito : Observación Gametogénesis Masculina
• Tinción: Hematoxilina
• Aumento Total: 400X
• Descripción : Observar distintos tipos celulares, y observar los tres tipos de compartimentos en las gónadas masculinas.
• Descripción: Se ven tres grandes compartimentos tubulares. El borde externo del túbulo se llama compartimiento peritubular y el contenido se llama compartimiento intratubular. Entre cada túbulo existe un compartimento llamado Intersticial. Dentro de las capas de un túbulo podemos distinguir en orden las siguientes células: Espermatogonias, Espermatocitos I, Espermátidas (redondas y alargadas) y espermios. En el compartimento intersticial se ven células de Leydig y en el compartimento intratubular, luego de las células Mioides, se ubican en forma triangular, las células de Sértoli.
TÚBULO
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• Nombre preparación : C.T. de Ovario de rata
• Propósito : Observación Gametogénesis Femenina
• Tinción: Hematoxilina - Eosina
• Aumento Total: 400X
• Descripción : Observar distintos tipos celulares, y observar los tres tipos de compartimentos en las gónadas masculinas.
• Descripción: Se ven folículos primordiales, Primarios (28 micrones) aún sin antro, secundarios (30 micrones) o en formación y Terciarios (35-36 micrones) con un antro ya formado.
FOLÍCULO
PRIMARIOFOLÍCUL
O SECUND
ARIO
FOLÍCULO
TERCIARIO
ANTRO
Mitosis MeiosisConservativa 2n 2n
(2n=Diploide; n=Haploide)Reducida 2n n (2n=Diploide;
n=Haploide)
1 División Producto: 2 Células Hijas
2 Divisiones Producto: 4 Células Hijas
No hay Apareamiento de cromosomas Homólogos
Hay Apareamiento de cromosomas Homólogos
Células NO Gaméticas Células Gaméticas
No hay Variabilidad Genética Hay Variabilidad Genética
Tabla Comparativa entre Mitosis y Meiosis
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CÉLULAS MIOIDES
CÉLULAS DE SERTOLI
ESPERMATOZOIDES
ESPERMÁTIDAS REDONDAS
ESPERMATOCITO I
ESPERMATOGONIAS
CÉLULAS DE LEYDIG
Folículo de Graff
Folículo Terciario
Antro Folicular
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2
Es importante destacar los colores característicos de cada Pigmento:
Clorofila a---Verde azulado
Clorofila b---Verde amarillento
Carotenos---Naranjo
Xantofilas----Amarillo
1
DESPUES DE BATIR..
Finalmente, la mezcla de alcohol, pigmentos y bencina blanca se bate, para que sus componentes se separen en dos capas:
La capa Superior corresponde a la Bencina blanca de tipo apolar, a la cual se han unido los pigmentos de Clorofila.
En la fase inferior a ésta se observa una gran cantidad de alcohol etílico, al cual se han unido los carotenos, es decir, pigmentos fotosintéticos de otra naturaleza. Éstos son los pigmentos que a la luz se ven de color rojo.
Sin embargo han quedado algunos pigmentos verdes de clorofila en la fase inferior. Esto ocurre debido a que la cantidad de bencina blanca fue mínima en relación con la gran cantidad de clorofila que había en el tubo de ensayo, por lo tanto, la bencina blanca se saturó y no pudo aceptar más clorofila.
Bencina+ clorofila HidrofóbicoAlcohol+ carotenos + antófilas Hidrofílico
Pigmentos fotosintéticos: carotenoides, antófilas, clorofila.
Bencina: naturaleza apolar / Clorofila: naturaleza Antipática
CO2+ Ba(OH)2 BaCO3+H2O
MATRAZ CON LEVADURA, AGUA Y
GLUCOSA
TUBO DE ENSAYO CON EL
Ba(OH)2 QUE
FORMA EL PRECIPITA
DO DE BaCO3
2*Experimento Fermentación
Alcohólica
Este experimento consiste en un matraz conectado a un tubo de ensayo que contiene Agua de Barita Ba(OH)2. En el matraz se ha puesto cierta concentración de glucosa, agua y levadura. Como el matraz se encuentra sellado herméticamente, la levadura comienza a consumir el O2 y se desprende alcohol etílico y CO2 como consecuencia de la actividad metabólica de la levadura. El CO2 liberado llega mediante una conexión al tubo de ensayo que contiene agua de Barita y reacciona con ella, de manera que se forman un precipitado de color blanco, que corresponden a Carbonato de Bario BaCO3, el nuevo compuesto formado por la reacción.
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• Nombre preparación : C.T. de Páncreas
• Propósito : Observar RER
• Tinción: Galocianina
• Aumento Total: 400X
• Descripción : Se identifican acinos (colonias celulares pancreáticas), con lumen, núcleo y RER, dispuesto hacia el lumen para la síntesis proteica.
LUMEN
ZONA DEL RER
ERGASTOPLAMS
O Grupos de ergastoplasmos
forman el acino
El RER se ubica en el ergastoplasmo
Islotes Pancreáticos
• Nombre preparación : C.T. de Tráquea de rata
• Propósito : Observar cilios
• Tinción: Hematoxilina Férrica(Tiñe de negro el núcleo)
• Aumento Total: 400X
• Descripción : Se ven Condrocitos (células cartilaginosas que conforman la tráquea) de los cuales se suspenden prolongaciones largas llamadas Cilios. (cilios: estructura básica del axolema).
Tejido Cartilaginoso
Se observan cilios, células caliciformes, tejido cartilaginoso,etc…
*Glicosilación(es el proceso de adición de carbohidratos a una proteína) ocurre en el RER y posteriormente en el Golgi.
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HOJA DE CARDENAL
DECOLORADA
HOJA DE CARDENAL
TEÑIDA CON LUGOL (SE TIÑEN
LOS AMILOPLASTOS)
Para decolorar la hoja de cardenal se sumerge en alcohol etílico (95º) y agua, contenidos en un vaso precipitado, hirviendo a baño maría, así se extraen sus pigmentos fotosintéticos.
Una vez decolorada la hoja de cardenal se tiñe con Yodo Yodurado (lugol) para reconocer los depósitos de almidón (amiloplastos), que se observan de un color café más oscuro en relación con el tejido vegetal de la hoja.
3*Experimento Reconocer el almidón en la hoja
Esto quiere decir, que la hoja tenía una función fotosintética, pues por alguna razón, fue capaz de sintetizar carbohidratos.
CO2+ Ba(OH)2 BaCO3+H2O
1
2
5*Experimento
En un tubo de ensayo hay Agua de Barita (1). Al insuflar aire en ella, se forma el mismo precipitado de carbonato de Bario que se formaba al experimentar con la levadura, pues cuando se insufla aire, también se recibe CO2. Por lo tanto, se ve la misma ecuación que en la reacción anterior.
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CO2+ H2O+ Rojo fenol H2CO3+ Beige
1 2
4*Experimento
En un tubo de ensayo se contiene una solución de Ba(OH)2 al 5% que además, tiene como indicador Rojo Fenol (1). Es importante comprender, que la mezcla está en estado básico pues se encuentra en agua y que el rojo fenol reacciona en soluciones ácidas.
Al insuflar aire en el tubo de ensayo, el rojo fenol cambia su color a beige (2), pues al captar CO2 éste reacciona con la molécula de agua y finalmente el agua se disocia para formar un ácido llamado Ácido Carbónico H2CO3.
Medio Basico Hidroxido de sodio+rojo fenol +CO2
Se agrego CO2 y se hizo un medio más acido
6.- Ciclo Celular y Apoptosis:
• Nombre preparación : C.T. de Hígado
• Propósito : Observación de núcleos
• Tinción: H/E
• Aumento Total: 400X
• Descripción : Se ven Hepatocitos humanos, con núcleos teñidos de un color morado. El borde más oscuro del núcleo corresponde a sitios en donde se encuentra la Heterocromatina. En el centro del núcleo, se observan unos gránulos morados oscuros que también corresponden a Heterocromatina, mientras que las porciones transparentes del núcleo corresponden a Eucromatina.
NÚCLEOHEPAT
OCITO
Los Hepatocitos tienen núcleos principalmente intermedios
Núcleo Vesiculoso
Núcleo Intermedio
Núcleo Macizo
Eu < He
Eu = He
Eu > He
He: Heterocromatina
Eu:Eucromatina
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• Nombre preparación : C.T. de intestino delgado
• Propósito : Observar diferenciación de membranas
• Tinción: H/E
• Aumento Total: 400X
• Descripción : Se identifican microvellosidades
MICROVELLOSIDADES
TEJIDO CONJUNTI
VO
CELULA CALICIFOR
ME
Apical
Basal
Microvellosidades
LumenChapa Estriada: Conjunto de microvellosidadesCélulas Caliciformes: Secretan mucus
• Nombre preparación : C.T. de Epidídimo
• Propósito : Observar Complejo de Golgi
• Tinción: Método de Elfman
• Aumento Total: 400X
• Descripción : : Es posible reconocer prolongaciones de color negro que corresponden al complejo de golgi, sitio de modificaciones proteicas
* El método de elfman aplica una solución de sales de plata (plata metálica) que tiñe el golgi de color negro. Esto porque posee azucares reductores.
Lumen
Lumen
Se pueden observar: núcleos, estereocilios, aparato de golgi, etc...
jos
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4.- Organización Celular Eucarionte:• Nombre preparación : Epidermis de catafilo de cebolla
• Propósito: Observación de permeabilidad células vegetales
• Tinción: Sin tinción
• Aumento Total: 400X
Concentración Medio Comportamiento
0,2 hipotónico turgencia
0,4 isotónico ------------------
0,6 hipertónico plasmólisis incipiente
0,8 hipertónico plasmólisis total
Se acerca al medio isotónico
Comienza la plasmólisis
Plasmolisis avanzada
Osmosis
0,2M 0,4 M
0,6 M
Ingresa Agua.
0,8 M Sale Agua.
: Más soluto
: Menos Soluto
• Nombre preparación : Frotis sanguíneo a diferentes concentraciones
• Propósito: Observación de permeabilidad células vegetales
• Tinción: Sin tinción
• Aumento Total: 400X
Hipertónico Sale agua Plasmólisis Hipotónico entra agua Turgencia
0,1% 0,5%
0,9% 1,1%
No hay zona
bicóncava
Zona Bicóncava
Hipotónico Hipotónico
Isotónico
Hipertónico
Crenación: Deshidratación de los Eritrocitos
En células vegetales En Glóbulos rojos
Plasmólisis
Lisis Celular
Crenación
Hemolisis
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• Nombre preparación : Pellet 1,2 o 3
• Propósito: Pellets obtenidos por fraccionamiento celular
• Tinción: Azul de Metileno
• Aumento Total: 400X
• Descripción : Se observa:
En el Pellet 1: La célula en sí. (Células completas)
En el Pellet 2: Núcleos
En el Pellet 3: Componentes del citoplasma (Restos de membrana y nucléolos)
PELLET 1
PELLET 2
PELLET 3
Procedimiento: Moler en 1 mortero, se deja descansar y se traspasa el sobrenadante Pellet1 (se obtuvo dejándolo decantar). Se saca el sobrenadantePellet2 Centrifugar 10min 1200RPM Pellet 3 10min. 5000 RPM , descartar el portanadante.
0,2 M 0,4 M
0,6 M 0,8 M
• Nombre preparación : Mezcla de Diatomeas
• Propósito: Observación representante del reino Protista
• Tinción: Vital
• Aumento Total: 400X
• Descripción: Se observan dos tipos de diatomeas: unas que tienen forma de hoja llamadas “Pennales” y otras que tienen forma de esfera, llamadas “Centrales”.
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Reino Protista
COLONIA DE
PINULARIAS
PINULARIA
FILAMENTOSANAVICU
LAR
Diatomeas
Penales
Filamentosas
Naviculares
Pinularias
Centrales
Frustula: Capa externa de la Diatomea compuesta de sílice.
Rafe: Función entrada y salida de agua
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• Nombre preparación : Penicillium Sp.
• Propósito: Observación representante del reino Fungi
• Tinción: Vital
• Aumento Total: 400X
• Descripción : Se observa una madeja de hilos (Hifas) de las cuales las que están en el centro del cuerpo se llaman hifas vegetativas. Las hifas que llegan a la periferia corresponden a hifas que contienen en su extremo terminal un esporangio, estas son las hifas reproductivas.
Reino Fungi
HIFAS REPRODUCT
IVAS CON ESPORANGI
OHIFAS VEGETATIVAS
Micelio: Conjunto de Hifas (reproductivas + vegetativas)
Levadura (Saccharomyces cerevisiae) único Hongo unicelular que existe
• Nombre preparación: Hilos entrecruzados
• Propósito: Uso y manejo del microscopio, poder de penetración
• Tinción: Sin tinción
• Nombre preparación : Oscillatoria Sp
• Propósito: Observación representante del reino monera
• Tinción: Vital(Tiñe cuando el organismo esta vivo)
• Aumento Total: 400X
• Descripción: Se observan compartimentos o celdas unidas entre sí, formando una especie de hilo bacteriano que tiende a enrollarse u oscilar. Esta especie es llamada “Oscillatoria sp.” La bacteria se tiñe de un color verde azulado.
El Poder de Penetración es inversamenteproporcional al poder del aumento
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4Colonia
Oscillatoria
Septo (división)
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• Nombre preparación : Amoeba Sp.
• Propósito: Observación reino Protista
• Tinción: Vital
• Aumento Total: 400X
• Descripción: Se ven Amebas de color violeta y rosado, las cuales poseen brazos llamados pseudópodos. También posee: una vacuola contráctil y una vacuola alimenticia.
NÚCLEO
PSEUDÓPODO
V. CONTRA
CTIL
V. ALIMEN
TICIA
Pseudópodos: Extensiones del citoplasma + el citoesqueleto
• Nombre preparación : Lichen tallus
• Propósito: Organismo simbionte entre un representante del reino protista o monera y un representante del reino fungi.
• Tinción: Vital
• Aumento Total: 400X
• Descripción : El hongo degrada minerales de la roca, para que estos sean utilizados por las algas (ya que normalmente la simbiosis es con una alga) y el alga fotosintetiza para alimentar al hongo.
El liquen aparenta ser un tejido, pero en realidad es un Pseudo-tejido.
Liquen (No pertenece a ningún reino)
Asociación de 2 organismos diferentes en el que ambos se ven beneficiados.
Parte del Hongo
LiquenCORTEZA
CAPA ALGALCAPA FUNGICA
(soporte firmeza y agua)RIZOIDE (adhesión al sustrato)
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Capa Rizoide: Pertenece al hongo la función es adherirse al sustrato
Capa Fúngica: Hifas modificadas
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• Nombre preparación : Corte Transversal de hoja
• Propósito : Observación representante del reino plantae
• Tinción: Vital
• Aumento Total: 400X
• Descripción : Se observa una capa celular superior, que corresponde a la epidermis superior. Luego, se observan líneas celulares que corresponden al clorénquima. Y para finalizar, una capa que almacena aire y en la cual se ubican las estomas llamada neumatenquima, la que inferiormente es sellada por una capa celular llamada epidermis inferior.
Reino Plantae
ESTOMA
NEUMATENQUIMA
CLORENQU
IMA
EPIDERMIS SUPERIOR
Estomas= Células oclusivas + poro + cámara subestomática.
Clorénquima: Posee gran cantidad de cloroplastos. Función: fotosíntesis
Neumatenquima: Almacenamiento de gases(ej: vapor de
agua,co2...)
Estomas: Permite el intercambio gaseoso
Método InmediatoMétodo Mediato
NO
Se puede observar el proceso de crenación (cambios fisiológicos)
Más Rápido, Menos Costoso
Duran Horas
Se observa apilamiento de Eritrocitos
In Vivo
Se pueden ver los leucocitos
NO
Proceso de crenación Los glóbulos rojos se están deshidratando. En la célula vegetal a este proceso se le llama plasmólisis.
Menos Rápido, Más Costoso
Duran Años
NO
In Vitro
Ventajas: se logra ver con mayor detalle, gracias a su tinción.
Dura + tiempo
Desventaja: No se observan procesos biológicos (como crenación)
Preparación más compleja
Mucho más costoso
Método Mediato
En el otro método es lo
mismo pero al revés.
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3.-Metodos de estudio de biología celular• Nombre preparación : Frontis de sangre humana
• Propósito: Ventajas y desventajas del método Inmediato
• Tinción: Sin tinción
• Aumento Total: 400X
• Descripción: Se presentan gran cantidad de glóbulos rojos y se aprecia su forma, se notan todas las células iguales. Entrega la información de la agrupación en pilas de monedas
• Nombre preparación : Aplastado de Hígado
• Propósito : ventajas y desventajas del método inmediato
• Tinción: sin tinción
• Aumento Total: 400X
• Descripción : Se observan hepatocitos y el espacio intersticio.
• Nombre preparación : Frontis de sangre humana
• Propósito: Ventajas y desventajas del método Mediato
• Tinción: May grundwold giemsa
• Aumento Total: 400X
• Descripción: Permite observar glóbulos blancos, rojos y plaquetas. El glóbulo blanco es polimorfo nuclear más grande que el glóbulo rojo y mide de 9 a 10 micrones.También es posible diferenciar un linfocito, ya que su núcleo es grande y la célula se tiñe prácticamente completa.
Al fijarse los glóbulos rojos no se superponen entre sí, están fijados. Esto sucede por la técnica histológica
Glóbulo rojo crenado --> deshidratado
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NÚCLEO DE UN HEPATOCITO
• Nombre preparación : C.T. de Hígado de rata
• Propósito : ventajas y desventajas del método mediato
• Tinción: H/E
• Aumento Total: 400X
• Descripción : Se observan hepatocitos teñidos, los núcleos de estos y se logra diferenciar el espacio intersticio.
ESPACIO INTERSTICIO
HEPATOCITO
NÚCL
EO
H/E: Hematoxilinacolorante básico tiñe de azul o purpura los elementos ácidos ej:Núcleo. Eosina Tiñe de Rosado o Rojo los elementos básicos Ej: Citoplasma.
• Nombre preparación: N°6 en papel milimetrado
• Propósito: Uso y manejo del microscopio. Poder de las lentes
• Tinción: Sin tinción
• Aumento Total: 40X, 100X, 400X
1.-Microscopia
• Nombre preparación : Frotis de Sangre Humana
• Propósito: Calculo del tamaño celular. Uso del aumento de inmersión
• Tinción: May Grundwald Giemsa(MGG)
• Aumento Total: 400X 1
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2.- Morfología de los Seres Vivos
Reino Monera
• Nombre preparación : Frotis Bacteriano
• Propósito: Observación representante del reino Monera
• Tinción: Gram
• Aumento Total: 1000X
• Descripción: Se observan células teñidas(Gram+) de color violeta. Revelando morfología en forma de bastón, llamadas “Bacillus” y en forma esférica llamadas “Coccus”
Gram(+) Violeta
Gram(-) Rosado
Espirilos
Cocaceas
Bacilos
Stafilo sp
Streptococcusp