Προιοριμός MIC, MBC · 2014. 6. 24. · – Tables 2A έως 2L (M100-S18, Vol.28, CLSI)...
Transcript of Προιοριμός MIC, MBC · 2014. 6. 24. · – Tables 2A έως 2L (M100-S18, Vol.28, CLSI)...
![Page 1: Προιοριμός MIC, MBC · 2014. 6. 24. · – Tables 2A έως 2L (M100-S18, Vol.28, CLSI) Συνολικός αριθμός απόφαη ου ργαηρίου – τέτοιος](https://reader035.fdocuments.co/reader035/viewer/2022081621/611de140738704176a5bfe3e/html5/thumbnails/1.jpg)
Προσδιορισμός MIC, MBC
Γεωργία Βρυώνη
![Page 2: Προιοριμός MIC, MBC · 2014. 6. 24. · – Tables 2A έως 2L (M100-S18, Vol.28, CLSI) Συνολικός αριθμός απόφαη ου ργαηρίου – τέτοιος](https://reader035.fdocuments.co/reader035/viewer/2022081621/611de140738704176a5bfe3e/html5/thumbnails/2.jpg)
Έλεγχος ευαισθησίας με τη μέθοδο αραιώσεων των αντιβιοτικών
Αρχή: – Έκθεση μικροβιακού εναιωρήματος σε διαφορετικές συγκεντρώσεις αντιβιοτικού
– Η μικρότερη συγκέντρωση αντιβιοτικού που δεν επιτρέπει την ανάπτυξη του μικροοργανισμού in vitro
Ελάχιστη Ανασταλτική Πυκνότητα του φαρμάκου (ΕΑΠ) Minimun Inhibitory Concentration (MIC)
![Page 3: Προιοριμός MIC, MBC · 2014. 6. 24. · – Tables 2A έως 2L (M100-S18, Vol.28, CLSI) Συνολικός αριθμός απόφαη ου ργαηρίου – τέτοιος](https://reader035.fdocuments.co/reader035/viewer/2022081621/611de140738704176a5bfe3e/html5/thumbnails/3.jpg)
Ελάχιστη Ανασταλτική Πυκνότητα Minimum Inhibitory Concentration (MIC)
Όχι απόλυτη τιμή – Η αληθινή τιμή μεταξύ της MIC που αναστέλλει τη μικροβιακή ανάπτυξη και της αμέσως υποδιπλάσιας αραίωσης που επιτρέπει τη μικροβιακή ανάπτυξη
Αραιώσεις αντιβιοτικού υποδιπλάσιες (5-7): 1, 2, 4, 8, 16μg/mL
Κρίσιμες συγκεντρώσεις αντιβιοτικού (1 - 3) [ Breakpoint MIC ] :
Π.χ. 4, 6, 8, 12, 16 μg/mL
![Page 4: Προιοριμός MIC, MBC · 2014. 6. 24. · – Tables 2A έως 2L (M100-S18, Vol.28, CLSI) Συνολικός αριθμός απόφαη ου ργαηρίου – τέτοιος](https://reader035.fdocuments.co/reader035/viewer/2022081621/611de140738704176a5bfe3e/html5/thumbnails/4.jpg)
Ελάχιστη Ανασταλτική Πυκνότητα Minimum Inhibitory Concentration (MIC)
MIC50
– Η ελάχιστη συγκέντρωση του αντιβιοτικού που αναστέλλει την ανάπτυξη 50% των υπό έλεγχο στελεχών (εντός του ίδιου είδους)
MIC90
– Η ελάχιστη συγκέντρωση του αντιβιοτικού που αναστέλλει την ανάπτυξη 90% των
υπό έλεγχο στελεχών (εντός του ίδιου είδους)
![Page 5: Προιοριμός MIC, MBC · 2014. 6. 24. · – Tables 2A έως 2L (M100-S18, Vol.28, CLSI) Συνολικός αριθμός απόφαη ου ργαηρίου – τέτοιος](https://reader035.fdocuments.co/reader035/viewer/2022081621/611de140738704176a5bfe3e/html5/thumbnails/5.jpg)
Ελάχιστη Ανασταλτική Πυκνότητα Minimum Inhibitory Concentration (MIC)
Ερμηνεία:
3 κατηγορίες ευαισθησίας μικροοργανισμών – Ευαίσθητοι (Susceptible)
– Μέτρια ευαίσθητοι (Intermediate)
– Ανθεκτικοί (Resistant)
![Page 6: Προιοριμός MIC, MBC · 2014. 6. 24. · – Tables 2A έως 2L (M100-S18, Vol.28, CLSI) Συνολικός αριθμός απόφαη ου ργαηρίου – τέτοιος](https://reader035.fdocuments.co/reader035/viewer/2022081621/611de140738704176a5bfe3e/html5/thumbnails/6.jpg)
Κριτικές συγκεντρώσεις
S I R
c C
δύο συγκεντρώσεις
MIC c c < MIC C MIC > C
c : χαμηλή
C : υψηλή
![Page 7: Προιοριμός MIC, MBC · 2014. 6. 24. · – Tables 2A έως 2L (M100-S18, Vol.28, CLSI) Συνολικός αριθμός απόφαη ου ργαηρίου – τέτοιος](https://reader035.fdocuments.co/reader035/viewer/2022081621/611de140738704176a5bfe3e/html5/thumbnails/7.jpg)
Έλεγχος ευαισθησίας με τη μέθοδο αραιώσεων των αντιβιοτικών
Είδη: – Μέθοδος αραιώσεων σε ζωμό (broth dilution method)
Μακρο-μέθοδος (macrodilution)
Μικρο-μέθοδος (microdilution)
– Μέθοδος αραιώσεων σε άγαρ (agar dilution method)
Μέθοδοι αναφοράς (Standard Reference Methods) Μέθοδοι προτυποποιημένες
![Page 8: Προιοριμός MIC, MBC · 2014. 6. 24. · – Tables 2A έως 2L (M100-S18, Vol.28, CLSI) Συνολικός αριθμός απόφαη ου ργαηρίου – τέτοιος](https://reader035.fdocuments.co/reader035/viewer/2022081621/611de140738704176a5bfe3e/html5/thumbnails/8.jpg)
Αντιβιοτικά Πρότυπες ουσίες
– περιεκτικότητα σε δραστική ουσία ή ενεργότητα (μg/mg ή IU/mg)
– ημερομηνία λήξης – διατήρηση: </= -20ο C
Παρασκευή μητρικού διαλύματος (stock solution) – άνοιγμα αφού πάρουν θο C δωματίου (υδρατμοί)
καταστροφή β-λακταμικών αντιβιοτικών αύξηση βάρους υγροσκοπικών ουσιών (αμινογλυκοσίδες)
– προστασία από μεγάλη έκθεση στο φως ριφαμπικίνη, πολυμιξίνη Β σκοτάδι
– συγκέντρωση (1000 μg/mL ή 10 χ μεγαλύτερης συγκέντρωσης)
– γνωστό το ακριβές βάρος της ουσίας – επιλογή / υπολογισμός διαλύτη (Table 4, M7-MIC)
![Page 9: Προιοριμός MIC, MBC · 2014. 6. 24. · – Tables 2A έως 2L (M100-S18, Vol.28, CLSI) Συνολικός αριθμός απόφαη ου ργαηρίου – τέτοιος](https://reader035.fdocuments.co/reader035/viewer/2022081621/611de140738704176a5bfe3e/html5/thumbnails/9.jpg)
Αντιβιοτικά Πρότυπες ουσίες
– περιεκτικότητα σε δραστική ουσία ή ενεργότητα (μg/mg ή IU/mg)
– ημερομηνία λήξης – διατήρηση: </= -20ο C
Παρασκευή μητρικού διαλύματος (stock solution) – άνοιγμα αφού πάρουν θο C δωματίου (υδρατμοί)
καταστροφή β-λακταμικών αντιβιοτικών αύξηση βάρους υγροσκοπικών ουσιών (αμινογλυκοσίδες)
– προστασία από μεγάλη έκθεση στο φως ριφαμπικίνη, πολυμιξίνη Β σκοτάδι
– συγκέντρωση (1000 μg/mL ή 10 χ μεγαλύτερης συγκέντρωσης)
– γνωστό το ακριβές βάρος της ουσίας – επιλογή / υπολογισμός διαλύτη (Table 4, M7-MIC)
ποσότητα που ζυγίστηκε (mg) X ενεργότητα (μg/mg) Όγκος (mL)= --------------------------------------------- επιθυμητή συγκέντρωση (μg/mL) όγκος (mL) X συγκέντρωση (μg/mL) Βάρος (mg)= ------------------------------- ενεργότητα (μg/mg)
![Page 10: Προιοριμός MIC, MBC · 2014. 6. 24. · – Tables 2A έως 2L (M100-S18, Vol.28, CLSI) Συνολικός αριθμός απόφαη ου ργαηρίου – τέτοιος](https://reader035.fdocuments.co/reader035/viewer/2022081621/611de140738704176a5bfe3e/html5/thumbnails/10.jpg)
Αντιβιοτικά Διατήρηση μητρικού διαλύματος (stock solution)
– όχι απαραίτητη η αποστείρωση αν ναι: διήθηση με ειδικά φίλτρα
– διαμοίραση σε μικρές ποσότητες σωλην. πολυ-προπυλενίου, -αιθυλενίου, -στυρενίου
– Θερμοκρασία </= -60o C για ~ 6 μήνες ποτέ > -20ο C Ιμιπενέμη, κεφακλόρη, κλαβουλανικό οξύ, ριφαμπικίνη: </= -70o C για 1 μήνα
Αμπικιλλίνη, τριμεθοπρίμη και άλλα σε διαλύματα φωσφορικών: ίζημα (καλή ανάδευση)
– Αποφυγή απόψυξης / ψύξης
![Page 11: Προιοριμός MIC, MBC · 2014. 6. 24. · – Tables 2A έως 2L (M100-S18, Vol.28, CLSI) Συνολικός αριθμός απόφαη ου ργαηρίου – τέτοιος](https://reader035.fdocuments.co/reader035/viewer/2022081621/611de140738704176a5bfe3e/html5/thumbnails/11.jpg)
Επιλογή αντιβιοτικών Είδος αντιβιοτικού ανάλογα
– μικροβιακού είδους
Μη απαιτητικά
Απαιτητικά
Table 1, M100-S18, Vol.28 No.1
Εντεροβακτηριακά Pseudomonas aeruginosa και άλλα μη-εντεροβακτηριακά Staphylococcus spp. Enterococcus spp. Acinetobacter spp. Burkolderia cepacia, Stenotrophomonas maltophilia
Haemophilus spp. Neisseria gonorrhoeae Streptococcus pneumoniae Streptococcus spp. εκτός από S. pneumoniae
– Εστίας λοίμωξης, αντοχής, αλλεργίας, κλπ Ομάδα Α: υποχρεωτικά (primary testing) Ομάδα Β:
– αντοχή στην ομάδας Α – περιοχή λοίμωξης: SXT και ουρολοίμωξη, 3η γενιάς κεφαλοσπορίνες και CSF
– πολυμικροβιακή λοίμωξη,πολλές εστίες λοίμωξης, αλλεργία, μη απάντηση σε Ομ. Α
– επιδημιολογικοί λόγοι
Ομάδα C: εναλλακτική ή επιπλέον αγωγή Ομάδα U: θεραπεία ουρολοίμωξης Ομάδα Inv. “Investigational”
![Page 12: Προιοριμός MIC, MBC · 2014. 6. 24. · – Tables 2A έως 2L (M100-S18, Vol.28, CLSI) Συνολικός αριθμός απόφαη ου ργαηρίου – τέτοιος](https://reader035.fdocuments.co/reader035/viewer/2022081621/611de140738704176a5bfe3e/html5/thumbnails/12.jpg)
Επιλογή συγκεντρώσεων αντιβιοτικών
Κριτικές συγκεντρώσεις (Breakpoints) – Tables 2A έως 2L (M100-S18, Vol.28, CLSI)
Συνολικός αριθμός απόφαση του εργαστηρίου – τέτοιος ώστε ένας τουλάχιστον μικροοργανισμός
ποιοτικού ελέγχου να έχει όλες τις διαδοχικές τιμές συγκεντρώσεων
– ασυνήθεις συγκεντρώσεις σε επιλεγμένες περιπτώσεις, όπως υψηλές για Έλεγχος υψηλού επιπέδου αντοχής σε γενταμυκίνη /
στρεπτομυκίνη στους εντεροκόκκους (High-Level Aminoglycoside Resistance, HLAR)
![Page 13: Προιοριμός MIC, MBC · 2014. 6. 24. · – Tables 2A έως 2L (M100-S18, Vol.28, CLSI) Συνολικός αριθμός απόφαη ου ργαηρίου – τέτοιος](https://reader035.fdocuments.co/reader035/viewer/2022081621/611de140738704176a5bfe3e/html5/thumbnails/13.jpg)
Μικροβιακό εναιώρημα Θολερότητα: 0.5 κλίμακας McFarland
– 1-2 x 108 CFU/mL για E. coli ATCC 25922
Μέθοδος – άμεσο εναιώρημα αποικίας (direct colony suspension m.)
– εναιώρημα λογαριθμικής φάσης ανάπτυξης (growth method)
![Page 14: Προιοριμός MIC, MBC · 2014. 6. 24. · – Tables 2A έως 2L (M100-S18, Vol.28, CLSI) Συνολικός αριθμός απόφαη ου ργαηρίου – τέτοιος](https://reader035.fdocuments.co/reader035/viewer/2022081621/611de140738704176a5bfe3e/html5/thumbnails/14.jpg)
Μικροβιακό εναιώρημα Θολερότητα: 0.5 κλίμακας McFarland
– 1-2 x 108 CFU/mL για E. coli ATCC 25922
Μέθοδος – άμεσο εναιώρημα αποικίας (direct colony suspension m.)
– εναιώρημα λογαριθμικής φάσης ανάπτυξης (growth method)
•Η πιο κατάλληλη Η μόνη για: Staphylococcus spp., Haemophilus spp., N. gonorrhoeae, N. meningitidis και στρεπτοκόκκους Τρόπος: εναιώρημα σε ζωμό ή φ.ο. τρυβλίο μη εκλεκτικού υλικού (αιματούχο άγαρ) μετά18-24 h επώασης
![Page 15: Προιοριμός MIC, MBC · 2014. 6. 24. · – Tables 2A έως 2L (M100-S18, Vol.28, CLSI) Συνολικός αριθμός απόφαη ου ργαηρίου – τέτοιος](https://reader035.fdocuments.co/reader035/viewer/2022081621/611de140738704176a5bfe3e/html5/thumbnails/15.jpg)
Μικροβιακό εναιώρημα Θολερότητα: 0.5 κλίμακας McFarland
– 1-2 x 108 CFU/mL για E. coli ATCC 25922
Μέθοδος – άμεσο εναιώρημα αποικίας (direct colony suspension m.)
– εναιώρημα λογαριθμικής φάσης ανάπτυξης (growth method)
•Η πιο κατάλληλη Η μόνη για: Staphylococcus spp., Haemophilus spp., N. gonorrhoeae, N. meningitidis και στρεπτοκόκκους Τρόπος: εναιώρημα σε ζωμό ή φ.ο. τρυβλίο μη εκλεκτικού υλικού (αιματούχο άγαρ) μετά18-24 h επώασης
•Εναλλακτικά, ιδίως αν δεν είναι δυνατή η δημιουργία ομοιόμορφου εναιωρήματος •Σε μη απαιτητικά μικρόβια (εκτός Staphylococcus) όταν δεν υπάρχει πρόσφατο καλλιέργημα
Τρόπος: 3-5 αποικίες σε 4-5mL ζωμού (tryptic soy broth) επώαση 35ο C έως θολερότητα =/>0.5 McFarland (2-6h) θολερότητα 0.5 με ζωμό ή φ.ο.
![Page 16: Προιοριμός MIC, MBC · 2014. 6. 24. · – Tables 2A έως 2L (M100-S18, Vol.28, CLSI) Συνολικός αριθμός απόφαη ου ργαηρίου – τέτοιος](https://reader035.fdocuments.co/reader035/viewer/2022081621/611de140738704176a5bfe3e/html5/thumbnails/16.jpg)
Παρασκευή μικροβιακού εναιωρήματος (inoculum)
Θολερότητα 0.5 κλίμακας McFarland ( 1-2 Χ 108 CFU/ml E.coli ATCC® 25922 ) ή με φωτόμετρο
0.5McF E.coli ATCC 25922
![Page 17: Προιοριμός MIC, MBC · 2014. 6. 24. · – Tables 2A έως 2L (M100-S18, Vol.28, CLSI) Συνολικός αριθμός απόφαη ου ργαηρίου – τέτοιος](https://reader035.fdocuments.co/reader035/viewer/2022081621/611de140738704176a5bfe3e/html5/thumbnails/17.jpg)
Μέθοδος αραιώσεων σε ζωμό
Μακρομέθοδος: σωληνάρια
Μικρομέθοδος: πλάκα μικροτιτλοποίησης
![Page 18: Προιοριμός MIC, MBC · 2014. 6. 24. · – Tables 2A έως 2L (M100-S18, Vol.28, CLSI) Συνολικός αριθμός απόφαη ου ργαηρίου – τέτοιος](https://reader035.fdocuments.co/reader035/viewer/2022081621/611de140738704176a5bfe3e/html5/thumbnails/18.jpg)
Μέθοδος αραιώσεων σε ζωμό
Υλικό: Mueller-Hinton broth (MHΒ) – pH 7.2 – 7.4 σε θο C περιβάλλοντος (25ο C) – Ιόντα: αμινογλυκοσίδες & Pseudomonas, τετρακυκλίνες, δαπτομυσίνη
& gram(+) Ca++: 20-25 mg/L (50 για daptomycin) Mg++: 10-12.5 mg/L
– HTM για Haemophilus spp. – 2% NaCl για οξασιλλίνη, μεθικιλλίνη, ναφκιλλίνη (σταφυλόκοκκοι) – 2.5-5% aίμα (LHB): για S. pneumoniae, N. meningitis
στρεπτοκόκκους
Ενοφθαλμισμός Επώαση: 35±2ο C για 16-20 h
– 20-24h για Acinetobacter spp., B. cepacia, S. maltophilia, Haemophilus spp S. pneumoniae, λοιποί στρεπτόκοκκοι – 24h για oxacillin σε Staphylococcus, βανκομυκίνη σε Enterococcus και
γενταμυκίνη / στρεπτομυκίνη HLAR σε Enterococcus – 5% CO2 για N. meningitis (20-24h)
![Page 19: Προιοριμός MIC, MBC · 2014. 6. 24. · – Tables 2A έως 2L (M100-S18, Vol.28, CLSI) Συνολικός αριθμός απόφαη ου ργαηρίου – τέτοιος](https://reader035.fdocuments.co/reader035/viewer/2022081621/611de140738704176a5bfe3e/html5/thumbnails/19.jpg)
Μέθοδος αραιώσεων σε ζωμό
Υλικό: Mueller-Hinton broth (MHΒ) – pH 7.2 – 7.4 σε θο C περιβάλλοντος (25ο C) – Ιόντα: αμινογλυκοσίδες & Pseudomonas, τετρακυκλίνες, δαπτομυσίνη
& gram(+) Ca++: 20-25 mg/L (50 για daptomycin) Mg++: 10-12.5 mg/L
– HTM για Haemophilus spp. – 2% NaCl για οξασιλλίνη, μεθικιλλίνη, ναφκιλλίνη (σταφυλόκοκκοι) – 2.5-5% aίμα (LHB): για S. pneumoniae, N. meningitis
στρεπτοκόκκους
Ενοφθαλμισμός Επώαση: 35±2ο C για 16-20 h
– 20-24h για Acinetobacter spp., B. cepacia, S. maltophilia, Haemophilus spp S. pneumoniae, λοιποί στρεπτόκοκκοι – 24h για oxacillin σε Staphylococcus, βανκομυκίνη σε Enterococcus και
γενταμυκίνη / στρεπτομυκίνη HLAR σε Enterococcus – 5% CO2 για N. meningitis (20-24h)
Εμπλουτισμένο ΜΗΒ Caution-adjusted ΜΗΒ (CAMHB)
![Page 20: Προιοριμός MIC, MBC · 2014. 6. 24. · – Tables 2A έως 2L (M100-S18, Vol.28, CLSI) Συνολικός αριθμός απόφαη ου ργαηρίου – τέτοιος](https://reader035.fdocuments.co/reader035/viewer/2022081621/611de140738704176a5bfe3e/html5/thumbnails/20.jpg)
Μέθοδος αραιώσεων σε ζωμό
Υλικό: Mueller-Hinton broth (MHΒ) – pH 7.2 – 7.4 σε θο C περιβάλλοντος (25ο C) – Ιόντα: αμινογλυκοσίδες & Pseudomonas, τετρακυκλίνες, δαπτομυσίνη
& gram(+) Ca++: 20-25 mg/L (50 για daptomycin) Mg++: 10-12.5 mg/L
– HTM για Haemophilus spp. – 2% NaCl για οξασιλλίνη, μεθικιλλίνη, ναφκιλλίνη (σταφυλόκοκκοι) – 2.5-5% aίμα (LHB): για S. pneumoniae, N. meningitis
στρεπτοκόκκους
Ενοφθαλμισμός Επώαση: 35±2ο C για 16-20 h
– 20-24h για Acinetobacter spp., B. cepacia, S. maltophilia, Haemophilus spp S. pneumoniae, λοιποί στρεπτόκοκκοι – 24h για oxacillin σε Staphylococcus, βανκομυκίνη σε Enterococcus και
γενταμυκίνη / στρεπτομυκίνη HLAR σε Enterococcus – 5% CO2 για N. meningitis (20-24h)
Εμπλουτισμένο ΜΗΒ Caution-adjusted ΜΗΒ (CAMHB)
Διαφορές από Κ-Β:
Υλικό: CAMHB (με 50 μg/mL Ca++ αν δαπτομυσίνη)
Προσθήκη αίματος: αλόγου LHB (όχι προβάτου) σε
N. meningitis, S. pneumoniae
και λοιπούς στρεπτοκόκκους
Χρόνος επώασης έως 20h (όχι 18h)
Περιβάλλον επώασης:
ΌΧΙ 5% CO2 για Haemophilus spp., S. pneumoniae
![Page 21: Προιοριμός MIC, MBC · 2014. 6. 24. · – Tables 2A έως 2L (M100-S18, Vol.28, CLSI) Συνολικός αριθμός απόφαη ου ργαηρίου – τέτοιος](https://reader035.fdocuments.co/reader035/viewer/2022081621/611de140738704176a5bfe3e/html5/thumbnails/21.jpg)
Mueller
Hinton
Broth
1 ml
1 ml
0 0.5 1 2 4 8 16 µg/ml
108 CFU
35°C για 16 - 20 h
0 0.5 1 2 4 8 16 µg/ml
0 0.5 1 2 4 8 16 µg/ml
Μέθοδος αραιώσεων σε ζωμό Μέθοδος αναφοράς για CLSI
MIC = 4
![Page 22: Προιοριμός MIC, MBC · 2014. 6. 24. · – Tables 2A έως 2L (M100-S18, Vol.28, CLSI) Συνολικός αριθμός απόφαη ου ργαηρίου – τέτοιος](https://reader035.fdocuments.co/reader035/viewer/2022081621/611de140738704176a5bfe3e/html5/thumbnails/22.jpg)
Μακρομέθοδος: S. aureus και τετρακυκλίνη
Ανάπτυξη φαίνεται στη συγκέντρωση τετρακυκλίνης 0.8 μg/ml αλλά όχι στην 1.6 μg/ml.
Μακρομέθοδος
Ανάγνωση αποτελεσμάτων
![Page 23: Προιοριμός MIC, MBC · 2014. 6. 24. · – Tables 2A έως 2L (M100-S18, Vol.28, CLSI) Συνολικός αριθμός απόφαη ου ργαηρίου – τέτοιος](https://reader035.fdocuments.co/reader035/viewer/2022081621/611de140738704176a5bfe3e/html5/thumbnails/23.jpg)
Μακρομέθοδος: S. aureus και τετρακυκλίνη
Ανάπτυξη φαίνεται στη συγκέντρωση τετρακυκλίνης 0.8 μg/ml αλλά όχι στην 1.6 μg/ml.
Μακρομέθοδος
Ανάγνωση αποτελεσμάτων
MIC είναι 1.6 μg/ml.
![Page 24: Προιοριμός MIC, MBC · 2014. 6. 24. · – Tables 2A έως 2L (M100-S18, Vol.28, CLSI) Συνολικός αριθμός απόφαη ου ργαηρίου – τέτοιος](https://reader035.fdocuments.co/reader035/viewer/2022081621/611de140738704176a5bfe3e/html5/thumbnails/24.jpg)
Ανάγνωση αποτελεσμάτων
Μικρομέθοδος
Ceftizoxime (C.III)
![Page 25: Προιοριμός MIC, MBC · 2014. 6. 24. · – Tables 2A έως 2L (M100-S18, Vol.28, CLSI) Συνολικός αριθμός απόφαη ου ργαηρίου – τέτοιος](https://reader035.fdocuments.co/reader035/viewer/2022081621/611de140738704176a5bfe3e/html5/thumbnails/25.jpg)
Ανάγνωση αποτελεσμάτων
Μικρομέθοδος
Ceftizoxime (C.III)
![Page 26: Προιοριμός MIC, MBC · 2014. 6. 24. · – Tables 2A έως 2L (M100-S18, Vol.28, CLSI) Συνολικός αριθμός απόφαη ου ργαηρίου – τέτοιος](https://reader035.fdocuments.co/reader035/viewer/2022081621/611de140738704176a5bfe3e/html5/thumbnails/26.jpg)
Ανάγνωση αποτελεσμάτων
Μικρομέθοδος
![Page 27: Προιοριμός MIC, MBC · 2014. 6. 24. · – Tables 2A έως 2L (M100-S18, Vol.28, CLSI) Συνολικός αριθμός απόφαη ου ργαηρίου – τέτοιος](https://reader035.fdocuments.co/reader035/viewer/2022081621/611de140738704176a5bfe3e/html5/thumbnails/27.jpg)
η ελάχιστη συγκέντρωση του αντιβιοτικού που επιτρέπει την επιβίωση 1/10.000 βακτήρια ή 0.01% του αρχικού εναιωρήματος
Ελάχιστη Βακτηριοκτόνος Πυκνότητα Minimal Bactericidal Concentration MBC
για πολλές σύγχρονες ουσίες είναι πλησίον της MIC κύρια επιδίωξη για τη θεραπευτική επιτυχία σε
βαριές λοιμώξεις: ενδοκαρδίτιδα οστεομυελίτιδα λοιμώξεις σε ανοσοκατεσταλμένους (ουδετεροπενικοί)
![Page 28: Προιοριμός MIC, MBC · 2014. 6. 24. · – Tables 2A έως 2L (M100-S18, Vol.28, CLSI) Συνολικός αριθμός απόφαη ου ργαηρίου – τέτοιος](https://reader035.fdocuments.co/reader035/viewer/2022081621/611de140738704176a5bfe3e/html5/thumbnails/28.jpg)
Ελάχιστη Βακτηριοκτόνος Πυκνότητα Minimal Bactericidal Concentration MBC
Μέθοδος
Προσδιορισμός MIC (μακρο-/μικρο-μέθοδος) Αραιώσεις αντιβιοτικού από 8χ έως ½ ή ¼ x MIC
128 - 0.06 μg/mL
Ανακαλλιέργεια σε στερεό θρεπτικό υλικό από τα σωληνάρια ή πηγαδάκια χωρίς ορατή μικροβιακή ανάπτυξη
Προσδιορισμός MBC ως την ελάχιστη πυκνότητα του αντιβιοτικού που προκαλεί θάνατο στα 99,9% των μικροβιακών κυττάρων
Μέθοδος όχι προτυποποιημένη Κατάλληλη για την αξιολόγηση νέων αντιβιοτικών και για ερευνητικούς σκοπούς
![Page 29: Προιοριμός MIC, MBC · 2014. 6. 24. · – Tables 2A έως 2L (M100-S18, Vol.28, CLSI) Συνολικός αριθμός απόφαη ου ργαηρίου – τέτοιος](https://reader035.fdocuments.co/reader035/viewer/2022081621/611de140738704176a5bfe3e/html5/thumbnails/29.jpg)
Μέθοδος προσδιορισμού MBC
10 µl
0 µg/ml
4 µg/ml
8 µg/ml
16 µg/ml
MBC = ?
0 0.5 1 2 MIC = 4 8 16 µg/ml
35 2°C για 24h Gram(-)
βακτηρίδια
48h Staphylococcus Enterococcus
72h άλλα βακτήρια
![Page 30: Προιοριμός MIC, MBC · 2014. 6. 24. · – Tables 2A έως 2L (M100-S18, Vol.28, CLSI) Συνολικός αριθμός απόφαη ου ργαηρίου – τέτοιος](https://reader035.fdocuments.co/reader035/viewer/2022081621/611de140738704176a5bfe3e/html5/thumbnails/30.jpg)
Καθορισμός του κρίσιμου αριθμού αποικιών για προσδιορισμό MBC
Τελικό εναιώρημα (CFU/mL)
Κρίσιμος αριθμός
αποικιών
Ευαισθησία (%) Ειδικότητα (%)
1 x 105 4 77 97
2 x 105 8 89 99
3 x 105 15 99 99
4 x 105 20 99 99
5 x 105 25 99 99
6 x 105 29 99 99
Μέθοδος προσδιορισμού MBC
![Page 31: Προιοριμός MIC, MBC · 2014. 6. 24. · – Tables 2A έως 2L (M100-S18, Vol.28, CLSI) Συνολικός αριθμός απόφαη ου ργαηρίου – τέτοιος](https://reader035.fdocuments.co/reader035/viewer/2022081621/611de140738704176a5bfe3e/html5/thumbnails/31.jpg)
Καθορισμός του κρίσιμου αριθμού αποικιών για προσδιορισμό MBC
Τελικό εναιώρημα (CFU/mL)
Κρίσιμος αριθμός
αποικιών
Ευαισθησία (%) Ειδικότητα (%)
1 x 105 4 77 97
2 x 105 8 89 99
3 x 105 15 99 99
4 x 105 20 99 99
5 x 105 25 99 99
6 x 105 29 99 99
Μέθοδος προσδιορισμού MBC
Σωληνάριο Συγκέντρωση αντιβιοτικού
μg/mL
Αριθμός αποικιών
CFU
≥99.9%
Θάνατος
1 128 2 ΝΑΙ
2 64 11 ΝΑΙ
3 32 18 ΝΑΙ
4 16 33 ΌΧΙ
5 8 Μη μετρούμενες ΌΧΙ
MBC = 32 μg/mL
![Page 32: Προιοριμός MIC, MBC · 2014. 6. 24. · – Tables 2A έως 2L (M100-S18, Vol.28, CLSI) Συνολικός αριθμός απόφαη ου ργαηρίου – τέτοιος](https://reader035.fdocuments.co/reader035/viewer/2022081621/611de140738704176a5bfe3e/html5/thumbnails/32.jpg)
Καθορισμός του κρίσιμου αριθμού αποικιών για προσδιορισμό MBC
Τελικό εναιώρημα (CFU/mL)
Κρίσιμος αριθμός
αποικιών
Ευαισθησία (%) Ειδικότητα (%)
1 x 105 4 77 97
2 x 105 8 89 99
3 x 105 15 99 99
4 x 105 20 99 99
5 x 105 25 99 99
6 x 105 29 99 99
Μέθοδος προσδιορισμού MBC
Σωληνάριο Συγκέντρωση αντιβιοτικού
μg/mL
Αριθμός αποικιών
CFU
≥99.9%
Θάνατος
1 128 2 ΝΑΙ
2 64 11 ΝΑΙ
3 32 18 ΝΑΙ
4 16 33 ΌΧΙ
5 8 Μη μετρούμενες ΌΧΙ
MBC = 32 μg/mL
Υπολογισμός εναιωρήματος (CFU/mL)
του σωληναρίου χωρίς αντιβιοτικό
1.Αραίωση εναιωρήματος 2.Ενοφθαλμισμός συγκεκριμένης ποσότητας σε τρυβλίο 3.Υπολογισμός (CFU/mL): αριθμός αποικιών x ποσότητα ενοφθαλμισμού x αραίωση
![Page 33: Προιοριμός MIC, MBC · 2014. 6. 24. · – Tables 2A έως 2L (M100-S18, Vol.28, CLSI) Συνολικός αριθμός απόφαη ου ργαηρίου – τέτοιος](https://reader035.fdocuments.co/reader035/viewer/2022081621/611de140738704176a5bfe3e/html5/thumbnails/33.jpg)
Συγκέντρωση αντιβιοτικού σε μg/mL (+) μάρτυρας
ανάπτυξης
Τελευταίο σωληνάριο με ορατή ανάπτυξη
Επώαση για 16-20h
MIC = 0.125μg/mL
Ανακαλλιέργεια σε τρυβλία
CFU / mL Επιβίωση 0.01%
MIC=0.125μg/mL
MBC=0.25μg/mL
MΒC / MΙC=2 < 4
Αντιβιοτικό = βακτηριοκτόνο
Αν MΒC/MΙC < 4 τότε το αντιβιοτικό είναι βακτηριοκτόνο
![Page 34: Προιοριμός MIC, MBC · 2014. 6. 24. · – Tables 2A έως 2L (M100-S18, Vol.28, CLSI) Συνολικός αριθμός απόφαη ου ργαηρίου – τέτοιος](https://reader035.fdocuments.co/reader035/viewer/2022081621/611de140738704176a5bfe3e/html5/thumbnails/34.jpg)
Δράση βακτηριοκτόνος
Δράση βακτηριοστατική
128 64 32 16 8 4 2 1 0.5 0.25 μg/mL
128 64 32 16 8 4 2 1 0.5 0.25 μg/mL
Όχι
αντιβιοτικό
Όχι
αντιβιοτικό
Όχι
μικρόβιο
Όχι
μικρόβιο
![Page 35: Προιοριμός MIC, MBC · 2014. 6. 24. · – Tables 2A έως 2L (M100-S18, Vol.28, CLSI) Συνολικός αριθμός απόφαη ου ργαηρίου – τέτοιος](https://reader035.fdocuments.co/reader035/viewer/2022081621/611de140738704176a5bfe3e/html5/thumbnails/35.jpg)
MIC - MBC
MIC MBC
Βακτηριοκτόνο – Bactericidal (MBC/MIC < 4)
MIC MBC
Βακτηριοστατικό- Bacteriostatic (MBC/MIC > 4)
1 2 8 16 32 64 128 4
1 2 8 16 32 64 128 4
![Page 36: Προιοριμός MIC, MBC · 2014. 6. 24. · – Tables 2A έως 2L (M100-S18, Vol.28, CLSI) Συνολικός αριθμός απόφαη ου ργαηρίου – τέτοιος](https://reader035.fdocuments.co/reader035/viewer/2022081621/611de140738704176a5bfe3e/html5/thumbnails/36.jpg)
Η γενταμυκίνη είναι βακτηριοκτόνο αντιβιοτικό γιατί: MIC = 0.8 μg/ml (ανάπτυξη 0.4, όχι 0.8) και MBC = 0.8. Άρα MBC = MIC.
Gentamicin 0.1 0.2 0.4 0.8 1.6 3.1
Η τετρακυκλίνη είναι βακτηριοστατικό αντιβιοτικό γιατί: MIC = 1.6 μg/ml, και ανάπτυξη σε 3.1, 6.3, και ίχνη σε 12.5 μg/ml, Άρα MBC 4 αραιώσεις υψηλότερη στα 25 μg/ml.
Tetracycline 0.1 0.2 0.4 0.8 1.6 3.1 6.3 12.5
![Page 37: Προιοριμός MIC, MBC · 2014. 6. 24. · – Tables 2A έως 2L (M100-S18, Vol.28, CLSI) Συνολικός αριθμός απόφαη ου ργαηρίου – τέτοιος](https://reader035.fdocuments.co/reader035/viewer/2022081621/611de140738704176a5bfe3e/html5/thumbnails/37.jpg)
Μέθοδος αραιώσεων σε άγαρ
Tρυβλία με αντιβιοτικό (το κάθε ένα με διαφορετική συγκέντρωση) Πολλές κηλίδες από διαφορετικά στελέχη που ελέγχονται ταυτόχρονα (30-35 / τρυβλίο 100 mm) Καταγραφή της MIC
![Page 38: Προιοριμός MIC, MBC · 2014. 6. 24. · – Tables 2A έως 2L (M100-S18, Vol.28, CLSI) Συνολικός αριθμός απόφαη ου ργαηρίου – τέτοιος](https://reader035.fdocuments.co/reader035/viewer/2022081621/611de140738704176a5bfe3e/html5/thumbnails/38.jpg)
Μέθοδος αραιώσεων σε άγαρ
Υλικό: Mueller-Hinton Agar (MHA) – pH 7.2 – 7.4 σε θο C περιβάλλοντος αφού πήξει – Όχι ιόντα Mg ή Ca – NaCl 2% w/v για οξασιλλίνη, μεθικιλλίνη, ναφκιλλίνη (σταφυλόκοκκοι) – 5% αίμα προβάτου για N. meningitis και στρεπτοκόκκους πλην S.
pneumoniae, ή αλόγου (LHB) για σουλφοναμίδες σε στρεπτοκόκκους και για λιστέρια
Ενοφθαλμισμός – Συγκεκριμένη ποσότητα – Τοποθέτηση ως κηλίδα 5-8 mm στο ΜΗΑ (104 CFU/κηλίδα)
Επώαση: 35±2ο C για 16-20 h – 20-24h για Acinetobacter spp., B. cepacia, S. maltophilia, – 24h για oxacillin σε Staphylococcus, βανκομυκίνη σε Enterococcus και
γενταμυκίνη / στρεπτομυκίνη HLAR σε Enterococcus – 5% CO2 για N. meningitis, N. gonorrhoeae (36±1o C) και στρεπτοκόκκους
(20-24h)
![Page 39: Προιοριμός MIC, MBC · 2014. 6. 24. · – Tables 2A έως 2L (M100-S18, Vol.28, CLSI) Συνολικός αριθμός απόφαη ου ργαηρίου – τέτοιος](https://reader035.fdocuments.co/reader035/viewer/2022081621/611de140738704176a5bfe3e/html5/thumbnails/39.jpg)
Μέθοδος αραιώσεων σε άγαρ
Υλικό: Mueller-Hinton Agar (MHA) – pH 7.2 – 7.4 σε θο C περιβάλλοντος αφού πήξει – Όχι ιόντα Mg ή Ca – NaCl 2% w/v για οξασιλλίνη, μεθικιλλίνη, ναφκιλλίνη (σταφυλόκοκκοι) – 5% αίμα προβάτου για N. meningitis και στρεπτοκόκκους πλην S.
pneumoniae, ή αλόγου (LHB) για σουλφοναμίδες σε στρεπτοκόκκους και για λιστέρια
Ενοφθαλμισμός – Συγκεκριμένη ποσότητα – Τοποθέτηση ως κηλίδα 5-8 mm στο ΜΗΑ (104 CFU/κηλίδα)
Επώαση: 35±2ο C για 16-20 h – 20-24h για Acinetobacter spp., B. cepacia, S. maltophilia, – 24h για oxacillin σε Staphylococcus, βανκομυκίνη σε Enterococcus και
γενταμυκίνη / στρεπτομυκίνη HLAR σε Enterococcus – 5% CO2 για N. meningitis, N. gonorrhoeae (36±1o C) και στρεπτοκόκκους
(20-24h)
Όχι για δαπτομυσίνη [λιποπεπτίδιο για gram(+)]
Όχι για H. influenzae και H. parainfluenzae
Όχι για S. pneumoniae
N. gonorrhoae: GC άγαρ, 5% CO2, 36±1o C
![Page 40: Προιοριμός MIC, MBC · 2014. 6. 24. · – Tables 2A έως 2L (M100-S18, Vol.28, CLSI) Συνολικός αριθμός απόφαη ου ργαηρίου – τέτοιος](https://reader035.fdocuments.co/reader035/viewer/2022081621/611de140738704176a5bfe3e/html5/thumbnails/40.jpg)
Έτοιμα συστήματα προσδιορισμού MIC
Χειροκίνητα
Ημιαυτοματοποιημένα
Αυτοματοποιημένα
Etest
MicroScan Autoscan 4 Wider I ATB system
Vitek System Phoenix System MicroScan WalkAway
Σύγκριση αποτελεσμάτων AST panels με μέθοδο αραιώσεων σε ζωμό (μέθοδος αναφοράς) τουλάχιστον 100 κλινικά στελέχη ίδιου γένους ή είδους Πολύ μεγάλα σφάλματα (very major errors) ψευδώς ευαίσθητα: < 1.5% Μεγάλα σφάλματα (major errors) ψευδώς ανθεκτικά: < 3% Συμφωνία με μέθοδο αναφοράς (± 1 αραίωση): ≥ 90%
![Page 41: Προιοριμός MIC, MBC · 2014. 6. 24. · – Tables 2A έως 2L (M100-S18, Vol.28, CLSI) Συνολικός αριθμός απόφαη ου ργαηρίου – τέτοιος](https://reader035.fdocuments.co/reader035/viewer/2022081621/611de140738704176a5bfe3e/html5/thumbnails/41.jpg)
Μέθοδος κλιμακωτής (gradient) διάχυσης
Ταινίες Εtest (strips): διαβαθμισμένες συγκεντρώσεις αντιβιοτικού
Συγκεκριμένο εναιώρημα σε ΜΗΑ
Μετά επώαση, αναστολή ανάπτυξης σε σχήμα έλλειψης
MIC: σημείο που η έλλειψη
συναντά την ταινία
![Page 42: Προιοριμός MIC, MBC · 2014. 6. 24. · – Tables 2A έως 2L (M100-S18, Vol.28, CLSI) Συνολικός αριθμός απόφαη ου ργαηρίου – τέτοιος](https://reader035.fdocuments.co/reader035/viewer/2022081621/611de140738704176a5bfe3e/html5/thumbnails/42.jpg)
Μέθοδος κλιμακωτής (gradient) διάχυσης
Ταινίες Εtest (strips): διαβαθμισμένες συγκεντρώσεις αντιβιοτικού
Συγκεκριμένο εναιώρημα σε ΜΗΑ
Μετά επώαση, αναστολή ανάπτυξης σε σχήμα έλλειψης
MIC: σημείο που η έλλειψη
συναντά την ταινία
Πρώτη παρουσίαση: 1988 στο Interscience Conference on Antimicrobial Agents and Chemo-therapy (ICAAC)
Food and Drug Administration (FDA) έγκριση
* προσοχή: ανά μικρόβιο ή οικογένεια μικροβίων και αντιβιοτικό
![Page 43: Προιοριμός MIC, MBC · 2014. 6. 24. · – Tables 2A έως 2L (M100-S18, Vol.28, CLSI) Συνολικός αριθμός απόφαη ου ργαηρίου – τέτοιος](https://reader035.fdocuments.co/reader035/viewer/2022081621/611de140738704176a5bfe3e/html5/thumbnails/43.jpg)
Εtest
Υλικό: ΜΗΑ
Εναιώρημα - ενοφθαλμισμός: όπως Κ-Β
Τοποθέτηση ταινιών Εtest
Επώαση (όπως Κ-Β)
Ανάγνωση αποτελεσμάτων – Οδηγίες κατασκευαστού
– Προσδιορισμός MIC (CLSI κριτήρια)
Μέθοδος (σύμφωνα με οδηγίες κατασκευαστού)
![Page 44: Προιοριμός MIC, MBC · 2014. 6. 24. · – Tables 2A έως 2L (M100-S18, Vol.28, CLSI) Συνολικός αριθμός απόφαη ου ργαηρίου – τέτοιος](https://reader035.fdocuments.co/reader035/viewer/2022081621/611de140738704176a5bfe3e/html5/thumbnails/44.jpg)
Μέθοδος Etest
5 min στους 35 °C
< 15 min
Εναιώρημα (σε φ.ο.)
35°C
35°C
CO2
Μέτρηση McF
Ενοφθαλμισμός
κλίβανος
![Page 45: Προιοριμός MIC, MBC · 2014. 6. 24. · – Tables 2A έως 2L (M100-S18, Vol.28, CLSI) Συνολικός αριθμός απόφαη ου ργαηρίου – τέτοιος](https://reader035.fdocuments.co/reader035/viewer/2022081621/611de140738704176a5bfe3e/html5/thumbnails/45.jpg)
Μέθοδος Etest
5 min στους 35 °C
< 15 min
Εναιώρημα (σε φ.ο.)
35°C
35°C
CO2
Μέτρηση McF
Ενοφθαλμισμός
κλίβανος
![Page 46: Προιοριμός MIC, MBC · 2014. 6. 24. · – Tables 2A έως 2L (M100-S18, Vol.28, CLSI) Συνολικός αριθμός απόφαη ου ργαηρίου – τέτοιος](https://reader035.fdocuments.co/reader035/viewer/2022081621/611de140738704176a5bfe3e/html5/thumbnails/46.jpg)
Εtest
Ανάγνωση αποτελεσμάτων
MIC: όπου η έλλειψη συναντά την ταινία Προσοχή
– στον ερπυσμό,
– στην αιμόλυση
Αν μεταξύ αραιώσεων: MIC η μεγαλύτερη αραίωση
Σύμφωνα με οδηγίες κατασκευαστή
![Page 47: Προιοριμός MIC, MBC · 2014. 6. 24. · – Tables 2A έως 2L (M100-S18, Vol.28, CLSI) Συνολικός αριθμός απόφαη ου ργαηρίου – τέτοιος](https://reader035.fdocuments.co/reader035/viewer/2022081621/611de140738704176a5bfe3e/html5/thumbnails/47.jpg)
Εtest
Ανάγνωση αποτελεσμάτων
MIC: όπου η έλλειψη συναντά την ταινία Προσοχή
– στον ερπυσμό,
– στην αιμόλυση
Αν μεταξύ αραιώσεων: MIC η μεγαλύτερη αραίωση
Σύμφωνα με οδηγίες κατασκευαστή
![Page 48: Προιοριμός MIC, MBC · 2014. 6. 24. · – Tables 2A έως 2L (M100-S18, Vol.28, CLSI) Συνολικός αριθμός απόφαη ου ργαηρίου – τέτοιος](https://reader035.fdocuments.co/reader035/viewer/2022081621/611de140738704176a5bfe3e/html5/thumbnails/48.jpg)
Εtest
Ανάγνωση αποτελεσμάτων
MIC: όπου η έλλειψη συναντά την ταινία Προσοχή
– στον ερπυσμό,
– στην αιμόλυση
Αν μεταξύ αραιώσεων: MIC η μεγαλύτερη αραίωση
Σύμφωνα με οδηγίες κατασκευαστή
![Page 49: Προιοριμός MIC, MBC · 2014. 6. 24. · – Tables 2A έως 2L (M100-S18, Vol.28, CLSI) Συνολικός αριθμός απόφαη ου ργαηρίου – τέτοιος](https://reader035.fdocuments.co/reader035/viewer/2022081621/611de140738704176a5bfe3e/html5/thumbnails/49.jpg)
Εtest
Ανάγνωση αποτελεσμάτων
Στα βακτηριοκτόνα αντιβιοτικά: πλήρης αναστολή ανάπτυξης (όχι μικροαποικίες και
θόλωση (haze))
Στα βακτηριοστατικά αντιβιοτικά: 80% αναστολή ανάπτυξης
Σύμφωνα με οδηγίες κατασκευαστή
![Page 50: Προιοριμός MIC, MBC · 2014. 6. 24. · – Tables 2A έως 2L (M100-S18, Vol.28, CLSI) Συνολικός αριθμός απόφαη ου ργαηρίου – τέτοιος](https://reader035.fdocuments.co/reader035/viewer/2022081621/611de140738704176a5bfe3e/html5/thumbnails/50.jpg)
Εtest
Ανάγνωση αποτελεσμάτων
Στα βακτηριοκτόνα αντιβιοτικά: πλήρης αναστολή ανάπτυξης (όχι μικροαποικίες και
θόλωση (haze))
Στα βακτηριοστατικά αντιβιοτικά: 80% αναστολή ανάπτυξης
Σύμφωνα με οδηγίες κατασκευαστή
MIC
Linezolid S. aureus ATCC 29213
![Page 51: Προιοριμός MIC, MBC · 2014. 6. 24. · – Tables 2A έως 2L (M100-S18, Vol.28, CLSI) Συνολικός αριθμός απόφαη ου ργαηρίου – τέτοιος](https://reader035.fdocuments.co/reader035/viewer/2022081621/611de140738704176a5bfe3e/html5/thumbnails/51.jpg)
24 Hrs ATB STRIPS
Αρχή : κάθε αντιβιοτικό
(A,B, Γ, Δ…) ελέγχεται στις 2 διαφορετικές κριτικές συγκεντρώσεις (Breakpoints: c, C)
c C
Γ
B
A
0 Μάρτυρας
ανάπτυξης
S (Susceptible)
R (Resistant)
I (Intermediate)
= όχι μικροβιακή ανάπτυξη
= μικροβιακή ανάπτυξη
![Page 52: Προιοριμός MIC, MBC · 2014. 6. 24. · – Tables 2A έως 2L (M100-S18, Vol.28, CLSI) Συνολικός αριθμός απόφαη ου ργαηρίου – τέτοιος](https://reader035.fdocuments.co/reader035/viewer/2022081621/611de140738704176a5bfe3e/html5/thumbnails/52.jpg)
Εναιώρημα
Ενοφθαλμισμός του
strip Επώαση
ATB medium (M-H)
ATB 24hrs - Μεθοδολογία
10 µl
50 µl
200 µl
Θολερότητα 0.5 - 4 McF
35°C
ANA 35°C
O2
35°C
CO2
135 µl / πηγαδάκι
Ανάγνωση strips αυτόματα ή manual
![Page 53: Προιοριμός MIC, MBC · 2014. 6. 24. · – Tables 2A έως 2L (M100-S18, Vol.28, CLSI) Συνολικός αριθμός απόφαη ου ργαηρίου – τέτοιος](https://reader035.fdocuments.co/reader035/viewer/2022081621/611de140738704176a5bfe3e/html5/thumbnails/53.jpg)
MICROSCAN Ημιαυτόματο ή αυτόματο σύστημα για:
1. ταυτοποίηση 2. εύρεση της MIC ή BP των gram ( - ) και gram ( + ) μικροβίων
Το σύστημα: εξασφαλίζει πραγματικές MIC ή ΒΡ τιμές ανεξάρτητες από την
ταυτοποίηση του μικροβίου έχει δυνατότητα ταυτόχρονης ταυτοποίησης και ΜICή BP σε ένα
panel ( COMBO PANEL ) ελαχιστοποιεί την ανάγκη για off – line tests δίνει αποτελέσματα ταυτοποίησης και MIC ή ΒΡ σε 16 – 18 ώρες
για τα gram(-) και gram(+) έχει εύκολο και γρήγορο εμβολιασμός κάθε panel με μία μόνο
κίνηση με τη βοήθεια ειδικού εξαρτήματος ( RENOK ) δίνει δυνατότητα διαβάσματος των panels με το μάτι διαθέτει ένα εξαιρετικά ανεπτυγμένο software για τη διαχείριση
και την αποθήκευση των πληροφοριών (LABPRO-ALERT)
AUTOSCAN – 4 SYSTEM WALKAWAY SI 40/96
![Page 54: Προιοριμός MIC, MBC · 2014. 6. 24. · – Tables 2A έως 2L (M100-S18, Vol.28, CLSI) Συνολικός αριθμός απόφαη ου ργαηρίου – τέτοιος](https://reader035.fdocuments.co/reader035/viewer/2022081621/611de140738704176a5bfe3e/html5/thumbnails/54.jpg)
![Page 55: Προιοριμός MIC, MBC · 2014. 6. 24. · – Tables 2A έως 2L (M100-S18, Vol.28, CLSI) Συνολικός αριθμός απόφαη ου ργαηρίου – τέτοιος](https://reader035.fdocuments.co/reader035/viewer/2022081621/611de140738704176a5bfe3e/html5/thumbnails/55.jpg)
MICROSCAN: Prompt Ετοιμασία εναιωρήματος
MICROSCAN: Renok
Ενοφθαλμισμός
πλάκας
![Page 56: Προιοριμός MIC, MBC · 2014. 6. 24. · – Tables 2A έως 2L (M100-S18, Vol.28, CLSI) Συνολικός αριθμός απόφαη ου ργαηρίου – τέτοιος](https://reader035.fdocuments.co/reader035/viewer/2022081621/611de140738704176a5bfe3e/html5/thumbnails/56.jpg)
Διαδικασία MICROSCAN
1 αποικία
30 ml
διαλύ
ματος
RENOK
Prompt ή
0.5 McF
35°C
![Page 57: Προιοριμός MIC, MBC · 2014. 6. 24. · – Tables 2A έως 2L (M100-S18, Vol.28, CLSI) Συνολικός αριθμός απόφαη ου ργαηρίου – τέτοιος](https://reader035.fdocuments.co/reader035/viewer/2022081621/611de140738704176a5bfe3e/html5/thumbnails/57.jpg)
![Page 58: Προιοριμός MIC, MBC · 2014. 6. 24. · – Tables 2A έως 2L (M100-S18, Vol.28, CLSI) Συνολικός αριθμός απόφαη ου ργαηρίου – τέτοιος](https://reader035.fdocuments.co/reader035/viewer/2022081621/611de140738704176a5bfe3e/html5/thumbnails/58.jpg)
![Page 59: Προιοριμός MIC, MBC · 2014. 6. 24. · – Tables 2A έως 2L (M100-S18, Vol.28, CLSI) Συνολικός αριθμός απόφαη ου ργαηρίου – τέτοιος](https://reader035.fdocuments.co/reader035/viewer/2022081621/611de140738704176a5bfe3e/html5/thumbnails/59.jpg)
Vitek 2 σύστημα
Μέθοδος μικροαραίωσης Κάρτα 64-μικροϋποδοχών
– Μια υποδοχή ελέγχου – Υποδοχές προμετρημένων ποσοτήτων 19-20
αντιμικροβιακών παραγόντων σε συνδυασμό με υλικό καλλιέργειας
Πλήρωση, σφράγισμα της κάρτας και τοποθέτησή της στην μονάδα επώασης/ανάγνωσης του οργάνου
Παρακολούθηση ανάπτυξης σε κάθε υποδοχή της κάρτας ανά 15min (φθορισμός, θολερότητα, χρώμα)
Προσδιορισμός MIC σε 4-18 ώρες Επαγωγή αποτελεσμάτων για 4-10 επιπλέον αντιβ.
– Αποτελέσματα για 23-30 αντιβιοτικά/κάρτα Advanced EXPERT System (AES)
![Page 60: Προιοριμός MIC, MBC · 2014. 6. 24. · – Tables 2A έως 2L (M100-S18, Vol.28, CLSI) Συνολικός αριθμός απόφαη ου ργαηρίου – τέτοιος](https://reader035.fdocuments.co/reader035/viewer/2022081621/611de140738704176a5bfe3e/html5/thumbnails/60.jpg)
60 & XL
Εναιώρημα σε:
•3mL 0.45-0.50% NaCl
•0.50-0.63 McF
![Page 61: Προιοριμός MIC, MBC · 2014. 6. 24. · – Tables 2A έως 2L (M100-S18, Vol.28, CLSI) Συνολικός αριθμός απόφαη ου ργαηρίου – τέτοιος](https://reader035.fdocuments.co/reader035/viewer/2022081621/611de140738704176a5bfe3e/html5/thumbnails/61.jpg)
Advanced EXPERT System (AES)
E.coli
Wild
Penicillinase
ESBL
Ampicillin Cephalotin Cefotaxime
![Page 62: Προιοριμός MIC, MBC · 2014. 6. 24. · – Tables 2A έως 2L (M100-S18, Vol.28, CLSI) Συνολικός αριθμός απόφαη ου ργαηρίου – τέτοιος](https://reader035.fdocuments.co/reader035/viewer/2022081621/611de140738704176a5bfe3e/html5/thumbnails/62.jpg)
Advanced EXPERT System (AES)
E.coli
Wild
Penicillinase
ESBL
Ampicillin Cephalotin Cefotaxime
200 μηχανισμοί αντοχής
Περισσότεροι από 2.400 φαινότυποι
~ 20.000 κατανομές MIC
100,000 βιβλιογραφικές αναφορές
![Page 63: Προιοριμός MIC, MBC · 2014. 6. 24. · – Tables 2A έως 2L (M100-S18, Vol.28, CLSI) Συνολικός αριθμός απόφαη ου ργαηρίου – τέτοιος](https://reader035.fdocuments.co/reader035/viewer/2022081621/611de140738704176a5bfe3e/html5/thumbnails/63.jpg)
MIC
8
Τυπικό στέλεχος
Οριακή MIC (εντός)
Οριακή MIC (εκτός)
Αναμενόμενη MIC στην Ampicillin για E.coli / Άγριο τύπο
0.25
Advanced EXPERT System (AES)
![Page 64: Προιοριμός MIC, MBC · 2014. 6. 24. · – Tables 2A έως 2L (M100-S18, Vol.28, CLSI) Συνολικός αριθμός απόφαη ου ργαηρίου – τέτοιος](https://reader035.fdocuments.co/reader035/viewer/2022081621/611de140738704176a5bfe3e/html5/thumbnails/64.jpg)
MIC
8
Τυπικό στέλεχος
Οριακή MIC (εντός)
Οριακή MIC (εκτός)
Αναμενόμενη MIC στην Ampicillin για E.coli / Άγριο τύπο
0.25
Advanced EXPERT System (AES)
![Page 65: Προιοριμός MIC, MBC · 2014. 6. 24. · – Tables 2A έως 2L (M100-S18, Vol.28, CLSI) Συνολικός αριθμός απόφαη ου ργαηρίου – τέτοιος](https://reader035.fdocuments.co/reader035/viewer/2022081621/611de140738704176a5bfe3e/html5/thumbnails/65.jpg)
E.coli
Wild
Penicillinase
ESBL
Ampicillin Cephalotin Cefotaxime
Observed result
MIC
Αποτελέσματα ευαισθησίας και φαινότυπος αξιολογούνται και επιβεβαιώνονται
Αποτέλεσμα ευαισθησίας
![Page 66: Προιοριμός MIC, MBC · 2014. 6. 24. · – Tables 2A έως 2L (M100-S18, Vol.28, CLSI) Συνολικός αριθμός απόφαη ου ργαηρίου – τέτοιος](https://reader035.fdocuments.co/reader035/viewer/2022081621/611de140738704176a5bfe3e/html5/thumbnails/66.jpg)
Phoenix σύστημα
Μικρομέθοδος
Panels ταυτοποίησης και αντιβιογράμματος
Τα
υτο
πο
ίησ
η
Αντιβιόγραμμα
84 πηγαδάκια + 1 μάρτυρας ανάπτυξης
– τουλάχιστον 3 αραιώσεις / αντιβιοτικό
Προσδιορισμός MIC
– όχι υπολογιζόμενη MIC
Διπλός τρόπος ανάγνωσης
– Θολερότητα σαν δείκτης ανάπτυξης
– Χρώμα ως αντίδραση μικροβιακού
μεταβολισμού
Μέτρηση ανάπτυξης κινητικής μορφής / 20 min
![Page 67: Προιοριμός MIC, MBC · 2014. 6. 24. · – Tables 2A έως 2L (M100-S18, Vol.28, CLSI) Συνολικός αριθμός απόφαη ου ργαηρίου – τέτοιος](https://reader035.fdocuments.co/reader035/viewer/2022081621/611de140738704176a5bfe3e/html5/thumbnails/67.jpg)
![Page 68: Προιοριμός MIC, MBC · 2014. 6. 24. · – Tables 2A έως 2L (M100-S18, Vol.28, CLSI) Συνολικός αριθμός απόφαη ου ργαηρίου – τέτοιος](https://reader035.fdocuments.co/reader035/viewer/2022081621/611de140738704176a5bfe3e/html5/thumbnails/68.jpg)
BDXpertTM-System
MIC
Κανόνες expert
Τελική ερμηνεία και διόρθωση αποτελεσμάτων
SIR Ερμηνεία
(CLSI Standard)
ID
ID
![Page 69: Προιοριμός MIC, MBC · 2014. 6. 24. · – Tables 2A έως 2L (M100-S18, Vol.28, CLSI) Συνολικός αριθμός απόφαη ου ργαηρίου – τέτοιος](https://reader035.fdocuments.co/reader035/viewer/2022081621/611de140738704176a5bfe3e/html5/thumbnails/69.jpg)
Αραιώσεις αντιβιοτικών
Gram (-) panels VITEK 2 vs
Phoenix
![Page 70: Προιοριμός MIC, MBC · 2014. 6. 24. · – Tables 2A έως 2L (M100-S18, Vol.28, CLSI) Συνολικός αριθμός απόφαη ου ργαηρίου – τέτοιος](https://reader035.fdocuments.co/reader035/viewer/2022081621/611de140738704176a5bfe3e/html5/thumbnails/70.jpg)
Αραιώσεις αντιβιοτικών
Gram (+) panels VITEK 2 vs
Phoenix
![Page 71: Προιοριμός MIC, MBC · 2014. 6. 24. · – Tables 2A έως 2L (M100-S18, Vol.28, CLSI) Συνολικός αριθμός απόφαη ου ργαηρίου – τέτοιος](https://reader035.fdocuments.co/reader035/viewer/2022081621/611de140738704176a5bfe3e/html5/thumbnails/71.jpg)
Επιλογή αντιβιοτικών
Προτεινόμενα από την επιτροπή CLSI
Ανάλογα με το είδος του μικροβίου Ανάλογα με τη θέση της λοίμωξης
![Page 72: Προιοριμός MIC, MBC · 2014. 6. 24. · – Tables 2A έως 2L (M100-S18, Vol.28, CLSI) Συνολικός αριθμός απόφαη ου ργαηρίου – τέτοιος](https://reader035.fdocuments.co/reader035/viewer/2022081621/611de140738704176a5bfe3e/html5/thumbnails/72.jpg)
Επιλογή αντιβιοτικών
– Εστίας λοίμωξης, αντοχής, αλλεργίας, κλπ Ομάδα Α: υποχρεωτικά (primary testing) Ομάδα Β:
– αντοχή στην ομάδας Α – περιοχή λοίμωξης: SXT και ουρολοίμωξη, 3η γενιάς κεφαλοσπορίνες και CSF
– πολυμικροβιακή λοίμωξη,πολλές εστίες λοίμωξης, αλλεργία, μη απάντηση σε Ομ. Α
– επιδημιολογικοί λόγοι
Ομάδα C: εναλλακτική ή επιπλέον αγωγή Ομάδα U: θεραπεία ουρολοίμωξης Ομάδα Inv. “Investigational”
![Page 73: Προιοριμός MIC, MBC · 2014. 6. 24. · – Tables 2A έως 2L (M100-S18, Vol.28, CLSI) Συνολικός αριθμός απόφαη ου ργαηρίου – τέτοιος](https://reader035.fdocuments.co/reader035/viewer/2022081621/611de140738704176a5bfe3e/html5/thumbnails/73.jpg)
Αντιβιοτικά στον έλεγχο ευαισθησίας Gram αρνητικών
(Α) Έλεγχος και αναφορά
Αμπικιλλίνη
Κεφαζολίνη
Κεφουροξίμη
Γενταμικίνη
(Ο) Επιπλέον για τα ούρα
Ναλιδιξικό οξύ
Νορφλοξασίνη ή
οφλοξασίνη
Νιτροφουράνια
Κο-τριμοξαζόλη
(Β) Έλεγχος και επιλεκτική αναφορά Πιπερακιλλίνη (Εμπορικά δεν υπάρχει) Τικαρκιλλίνη (Εμπορικά δεν υπάρχει) Αμοξυκιλλίνη+κλαβ. ή αμπικιλλίνη+σουλμπ. Πιπερακιλλίνη+ταζομπακτάμη Τικαρκιλλίνη+κλαβουλανικό Κεφοξιτίνη Κεφοταξίμη ή κεφτριαξόνη Κεφταζιδίμη Κεφεπίμη Αζτρεονάμη Ιμιπενέμη ή μεροπενέμη Ερταπενέμη Σιπροφλοξασίνη ή λεβοφλοξασίνη Κο-τριμοξαζόλη Αμικασίνη Νετιλμικίνη Τομπραμυκίνη Τετρακυκλίνη Χλωραμφαινικόλη
![Page 74: Προιοριμός MIC, MBC · 2014. 6. 24. · – Tables 2A έως 2L (M100-S18, Vol.28, CLSI) Συνολικός αριθμός απόφαη ου ργαηρίου – τέτοιος](https://reader035.fdocuments.co/reader035/viewer/2022081621/611de140738704176a5bfe3e/html5/thumbnails/74.jpg)
Αντιβιοτικά στον έλεγχο ευαισθησίας σταφυλοκόκκων
(Α) Έλεγχος και αναφορά
Κεφοξιτίνη (30μg)
ή Oxacillin (1 μg)
Πενικιλλίνη (10 u)
Ερυθρομυκίνη (15μg)
Κλινδαμυκίνη (2μg)
Φουσιδικό οξύ (10μg)
Σουλφαμεθοξαζόλη-Τριμεθοπρίμη (1,25/23,75μg)
(Ο) Επιπλέον για τα ούρα
Νορφλοξασίνη (10μg)
Νιτροφουραντοΐνη (300μg)
(Β) Έλεγχος και επιλεκτική αναφορά
Γενταμικίνη (10μg)
Καναμυκίνη (30μg)
Νετιλμικίνη (30μg)
[Τομπραμυκίνη] (10μg)
Βανκομυκίνη (30μg)
Τεϊκοπλανίνη (30μg)
Σιπροφλοξασίνη (5μg)
Ριφαμπικίνη (5μg)
Τετρακυκλίνη (30μg)
Λινεζολίδη (30μg)
Κινοπριστίνη/Δαλφοπριστίνη (15μg)