Poster de practicas

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INTRODUCCIÓN METODODOLOGÍA EDER ALEXANDER GÓMEZ, JOHN JAIRO GÓMEZ, CONSUELO TABORDA SEGUIMIENTO FITOQUÍMICO Y DETERMINACIÓN DE LA ACTIVIDAD BIOLÓGICA DE LOS EXTRACTOS DE LAS HOJAS DE Licania tomentosa (Chrysobalanaceae) Marcha fitoquímica Metabolitos Resultado Flavonoides ++ Leucoantocianidi na ++ Compuestos fenólicos +++ Taninos +++ Cardiotónicos - Terpenoides +++ Aminoácidos +++ Alcaloides - AGRADECIMIENTOS CONCLUSIONES Las hojas de la planta Licania tomentosa mostraron presencia de flavonoides, leucoantocianidinas, compuestos fenólicos, taninos, triterpenoides y aminoácidos. Como los ensayos de actividad de la capacidad captadora de radicales libres mostró que a una concentración de 36,0 g/ml del extracto etanólico se produce decoloración de la solución de DPPH en el tiempo cero de la reacción, se recomienda seguir haciendo diluciones con el fin de cuantificar la actividad real de dicho extracto. El extracto en diclorometano mostró fracciones activas contra los microorganismos E.coli y S. aureus, teniendo sólo una fracción que mostró actividad contra ambos microorganismos. El extracto etanólico mostró cuatro fracciones activas contra ambos microorganismos. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS Ensayo de actividad antioxidante (DPPH) Ensayo de actividad antibacterial: bioautografía directa RESULTADOS Figura 1. Efecto de la concentración (g/ml) sobre la capacidad de captación de radicales libres (% decoloración del DPPH). Actividad antibacterial Tabla 1. Resultados de la determinación de metabolitos secundarios en las hojas de Licania tomentosa Actividad antioxidante Tabla 2. Actividad antioxidante del extracto etanólico de Licania tomentosa 1. Castilho R, Oliveira R, Kaplan M.. Fitoterapia. 2005; (76): 562-566. 2. Fernández J, Oliveira R, Rangel da Costa M, Wagner- Souzac K, Coellho Kaplanb MA, Gattassa CR. Cancer letters. 2002; 166-169. 3. Miranda MMFS, Gonçalves JLS, Romanos MTV, Silva FP, Pinto L, Silva MH, Ejzemberg R, Granja LFZ, Wigg MD. Phytomedicine. 2002; (9): 641–645. 4. Braca A, Sortino C, Politi M, Morelli I, Mendez J. J Ethnopharmacol. 2002; (79): 379–381. 5. Martínez, A, Galeano E, Jiménez N, Valencia G. Manual de prácticas de Laboratorio de Farmacognosia y Fitoquímica. Universidad de Antioquia. Facultad de Química Farmacéutica. 2008; 72–78. Diana Margarita Márquez Fernández, Henry Moreno Parra, Jhonny Colorado Ríos. Desde la antigüedad la medicina tradicional ha desempeñado un papel importante aliviando las enfermedades y el dolor. Actualmente existe un gran interés por el mejor conocimiento y uso de medicinas alternativas, entre las que se destaca la medicina natural (1). Entre las diferentes especies vegetales que han despertado interés por la actividad biológica presentada por sus componentes, se encuentran especies pertenecientes a la familia Chrysobalanaceae la cual comprende 17 géneros y cerca de 450 especies (1). Entre las plantas más activas de este género se encuentran especies pertenecientes al género Licania (1). Los estudios etnofarmacológicos de diferentes especies de este género han reportado el uso del fruto macerado de la Licania arborea S (1); en México se usa para evitar la caida del cabello; la corteza macerada en agua se utiliza para el tratamiento de la piroplasmósis, pero si esta se cocina, se usa administrada en forma oral para el dolor de parto. Las hojas de Licania densiflora y Licania licaniaeflora se usan en Venezuela para preparar remedios anti- inflamatorios (1). La fracción en diclorometano de las hojas de Licania tomentosa y C. icaco, han mostrado inhibición del crecimiento de células de leucemia humana y de la línea celular K562 (2). Preparar una solución patrón de DPPH 1 ml de sln DPPH + 0.5 ml de la muestra Preparar diluciones de la muestra Calcular el % de decoloración del DPPH Leer absorbancia cada 10 minutos Leer absorbancia a = 517 nm Muestras + DPPH Preparar los cultivos de m.o a ensayar en medio liquido. 1 ml del cultivo + 9 ml del caldo estéril. Sumergir la placa de cromatografía dentro de los cultivos x 10 minutos Incubar a 38 ºC x 4 horas Revelar la bioautografía: sumergir los cromatogramas x 10 min en una sln de sales de tetrasolium (MTT). Incubar a 38º C x 30 min Observar halos de inhibición formados (Gentamicina como control positivo) Agitar a 38º C por 2 horas Sembrar (E. coli y S. aureus) Lavar las placas con etanol al 70% Concentración (mg/ml) % de decoloración 1,035 90,792 0,446 91,212 0,098 66,351 0,056 46,129 0,036 35,132 a) b) a) b) Figura 2. Bioautografía del extracto en diclorometano de Licania tomentosa contra a) Escherichia coli y b) Staphylococcus aureus. Figura 3. Bioautografía del extracto etanólico de Licania tomentosa contra a) Escherichia coli y b) Staphylococcus aureus. Marcha fitoquímica Protocolo realizado según Martínez et al., 2008 (5) Pruebas cualitativas y de precipitación Metabolitos secundarios Material vegetal: Licania tomentosa Sitio de recolección y clasificación taxonómica: Universidad Nacional sede Medellín

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INTRODUCCIÓN

METODODOLOGÍA

EDER ALEXANDER GÓMEZ, JOHN JAIRO GÓMEZ, CONSUELO TABORDA

SEGUIMIENTO FITOQUÍMICO Y DETERMINACIÓN DE LA ACTIVIDAD BIOLÓGICA DE LOS EXTRACTOS DE LAS HOJAS DE Licania tomentosa (Chrysobalanaceae)

Marcha fitoquímica

Metabolitos Resultado

Flavonoides ++

Leucoantocianidina ++

Compuestos fenólicos +++

Taninos +++

Cardiotónicos -

Terpenoides +++

Aminoácidos +++

Alcaloides -

AGRADECIMIENTOS

CONCLUSIONESLas hojas de la planta Licania tomentosa mostraron presencia de flavonoides, leucoantocianidinas, compuestos fenólicos, taninos, triterpenoides y aminoácidos.

Como los ensayos de actividad de la capacidad captadora de radicales libres mostró que a una concentración de 36,0 g/ml del extracto etanólico se produce decoloración de la solución de DPPH en el tiempo cero de la reacción, se recomienda seguir haciendo diluciones con el fin de cuantificar la actividad real de dicho extracto.

El extracto en diclorometano mostró fracciones activas contra los microorganismos E.coli y S. aureus, teniendo sólo una fracción que mostró actividad contra ambos microorganismos.

El extracto etanólico mostró cuatro fracciones activas contra ambos microorganismos.

REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

Ensayo de actividad antioxidante (DPPH)

Ensayo de actividad antibacterial: bioautografía directa

RESULTADOS

Figura 1. Efecto de la concentración (g/ml) sobre la capacidad de captación de radicales libres (% decoloración del DPPH).

Actividad antibacterial

Tabla 1. Resultados de la determinación de metabolitos secundarios en las hojas de Licania tomentosa

Actividad antioxidante

Tabla 2. Actividad antioxidante del extracto etanólico de Licania tomentosa

1. Castilho R, Oliveira R, Kaplan M.. Fitoterapia. 2005; (76): 562-566.

2. Fernández J, Oliveira R, Rangel da Costa M, Wagner- Souzac K, Coellho Kaplanb MA, Gattassa CR. Cancer letters. 2002; 166-169.

3. Miranda MMFS, Gonçalves JLS, Romanos MTV, Silva FP, Pinto L, Silva MH, Ejzemberg R, Granja LFZ, Wigg MD. Phytomedicine. 2002; (9): 641–645.

4. Braca A, Sortino C, Politi M, Morelli I, Mendez J. J Ethnopharmacol. 2002; (79): 379–381.

5. Martínez, A, Galeano E, Jiménez N, Valencia G. Manual  de prácticas de Laboratorio de Farmacognosia y Fitoquímica. Universidad de Antioquia. Facultad de Química Farmacéutica. 2008; 72–78.

Diana Margarita Márquez Fernández, Henry Moreno Parra, Jhonny Colorado Ríos.

Desde la antigüedad la medicina tradicional ha desempeñado un papel importante aliviando las enfermedades y el dolor. Actualmente existe un gran interés por el mejor conocimiento y uso de medicinas alternativas, entre las que se destaca la medicina natural (1).

Entre las diferentes especies vegetales que han despertado interés por la actividad biológica presentada por sus componentes, se encuentran especies pertenecientes a la familia Chrysobalanaceae la cual comprende 17 géneros y cerca de 450 especies (1). Entre las plantas más activas de este género se encuentran especies pertenecientes al género Licania (1).

Los estudios etnofarmacológicos de diferentes especies de este género han reportado el uso del fruto macerado de la Licania arborea S (1); en México se usa para evitar la caida del cabello; la corteza macerada en agua se utiliza para el tratamiento de la piroplasmósis, pero si esta se cocina, se usa administrada en forma oral para el dolor de parto. Las hojas de Licania densiflora y Licania licaniaeflora se usan en Venezuela para preparar remedios anti-inflamatorios (1).

La fracción en diclorometano de las hojas de Licania tomentosa y C. icaco, han mostrado inhibición del crecimiento de células de leucemia humana y de la línea celular K562 (2).

Preparar una solución patrón de DPPH

1 ml de sln DPPH + 0.5 ml de la muestra

Preparar diluciones de la muestra

Calcular el % de decoloración del DPPH

Leer absorbancia cada 10 minutos

Leer absorbancia a = 517 nm

Muestras + DPPH

Preparar los cultivos de m.o a ensayar en medio liquido.

1 ml del cultivo + 9 ml del caldo estéril.

Sumergir la placa de cromatografía dentro de los cultivos x 10 minutos

Incubar a 38 ºC x 4 horas

Revelar la bioautografía: sumergir los cromatogramas x 10 min en una sln de

sales de tetrasolium (MTT).

Incubar a 38º C x 30 min

Observar halos de inhibición formados (Gentamicina como control positivo)

Agitar a 38º C por 2 horas

Sembrar (E. coli y S. aureus)

Lavar las placas con etanol al 70%

Concentración (mg/ml) % de decoloración

1,035 90,792

0,446 91,212

0,098 66,351

0,056 46,129

0,036 35,132

a) b)

a) b)

Figura 2. Bioautografía del extracto en diclorometano de Licania tomentosa contra a) Escherichia coli y b) Staphylococcus aureus.

Figura 3. Bioautografía del extracto etanólico de Licania tomentosa contra a) Escherichia coli y b) Staphylococcus aureus.

Marcha fitoquímica

Protocolo realizado según Martínez et al.,

2008 (5)

Pruebas cualitativas y de precipitación

Metabolitos secundarios

Material vegetal: Licania tomentosaSitio de recolección y clasificación taxonómica: Universidad Nacional sede Medellín