PRÁCTICA 4

MITOSISPLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA:

¿Por qué la duración de la mitosis varía según el tipo de células y las condiciones del medio en el que se encuentran?

HIPÓTESIS (PUNTOS: 5).

La duración del ciclo celular y en este caso la mitosis varía de célula en célula, tal vez se deba a los tres tipos o clases de células que existen, ya que estas tienen diferentes funciones y al tener esas funciones se necesitan reproducir más rápido o más lento dependiendo de su necesidad. Y lo mismo se puede decir del medio ya que existen células que necesitan diferentes tipos de estímulos apropiados para dividirse ya que normalmente no lo harían.

Elabora una hipótesis de acuerdo al planteamiento del problema y explica las razones para la formación de esta hipótesis.

PREDICCIONES (PUNTOS: 5).

las células se hinchan y se retraen en respuestaa los cambios en el contenido de solutos del líquido extracelular.

De acuerdo a la hipótesis escribe las predicciones de los resultados.

De acuerdo a la hipótesis redacta la INTRODUCCIÓN (PUNTOS: 5). La mitosis es la división celular de manera asexual, esta división celular

comprende una seria de fenómenos por los cuales los materiales primero se

duplican y luego se reparten en proporciones virtualmente iguales entre las dos

células hijas. Todos los componentes de la célula (no solo los que están

relacionados con la transmisión de la gerencia genética) se duplican antes de la

mitosis. Las etapas en las que se divide la mitosis son profase, prometafase,

anafase y telofase, aunque a partir del anafase comienza la llamada citocinesis la

cual consta de la separación de los dos territorios citoplasmáticos hijos (1).

Aunque la mitosis es muy similar células animales y vegetales, suele tener

algunas diferencias, un ejemplo de ello se observa en la citocinesis, pues mientras

que en las células animales se produce la denomina plasmocinesis (en la que a

partir de la periferia de la célula el citoplasma se va estrangulando hasta que las

células hijas se ponen en contacto (1) (2).

En las células vegetales se forman vesículas membranosas en la zona

comprendida entre los núcleos hijos. Estas vesículas se fusionan unas con otras

dando origen a la membrana plasmática, quedando entre las membranas el

contenido de las vesículas que constituirá la pared celular.

Y son algunas de estas pequeñas diferencial las que modifican la duración

de la mitosis según su tipo de célula (1) (2).

Referencias:

Fundamentos de biología celular y molecular, 4ta edición de Robertis

Biología celular y molecular, 5a Edición de Lodish

De acuerdo a la hipótesis redacta el OBJETIVO del experimento (PUNTOS: 5).Observar e identificar los principales cambios morfológicos que se presentan

durante la profase, metafase, anafase, telofase y citocinesis en células de cebolla

y en células de mucosa bucal.

Identificar las diferencias que hay entre la mitosis en una célula vegetal (células de cebolla) y en una célula animal (mucosa bucal)

Materiales de laboratorio por equipo Material del alumno por equipo4 Portaobjetos 2 abatelenguas4 cubreobjetos 1 botella de agua purificada .2 Vidrios de reloj Material Biológico por equipo1 pinza de disección Raíces primarias de Allium cepa (cebolla)1 Bisturi Células de epitelio bucal.1 mechero1 Microscopio Reactivos de laboratorio por equipo.1 pinzas para crisol 50 ml de Solución de Alcohol etílico -Ac.

Acético 45% 3:1.1 placa de calentamiento 50 ml de Orceína acética2 pipetas graduadas de 10mlI pipetor de 10 ml1 tabla para picar.1 pinza de disección.

ACTIVIDAD DEL EXPERIMENTO

Preparación de los meristemos

1. Germinar las raíces de la cebolla: insertarle al bulbo de cebolla 3 palillos de dientes en un ángulo de 120º, de manera que el bulbo pueda ser suspendido en la boca de un frasco. Colocar el bulbo en el frasco, agregar agua de la llave hasta un espacio cercano a las raíces de la cebolla pero evitando que las raíces toquen el agua, de esta manera crecerán más rápido. Dejar que las raíces crezcan durante cinco días (figura 1).

2. Inmediatamente de sacar el bulbo de la cebolla del frasco, cortar con un bisturí aproximadamente 1 a 2 cm la punta de las raíces de la cebolla. Colocar los cortes en un vidrio de reloj con 20 ml de orceína acética. Cuidar que los meristemos queden perfectamente cubiertos con el colorante. Deje actuar el colorante durante 10 minutos.

3. Con la ayuda de una pinza para crisol, calentar suavemente el vidrio del reloj con la muestra, en una placa de calentamiento y retirarlo cuando comience a desprenderse vapores. Enfriar y volver a calentar nuevamente por 2-3 veces, cuidando que la temperatura no ponga en ebullición el colorante, ya que esto daña los meristemos. Evite que se seque el colorante agregando cuando sea necesario

4. Enfriar y transferir cada una de las raíces a un portaobjeto, cortar los primeros 2 mm del extremo de la raíz (corresponde a la región meristemática) cuidando de no eliminarlos. Añadir una gota de orceína acética, colocar encima el cubreobjetos y presionarlo en la zona donde se encuentra el meristemo para forma una monocapa. Con un papel quitar el exceso de colorante.

5. Observar al microscopio primero a 10x para encontrar el campo y después a 40X y 100X para observar la muestra. La preparación presentará células apreciandose en diferentes estadios de división celular. Pueden verse los cromosomas impregandos por la orceina, de color morado.

Figura 1. Germinación de las raíces de la cebolla.

Método para la cromatina sexual (cuerpo de Barr).

1. Enjuagar varias veces la boca con agua, tome un raspado suave de la mucosa interna de la boca con un abatelenguas, la persona debe mantener la lengua en el lado opuesto donde se va a recolectar la muestra. Eliminar el primer raspado con un algodón y repetir la operación.

2. En porta objetos perfectamente lavados y desengrasados, haga un frotis con la muestra extendiéndola, esto debe hacerse con presión moderada asegurándose de obtener una capa delgada blanquecina. Etiquete los portaobjetos.

3. Los portaobjetos se sumergen por 1 minuto en 20ml de solución fijadora de Alcohol etílico -Ac. Acético 45% 3:1.

4. Teñir con orceína acética por 15 minutos. El colorante en exceso se remueve aplicando presión con papel filtro.

5. Observar al microscopio primero a 10x para encontrar el campo y después a 100X para observar la muestra. El corpúsculo de Barr se aprecia como una mancha obscura adherida a la membrana nuclear y que no desaparece al mover el tornillo micrométrico del microscopio.

PRESENTACIÓN DE LOS RESULTADOS (PUNTOS 25).

En el siguiente cuadro agrega fotos o dibujos de cada uno de los objetivos donde se observaron las muestras. Describe lo observado respecto a los meristemos y a la cromatina sexual en cada fase de la mitosis (interfase, profase, metafase y anafase).

Cuadro 1. Resultados de las observaciones de los meristemos y la cromatina sexual.

MeristemosDescripción 40X 100X

Cuerpo de BarrDescripción 40X 100X

ANÁLISIS Y DISCUSIONES DE LOS RESULTADOS (puntos totales 50):

Para realizar el análisis y las discusiones del experimento, de acuerdo a tus resultados obtenidos, responde lo siguiente:

1. ¿Qué diferencia hay entre la mitosis de células animales y vegetales? (PUNTOS 10).2. Según tus observaciones indica la función de las estructuras celulares que se aprecian en

cada fase observada en las células meristemáticas.3. En qué fase del ciclo celular son visibles los córpusculos de Barr4. Explica la importancia de las células meristemáticas y la heterocromatización del

cromosoma X (PUNTOS 10). 5. La hipótesis fue apoyada por los datos obtenidos? Explica. (PUNTOS 10).

Nota: Es importante que al redactar este apartado se refieran al número de tabla en la cual se encuentran los resultados obtenidos. No se te olvide anexar la bibliografía para sustentar las discusiones

CONCLUSIONES. (PUNTOS 25).

Escribe una breve conclusión, tomando como referencia el problema planteado, la hipótesis y el objetivo del experimento.