Práctica de Laboratorio: Determinación del Volúmen Globular (Hematocrito)

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Reporte de prácitca, laboratorio clínico.

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  • ELABOR: Karime Estefania Lpez Jurez

    DETERMINACIN DEL VOLMEN GLOBULAR (HEMATOCRITO)

    INTRODUCCIN.

    El hematocrito es un examen de sangre que mide la fraccin que comprende a los glbulos rojos (masa globular), respecto al volumen total de la muestra de sangre venosa o capilar. Esta medicin depende del nmero de glbulos rojos y de su tamao. El resultado se expresa en porcentaje, aunque tambin puede expresarse como valor decimal.

    El hematocrito casi siempre se ordena como parte de un conteo sanguneo completo (hemograma o hematimetra).

    Para la realizacin de esta prueba, con el macromtodo, la sangre se extrae tpicamente de una vena, por lo general de la parte interior del codo o del dorso de la mano.

    Cuando se inserta la aguja para extraer la sangre, algunas personas sienten un dolor moderado, mientras que otras slo sienten un pinchazo o sensacin de picadura. Posteriormente, puede haber algo de sensacin pulstil.

    Un volumen de sangre se deposita en un tubo de Wintrobe, por medio de una pipeta, hasta la marca del 10 y se centrifuga. Al terminar la prueba, deben de quedar separados el plasma de la sangre y las clulas, depositndose en el fondo y presentando un color rojo intenso.

    Para la realizacin del micromtodo, se utilizan unos tubos de un calibre muy delgado, llamados capilares, y pueden ser llenados con la misma sangre venosa o de capilar. Este ltimo es el ms usado, por ser ms rpido y menos riesgoso. Para su lectura se usa una escala estandarizada. OBJETIVO

    Aprender a realizar la prueba del hematocrito utilizando el macro y micromtodo, conocer su importancia en el diagnstico de enfermedades y la forma adecuada de su procedimiento. METODOLOGA Y TCNICAS DEL REA MATERIAL

    Tubo de Wintrobe graduado de 0-100 mm

    Pipetas Pasteur

    Equipo para venopuncion (Tubo lila)

    Tubos capilares rojos y azules (75 x 1.5 mm)

    Plastilina

    Encendedor o cerillos

    Centrifuga

    Microcentrifuga

    SUSTANCIAS:

    Alcohol al 70%

    Sangre venosa

    Mtodo de Wintrobe (para macrohematocrito).

    1. Una vez seleccionada, se desinfecta la zona con alcohol al 70%, y se practica puncin venosa. La sangre es recogida en un tubo lila con EDTA.

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    2. Llenar el tubo de Wintrobe con la sangre extrada con anticoagulante ayudndose de una pipeta Pasteur, comenzando desde el fondo hasta la marca superior de 100 mm, teniendo cuidado de no provocar espuma ni dejar burbujas en el tubo.

    3. Se recomienda como medida de precaucin tapar el tubo con un tapn de goma para evitar la evaporacin

    4. Centrifugar a 3000 rpm durante 30 minutos 5. Leer directamente de la graduacin la columna de glbulos rojos y anotar resultados

    Mtodo del capilar (para microhematocrito).

    1. Tomar la muestra en capilares rojos heparinizados directamente del dedo, o utilizar capilares azules sin heparina para sangre venosa con anticoagulante EDTA. Debe llenarse aproximadamente 70-80% del capilar, sin dejar burbujas de aire.

    2. Ocluir (tapar) el extremo del capilar que no estuvo en contacto con la sangre, con plastilina o sellando con fuego.

    3. Colocar el capilar sobre la plataforma del cabezal de la microcentrifuga, con el extremo ocluido adherido al reborde externo de la plataforma

    4. Centrifugar por 5 minutos entre 10 000 y 12 000 rpm 5. Para leer el resultado, se lleva a cabo una regla de tres, midiendo el volumen total de plasma

    y eritrocitos o por medio de la regleta. 6. Para la regleta, se sostiene el tubo frente a la escala de manera que el fondo de la columna

    de eritrocitos, quede exactamente al mismo nivel de la lnea hroizontal correspondiente al cero.

    7. Desplazar el tubo a travs de la escala hasta que la lnea marcada con el 1.0 quede al nivel del tope del plasma. El tubo debe de encontrarse completamente en posicin vertical.

    8. La lnea que pase al nivel del tope de la columna de eritrocitos indicara la fraccin del

    volumen de estos. METODOLOGA Y TCNICAS DE CONTROL DE CALIDAD DEL REA. FASE PREANALTICA: Control de la muestra

    Es importante tener cuidado con ella desde su obtencin hasta el momento en que es utilizada para llevar a cabo la metodologa antes descrita, en resmen, se requiere de una muestra, que esta sea: Bien obtenida, bien transportada, bien procesada, bien conservada y bien identificada

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    Manejo de los aparatos.

    Formacin especfica del personal, es importante que el personal sepa utilizar los aparatos que sern necesarios para llevar a cabo los anlisis.

    Guas de manejo o procesos normalizados de operacin (PNO) siempre presentes. Calibracin:

    Es necesario que tanto los aparatos como los materiales volumtricos o de medicin se encuentren bien calibrados, pues esto garantiza la confiabilidad y exactitud de los resultados. La calibracin puede ser: programada (tras sustitucin de componentes peridicos reactivos- o tras un tiempo prolongado sin ser utilizado) y no programada (tras la aparicin desviaciones). Mantenimiento.

    Tanto las instalaciones como los instrumentos y aparatos realizados deben contar con un mantenimiento adecuado, este mantenimiento puede ser: peridico (con carcter preventivo), o correctivo (por averas o mensajes de error). FASE ANALTICA: Valoracin de la precisin:

    Mediante muestras control comerciales de sangre total.

    Las primeras determinaciones del da son 2 muestras control (una de nivel alto y otra bajo)

    Se intercalan varias muestras control entre los especmenes procesados y se evala la dispersin.

    Valoracin de la exactitud: Regla de los 3:

    En el caso del hematocrito se utiliza el valor de la concentracin de hemoglobina, su relacin est dada por: [Hemoglobina] x 3 = Hematocrito 3 FASE POSTANALTICA: Criterios de revisin de los resultados:

    Las sangres sospechosas se observan al microscopio (extensiones) cuando tras el anlisis:

    No se tienen resultados

    Hubo alguna alarma o fallo en los aparatos.

    Se obtuvo un nmero o proporcin de algn tipo de clulas normales fuera de los rangos prefijados de revisin.

    REGISTRO E INTERPRETACIN DE LOS RESULTADOS.

    El resultado obtenido por los mtodos tanto macro como micro es un porcentaje que se compara con los siguientes, que actan como valores de referencia:

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    Tras una centrifugacin de la sangre total se pueden apreciar dos niveles, uno con el

    depsito de los glbulos rojos, principalmente y en color rojo oscuro, otra capa blanca, de leucocitos y una delgada de color gris, que son plaquetas y finalmente otro nivel del plasma total, de un leve color amarillento. La disposicin celular en los tubos es:

    Con el valor hematocrito se confirma el diagnostico de diferentes enfermedades y

    patologas, principalmente de las anemias y la policitemia. Normalmente, el valor hematocrito se realiza en un anlisis completo de hematimetra,

    donde consta el recuento de hemates. Los patrones de los valores del hematocrito dependen de la edad y del sexo, as como de la

    altitud geogrfica. Otra de las observaciones a tener en cuenta es que los valores varan de un laboratorio a otro. De acuerdo a esto, un ndice bajo de Hematocrito puede deberse a:

    o Anemia o Fallos en la mdula sea (Radiaciones, toxinas, fibrosis, tumores, etc.) o Embarazo o Hemorragias o Hipertirodismo o Hemolisis (destruccin de glbulos rojos) por una transfusin o Leucemia o Problemas de alimentacin o Artritis reumatoide

    Y un ndice alto de Hematocrito puede deberse a:

    o Cardiopatas o Deshidratacin o Eclampsia (en el embarazo) o Enfermedades pulmonares crnicas o Exceso de formacin de hemates (eritrocitosis) o Policitemia vera o Choque (shock)

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    COMO SE VALIDA LA CORRIDA.

    La validacin de los resultados es el proceso por el que un facultativo se responsabiliza de los resultados, mediante la firma del informe. Validacin tcnica: Comprobacin de criterios de calidad de las muestras y resultados no aberrantes. Validacin facultativa: Revisin de resultados sospechosos. Procedimientos de confirmacin como la observacin de extensiones sanguneas, que lleven a confirmar o descartar los resultados obtenidos. Repeticin de la prueba realizada, de ser necesario. CONCLUSIONES.

    En esta prueba se mide la cantidad de eritrocitos de la sangre en porcentaje del total, o lo que es lo mismo, el porcentaje de clulas que transportan oxgeno frente al volumen total de sangre, determinado por proceso de centrifugacin

    En este proceso, se pueden apreciar dos niveles, las clulas sanguneas que se sedimentan, y el plasma total que flota. En definitiva es la relacin porcentual entre ambos lo que representa el valor hematocrito.

    Tambin, en este trabajo se trat de dar una idea de los controles de calidad necesarios para llevar a cabo la prueba de manera correcta y satisfactoria, y de esta manera obtener resultados confiables. BIBLIOGRAFA

    o Hematocrito, articulo web consultado el da 20 de enero de 2013 en: http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/003646.htm

    o Martnez Fragoso, Vicente. Manual de Biometra Hemtica. CBTis199, Mxico, 2012. Pp. 12-

    13.

    o Moron Cortijo, Cecilia G; Muoz Zambrano, Mara E. Manual de procedimientos de laboratorio en tcnicas bsicas de hematologa. Instituto Nacional de Salud, Repblica del Per. Lima, Per. Ministerio de Salud, 2005.

    o Suardaz, Jorge; et al. Laboratorio Clnico. Editorial Ciencias Mdicas. La Habana. 2004.