Practica Test de Coggin´s 2008.

PRACTICA DE INMUNODIFUSION DOBLE: TEST PRACTICA DE INMUNODIFUSION DOBLE: TEST DE COGGIN´SDE COGGIN´S

OBJETIVOS DE LA PRACTICAOBJETIVOS DE LA PRACTICA

1. Conocer algunos conceptos relacionados con la 1. Conocer algunos conceptos relacionados con la Anemia infecciosa Equina, enfermedad que se Anemia infecciosa Equina, enfermedad que se diagnosticá en esta sesión práctica.diagnosticá en esta sesión práctica.

2. Aprender el fundamento de la técnica de 2. Aprender el fundamento de la técnica de precipitación doble en gel de agar o de Ouchterlony precipitación doble en gel de agar o de Ouchterlony usada para el diagnostico de Anemia Infecciosa Equina usada para el diagnostico de Anemia Infecciosa Equina (test de Coggin´s).(test de Coggin´s).

3. Adquirir destrezas en la elaboración del Test de 3. Adquirir destrezas en la elaboración del Test de Coggin´sCoggin´s

4. Interpretar adecuadamente los resultados obtenidos 4. Interpretar adecuadamente los resultados obtenidos producto del montaje de esta prueba producto del montaje de esta prueba inmunodiagnóstica secundaria. inmunodiagnóstica secundaria.

CONCEPTO DE ANEMIA INFECCIOSA EQUINA CONCEPTO DE ANEMIA INFECCIOSA EQUINA

La anemia infecciosa equina es una enfermedad La anemia infecciosa equina es una enfermedad vírica crónica, exclusiva de los équidos y es vírica crónica, exclusiva de los équidos y es transmitida habitualmente por artrópodos, con transmitida habitualmente por artrópodos, con clínica caracterizada por crisis hemolíticas clínica caracterizada por crisis hemolíticas febriles intermitentes. Su impacto sanitario febriles intermitentes. Su impacto sanitario también es importante, debido a que afecta al también es importante, debido a que afecta al hombre, causando una enteropatía febril aguda hombre, causando una enteropatía febril aguda recidivante, con viremia persistente.recidivante, con viremia persistente.

Presenta curso agudo, crónico y no aparente o Presenta curso agudo, crónico y no aparente o latente. La infección es vitalicia y recidivante.latente. La infección es vitalicia y recidivante.

ASPECTOS ZOONÓTICOSASPECTOS ZOONÓTICOS

El virus de la anemia infecciosa equina puede El virus de la anemia infecciosa equina puede infectar al hombre, causando un cuadro infectar al hombre, causando un cuadro virémico de 2 a 7 años de duración, con crisis virémico de 2 a 7 años de duración, con crisis febriles acompañadas de enteritis hemorrágicas febriles acompañadas de enteritis hemorrágicas violentas; dolores lumbares, cefalalgias, violentas; dolores lumbares, cefalalgias, debilidad, pérdida de peso y anemia.debilidad, pérdida de peso y anemia.

SINONIMIASINONIMIA

La enfermedad en La enfermedad en BrasilBrasil se conoce como " se conoce como "FiebreFiebre de de los pantanos" y en los pantanos" y en ColombiaColombia como como el SIDAel SIDA de los de los equinos. Fiebre Malaria, Fiebre lenta, Fiebre de la equinos. Fiebre Malaria, Fiebre lenta, Fiebre de la montaña, Fiebre tifoidea de los caballos, montaña, Fiebre tifoidea de los caballos, AnemiaAnemia perniciosa de los equinos o Zurra americana.perniciosa de los equinos o Zurra americana.

ETIOLOGÍAETIOLOGÍA

El virus causal pertenece al Género El virus causal pertenece al Género LentivirusLentivirus, Familia , Familia RetroviridaeRetroviridae..

Es un ribovirus monocatenario con envoltura; el virión, Es un ribovirus monocatenario con envoltura; el virión, aproximadamente esférico, de 80-130 nm. de aproximadamente esférico, de 80-130 nm. de diámetro, cuya envoltura lipoproteica doble, con diámetro, cuya envoltura lipoproteica doble, con peplómeros glicoproteicos, envuelve una peplómeros glicoproteicos, envuelve una nucleocápsida icosaédrica.nucleocápsida icosaédrica.

Muy resistente a desecación y temperaturas inferiores a Muy resistente a desecación y temperaturas inferiores a 50ºC, sensible a desinfectantes y cambios de pH.50ºC, sensible a desinfectantes y cambios de pH.

Cultivable en histocultivo de leucocitos y de fibroblastos Cultivable en histocultivo de leucocitos y de fibroblastos dérmicos equinos, así como en líneas celulares dérmicos equinos, así como en líneas celulares equinas, caninas y felinas, en los que no causa ECP, equinas, caninas y felinas, en los que no causa ECP, sino infección persistente como provirus integrado en sino infección persistente como provirus integrado en el genoma de la célula hospedadora.el genoma de la célula hospedadora.

Existen cepas diferenciables en el laboratorioExisten cepas diferenciables en el laboratorio

CLÍNICACLÍNICA

Período de incubación de 7 a 21 días.Período de incubación de 7 a 21 días.

Forma aguda: Es características de los caballos que Forma aguda: Es características de los caballos que entran en contacto por primera vez con el virus. Se entran en contacto por primera vez con el virus. Se caracteriza por: Fiebre alta, anorexia, debilidad, caracteriza por: Fiebre alta, anorexia, debilidad, sudoración profusa y descarga nasal serosa, sudoración profusa y descarga nasal serosa, taquicardia con pulso débil y taquipnea, intensa taquicardia con pulso débil y taquipnea, intensa anemia anisocítica, ictericia, heces hemorrágicas y anemia anisocítica, ictericia, heces hemorrágicas y petequias en mucosas. Curso de 5 a 30 días, mortal petequias en mucosas. Curso de 5 a 30 días, mortal en el 30% de los casos, o con lenta recuperación, con en el 30% de los casos, o con lenta recuperación, con paso como portadorpaso como portador

Forma crónica con febrícula persistente, anemia, Forma crónica con febrícula persistente, anemia, hipergammaglobulinemia persistentes, debilidad hipergammaglobulinemia persistentes, debilidad muscular y marcha insegura, caquexia progresiva sin muscular y marcha insegura, caquexia progresiva sin anorexia, arritmias y debilidad cardíaca con edemas anorexia, arritmias y debilidad cardíaca con edemas declives. declives.

TRANSMISIÓNTRANSMISIÓN

Al contrario de lo que se creía inicialmente, el paso Al contrario de lo que se creía inicialmente, el paso del virus de los del virus de los animalesanimales infectados a los infectados a los susceptibles no se produce con preferencia por susceptibles no se produce con preferencia por contacto directo, sino por artrópodos hematófagos, contacto directo, sino por artrópodos hematófagos, principalmente los de la principalmente los de la familiafamilia Tabanidae que Tabanidae que parasitan a los equinos. parasitan a los equinos.

El contagio también puede ocurrir por la transfusión El contagio también puede ocurrir por la transfusión de sangre infectada o por la utilización de agujas de sangre infectada o por la utilización de agujas hipodérmicas o instrumental quirúrgico infectado. hipodérmicas o instrumental quirúrgico infectado.

El virus es capaz de atravesar la barrera placentaria, El virus es capaz de atravesar la barrera placentaria, por lo que se puede presentar una infección por lo que se puede presentar una infección prenatal del prenatal del fetofeto en gestación. en gestación.


En los caballos con heridas abiertas actúan también como En los caballos con heridas abiertas actúan también como transmisoras moscas con aparato bucal lamedor; por su parte, transmisoras moscas con aparato bucal lamedor; por su parte, los piojos, ácaros, y garrapatas no tienen tanta importancia los piojos, ácaros, y garrapatas no tienen tanta importancia como agentes transmisores. como agentes transmisores.

Es muy posible el contagio oral al beber Es muy posible el contagio oral al beber aguaagua o pienso infectado, o pienso infectado, si bien esta circunstancia únicamente desempeña un papel si bien esta circunstancia únicamente desempeña un papel importante cuando se acompaña de microlesiones en el tracto importante cuando se acompaña de microlesiones en el tracto digestivo que actúan como puerta de entrada de dosis digestivo que actúan como puerta de entrada de dosis infectante. infectante.

Debe admitirse la posibilidad de contagio por el coito puesto que Debe admitirse la posibilidad de contagio por el coito puesto que se consigue la transmisión experimental de virus mediante se consigue la transmisión experimental de virus mediante inyección subcutánea de esperma de semental inyección subcutánea de esperma de semental


Una vez infectado el animal susceptible, en virtud de Una vez infectado el animal susceptible, en virtud de la persistencia típica de "Slow viruses" el equido se la persistencia típica de "Slow viruses" el equido se convierte en vehículo del virus para toda su vida, a convierte en vehículo del virus para toda su vida, a pesar de generarse anticuerpos. pesar de generarse anticuerpos.

La enfermedad clínica al igual que la latente, no deja La enfermedad clínica al igual que la latente, no deja ninguna inmunidad protectora por lo que los ninguna inmunidad protectora por lo que los animales infectados pueden enfermar gravemente animales infectados pueden enfermar gravemente y morir al cabo de meses y años, inclusive tras y morir al cabo de meses y años, inclusive tras largos periodos apiréticos. largos periodos apiréticos.

DIAGNÓSTICODIAGNÓSTICO

El cuadro clínico de la enfermedad es muy variable. El cuadro clínico de la enfermedad es muy variable. Para emitir un Para emitir un diagnósticodiagnóstico, resulta imprescindible , resulta imprescindible la práctica de la práctica de pruebaspruebas laboratoriales. Además de laboratoriales. Además de estudiar el curso seguido por el cuadro hemático, estudiar el curso seguido por el cuadro hemático, se han propuesto diversos Test serológicos para la se han propuesto diversos Test serológicos para la identificación de anticuerpos. identificación de anticuerpos.


Hasta el año 1970 no era posible diagnosticar la Hasta el año 1970 no era posible diagnosticar la enfermedad de la AIE, hasta que Leroy y Coggin´s enfermedad de la AIE, hasta que Leroy y Coggin´s describieron una prueba efectiva de anticuerpos describieron una prueba efectiva de anticuerpos específicos del virus de la AIE. específicos del virus de la AIE.

Aunque se han definido otros exámenes serológicos Aunque se han definido otros exámenes serológicos y se han aprobado para el diagnóstico de la AIE, la y se han aprobado para el diagnóstico de la AIE, la prueba de Coggins es internacionalmente prueba de Coggins es internacionalmente reconocida como la prueba de oro y ha sido reconocida como la prueba de oro y ha sido utilizada por más de 20 años. utilizada por más de 20 años.

El uso de la prueba Coggin´s y pruebas adicionales El uso de la prueba Coggin´s y pruebas adicionales han ayudado en el control de la Anemia Infecciosa han ayudado en el control de la Anemia Infecciosa Equina.Equina.


Pueden presentarse resultados débilmente positivos Pueden presentarse resultados débilmente positivos en el Test de Coggins: en potros sanos que porten en el Test de Coggins: en potros sanos que porten anticuerpos maternos persistentes (un segundo anticuerpos maternos persistentes (un segundo análisis realizado 2 meses después del destete, análisis realizado 2 meses después del destete, quinto mes de vida arrojará resultados claramente quinto mes de vida arrojará resultados claramente negativos); en equinos infectados, en periodos de negativos); en equinos infectados, en periodos de incubación (un segundo análisis a los 15 ó 20 días incubación (un segundo análisis a los 15 ó 20 días después arrojará resultados claramente positivos); después arrojará resultados claramente positivos); en animales con la infección latente, el segundo en animales con la infección latente, el segundo análisis da también por lo general débilmente análisis da también por lo general débilmente positivo (Coggins and Norcross, 1970).positivo (Coggins and Norcross, 1970).


La organización genética del virus de la AIE es La organización genética del virus de la AIE es similar a la del VIH pero es menos compleja. La similar a la del VIH pero es menos compleja. La estructura proteínica mayor del virus estimula estructura proteínica mayor del virus estimula una respuesta inmune que puede ser detectada una respuesta inmune que puede ser detectada en muchos Test serológicos. La proteína 26 en muchos Test serológicos. La proteína 26 contiene grupos específicos y determinantes contiene grupos específicos y determinantes interespecies que pueden ser detectados por el interespecies que pueden ser detectados por el Test ELISA.Test ELISA.


Como incluso en el curso de la infección natural no Como incluso en el curso de la infección natural no garantizan los anticuerpos formados ninguna protección garantizan los anticuerpos formados ninguna protección inmunitaria, hasta el presente no ha sido posible inmunitaria, hasta el presente no ha sido posible disponer de una inmunoprofilaxis eficaz ni de una disponer de una inmunoprofilaxis eficaz ni de una terapia o metafilaxis efectiva. Todas las medidas terapia o metafilaxis efectiva. Todas las medidas preventivas y de luchas se concentran, por tanto, en preventivas y de luchas se concentran, por tanto, en descubrir y eliminar los reservorios del virus así como descubrir y eliminar los reservorios del virus así como evitar la difusión de este y erradicarlo paulatinamente.evitar la difusión de este y erradicarlo paulatinamente.

2,4 mm2,4 mm

5,3 mm 5,3 mm Ø.Ø.

30 30 µl/pozo.µl/pozo.

MEDIDAS PREVENTIVAS CONTRA EPIZOOTIASMEDIDAS PREVENTIVAS CONTRA EPIZOOTIAS

Se prohiben las Se prohiben las importacionesimportaciones y tránsitos de equinos y tránsitos de equinos procedentes de territorios con la enfermedad procedentes de territorios con la enfermedad exótica. exótica.

Además, en cada Además, en cada importaciónimportación de solípedos exigirá el de solípedos exigirá el país importador del exportador un certificado país importador del exportador un certificado oficial internacional en el que haga constar que no oficial internacional en el que haga constar que no más de 5 días antes de efectuar el más de 5 días antes de efectuar el transportetransporte: :

1. Los animales se encontraban libres de 1. Los animales se encontraban libres de signossignos clínicos de la enfermedad. clínicos de la enfermedad.


2.2. Los animales permanecieron como mínimo durante Los animales permanecieron como mínimo durante los tres últimos meses en su establecimiento de los tres últimos meses en su establecimiento de origen, en el cual, los mismos estaban libres de origen, en el cual, los mismos estaban libres de Anemia Infecciosa Equina desde 12 meses antes en Anemia Infecciosa Equina desde 12 meses antes en un entorno de 30 Km. un entorno de 30 Km.

3.3. Los animales arrojarán resultados negativos al Test Los animales arrojarán resultados negativos al Test de Coggins 30 días antes de su de Coggins 30 días antes de su exportaciónexportación. .

4.4. Los caballos que permanezcan corto Los caballos que permanezcan corto tiempotiempo en el en el país (exposiciones y concursos hípicos) cumplirán país (exposiciones y concursos hípicos) cumplirán los requisitos 1, 2 y 3. los requisitos 1, 2 y 3.


5.5. Los caballos que vayan quedarse en el país se Los caballos que vayan quedarse en el país se someterán como mínimo a una cuarentena de 28 someterán como mínimo a una cuarentena de 28 días, en cuyo transcurso serán investigados días, en cuyo transcurso serán investigados serológicamente. serológicamente.

6.6. La validez máxima del Test de Coggins negativo La validez máxima del Test de Coggins negativo debe fijarse de manera unitaria en 120 días. debe fijarse de manera unitaria en 120 días.

7.7. Al efectuar vacunaciones y extracciones de Al efectuar vacunaciones y extracciones de sangre, en todas las poblaciones equinas es sangre, en todas las poblaciones equinas es absolutamente imprescindible utilizar en cada absolutamente imprescindible utilizar en cada animal aguja y jeringuilla estériles, de un solo uso animal aguja y jeringuilla estériles, de un solo uso o desechables. o desechables.

MEDIDAS RECUPERATIVAS DE LAS EPIZOOTIASMEDIDAS RECUPERATIVAS DE LAS EPIZOOTIAS

1. Está contraindicado todo tipo de tratamiento 1. Está contraindicado todo tipo de tratamiento contra AIE, ya que el animal una vez infectado se contra AIE, ya que el animal una vez infectado se convierte en vehiculizador del virus por toda su convierte en vehiculizador del virus por toda su vida y con ello una potencial fuente de contagio. vida y con ello una potencial fuente de contagio.

2. Todos los animales enfermos y todos los que den 2. Todos los animales enfermos y todos los que den positivos deben separarse del efectivo y positivos deben separarse del efectivo y sacrificarse. sacrificarse.

3. Cuantos animales contactaron con ellos, se 3. Cuantos animales contactaron con ellos, se alistaran y se someterán a control clínico y alistaran y se someterán a control clínico y serológico. serológico.

MEDIDAS RECUPERATIVAS DE LAS EPIZOOTIASMEDIDAS RECUPERATIVAS DE LAS EPIZOOTIAS

4. Combatir los insectos y mantener correctamente 4. Combatir los insectos y mantener correctamente todas las condiciones sanitarias; drenajes de los todas las condiciones sanitarias; drenajes de los pastos anegados y fiscalización de aguadas y pastos anegados y fiscalización de aguadas y bebederos, con el fin de que los animales no beban bebederos, con el fin de que los animales no beban agua estancada; no introducir animales infectados agua estancada; no introducir animales infectados en la finca; uso de agujas hipodérmicas e en la finca; uso de agujas hipodérmicas e instrumental quirúrgico debidamente esterilizados. instrumental quirúrgico debidamente esterilizados.

Elaborado por: ProfElaborado por: Profa. a. Zoraida Nava Lotuffo. M.V. MSc.Zoraida Nava Lotuffo. M.V. MSc.

Practica Test de Coggin´s 2008.

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