Preparación de Solución de Papaína Activada

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  • 7/25/2019 Preparacin de Solucin de Papana Activada

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    Preparacin de Solucin de papana activada (Lws Papain)

    Propsito: Preparacin de solucin de papana activada para papainizar glbulosrojos.

    Alcance: Preparacin de Solucin de papana activada.

    Responsables: Coordinador y profesionales que laboran en el laboratorio deonoclonales.

    !efiniciones" Abreviaciones y#o $raducciones

    !esarrollo del Procedi%ientoateriales:

    Reactivos: solucin de buffer de Sorensen p& '"( )*&+P,( -"- g#l" /a+&P,( 0"+1g#l2. solucin '0 % de 34cistena" solucin de /a,& 5 .

    Actividades:

    54 Se pesan 500 %g de papana )Sig%a P4(67+2.+4 Se disuelven en +' %l de una solucin de buffer de Sorensen p& '"(

    )*&+P,( -"- g#l" /a+&P,( 0"+1 g#l2.+.5A este p& la papana no se disuelve co%pleta%ente" por lo que esta

    suspensin se diluye con +' %l de una solucin '0 % de 34cistena )516%g para '0 %l del %is%o buffer de Sorensen2.

    +.+8sto 9ace que la preparacin se acidifique y se disuelva total%ente"llegando a un p& cercano a +" provocando la total disolucin de la papana"quedando la solucin co%pleta%ente cristalina.

    4 3uego de incubar por 5 9ora a 6C en un ba;o de ara" el p& de lasolucin se regresa a '"( a;adiendo gota a gota una solucin de /a,& 5.

    (4 3a solucin de papana" a9ora activada" se reparte en alcuotas de 5 %l yse congela a