Primer Informe Instrumental
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CUESTIONARIO:
1. ¿Cuál es la diferencia entre un fotocolorímetro un es!ectrofot"metro#
La diferencia fundamental entre un espectrofotómetro y un fotómetro o
fotocolorímetro, consiste en que el fotocolorímetro trabaja únicamente en el
espectro de luz visible y selecciona una longitud de onda determinada mediante
filtros fijos.
En cambio, un Espectrofotómetro es capaz de trabajar, no solo con la luz visible
sino que en otras regiones del espectro electromagnético ultravioleta e infrarrojo!.
"dem#s posee un monocromador para seleccionar la longitud de onda deseada.
$. E%!li&ue las diferencias entre los instrumentos de un solo 'a( de do)le
'a( !ara las mediciones de a)sor)ancia
Los instrumentos de un solo $az son aquellos que la luz sigue una única
trayectoria entre la fuente y el detector. La banda de luz atraviesa la muestra que
se $alla contenida en una celda y la luz transmitida por la muestra pasa el
detector, origin#ndose una corriente eléctrica que por medio de diferentes circuitos
permite observar una se%al. El sistema puede tener una o dos celdas para la
muestra en blanco y la de problema en el caso de un solo $az sed debe
desplazar las cubetas a diferencia de un instrumento doble $az que se dirige una
$az a la muestra y otro a la problema a la vez se $ace el barrido.
*. ¿Cuál es criterio !ara seleccionar el uso de un instrumento de un solo 'a(o de do)le 'a(#
Es!ectrofot"metro de un solo 'a( Es!ectrofot"metro de un do)le 'a(
• es un equipo sencillo económico.
• &rabaja en la región visible y
otros en la región uv'vis.
• (resencia de ruido de parpadeo
de las fuentes y detectores
• La radiación se divide en dos uno
pasa por la muestra y el otro por
blanco
• Equipo costoso
• )ealiza correcciones*
La intensidad de la fuente de luz,
&ransmisión del monocromador,+ensibilidad del detector.!
• )esultados m#s confiables
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El es!ectrofot"metro de do)le 'a( con dos celdas para dos cubetas!* las
disoluciones de la muestra problema y de referencia se someten simult#neamente
a la radiación, el aparato autom#ticamente recorre toda la zona del espectro que
se desea estudiar y graficar directamente en un aparato registrador, la diferencia
de absorbancias observadas en función de la longitud de onda.
El es!ectrofot"metro de un solo 'a( con una sola celda para alojarla cubeta
con la muestra!* Las disoluciones de la muestra problema y de referencia se
someten independientemente a la radiación, el resultado de la absorbancia o
transmitancia se tiene que anotar par luego graficar en un papel milimetrado
diferencia de absorbancias observadas en función de la longitud de onda.
+. ,efina cada t-rmino:
E%actitud fotom-trica* es el grado de concordancia entre la absorbancia real y laabsorbancia medida.
Ruido* en una definición simplista, es la sensación sonora que no resulta
agradable y que no comunica nada útil.
Anc'o de )anda* el anc$o de banda espectral practico es el anc$o de banda de
un instrumento operado a un periodo de integración y mantienen una relación
se%al a ruido fija.
Sistema dis!ersor * focaliza sobre la placa fotogr#fica todas las im#genes rendija
de la red de forma espectral por la acción aptica del prisma.
. ¿/u- es el error a)soluto de un es!ectrofot"metro# ¿Cuál es su 0alor
num-rico#
Eactitud del método* La eactitud de un método analítico indica que tan alejado
se encuentra el valor medido del valor verdadero o valor real, se mide mediante*
El error absoluto* Es la diferencia entre el valor de la medida y el valor tomado
como eacto. (uede ser positivo o negativo, según si la medida es superior al
valor real o inferior
alor a)soluto 2 3alor medido 4 alor es!erado5 % 166
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7. ,edu(ca matemáticamente la f"rmula: A 2 $ 8 lo9 T. ¿Cuál es el ran9o
de 0alores de transmitancia de la a)sor)ancia#
& - / 0
-ntensidad de la radiación que llega al detector luego de pasar por la muestra.
0-ntensidad de la radiación que llega al detector
Los rangos de los valores de transmitancia varían de 0 ' 1 y los valores de
absorbancia varían de 0.12 a 0.3
;. ¿C"mo se califica el estado de la fuente luminosa de un
es!ectrofot"metro#
La fuente luminosa debe poseer estabilidad, direccionalidad, distribución de
energía espectral continua y larga vida. Las fuentes empleadas son* l#mpara
de 4olframio o tungsteno, l#mpara de arco de enón y l#mpara de deuterio que
es utilizada en los laboratorios atómicos.
+i " - ' log &- log 0 /
&- /0 100!
5 & - 100 / 0 !
0 / - 100/ 5 &
Entonces*
"-log 100 / 5&!
"- log 100! 6 log 5&!
"- 7 ' log 5&.
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<. ¿C"mo se 'ace la lim!ie(a de las cu)etas de muestras lue9o de ser
usadas con una soluci"n coloreada 9rasa#
(ara el caso de las cubetas de cuarzo se utiliza para lavarlas una solución de
8a9:, 0.1; y una de :<l diluido 0.1 ;. Luego se enjuaga varias veces con agua
destilada para que no quede resto de la sustancia coloreada o de grasa. +e secacon papel tissue por el eterior o se lleva a una estufa de desecación libre de
polvo o un enjuague con un disolvente vol#til como etanol y esperar su
evaporación.
RE=ERENCIAS >I>?IO@RA=ICAS
• =uymovic$ <, "c$eme ), +esini + y ;azziotta =. Espectrofotometro y
fotocolorimetroguiapactica de actualizacion. "cta >ioquimLatinuam? 7002?
@A B! 27A'@A.• +uarez <, <arsedo L, ;edina C, 9rtega ( y &rinidad (. &ratado de
otorrinolaringología y crugia de cuello y cabza.Ed. 7D. Espa%a*
panamericana? 7003.
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$ttp*//444.bioquimica.ucv.cl/paginas/central/bioquimica570clinica/apuntes
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1AJ3
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