5/25/2018 Reporte 1 - Cultivo

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Introduccin

Como todos los organismos vivos, los microorganimos requieren ciertos nutrientes

bsicos y factores fsicos para el mantenimiento de su vida, estas necesidades varan

segn el tipo de microorganismo, en este caso, de protozoarios, y es necesario

conocerlas para cultivarlos en el laboratorio. Estas necesidades nutricionales bsicas

pueden suministrarse en el laboratorio, mediante el uso de medios de cultivos

artificiales, los cuales se encuentran disponibles en una gran variedad y los cuales engeneral aportan a los microorganismos (Univ. Pamplona, 2005).

Una fuente de carbono, de nitrgeno (sntesis de macromolculas), elementos no

metlicos y metlicos, vitaminas y por claro, agua y energa (dependiendo si son

fottrofos y quimitrofos) [Carrascal, 2003].

Las necesidades de desarrollo y vida de los protozoarios, involucran necesidades

fsicas por supuesto, como: T, pH y gases, los cuales se encuentran en un rango pito

especfico para cada especie de protozoo sin importar sus caractersticas, ya que su

variacin puede acelerar o disminuir el crecimiento y para ello, se debe hacer

adecuadamente.

Pueden ser medios artificiales o medios qumicamente definidos, en el segundo

mencionado se conocen las cantidades exactas de compuestos qumicos puros, y en

los artificiales, hay compuestos de un nmero limitado de sustancias complejas, como

extractos de plantas o animales cuya composicin qumica se desconoce (Baker &

Breach, 1990).

Objetivos

Elaborar medios de cultivo especficos de protozoarios para Paramecium (medio

Chalkley) y Amoeba.

Material y mtodo

Se realizaron 2 medios de cultivo especficos:

a) Para amoeba (Proteux y Dubia)

Se colect una muestra de agua estancada con restos de hojas en estado de

putrefaccin con un vaso de precipitados de 250 ml y se observ al microscopio

ptico con los objetivos 10x y 40x para observar la presencia de protozoarios en

el medio. La muestra de agua se coloc en una caja de Petri, las hojas

putrefactas se tomaron con pinzas de diseccin para dejarlas con la muestra.

Seguido, se le aadieron tres granos de arroz y la muestra se dej reposando

durante siete das.

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b) Para Paramecium (Chalkley)

A un vaso de precipitados de 500 ml se le colocaron 300 ml de agua destilada y

esto se coloc en una placa de calentamiento a 100C hasta hervir. Se le agreg

100 ml de agua del estanque del Instituto Tecnolgico de Los Mochis (al igual

que el cultivo anterior, la muestra de agua se analiz al microscopio) y con

ayuda de una balanza analtica se le aadieron los siguientes solutos:

Slido Cantidad

Cloruro de Sodio 0.04 mg

Cloruro de Potasio 0.0016 mg

Cloruro de Calcio 0.0024 mg

Se agit la solucin y se dej reposar durante dos das. Al trmino de este

tiempo, se le agreg 7 gotas de leche desnatada entera y continu el reposo

durante 5 das ms.

Resultados

a) Cultivo para Amoebas

b) Cultivo de Paramesium

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Discusin

a) Cultivo de Amoeba de vida libre

La ameba es un protozoario unicelular, no presenta pared celular, lo que le

permite cambiar de forma y desplazarse mediante prolongaciones llamadaspseudpodos. Puede llegar a medir ms de 1 mm y observarse a simple vista,

es especie de vida libre en el agua y la tierra. Posee nutricin hetertrofa por

ingestin, y su dieta se basa en plantas acuticas, animales microscpicos,

bacterias y otras clulas (ICSMF, 1984).

En el proceso de observacin de la muestra del agua estancada se not que su

presencia no era muy notoria, se podra decir que haba aprox. 2 especmenes

por muestra de agua (gota de pipeta Pasteur) antes del cultivo. En la

observacin del cultivo su desarrollo fue mayor y hubo mayor presencia en el

medio, sin embargo, se encontraron algunos especmenes reventados perdiendosu forma original. Esto se debe a la variante presin osmtica del interior del

organismo hacia la pared celular de ste ocasionada por el cambio radical del

medio acuoso proveniente. (ICSMF, 1984).

b) Cultivo de Paramesium

Los paramecios son seres de forma generalmente ovalada de entre 0.05 y

0.35mm de longitud. Estn cubiertos de cilios que utilizan para desplazarse y

capturar alimento, y son comunes en aguas dulces estancadas. Se alimenta de

bacterias y tambin de otros protozoos, algas y levaduras. (Madigan, 1998).

Durante la observacin de la muestra del estanque del ITLM, fcilmente se not

que son los protozoarios ms prominentes en el medio obtenido. Su capa de

cilios alrededor de la pared celular, provoca que tengan un movimiento rpido en

el medio acuoso, imposibilitando la observacin detallada de su cuerpo. Al

trmino del medio de cultivo exclusivo para Paramesium sp; y el reposo de 7

das para su reproduccin, determin que los paramecios son uno de los

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protozoos de mayor desarrollo masivo en el medio (Schaad, 1988),

multiplicndose cientos de veces en cuestin de das con las caractersticas del

medio adecuadas.

Conclusin

La utilizacin de medios de cultivo para organismos especficos como los protozoarios,son de importancia en la cuestin del laboratorio ya que en la mayora de los casos, se

utilizan para identificar a la especie tratada por medio de su distribucin,

comportamiento, arreglo celular, etc.; con el fin de forzarla a reproducirse masivamente

y poder obtener a sta de una manera ms sencilla para evitar la prdida del

organismo durante el proceso cual sea en el laboratorio.

El objetivo planteado fue cumplido exitosamente, determinando la presencia de los

organismos deseados en el medio con la facilidad de obtencin y desarrollo de stos.

Bibliografa