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Sensible. Preciso. Flexible.
ESPECTROFOTÓMETRO DE FLUORESCENCIA AGILENT CARY ECLIPSE
Resultados fi ables
El espectrofotómetro de fl uorescencia Agilent Cary Eclipse es
sensible, preciso y fl exible, y se ha diseñado para afrontar sus retos
actuales y futuros. Puede estar seguro de que el dispositivo Agilent
Cary Eclipse le ofrecerá resultados fi ables gracias a sus precisos
sistemas de control de temperatura, a que evita la fotodegradación
de las muestras y a su amplia gama de accesorios de muestreo.
• Coste de mantenimiento mínimo: la lámpara tiene una vida
excepcionalmente larga de 3.000 millones de destellos, con una
duración habitual superior a los 10 años, lo que evita la necesidad
de tenerla que sustituír periodicamente con el consiguiente
ahorro económico que esto conlleva durante la vida del
instrumento.
• No es necesario emplear cubetas: la sonda opcional de fi bra
óptica ofrece resultados precisos acortando el tiempo de trabajo,
mejorando su rendimiento y reduciendo costes operativos, de
modo que mejora el fl ujo de trabajo y reduce los costes
• Adquisición de datos excepcionalmente rápida: la velocidad de
barrido de hasta 24.000 nm/min le permite barrer todo el
intervalo de longitudes de onda en menos de 3 segundos y
recopilar datos a una velocidad de 80 puntos/s en el caso de
medidas cinéticas
• Sensibilidad: detección de cantidades picomolares de
fl uoresceína en cubetas estándar y en microcubetas
• Medida de muestras biológicas o muy valiosas: la lámpara de
destello de xenón permite realizar medidas de alta sensibilidad
en muestras de pequeño volumen sin degradar la muestra
• Flexibilidad: elija entre los distintos modos de análisis de la
emisión pro fl uorescencia, fosforescencia, quimioluminiscencia
o bioluminiscencia que convierten este instrumento en una
herramienta robusta y versátil para todas sus necesidades
analíticas
ESPECTROFOTÓMETRO DE FLUORESCENCIA AGILENT CARY ECLIPSEAgilent Technologies es ahora su principal recurso y socio en espectroscopia molecular. Con la incorporación de la prestigiosa línea de productos Cary, que abarca FTIR, UV-Vis-NIR y fl uorescencia, Agilent ofrece una completa gama de soluciones de espectroscopia molecular.
2
3
Barrido rápido
El Cary Eclipse realiza barridos
a 24.000 nm/min sin generar
errores de posicionamiento de los
picos gracias al sofi sticado diseño
del mecanismo de accionamiento
del monocromador.
La red de difracción se mueve
solamente cuando la lámpara se
apaga, de modo que la medida se
realiza mediante ciclos repetidos
mover-parar-iluminar. La longitud
de la onda no cambia en el
momento de tomar el dato.
Medida de muestras con
volúmenes muy pequeños
Dispone de cubetas de volúmenes
muy reducidos, hasta 5 μL.
El perfi l de haz horizontal garantiza
una sensibilidad magnífi ca incluso
con estos volúmenes tan bajos.
Diseño óptico superior
La excelente sensibilidad se
obtiene mediante el uso de una
única lámpara pulsante de
xenon de alta intensidad
acoplada a una óptica con
espejos recubiertos y redes de
difracción con ángulos de blaze
optimizados para garantizar los
revestimientos de la rejilla que
garantizan la sensibilidad en
todo el intervalo de longitudes
de onda. Las muestras
fotosensibles no se exponen a
la luz de forma continua, ya que
la lámpara de xenón sólo emite
en el momento de tomar un
punto de lectura.
Amplio compartimento
de muestras
El amplio compartimento
de muestras facilita
la instalación y
desinstalación de
accesorios y le ofrece
espacio para sus propios
instrumentos de
investigación.
Filtros integrados
La existencia de varios
fi ltros integrados en los
monocromadores implica
que no tendrá que
comprar fi ltros
adicionales para reducir
la dispersión o excluir la
luz difusa de segundo
orden.
Inmunidad a la luz
ambiente
Si la muestra no encaja
en el compartimento de
muestras o le resulta
más fácil trabajar con un
compartimento de
muestras abierto, sólo
tiene que quitar la tapa.
La exclusiva lámpara de
destello de xenón y el
sofi sticado procesamiento
de señales ofrece al Cary
Eclipse inmunidad a la luz
ambiental en las medidas
de fl uorescencia.
Recopilación ultra rápida de
datos
Realice un barrido de todo el
intervalo de longitudes de onda
en menos de 3 segundos.
Sensibilidad ampliada
Los detectores de tubo
fotomultiplicador sensibles
al rojo aumentan la
sensibilidad hasta 900 nm
sin sacrifi car el rendimiento
UV.
Superfi cie reducida
El Cary Eclipse ocupa sólo 600 mm
(24 pulgadas) en la mesa.
La potencia del xenón
Con la exclusiva tecnología de la lámpara de destello de xenón,
el Agilent Cary Eclipse es:
• Inmune a la luz ambiente: su exclusivo diseño óptico le permite
realizar medidas con el compartimento de muestras abierto,
lo que posibilita la medida de muestras de gran tamaño o con
formas poco habituales
• Flexible: el haz altamente focalizado permite que se pueda
acoplar a la perfección a sistemas de fi bra óptica, lo que
convierte al Agilent Cary Eclipse en la mejor opción para realizar
medidas con fi bra óptica en fl uorescencia.
• Efi ciente: la lámpara sólo se activa al realizar una lectura.
Por consiguiente, no precisa de tiempo de calentamiento y se
reduce el consumo de energía eléctrica y los requisitos de
mantenimiento. De igual modo, se elimina la fotodegradación,
ya que las muestras fotosensibles no se exponen excesivamente
a la luz
Señal/ruido
El modo señal/ruido (S:R) es un modo de barrido único disponible
sólo en los instrumentos Agilent Cary, que permite controlar el nivel
de precisión que desee durante todo el barrido. Es especialmente útil
para muestras cuya emisión varía signifi cativamente a lo largo del
intervalo de longitudes de onda.
El modo S:R reduce los tiempos de barrido en más del 50%, ya que el
sistema acorta los tiempos de lectura en las zonas del espectro con
mayor intensidad de la emisión y aumenta el tiempo de integración
en las zonas de menor emisión.
CALIDAD Y RENDIMIENTO GRACIAS AL DISEÑONuestro historial demostrado de diseños ópticos excelentes e innovadores le garantiza que siempre obtendrá los resultados correctos.
4
Diseño óptico superior
El sistema óptico de recopilación Schwarzchild captura una gran parte de la luz
procedente de la potente lámpara de destello de xenón y la dirige a través de la
muestra, de modo que se obtiene una sensibilidad excelente y muy bajos niveles
de ruido.
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Software diseñado para muestras reales
El diseño modular del software WinFLR de Agilent Cary le permite
personalizarlo de acuerdo con sus necesidades analíticas, tanto si se
trata de aplicaciones químicas que utilizan medidas de concentraciones
o barridos básicos, como si se trata de aplicaciones de biociencia que
requieren un control térmico o una polarización avanzados.
MEJOR SOFTWARE CON DIFERENCIAEl software de uso sencillo y centrado en las aplicaciones proporciona un control completo del instrumento.
Obtención de gráfi cos en 3D y de contornos en cuestión de segundos
Recopile automáticamente un conjunto de barridos de excitación, emisión o
sincrónicos en todos los modos X. Los datos en 3D se pueden seccionar para
generar barridos simples de excitación o emisión, o se pueden crear gráfi cos
de contornos para mostrar el número de especies emisoras.
Aplicaciones específi cas de software
Agilice las medidas y ahorre tiempo con el sencillo software
WinFLR. Investigue los procesos de transferencia intracelular
de iones gracias al accesorio de fi ltros rápidos o realice
estudios de interacciones de fármacos mediante medidas
cinéticas o de polarización.
Funciones gráfi cas mejoradas
El módulo de control de gráfi cos dispone de etiquetado
automático de picos, zoom, cursor libre y de rastreo, múltiples
formatos de abscisas y ordenadas, copia y pegado inteligentes
y modos de superposición, lo que facilita la interpretación y
presentación de los espectros para su publicación.
Procesamiento de datos avanzado
Utilice la calculadora de espectros para aplicar operaciones
matemáticas a los espectros, tales como sumas, restas,
divisiones, multiplicaciones y raíces cuadradas, así como
operaciones con logaritmos.
La calculadora también incorpora funciones de promedios,
operaciones de normalización, suavización, derivadas de hasta
cuatro niveles y algoritmos de integración.
Soluciones a aplicaciones específi cas complejas
Utilice el potente lenguaje de programación integrado,
Applications Development Language (ADL), para personalizar
el software WinFLR y satisfacer sus aplicaciones más
específi cas.
Accesorios para un rendimiento superior
La amplia gama de accesorios del Cary Eclipse le permite trabajar
con la mayor variedad posible de tamaños y tipos de muestras.
Accesorios para muestras líquidas
• Lector de microplacas para el desarrollo de métodos o para
medidas de alto rendimiento
• Sondas y acopladores de fi bra óptica para obtener medidas
precisas y rápidas sin cubetas
• Soportes termostatizados por agua o por Peltier con una o varias
celdas para obtener un control preciso de la temperatura
• Sondas de temperatura para realizar medidas precisas de la
temperatura en el interior de la cubeta
• Accesorio de mezclado rápido para la investigación de cinéticas
ultrarrápidas que se completan en tiempos incluso inferiores a
unos pocos segundos
• Polarizadores manuales y automatizados para excitación de hasta
un límite de 275 nm
Accesorios para sólidos, polvos y pastas
• Soporte de muestras sólidas para adquirir espectros de
fl uorescencia de diversos tipos de muestras, que incluyen fi ltros,
polvos, geles, componentes ópticos y tejidos
• Acoplador y sonda de fi bra óptica para medias de refl ectancia.
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UN ESPECTROFOTÓMETRO CARY PARA TODAS LAS APLICACIONESLos espectrofotómetros de fl uorescencia Agilent Cary Eclipse se complementan con una gama de accesorios y software diseñados específi camente para las necesidades de sus aplicaciones.
Monitorización y control de la temperatura
La sonda de temperatura permite medir la temperatura del interior de la
cubeta. Así dispondrá de los datos más precisos en los experimentos que
dependen de la temperatura. El software WinFLR controla la temperatura
directamente desde la sonda y garantiza que los datos se recopilan a la
temperatura correcta.
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Lector de microplacas de gran rendimiento
El accesorio del lector de microplacas convierte al Cary Eclipse en un
lector de microplacas de gran rendimiento en menos de 30 segundos.
Ofrece barrido completo de longitudes de onda con una sensibilidad
excelente gracias al uso de un sistema óptico refl ectante en lugar de
un sistema de fi bra óptica.
• Mida 96 pocillos en menos de 50 segundos y 384 pocillos en
menos de 90 segundos
• Realice barridos completos de longitudes de onda en cada pocillo
en cuestión de minutos. Realice análisis en estado estacionario
de fl uorescencia, fosforescencia, quimioluminiscencia,
bioluminiscencia o fl uorescencia retrasada en el tiempo
• Analice en unos minutos las cantidades de muestra depositada
en los laterales o la base de los pocillos.
• Personalice las posiciones de medida para las microplacas o los
sustratos no estándar. Controle el tamaño de la zona de la
imagen hasta un tamaño mínimo de 2 mm de diámetro
• Alinee automáticamente el haz de excitación sobre las
microplacas y almacene información acerca de todos los tipos de
placas
• Utilice el lector de microplacas como método de transferencia x-y
para medir otras muestras como geles, películas y sólidos en
diferentes puntos de la superfi cie
Barrido de células adheridas a los pocillos
El lector de microplacas puede realizar fácilmente un barrido de las células
adheridas al lateral del pocillo, con una excelente relación señal/ruido.
En esta imagen se muestra un barrido con emisión de rodamina B que ha
recubierto el lateral y la parte inferior de una microplaca blanca de 384
pocillos.
20
60
40
80
100
140
120
570 580 590 610 620600 630 640Longitud de onda (nm)
Inte
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dad (
unid
ad d
e abso
rbanci
a)
Muestreo fl exible
Combine el Agilent Cary Eclipse con sondas de fi bra óptica para
crear el espectrofotómetro de fl uorescencia con lectura remota más
sensible:
• Utilice el sistema de fi bra óptica para medir la emisión
procedente de la superfi cie de un sólido o de un líquido
• La exclusiva característica de inmunidad a la luz ambiente en las
medidas de fl uorescencia indica que no existe ninguna restricción
en cuanto al tamaño o la forma de la muestra
Barrido superior
• La rápida velocidad de barrido de 24.000 nm/min sin error en el
posicionamiento de los picos se consigue gracias al diseño del
mecanismo de accionamiento del monocromador. La rejilla se
mueve solamente cuando la lámpara se apaga, de modo que la
medida se realiza con un método de activación intermitente (la
longitud de la onda no varía durante una medida)
• Utilice el modo de barrido con promedio mediante ordenador
(CAT) para calcular la media del número de barridos individuales
hasta que esté satisfecho con la calidad de la relación señal/
ruido
• Se pueden generar espectros corregidos de excitación y de
emisión hasta 600 nm sin que suponga un coste adicional
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PRODUCTOS QUÍMICOS Y MATERIALESCuando necesita innovar y producir nuevos materiales y productos con la mayor calidad y de forma consistente, las soluciones analíticas, fi ables e innovadoras resultan esenciales para el éxito. El Agilent Cary Eclipse le permite realizar una preparación mínima de las muestras y le ofrece soluciones de muestreo versátiles.
Medidas de fi bra óptica
El sistema de fi bra óptica Cary Eclipse se puede emplear para medir la
emisión procedente de la superfi cie de un sólido o emitida por un líquido,
sin poner en riesgo la calidad de los datos.
0
50
100
150
500 550Longitud de onda (nm)
Inte
nsi
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unid
ad d
e abso
rbanci
a)
Medida de fl uorescencia de detergentes
Utilice el espectrofotómetro de fl uorescencia Cary Eclipse con un
soporte de muestras sólidas para medir la fl uorescencia de agentes
abrillantadores ópticos en detergentes para ropa.
• El soporte de muestras sólidas resulta fácil de instalar y alinear,
con lo que reduce el tiempo de preparación de la muestra.
• Utilícelo junto con el soporte para polvo y el kit de montaje en
bordes si desea aún más fl exibilidad en el muestreo de sólidos.
• Adquiera espectros con el compartimento de muestras abierto.
Medida de fl uorescencia de estalactitas
Utilice el espectrofotómetro de fl uorescencia Cary Eclipse con
acoplador y sonda de fi bra óptica para medir la fl uorescencia de
muestras sólidas muy complicadas, como las estalactitas.
• Mida muestras con formas poco habituales, como estalactitas y
corales vivos, con una guía luminosa de fi bra óptica.
• La sonda y el acoplador de fi bra óptica son fáciles de instalar y
alinear, por lo que no es necesario preparar la muestra.
• Adquiera de forma sencilla espectros de fl uorescencia:
simplemente coloque la punta del sólido en la superfi cie de la
muestra sin necesidad de usar un protector de luz.
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Medidas de muestras sólidas
Utilice el soporte de muestras sólidas para medir fácilmente las propiedades
de fl uorescencia de diferentes tipos de muestras: desde fi ltros ópticos hasta
especialidades químicas, como agentes abrillantadores ópticos, componentes
ópticos, pinturas y tejidos.
Examen de las propiedades de fl uorescencia de un detergente para ropa
normal
El espectro de excitación y de emisión del polvo muestra bandas de absorción
en la zona de entre 320 y 390 nm y de emisión en el intervalo de 400–500 nm
propias de los agentes abrillantadores ópticos. Los tejidos que se laven con
este detergente podrían presentar un tono azul.
Investigación de las propiedades de fl uorescencia de una estalactita de
corte transversal
Simplemente se colocó la punta de la sonda en la superfi cie de la estalactita
para recopilar las matrices de excitación-emisión (EEM). El sistema también
se puede utilizar para la identifi cación de gemas y la detección de impurezas,
así como para el análisis de suelos, minerales y menas.
0
200
400
800
600
1000
400 450 500 550 600260
270
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320
330
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350
380
861
796
730
664
599
533
467
402
336
270
205
139
73
8
360
370
400 425 450 475 500 550 575525 600
200
400
600
1000
800
200 300 400 500 600Longitud de onda (nm)
Inte
nsi
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a)
Longitud de onda (nm)
Inte
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unid
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rbanci
a)
Longitud de onda (nm)
Long
itud d
e onda (
nm
)
Proteja las muestras valiosas
• Las muestras fotosensibles no se exponen de forma continua a la
luz, ya que la lámpara sólo se activa al adquirir un dato puntual,
evitando así la fotodegradación
• Gracias a las microcubetas, puede obtener medidas muy precisas
de muestras biológicas valiosas
• La temperatura del compartimento de muestras es estable,
puesto que la lámpara no genera calor; así se garantiza la
obtención de datos precisos y reproducibles
Medidas cinéticas rápidas y precisas
• Adquiera datos de fl uorescencia a 80 puntos por segundo y
detenga la recopilación de datos en cualquier momento para
agregar los reactivos sin que el rendimiento se vea afectado
• Amplíe el tiempo de adquisición de datos durante el análisis
• Realice medidas de tiempos de vida en procesos de
fosforescencia resuelta en el tiempo y de fl uorescencia diferida
• Utilice el accesorio de mezclado rápido para analizar reacciones
que fi nalizan en menos de 1 o 2 segundos
Concentraciones intracelulares de iones
• Utilice el accesorio de fi ltros rápidos o la gran velocidad de
movimiento de los monocromadores para recopilar datos del análisis
de las concentraciones intracelulares de iones o de las medidas de
pH en tiempo real (entre 50 ms y 1 s para medidas de relaciones o
cada 12,5 ms para marcadores a la longitud de onda fi ja)10
APLICACIONES PARA BIOCIENCIAEn un campo que exige precisión y productividad, los retos nunca han sido mayores. Hoy en día, los análisis requieren más fi abilidad, efi cacia y resultados de mayor calidad que en el pasado. Agilent ofrece un rendimiento óptico sin igual y un mejor control de la temperatura para medir las muestras más difíciles con la mayor exactitud.
Sin fotodegradación
Medida de la instensidad de la emisión frente a la longitud de onda tras
una excitación de 370 nm.
Se registró un descenso insignifi cante en la emisión máxima de BFP
(450 nm) después de 10 barridos sucesivos a una velocidad de barrido de
120 nm/min (tiempo total de exposición, 12 min 30 s) con el Agilent Cary
Eclipse (a), mientras que se observó una fotodegradación del 20%
aproximadamente con un instrumento disponible en el mercado con
una lámpara de xenón tradicional (b).
A B
10
20
30
40
50
60
0400 450 500 550
0
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400 450 500 550Longitud de onda (nm)
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Longitud de onda (nm)
Inte
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Movimiento de rotación de las moléculas
• Los fi ltros polarizadores opcionales permiten llegar a excitar
hasta los 275 nm, por lo que incluso se puede excitar el triptófano
sin que se produzca fotodegradación.
• Los polarizadores también permiten obtener medidas en el ángulo
signifi cativo de 55˚, así como con el ángulo complementario de
35˚.
• Con una relación de extinción extremadamente baja en la
posición transversal, se puede medir con gran precisión y
exactitud el movimiento de rotación de las proteínas y las
interacciones de los disolventes.
• El diseño Sturdy de los polarizadores facilita su mantenimiento y
limpieza.
Excelente control de la temperatura
El soporte de celda termostatizado con control de temperatura por
Peltier del Cary Eclipse ofrece:
• Medida simultánea de hasta cuatro muestras.
• Control rápido y preciso de la temperatura, esencial para el control
de la intensidad de la emisión de fl uorescencia.
• Excelente control de la estabilidad frente al tiempo (variación típica
± 0,05 °C).
• Variación mínima de celda a celda (máxima diferencia: 0,2 °C a
37 °C).
• Medida precisa de la temperatura de la muestra real en el interior
de la cubeta con las sondas de temperatura.
• Agitación electromagnética incorporada, que proporciona un
completo control de la velocidad de agitación, sin fl uctuaciones
(hasta 4 celdas).
• Se pueden seleccionar velocidades de rampa de temperatura muy
bajas (de hasta 0,06 °C/min) para estudios de renaturalización y
desnaturalización térmica del ADN mediante transferencia de
energía por resonancia de fl uorescencia (FRET).
11
Polarizador automatizado
Simplifi que sus medidas usando un polarizador automatizado y el software
WinFLR para seguir automáticamente los cambios en la polarización a lo
largo del tiempo.
Monitorización del funcionamiento celular de muestras fotosensibles a
nivel de proteínas
Se muestran los espectros de emisión de la fusión de la proteína fl uorescente
azul (BFP) y la proteína fl uorescente verde (GFP) tras una excitación de 360 nm.
Se observa la emisión de GFP (~510 nm) tras la excitación específi ca de la
BFP de forma individual (360 nm), valor indicativo de la FRET.
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30
20
50
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450 500 550Longitud de onda (nm)
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cia)
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