Teórica 2 - 2015

8/16/2019 Teórica 2 - 2015

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O isolamento de bactérias a partir de um peixe comsintomas de doença é tomado como evidência de infecção;

Esquecendo-se frequentemente da necessidade de secumprirem os Postulados de Koch.

!

Actualmente considera-se que o cumprimento dos postulados de Koch é

suficiente mais não necessário para o estabelecimento de uma relaçãocausal entre microrganismo e doença.

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Robert Koch (1843-1910)

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Robert Koch (1843-1910) utilizou os critérios desenvolvidospelo seu professor Jacob Henle (1809-1895) para

demonstrar a relação entre o Bacillus anthracis e o antraz;

Actualmente estes critérios são conhecidos comoPostulados de Koch:

Continuam a ser utilizados para demonstrar a ligaçãocausal entre um microrganismo e a doença por elecausada.

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1.O microrganismo tem que estar presente em todos osanimais doentes e ausente em todos os animais saudáveis;

2.O microrganismo tem que ser isolado a partir de umanimal doente e cultivado em cultura pura;

3.O microrganismo deve ser capaz de causar doença quando

introduzido num animal saudável;4.O microrganismo tem que ser re-isolado do animal

infectado experimentalmente e identificado como idênticoao que provocou a infecção inicial.

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Bactérias patogénicas para peixes:

Lista extensa:

Estão descritas cerca de 93 espécies bacterianas patogénicas para peixes, das quais algumas:

São reconhecidamente patogénicas (Ex: Vibrio sp.);

Têm validade taxonómica duvidosa (Ex: Myxobacterium);

São duvidosas como patogénios de peixes (Ex: S. epidermidis

)

Não são consideradas patogénios “

bona fide

”.

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Métodos de identificação bacteriana:

Identificação bioquímica:

Identificação bioquímica tradicional;

Testes miniaturizados multiprova.

Identificação serológica;

Identificação molecular.

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Sintomatologia de

infecções bacterianas

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Adaptado de Austin & Austin, 1999

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© Miguel Ramos, 2005

© Miguel Ramos, 2005 © Miguel Ramos, 2005


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© Schlotfeldt & Alderman, 1995 © Schlotfeldt & Alderman, 1995

© Schlotfeldt & Alderman, 1995 © Schlotfeldt & Alderman, 1995 © Schlotfeldt & Alderman, 1995

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© Schlotfeldt & Alderman, 1995 © Schlotfeldt & Alderman, 1995 © Schlotfeldt & Alderman, 1995

© Schlotfeldt & Alderman, 1995

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As amostras devem ser retiradas de animais moribundos oumortos recentemente;

Na presença de lesões externas, estas devem ser amostradas

antes de se proceder à necropsia do animal;

A forma de se amostrar as lesões depende do tipo de agente etiológico que sepresume estar a infectar o animal.

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Por rotina, os órgãos internos a analisar são:

Rim, Baço e Fígado;

Podem analisar-se outros órgãos como o cérebro, olhos, coração, intestino,

brânquias e tecido muscular.

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Órgãos internos a analisar:

A escolha dos órgãos a analisar pode estar relacionada com:

A sintomatologia externa e interna apresentada pelo animal;

O histórico da piscicultura.

Quantos mais órgãos analisarmos, maior é a probabilidade de se isolar oagente etiológico.

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A exposição dos órgãosinternos efectua-se com base em 3 incisões distintase sequenciais:

De a para b, tendo o cuidado denão perfurar o intestino;

De a para c ao longo da coluna vertebral;

De b para c.

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Isolamento Primário:

As amostras dos diferentes órgãos devem ser inoculadas em diferentes meios

de cultura de modo a maximizar o isolamento do agente etiológico:

Meios de cultura gerais:

TSA (Trypticase Soy Agar);

BHIA (Brain Hearth Infusian Agar);

NA (Nutrient Agar);

MA (Marine Agar).

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Meios Selectivos/Diferenciais:

Para o isolamento de Vibrio sp. utiliza-se TCBS (Thiosulfate Citrate Bile Salts Sucrose Agar);

Para o isolamento de bactérias Gram-positivas utiliza-se Agar Sangue;

Para o isolamento de Yersinia ruckeri utiliza-se SW (Shotts-Waltman) ou ROD (agar Ribose-Ornitina Desoxicolato);

Para o isolamento de Aeromonas hydrophila utiliza-se Rimler-Shotts (1973) (Novobiocina, azulde bromotimol, desoxicolato, citrato e tiosulfato).

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Meios especiais:

Para o isolamento de Flexibacter/Tenacibaculum e Flavobacterium utiliza-se Agar Cytophaga (AO - Anacker & Ordal, 1959), Agar de Song (1988) ou Agar FMM (Pazos et al ., 1995);

Agar FLP (Cepeda et al ., 2004) para o isolamento de Flavobacterium psychrophilum.

Para o isolamento de Renibacterium salmoninarum utiliza-se KDM-2 (Evelyn, 1977).

No caso de bactérias de água salgada, os meios deverão ser suplementadoscom NaCl (concentração final 1 a 2% p/v).

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Sub-culturas

Cultura pura

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Principais bactérias Gram negativas patogénicas para peixes:

Vibrio anguillarum;

Photobacterium damselae subsp. piscicida;

Tenacibaculum maritimum;

Aeromonas salmonicida.

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Principais bactérias Gram negativas patogénicas para peixes:

Aeromonas hydrophilla;

Yersinia ruckeri;

Flavobacterium columnare;

Flavobacterium psychrophilum.

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Principais bactérias Gram positivas patogénicas para peixes:

Mycobaterium marinum;

Streptococcus parauberis;

Lactococcus garvieae.

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Principais pontos:

Descrição da doença;

Características do agente etiológico;

Espécies afectadas;

Isolamento;

Epidemiologia;

Factores de patogenicidade;

Controlo.

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Principais bactérias patogénicas para peixes

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Bactéria Gram -;

Bacilo curto e fino;

Móvel;

Oxidase +;

Catalase +;

Fermentativo;

Cresce em TCBS:

Colónias amarelas;

Sensível ao O129;

Arginina dihidrolase +;

Lisina descaboxilase -;

Ornitina descarboxilase -;

Gelatinase +;

Indol +;

Manitol +;

Cresce entre 10-35 ºC, óptima 22 ºC.

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Gram -;

Bacilo curto e grosso;

Imóvel;

Oxidase +;

Catalase +;

Fermentativo;

Crescimento em TCBS -;

Sensível ao O129 (150 µg);

Arginina dihidrolase +;

Lisina descaboxilase -;


Gelatinase -;

Indol -;

Manitol -;

Cresce entre 10-32 ºC, óptima 25 ºC.

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Gram -;

Bacilo;

Imóvel;

Oxidase -;

Catalase +;

ß-Galactosidase -;

Fermentativo;

Arginina dihidrolase -;

Lisina descaboxilase +;

Ornitina descarboxilase +;

Gelatinase -;

Indol +;

H2S +;

Arabinose, Lactose, Manitol,Sacarose -;

Frutose, galactose, glicerol, maltose,manose +.

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Gram -;

Cocobacilo;

Mobilidade V:

Móvel a 22 ºC e imóvel a 37 ºC.

Oxidase -;

Catalase +;

Fermentativo; Arginina dehidrolase -;

Lisina descarboxilase -;

Ornitina descaboxilase +;

Vermelho de metilo +;

Voges-Proskauer - a 37ºC;

Citrato + a 22 ºC;

Sulfureto de hidrogénio (H2S) -;

Gelatinase +;

Ureia -.

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Gram -;

Cocobacilo;

Imóvel;

Oxidase +;

Catalase +;

Fermentativo;

Arginina dehidrolase +;

Lisina descarboxilase (+);


Gelatinase +;

Vermelho de metilo +;

Voges-Proskauer +;

Citrato -;


Urease -;

Produz um pigmento castanho.

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Gram -;

Bacilo;

Móvel;

Oxidase +;

Catalase +;

Fermentativo;

Arginina dehidrolase +;Lisina descarboxilase V;


Gelatinase +;

Vermelho de metilo -;

Voges-Proskauer +;

Citrato V;


Urease -;

ONPG +;Crescimento entre 5-37 ºC.

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Gram +;

Cocos aos pares ou pequenascadeias;

Imóvel;Oxidase -;

Catalase -;

Fermentativo;

Arginina dehidrolase -;



Gelatina +;

Sulfureto de Hidrogénio (H2S) -;

Indol -;

Lactose, Manitol e Sorbitol +;

MR -;

VP +;

Crescimento entre 10 - 37º C;

emolítico.

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Gram +;

Cocos aos pares ou pequenascadeias;

Imóvel;

Oxidase -;

Catalase -;

Fermentativo;

Arginina dehidrolase +;



Gelatina -;


Indol -;

Galactose, Manitol e Maltose +;

MR +;

VP +;

Crescimento entre 10-45ºC.

emolítico

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Gram -;

Bacilo;

Móvel;

Oxidase +;

Catalase +;

Oxidativo ou sem reacção;

Arginina dehidrolase -;



Gelatina +;


Indol -;

ONPG -;

Ureia -.

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Isolamento:

Facilmente isolado a partir de meios de cultura específicos como:

TCBS (Tiosulfato, Citrato, Bílis, Sacarose agar), no qual as estirpes sacarose positivas originampequenas colónias amarelas (Bolinches et al ., 1988);

VAM (sais biliareres, elevada concentração de NaCl, ampicilina, sorbitol e pH elevado), é um meio

onde as colónias amarelo brilhantes, com um halo amarelo (Alcina et al ., 1994):

No entanto, origina falsos positivos (Alcina et al ., 1994); 4 % de outros Vibrio foramidentificados como V. anguillarum.

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Características do agente etiológico:

Em meios líquidos originam dois tipos de células:

Os típicos bacilos curtos, móveis;

Células muito pequenas, extremamente móveis e capazes de atravessaremos poros dos filtros de 0,22 µm:

A importância destas células não é conhecida, mas podem representaruma fase do ciclo de vida, um artefacto de laboratório ou ummecanismo de sobrevivência.

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Grande diversidade antigénica (O1! O23):

O serótipo O1 é o que tem sido mais isolado e o que tem maior importância do ponto de vista

patogénico:

Apresenta homogeneidade bioquímica e, variabilidade por PFGE (35 pulsotipos distintos) eperfil plasmático (15 perfís distintos).

O serótipo O2 parece ser mais agressivo que o O1 (Austin & Austin, 2012):

Encontra-se subdividido em O2a e O2b;

Variabilidade nos perfís de LPS, “western blotting” e aglutinação:

Permitiu a definição de 9 grupos distintos (Tiainen et al ., 1997).

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Grande diversidade antigénica (O1! O23):

O serótipo O3 é pouco comum, mas parece estar a expandir-se:

O serótipo O3 encontra-se subdividido em O3A e O3B:

O serótipo O3B só tem sido observado em estirpes ambientais.

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Epidemiologia:

Inicialmente isolada a partir da enguia europeia ( Anguilla anguilla):

Pensa-se que inicialmente estava limitada às águas europeias;

O primeiro registo na América do Norte data de 1953;

O primeiro registo no Japão data de 1975 e pensa-se que deveu-se àimportação de enguias infectadas provenientes de França;

Existem cada vez mais evidências que pode surgir em água doce (Muroga,1975; Ghittino & Andruetto, 1977):

Continua a necessitar de sais para o seu isolamento.

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Epidemiologia:

Actualmente é um dos factores limitantes na produção de salmonídeos.

Pensa-se que todas as espécies marinhas são susceptíveis a este agenteetiológico;

Um estudo de revisão dá conta da sua presença em mais de 14 países distintos,

atingindo cerca de 48 espécies de peixes cultivados (Austin & Austin, 2012):

No norte de Portugal, tem sido isolado de robalo, dourada, pregado, linguado,solha e goraz.

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Epidemiologia:

Tem vindo a ganhar notoriedade em aquacultura de água salgada;

Pode provocar mortalidades da ordem dos 80%;

Faz parte da microbiota do meio aquático;

Todas estas observações sugerem que esta doença constitui um problema

generalizado a nível mundial;

As epizootias ocorrem durante o Verão, quando a temperatura da águaexcede os 10 ºC, a concentração de oxigénio dissolvido é muito baixa e ospeixes estão stressados devido ao sobre-povoamento e à baixa higiene.

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Epidemiologia:

Várias experiências têm sugerido que esta bactéria sobrevive longos períodos detempo em água do mar (> 50 meses) (Hoff, 1989);

Faz parte da microbiota normal de peixes de água salgada (Mattheis, 1964;

Oppenheimer, 1962);

A origem precisa de um isolado tem importância epizoótica.

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Epidemiologia:

O modo de infecção ainda não é completamente compreendido:

Envolve a colonização do hospedeiro e subsequente penetração nos tecidos:

Tem sido postulado que a infecção inicia-se no recto e tratogastrointestinal posterior (Ranson, 1978);

O tegumento é colonizado 12 h após imersão numa cultura virulenta(Kanno et al ., 1990), seguindo-se a infecção do fígado, baço, músculo,

brânquias e intestino (Muroga & De La Cruz, 1987).

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Epidemiologia:

A presença de metais pesados, em particular o cobre e o ferro, contribuem paraque haja uma exacerbar da infecção:

Devido à coagulação da camada de muco nas brânquias com a consequenteinibição do transporte de oxigénio e ao stress respiratório (Westfall, 1945);

Concentrações sub-letais de cloro não parecem promover o desenvolvimento deinfecções (Hetrick et al ., 1984).

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Epidemiologia:

Esta bactéria causa a vibriose:

Esta doença pode ser causada por um grupo significativo de diferentes espécies de Vibrio, das quaisas mais importantes são:

V. anguillarum (= Listonella anguillarum);

V. ordalii (anteriormente classificado como V. anguillarum biótipo 2)

V. salmonicida;

V. vulnificus biótipo 2.

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Patogenecidade:

O modo de infecção não é conhecido:

Pensa-se que se inicia com a colonização do tegumento (Spanggaard et al .,2000) e sub-sequente penetração dos tecidos;

A mobilidade quimiotáxica é necessária para a virulência (O’Toole et al ,1999, Larsen et al ., 2004):

O patogénico é atraído pelos aminoácidos de hidratos de carbonopresentes no intestino e no muco (O’Toole et al ., 1999);

A quimiotaxia em relação à serina é maior a 25 ºC do que a 5 ou 15 ºC.

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Patogenecidade:

A produção de proteína A, envolvida na construção do flagelo, é essencial para

a virulência (Milton et al ., 1996):

Estirpes em que se promoveu a perda do flagelo têm uma virulência atenuada em cerca de 500 vezes(O’Toole et al ., 1996):

A produção do flagelo e consequentemente a capacidade de virulência está relacionada com o

gene RpoN (O’Toole et al ., 1997), quando a infecção foi por banho, mas não quando foi por ip.

Produtos extra-celulares, como as hemolisinas e diferentes proteases, estãoenvolvidas na patogenecidade desta bactéria.

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Patogenecidade:

Só os serótipos O1, O2 e O3 (em menor grau) é que provocam mortalidades:

O serótipo O1, mas não o O2 tem a capacidade de aderirem ao muco de salmão do

Atlântico;

Os isolados do serótipo O1 possuem um plasmídeo de virulência (pJM1) com 67 Kb erelacionado com o sistema de absorção de ferro que é expresso em situações de limitaçãodeste ião (Crosa et al ., 1977; Crosa, 1980; Wolf & Crosa, 1986; Chen et al., 1996):

Existem estirpes avirulentas que possuem o pJM1 (Pedersen et al ., 1997);

Existem estirpes virulentas isoladas a partir de striped bass ( Morone saxatilis) quenão possuem o pJM1 (Toranzo et al ., 1983):

Parece que o DNA plasmático foi integrado no cromossoma bacteriano.

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Patogenecidade:

Estirpes do serótipo O1 virulentas:

Apresentam um plasmídeo de 67kbp (pJM1), que codifica:

Um sideróforo;

Uma proteína da membrana externa - OM2.

O plasmídeo pJM1 não foi detectado em mais nenhum serótipo (Austin et al ,1995):

Os restantes serótipos, em particular o O2, podem ser mais agressivos para os peixes doque o serótipo O1 (Austin & Austin, 2012).

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Patogenecidade (resumo):

1. Invasão dos tecidos do hospedeiro;

2. Sequestro do ferro com intervenção de genes presentes no plasmídeo pJM1e no cromossoma;

3. Lesões nos tecidos do peixe devido à presença de hemolisinas e proteases.

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Controlo:

Têm sido desenvolvidas e utilizadas várias vacinas comerciais com sucesso:

Tem-se verificado que os imunoestimulantes intensificam a protecção dada pela vacinas;

As vacinas injectáveis são as que têm dado melhores resultados:

Tem-se verificado imunização passiva com as vacinas injectáveis.

Geralmente utilizam-se vacinas bivalentes (Vibrio anguillarum e Vibrio ordalii ).

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Controlo:

Peixes vacinados exibem um melhor crescimento e são maissaudáveis;

A presença de LPS estáveis ao calor no sobrenadante da culturaparecem ser responsáveis pelo desenvolvimento da imunidade;

Duas pequenas proteínas (49 e 51 kDa) da membrana externa são

antigénios fortes:

São sensíveis ao calor, o que pode explicar porque se obtém uma maiorprotecção com vacinas inactivadas pelo formol do que pelo calor (Kusudaet al , 1978; Itami & Kusuda, 1980).

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Controlo:

Quimioterapia:

Vários antibióticos têm sido utilizados com sucesso no controlo de V.

anguillarum;

No entanto, os antibióticos são utilizados como aditivos alimentares:

Os peixes doentes não comem, consequentemente, para aquimioterapia ter sucesso terá que ser aplicada no início da infecção;

Os plasmídeos R podem pôr em causa o tratamento com antibióticos(Aoki, 1988).

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Descrição da doença:

Esta bactéria causa a doença chamada pasteurelose:

Também conhecida como pseudotuberculose, devido à sintomatologia queprovoca.

Tem sido responsável por perdas elevadas em aquacultura(40-50%);

Encontra-se em expansão na zona mediterrânea;

Peixes com um peso superior a 30-50 g são resistentes.

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É uma septicemia;

Os sinais clínicos são raros e só surgem em casos agudos;

Internamente observam-se nódulos brancos (rim e baço);

Daí que a doença também seja conhecida como pseudotuberculose.

Originam colónias branco acizentadas.

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Pode observar-se acumulação de material purulento na cavidade abdominal;

Também atinge populações naturais;

A doença ocorre a temperaturas superiores a 18º C.

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Inicialmente designada Pasteurella piscicida devido às características

morfológicas e fisiológicas muito semelhantes a este género:

Estudos taxonómicos detalhados, baseados em:

Sequenciação da subunidade pequena do rRNA;

Hibridação de DNA:DNA;

Revelaram que Pasteurella piscicida estava relacionada com o género Photobacterium (homologiade DNA > 80%).

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Pleomorfismo depende da idade e das condições de cultura;

Não cresce em TCBS;

Sensível ao agente vibriostático e à novobiocina.

Todas as estirpes possuem o mesmo perfíl API 20E - 2005004;

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Características do agente etiológico

Fenotipica e antigenicamente é uma espécie muito homogéneno;

Geneticamente heterogénea:

Por ribotipagem e RAPD verificou-se a existência de 2 clones:

Europa;

Japão e EUA.

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Espécies afectadas:

Na zona mediterrânica - dourada e robalo;

No Japão - yellowtail ( Seriola sp.), ayu ( Plecoglossus altivelis) e mero;

Em Portugal, tem sido isolada de robalo e dourada.

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Órgãos internos de um

alevim de dourada (0,3 g):

Baço inflamado e com nódulos

Fígado inchado;

Intestino inchado.

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Órgãos internos de robalo:

Fígado inchado e congestionado;

Baço inflamado e com módulos;

De uma maneira geral a vesículanatatória não se encontra cheia,

de forma que a maior parte dospeixes moribundos ou mortos,afundam-se para o fundo dotanque.

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Brânquias de robalo:

Grande área de epitélio branquialnecrótico perto de uma zonacongestionada e inflamada.

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Isolamento:

Facilmente isolado em meios de cultura gerais como o TSA, BHIA, NA e agarsangue desde que suplementados com 2% de NaCl;

Também tem sido isolado a partir de MA;

É facilmente isolado a partir do rim e do baço;

A incubação é feita a 22-25 ºC durante 2 a 4 dias.

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Epidemiologia:

Não se conhecem os factores que levam ao surgimento deepizootias:

Pensa-se que a infecção ocorre em água do mar a temperaturas querondam os 25 ºC;

Sobrevive pouco tempo em água doce ou em condições estuarinas;

Não parece ser capaz de sobreviver fora do organismo dos peixes.

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Epidemiologia:

Os mecanismos responsáveis pela patogenicidade ainda sãopraticamente desconhecidos;

Pode entrar num estado viável mas não cultivável, dormente oualterado:

Permite a sobrevivência em água do mar durante 6 - 12 dias, com ummetabolismo reduzido em cerca de 80 %;

Mantém a capacidade patogénica;

Pode levar à transmissão horizontal.

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Epidemiologia:

A infecção ocorre pela via oral (através do alimento) ou através das brânquias,infectando rapidamente os órgãos internos (coração, rim, fígado, baço e secospilóricos);

Ainda não foi possível demonstrar a existência de animais portadores.

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Patogenicidade:

A presença da cápsula protege a bactéria contra a fagocitose:

Permite a sua acumulação e multiplicação no interior dos macrófagos(Nelson et al ., 1989; Elkamel et al., 2003);

A produção da cápsula depende da presença de ferro e da cultura estar emfase exponencial.

A resistência pode estar relacionada com o tamanho do peixe e aeficácia dos linfócitos (Noya et al ., 1995).

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Patogenicidade:

Existem isolados virulentos e não virulentos:

A virulência parece estar relacionada com a presença de uma proteína de56 kDa (AIP56) codificada por um plasmídeo:

É essencial para induzir a apóptose em macrófagos e neutrófilos derobalo (do Vale et al ., 2003; 2005).

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Controlo:

Diferentes estirpes apresentam um padrão semelhante de sensibilidade aosantibióticos:

In vitro são sensíveis à ampicilina e ácido oxolínico e resistentes ao cloranfenicol, oxitetracicilina etetraciclina;

No Japão, devido à utilização intensiva dos antibióticos têm surgido resistências codificadas porplasmídeos (plasmídeos R - cloranfenicol, kanamicina, sulfonamidas, tetraciclina e florfenicol);

Como possuí uma fase intracelular, o tratamento com antibióticos pode não ser efectivo.

Já existem algumas vacinas comerciais.

8/16/2019 Teórica 2 - 2015


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A posição taxonómica de Tenacibaculum maritimum variou ao longo dotempo, tendo tido vários nomes:

Cytophaga marina;

Flexibacter marinus;

Flexibacter maritimus.

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É o agente responsável pela flexibacteriose de peixes marinhos;

A doença por ela causada teve vários nomes ao longo do tempo:

“Gliding bacterial diseases of sea fish”;

“ Eroded mouth syndrome”;

“ Black patch necrosis”.

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Actualmente tem uma distribuição mundial, tendo sido isolada na Europa,

Japão, América do norte e Australia;

Tenacibaculum maritimum afecta tanto juvenis como adultos:

Os juvenis são mais susceptíveis.

A prevalência e a severidade da doença aumenta com a temperatura (acimados 15 ºC);

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Erosão da boca causadapor T. maritimum.

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As lesões no tegumento vão servir como porta de entrada para outras bactérias e mesmo parasitas;

Por vezes ocorre uma infecção sistémica afectando vários órgãos;

Um sintoma menos frequente é o surgimento de lesões necróticas nas brânquias.

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Exemplares de salmão doatlântico com infecçãomúltipla de T. maritimum e Aeromonas salmonicida.

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Em peixes fortemente infectados é frequente observar-se:

Hemorragias petequiais na gordura visceral e intestino;

Acumulação de líquido hemorrágico na cavidade abdominal;

Esplenomegalia.

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As colónias apresentam um cor amarelo claro, planas de bordo irregular;

Bacilo Gram negativo, comprido (até 30 !m), móvel por deslizamento;

Aeróbio estrito.

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Bioquimicamente, T. maritimum é um grupo muito homogéneo;

Geneticamente constitui um grupo homogéneo, já que por RAPD (eatendendo à serotipagem) foi possível distinguir 2 grupos:

Um grupo contendo todos os isolados e solha e dourada;

Segundo grupo contendo os isolados de salmão do atlântico, pregado e yellowtail.

Foram estabelecidos 3 serótipos relacionados com o hospedeiro.

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Espécies afectadas:

Afecta peixes de cultura e peixes do meio natural;

De entre os peixes cultivados, infecta:

Pregado, solha, robalo, salmonídeos e várias espécies de dourada.

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Isolamento :

Para o diagnóstico presumível de Tenacibaculum maritimum,

pode ser utilizado:

A sintomatologia apresentada pelos peixes;

A observação ao microscópio de grupos de bacilos compridos, empreparações temporárias efectuadas a partir das lesões.

Este diagnóstico terá sempre que ser suportado pelo isolamento doagente etiológico ou com a identificação molecular em amostras detecido.

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Isolamento:

A temperatura de incubação varia entre 15 e 34 ºC:

A temperatura óptima é de 25 ºC.

Para o seu crescimento é necessário que o meio de cultura contenha sais:

Os melhores resultados obtêm-se em meios de cultura feitos com água do mar, uma vez que esta bactéria tem uma necessidade estrita de sais, bem como de alguns micronutrientes.

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Isolamento:

É feito em meios de cultura especiais:

Anacker & Ordal que deverá ser feito com água do mar;

Flexibacter maritimus Medium (FMM);

Selective Flexibacter Medium (SFM);

Marine Agar.

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Isolamento:

O meio mais eficaz para o isolamento desta bactéria é o FMM (Pazos et al.,1996);

Depois de se isolar a bactéria, pode utilizar-se o Marine Agar para repicagenssubsequentes.

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Epidemiologia:

Até este momento foram detectados 3 serótipos (O1, O2 e O3), que parecemestar relacionados com o hospedeiro:

O serótipo O1 é constituído por isolados de dourada e pela maioria dos isolados de solha;

O serótipo O2 é constituído por isolados de pregado;

O serótipo O3 é constituído por isolados de solha:

Este serótipo foi estabelecido com isolados portugueses em 2005.

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Epidemiologia:

É capaz de sobreviver por períodos prolongados em água do mar estéril;

O mesmo não se passa com água do mar natural.

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Patogenecidade:

Produz sideróforos;

A adesão (auto-aglutinação das células) tem sido implicada napatogenicidade;

Produzem hemolisinas e ECP’s.

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Controlo:

Até 1999, o controlo de Tenacibaculum maritimum só podia ser efectuadocom antibióticos:

Nesse ano, o grupo de Santiago de Compostela desenvolveu a única vacinacomercial contra esta bactéria:

Ela foi desenvolvida para proteger rodovalhos.

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Controlo:

Devido à existência de diferentes serótipos, relacionados com a espécie depeixe de onde foram isolados, terá que ser efectuada uma nova formulaçãopara solha;

Este trabalho já se encontra em curso da Universidade de Santiago e com valores de protecção superiores a 90% (Romalde et al ., 2005).

O controlo pode ser ainda efectuado com base em substâncias anti-microbianas.

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