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  • 7/24/2019 tesis sobre cultivo de trufas

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    FACULTAD DE CIENCIAS AGRARIASESCUELA DE AGRONOMA

    MANEJO DE BASES DE INTERCAMBIO Y METALES CATINICOS ENSUELOS MICORRIZADOS CON Tuber melanosporum

    MEMORIA DE TTULO

    SERGIO FABIN CABELLO LEIVA

    TALCA - CHILE

    2009

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    INGENIERO AGRNOMO

    TALCA, 2009

    APROBACIN

    Profesor Gua:

    Ingeniero Agrnomo, Dr. Roxana Lpez Emparan, Profesora de la Facultad de Ciencias

    Agrarias, Universidad de Talca

    Profesor informante:

    Licenciado en Biologa, Dr. Alejandro del Pozo Lira, Profesor de la Facultad de Ciencias

    Agrarias, Universidad de Talca

    Fecha de presentacin de la Defensa de Memoria: 12 de Agosto 2009

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    Agradecimientos

    Quiero agradecer principalmente a mi madre Rosa Leiva Prez, mi padre Sergio

    Cabello Duarte, mi abuelo Galvarino Leiva Leiva y mi abuela Clara Prez Lpez, quienesson todo para m en esta vida, ellos me ensearon y mostraron lo que es la vida, desde los

    pequeos detalles hasta las ms grandes lecciones de vida, junto a ellos he pasado losmejores momento de mi vida y espero seguir las enseanzas que me entregan da a da,

    son mi ejemplo a seguir y espero algn da poder llegar a parecerme un poco a ellos, yaque si lograse ese objetivo, estoy seguro que sera una gran persona. Les agradezco desdelo mas profundo de mi corazn sin encontrar las palabras para expresarles todo el amorque siento por uds.

    Agradecerle a mis hermanas Pamela y Natalia, las cuales siempre me han motivadoa seguir adelante con fuerza y entusiasmo, a mi polola Carolina, persona que se hizopresente en mi vida hace siete aos y que me ha ayudado en todo lo que he enfrentado,siendo un apoyo fundamental, agradecerle por todo el amor que me ha entregado y por

    toda su dedicacin. Agradecerle a una personita muy querida llamada Antonia, es misobrina-ahijada, ella siempre me da todo su cario y me da fuerzas con sus besos yabrazos incluso con sus maas, es una bendicin en mi familia. Un reconocimiento a mi

    Ta Mery quien se ha esforzado siempre por m incluso al extremo de considerarme su hijo,a mi primo pequeo Nicols, quien estoy seguro que va a ser muy grande. Un saludo especial a mis amigos de siempre Juan Ral, Vctor y a Pablo poraguantarme tantos aos, por apoyarme en momentos difciles y agradecerles todo lo que

    hemos vivido juntos, todos aquellos momentos que a veces recordamos con nostalgia, peroque permanecern intactos en nuestro interior y seguiremos compartiendo en cada una denuestras reuniones, mis amigos de siempre a los cuales quiero mucho. Un saludo afectuoso al to Juan y a la ta margarita quienes siempre se han

    preocupado como si fuese un integrante mas de su familia, se los agradezco de corazn.Agradecer tambin a una persona que se transform en mi familia y padre espiritual en elviejo continente, el cual me entreg su apoyo, cario y experiencia, Padre Juan un abrazocarioso

    Un reconocimiento especial a mi colegio I.R.F.E., establecimiento rico en capitalhumano, lleno de valores y metas que me gui a la hora de seguir estudiando, un saludo y

    en particular una abrazo al Padre Lucho. Un abrazo a mis amigos de la Universidad, a mi queridsima amiga Silvia (Shivy)

    quien me a ayudado mucho en esta etapa de mi vida un apoyo fundamental, a mi amigoLeonel, Jorge, Gregorio, Mauro, Paloma, Carlitos, Erick y Macarena, con los cuales hemos

    pasado momentos de estudio intenso hasta los mejores momentos uno puede tener en laUniversidad, amigos de verdad que siempre estn a mi lado y me ayudaron todos los das

    de universidad, los quiero mucho. Un reconocimiento especial a mi amigo y Profesor Patricio Peailillo, quien me ha

    aconsejado y guiado en este proceso, a la Profesora Gilda carrasco, Profesor ClaudioSandoval, al Profesor Miguel Urrestarazu a la Profesora Roxana Lpez, al ProfesorAlejandro del Pozo, la Directora Paula Manriquez y a la Ta Paty, personas que fueron

    fundamentales para cumplir esta meta en mi vida, y realizarla con xito. Etapa Universitaria que llega a su fin, pero que me enriqueci de una forma muygrata, espero poder seguir aprendiendo y creciendo en lo personal, les agradezco a todaslas personas que me han ayudado y enseado en esta vida.

    Con cario

    Sergio.

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    Autorizacin para la publicacinde memorias de Pregrado y tesis de Postgrado

    Yo, Sergio Fabin Cabello Leiva cdula de Identidad N 16.165.252-0autor de la memoria o tesis que se seala a continuacin, autorizo a la Universidad deTalca para publicar en forma total o parcial, tanto en formato papel y/o electrnico, copiasde mi trabajo.

    Esta autorizacin se otorga en el marco de la ley N 17.336 sobre Propiedad Intelectual,

    con carcter gratuito y no exclusivo para la Universidad.

    Ttulo de la memoriao tesis:

    MANEJO DE BASES DE INTECAMBIO Y METALES CATINICOSEN SUELOS MICORRIZADOS CON Tuber melanosporum.

    Unidad Acadmica: Facultad de Ciencias Agrarias, Escuela de Agronoma.

    Carrera o Programa: Agronoma

    Ttulo y/o grado alque se opta:

    Ingeniero Agrnomo y Licenciado en Agronoma

    Nota de calificacin 6,7

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    Firma de Alumno

    Rut: 16.165.252-0

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    Resumen.Uno de los principales factores para el desarrollo y crecimiento de la trufa (T.

    Melanosporum)en el suelo es el nivel de calcio total (Ca), el cual debe alcanzar niveles

    aproximados de 30.000 mg*kg-1. Las incubaciones rpidas de 24 horas a 70 C en estufas,

    son un mtodo rpido y confiable para determinar la capacidad tampn y dosis de

    enmiendas calcreas para distintos tipos de suelo. En este estudio en particular se utiliz el

    mtodo de incubacin rpida para determinar las dosis de enmiendas calcreas para seis

    suelos de rdenes Andisol, Alfisol, Molisol y Inceptisol, a un nivel de calcio total cercano a

    30.000 mg*kg-1. Los resultados de la incubacin muestran que los suelos andisoles,

    molisoles y alfisoles necesitan dosis de enmiendas calcreas superiores, en comparacin

    con enmiendas adicionadas a un suelo Inceptisol, para alcanzar niveles de 30.000 mg*kg-1

    de calcio total. La adicin de altas dosis de enmiendas calcreas desequilibran las

    relaciones existentes entre bases de intercambio, por lo cual es necesario adicionar niveles

    particulares de magnesio segn el orden de suelo; 824, 600, 570 y 491 mg kg-1 en un

    suelo Andisol, Molisol, Alfisol e Iceptisol, respectivamente, con el fin de obtener niveles

    cercanos a 2,9 cmol(+) de magnesio disponible. Caso similar se observ en el potasio

    disponible en el cual se debe adicionar niveles 614, 790, 800 y 680 mg kg-1, en un suelo

    Andisol, Molisol, Alfisol e Inceptisol, respectivamente, con el fin de obtener niveles

    cercanos a 1,45 cmol(+)kg de potasio disponible en cada suelo, y en consecuencia

    logrando un equilibrio en las relaciones anteriormente mencionadas. La adicin de

    elevadas dosis de magnesio (4.500 mg kg-1) a suelos que presentan niveles cercanos a

    30.000 mg kg-1de calcio total, increment la disponibilidad de calcio en un 21 y 7% en el

    suelo Andisol e Inceptisol, respectivamente. Los resultados obtenidos en este estudio

    indican que la metodologa de incubacin rpida en estufas son una confiable y eficiente

    herramienta para determinar las dosis de enmiendas calcreas y bases de intercambio

    necesarias para el adecuado crecimiento y desarrollo de T. melanosporum en suelos de

    distinto origen y propiedades fsico qumicas.

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    Palabras Clave: truficultura, enmienda calcrea, cationes de intercambio.

    Abstract. One of the main factors for the development and growth of the truffle (T.

    melanosporum) in soil is the level of total calcium (Ca), which should reach levels around

    30,000 mg * kg-1. Quick incubations of 24 hours at 70 C are a fast and reliable method to

    determine the buffering capacity and lime amendments dose for different soils.. In this study

    used the rapid incubation method for determining doses for six soil belonging to the orders

    Andisols, Alfisols, Mollisols and Inceptisols, a total calcium level close to 30,000 mg * kg-1.

    The results show that incubation Andisols soils, Mollisols and Alfisols need higher levels of

    lime amendments compared with Inceptisols, to reach levels of 30,000 mg * kg-1 total

    calcium. The addition of high doses of calcareous amendments unbalance the relationship

    between base exchange, which is necessary to add particular levels of magnesium in the

    order of soil, in the case of Andisols , Mollisols, alfisols and inceptisols is necessary to add

    824, 600, 570 and 490 mg kg-1 of magnesium, to obtain levels close to 2.9 cmol (+) of

    magnesium available. Similar case is observed in the potassium available. In the case of

    Andisols, Mollisols, alfisols, and inceptisolsis is necessary to add 614, 790, 800, and 680

    mg kg-1 of potassium respectively, in order to obtain levels close to 1.45 cmol (+) kg of

    potassium available on each soil and thus striking a balance in the relations above.

    The addition of high doses of magnesium (4.500 mg kg-1), in soils that have total calcium

    levels close to 30,000 mg kg-1, increased the available Calcium in 21 and 7% in Andisols

    and Inceptisols, respectively. The results indicate that the methodology of rapid incubation

    are a reliable and efficient tool to determine the doses of lime amendments and exchange

    bases necessary for Conditioning soils with different physicochemical properties for

    cultivation ofT. melanosporum.

    Key words: truffle, lime amendment, cation exchange.

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    NDICE

    ndice general Pgina

    1 INTRODUCCIN...... 1

    2 REVISIN BIBLIOGRFICA. 3

    2.1 La trufa negra,Tuber melanosporum 32.1.2 Tipo de Micorriza.. 32.1.3 Papel de las Micorrizas 42.2 Ciclo Biolgico de la Trufa.. 42.3 Hbitat de la Trufa negra 62.3.1 Distribucin Actual.. 62.3.2 Plantas simbiontes.. 62.3.3 Clima. 72.3.4 Suelo. 7

    2.3.5 El quemado 102.4 Viveros y la produccin de planta micorrizada 102.5 Los Precios de la Trufa 112.6 Cultivo deTuber melanosporumen Chile 112.6.1 reas potenciales en Chile. 122.6.2 Establecimiento de plantaciones Truferas en Chile 132.6.2.1 Orden Andisol 132.6.2.2 Orden Alfisol.. 132.6.2.3 Orden Inceptisol 142.6.2.4 Orden Molisol. 14

    3 MATERIALES Y MTODOS.. 15

    3.1 Ubicacin del experimento.. 15

    3.2 Primera Incubacin: Efecto de la aplicacin de dosis crecientes de CaCO3 153.2.1 Evaluacin de la priemra incubacin. 173.2.2 Anlisis estadstico.. 173.3 Segunda Incubacin: Efecto de la adicin de Mg y K en las relaciones de las

    bases de intercambio en suelos con niveles de 30.000 mg kg-1de calcio total. 173.3.1 Tratamientos Mg y K 183.3.2 Evaluacin Segunda Incubacin 193.3.3 Anlisis estadstico.. 19

    4 RESULTADOS Y DISCUSIN.. 20

    4.1 Determinacin del Calcio Total en seis series de suelo con adicin de tresdosis de Ca 20

    4.2 Determinacin de pH, CaCO3total y activo en suelos incubados... 22

    4.3 Efecto de las adicin de CaCO3 sobre las Bases de Intercambio Catinico

    y las relaciones Ca/Mg y K/Mg... 24

    4.4 Disponibi lidad de Magnesio en suelos con 30.000 mg*kg-1 de Calcio Total... 25

    4.5 Disponibilidad de Potasio en suelos con 30.000 mg*kg-1 de Calcio Total... 274.6 Efecto del Magnesio adicionado sobre el Calcio disponible presente

    en el suelo.. 28

    4.7 Perspectivas... 30

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    5 CONCLUSIONES. 31

    6 BIBLIOGRAFA.. 32

    NDICE DE CUADROS

    Cuadro 1Dosis de Calcio aplicado a seis suelos que fueron incubados en estufasa 60 C por 24 Horas 16

    Cuadro 2

    Dosis de CaCO3para llevar los niveles de Ca Total a 30.000 mg. de Ca kg-1

    18Cuadro 3 Tratamientos de Dosis de Magnesio y Potasio en suelos con un calcio

    total de 30.000 mg*kg-1.... 19

    Cuadro 4 Efecto de las dosis de CaCO3 sobre el Ca, Mg, K, Na disponible y sus

    Relaciones.. 25

    NDICE DE FIGURAS

    Figura 1 Calcio Total en seis suelos con adicin de 3 dosis de CaCO3..... 20

    Figura 2 CaCO3total, activo y pH frente a tres dosis crecientes de CaCO3... 23Figura 3 Magnesio disponible frente a tres dosis crecientes de MgO. 26Figura 4 Disponible frente a tres dosis crecientes de KCl 27Figura 5 Efecto de tres dosis de MgO sobre el Calcio disponible de los suelos 29

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    1. INTRODUCCIN

    La trufa negra (Tuber melanosporum) es un hongo Ascomycete hipogeo del orden

    Pezizales, formador de ectomicorrizas, con alto potencial econmico (mas de 1000/kg)

    dado a su alto valor culinario por su intenso aroma (Delmas et al.1981; Raglione et al.

    1992).

    Se desarrolla de forma natural en el sur de Europa, entre los paralelos 37 y 47 N. Se

    distribuye principalmente en el sur de Francia, este de Espaa y centro-norte de Italia

    (Muret et al. 2004). Las plantaciones truferas se realizan por ms de 30 aos, con planta

    micorrizada, muchas de las cuales ya han entrado en produccin (Reyna, 2007).

    Diversas investigaciones se han dirigido al estudio de propiedades del suelo y el

    impacto de stas en el desarrollo de trufas, incluyendo comparaciones de requerimientos

    fsico-qumicos de suelos en diferentes especies de trufas (Delmas et al.1981; Raglione et

    al. 1992), anlisis en la variabilidad fsica de suelos (Bencivenga et al. 1988, 1992), y

    estudios en general de parmetros de humedad de suelos en relacin con desarrollo y

    produccin de T. melanosporum (Letacon et al. 1982).

    Actualmente existe un nmero limitado de estudios que relacionan propiedades

    qumicas del suelo con el desarrollo y produccin de trufas. A este respecto, existen

    investigaciones que demuestran que la elevada concentracin de carbonato activo y Ca2+

    intercambiable, en conjunto con un gran tamao de zonas desprovistas de vegetacin,

    conocidas como quemados, son factores determinantes en el desarrollo de T.

    melanosporum(Garca-Montero et al. 2007). El carbonato activo es muy importante para T.

    melanosporum debido a su capacidad de regular pH y Ca2+ intercambiable, adems de

    participar en la organizacin y mantencin en la estructura del suelo, demostrando una

    gran importancia en la nutricin de Trufas (Garca-Montero et al. 2006).

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    En Chile los estudios se han orientado a inoculacin de dos especies de Nothofagus

    (Nothofagus oblicua, N. glauca) con esporas de T. melanosporum, en las cuales las

    semillas inoculadas de N. oblicua no se vieron afectadas por el alto pH del suelo requerido

    para dicha inoculacin, mostrando una proporcin de micorrizacin menor a Q. ilexy similar

    a Q. robus, lo que abre la posibilidad de cultivar trufas con especies nativas de la regin

    (Prez et al. 2007).

    En nuestro pas, desde la Regin Metropolitana hasta la IX Regin, se estn realizando

    plantaciones de Quercus ilex, Q. robus y Corylus avellana, inoculados con T.

    melanosporum. Sin embargo, a pesar de que los suelos se han encalado, stos pertenecen

    a distintos rdenes y presentan distinta capacidad tampn. Por lo tanto, resulta de gran

    inters determinar una dosis adecuada de CaCO3y bases de intercambio para cada orden

    de suelo en especfico, con el fin de favorecer el desarrollo y crecimiento de T.

    melanosporumen simbiosis con su hospedero.

    Hiptesis

    Al estimar dosis adecuadas de CaCO3 y bases de intercambio para cada orden de

    suelo, se incrementar la disponibilidad de nutrientes para Quercus ilex, Q. robus y Corylus

    avellana.

    Objetivo general

    Estimar la dosis de CaCO3y su relacin con las bases de intercambio en cuatro ordenes

    de suelo establecidos con Quercus robur, y Q. ilexinoculados con T. melanosporum.

    Objetivos especficos

    - Determinar el efecto de las distintas dosis de CaCO3 sobre la disponibilidad de Ca

    disponible y su relacin con la disponibilidad de bases de intercambio en 6 series de suelos

    (4 ordenes de suelo) establecidos con T. melanosporum. (primera incubacin).

    Ajustar la relacin Ca/Mg/K/Na en 4 ordenes de suelos ajustados a un nivel de Ca total

    de 30.000 mg kg-1

    (segunda Incubacin).

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    2. REVISIN BIBLIOGRFICA

    2.1 La trufa negra, Tuber melanosporum

    La trufa negra pertenece a la clase Ascomycetes, gnero Tuber, especie Tuber

    melanosporum (Garca-Montero et al., 2006). En la actualidad se denomina trufa a todos

    los hongos hipgeos que forman cuerpos fructferos subterrneos (llamados carpforos) de

    alto valor culinario dado al intenso aroma que poseen (Prez et al., 2007). T.

    melanosporum se incluye dentro del grupo de hongos simbiontes, los cuales necesitan

    asociarse a races finas de algunas plantas superiores como las encinas, robles, etc., sin

    las cuales no podran completar su ciclo vital de forma natural. En el caso de la trufa esta

    asociacin simbitica recibe el nombre de micorriza (Molina et al., 1992).

    El conocimiento de las trufas y su utilizacin en la gastronoma, se remonta a

    principios de nuestra era, siendo citado por asirios, judos, egipcios, romanos y griegos, al

    respecto se le otorga un gran atractivo el mbito gastronmico como as poderes mgicos

    (Delmas, 1983).

    2.1.2. Tipo de Micorriza

    Reyna (2007) define que una micorriza es bsicamente una raicil la muy fina de una

    planta rodeada o penetrada en mayor o menor grado por el micelio de un hongo. Basados

    en esta definicin es posible clasificar a la Trufa como un hongo que establece micorrizas

    Ectotrficas o Ectomicorrizas, las cuales son las micorrizas mas corrientes que se forman

    en ambientes forestales naturales. En estas raicillas el hongo forma un manto o vaina,

    penetrando intercelularmente en las primeras capas de clulas dando lugar a la red de

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    Hartig. Slo entre un 3 y 5% de los vegetales forman Ectomicorrizas, sin embargo su

    importancia forestal es enorme (De Miguel et al., 1997).

    2.1.3. Papel de las Micorrizas

    Los beneficios de las micorrizas son numerosos, siendo el de mayor importancia el

    aumento de volumen de suelo explorado, debido al aumento de forma considerable de la

    superficie radical del vegetal en contacto con la solucin del suelo (Dominquez et al., 2008).

    Segn Reyna (2007) los rboles micorrizados adquieren una serie de ventajas que

    les permiten prosperar de mejor forma en el medio natural, distinguindose principalmente

    los siguientes beneficios.

    Mejora la absorcin de nutrientes, distinguindose la absorcin de fsforo, la cual

    aumenta de manera considerable luego de establecerse la relacin simbitica. En

    ste sentido hay estudios que evidencian que la asimilacin de ste mejora hasta

    10 veces.

    La planta micorrizada posee mayor competencia para absorber agua, lo que le

    hace ser mas competitiva al verse enfrentada a situaciones de estrs.

    La trufa produce ciertos antibiticos de carcter aleloptico que evita competencia

    de otras especies vegetales, dando como resultado reas desprovistas de

    vegetacin alrededor de su hospedero (quemados).

    Las micorrizas tienen la capacidad de mejorar la estructura del suelo (Honrubia et

    al., 1992 citado porReyna, 2007). Los suelos micorrizados tienen, por lo general,

    mejor aireacin y drenaje. Muchos truferos se basan en este principio, valorando

    que tan esponjoso se encuentre el suelo al caminar sobre ste.

    2.2. Ciclo biolgico de la Trufa

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    La vida de la Trufa negra transcurre por distintas etapas, que en conjunto son la

    sucesin de procesos vitales similares a la de cualquier ser vivo, nacer, crecer,

    reproducirse y morir. Es por lo anterior que sus primeros estados son vegetativos, mientras

    que la trufa, su estructura reproductora o carpforo se produce en fases tardas

    (reproductivas) (Reyna, 2007).

    La etapa vegetativa del hongo contempla desde germinacin de la espora hasta la

    fructificacin, pasando rpidamente por una fase biselar y una larga fase micorrcica

    (Reyna, 2007).

    Luego de ser liberadas de las ascas las esporas llegan al suelo, para ser

    arrastradas por las lluvias hacia el interior del suelo, adems de eliminar los inhibidores

    germinativos propios de la espora. Al alcanzar temperatura y humedad adecuada la espora

    germina y produce un filamento de micelio que ramifica rpidamente, l cual debe alcanzar

    contacto con una raicilla a la cual minorizar. Existen evidencias que las races emiten

    ciertos exudados para estimular al micelio para su aproximacin producindose una

    infeccin primaria. Luego se produce la infeccin secundaria, en la cual el micelio sigue

    creciendo e infectando nuevas raicillas (De Miguel et al., 2005)).

    Al encontrase en una situacin ambiental adecuada T. melanosporumpuede llegar

    a fructificar, es decir puede llegar a la fase reproductiva con formacin de carpforos (la

    trufa en s) que poseen el valor culinario antes citado. Estos carpforos es posible

    encontrarlos en las truferas a partir de los 4 a 12 aos posteriores a la plantacin, siendo

    un tiempo de estimacin muy variable, influenciado por muchos factores climticos y

    edficos (Suz et al., 2008).

    En la actualidad se considera que T. melanosporum podra tener una fase

    saprftica, es decir que en una fase del desarrollo no dependera de forma directa de su

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    conexin con el rbol (Giovannetti et al, 1992 citado por Reyna, 2007). A finales de

    primavera y principios del verano comienza dicha fase, el carpforo se independiza de

    micorrizas y comienza a vivir de sustancias orgnicas presentes en el suelo (Barry et al.,

    1994 citado porde Miguel y Reyna, 2007). En esta fase se produce un engrosamiento de la

    trufa, necesitando precipitaciones superiores a 300 mm. Con dicho nivel de precipitaciones

    es posible obtener un desarrollo adecuado del carpforo, desde un punto de vista

    comercial (De Miguel y Reyna, 2007).

    A finales de otoo las trufas ya se encuentran maduras, lo que se prolongar hasta

    principios de primavera. Al estar maduro el carpforo liberar progresivamente fuertes

    aromas que atraern a todo tipo de mamferos (en Europa se distinguen, jabales, tejones,

    zorros, roedores, etc.) e insectos que consideran la trufa un potencial alimento. De esta

    forma los animales transportan las esporas, en su piel o tracto intestinal, diseminando el

    hongo en las cercanas o a varios kilmetros desde su origen (Jeandroz et al., 2008).

    1..3Hbitat de la Trufa negra

    1..3.1 Distribucin Actual

    Tuber melanosporum vive de forma natural en el sur de Europa, de forma

    preferencial en suelos calcreos de Espaa, Francia e Italia, aproximadamente en los

    paralelos 37 y 49 Norte (Suz et al.,2008).

    1..3.2 Plantas simbiontes

    La trufa negra es capaz de formar micorrizas, de forma natural o con la ayuda del

    hombre con ciertos gneros de plantas, de entre los cuales se distingue: Quercus, Fagus,

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    Popalus, Salix, Ostrya, Agnus, Betuna, Corylus, Castanea, Tilia, Cistus, Fumana,

    Eucalyptus, Pinus, Abies y Cedros. (Ceruti et al., 2003 citado porGarca et al., 2007)

    Pocas de estas especies son capaces de mantener una produccin trufera normal.

    En Espaa, las ms frecuentes son las encinas (Quercus ilex subsp. ilex y Q. ilex subsp.

    ballota) el quejigo (Quercus faginea subsp. faginea), el roble pubescente (Quercus

    humulis), el roble cerrioide (Quercus x cerrioides), la coscoja (Quercus coccifera) y el

    avellano (Coryllus avellana) (Garca et al., 2007).

    En Espaa las encinas son los rboles ms extendidos para la truficultura,

    especialmente Quercus ilex(Garca et al., 2007).

    En Chile los estudios se han orientado a inoculacin de dos especies de

    Nothofagus (Nothofagus oblicua, N. glauca) con esporas de T. melanosporum, en las

    cuales, las semillas inoculadas de N. oblicua no se vieron afectadas por el alto pH (pH

    superio a 7) del suelo requerido para dicha inoculacin, mostrando una proporcin de

    micorrizacin menor a Q. ilexy similar a Q. robur.Abriendo la posibilidad de cultivar trufas

    en la regin (Prez et al., 2007).

    1..3.3 Clima

    T. melanosporum crece y se desarrolla de forma natural bajo clima mediterrneo

    templado y continental, con precipitaciones anuales superiores a los 350 mm, desarrollando

    una cierta adaptacin a la sequa en de verano (no muy prolongada), evitando climas

    tropicales y climas de alta aridez (Jeandroz et al., 2008)

    2.3.4. Suelo

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    8

    El rango de altitud menor en que se desarrolla la trufa negra se muestra en Francia

    e Italia en donde alcanza los 100 m, y su altitud mxima se observa en el sur de Espaa

    alcanzando altitudes de hasta 1800 m, no encontrndose presente en la alta montaa

    (Jeandroz et al., 2008).

    Tuber melanosporum se desarrolla en suelos calizos que presentan una alta

    permeabilidad, aireacin y un buen drenaje. Evita suelos pesados y con problemas de

    encharcamiento (Pomarico et al.,2007).

    Los rangos considerados adecuados para partculas superiores a 2 mm en suelos

    truferos es muy variable, oscilando entre el 0,2 y el 92% de pedregosidad en el perfil. La

    pedregosidad superficial es un elemento muy valorado por los truferos, ya que contribuye al

    drenaje y aireacin del suelo, captacin de calor en inverno, disminucin de la evaporacin

    en verano, proteccin contra compactacin y erosin producida por el impacto de la gota de

    lluvia. Pudiendo llegar a explicar el aumento de hasta un 24% en la produccin de trufas al

    ayudar de forma significativa la aireacin y el drenaje.

    Considerando como textura a la proporcin en el suelo de arena, limo y arcilla. El

    mejor desarrollo de las trufas se logra bajo textura franca, franco arcillosa y franco limosa,

    evitando texturas extremas de suelo (Reyna et al., 2007).

    Los rangos deseados de pH. para T. melanosporum van desde 7,5 a 8,5 (Prez et

    al., 2008). Se considera requisito indispensable para el cultivo de T. melanosporum la

    presencia de carbonato de calcio, ste proviene del material originario (roca madre) y/o de

    materiales gruesos (pedregosidad). El carbonato de calcio es posible de encontrar en

    partculas finas como arena, limo y arcillas o bien de forma solubilizada. (Reyna et al.,

    2007).

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    La caliza total (carbonato de calcio) es la medida de partculas finas de caliza con

    dimetro menor a 2 mm que se encuentran presentes en el suelo. En truferas silvestres se

    mueve en rangos de 0 a 84%. La caliza activa es una medida de la fraccin mas fina y de

    mayor solubilidad, sta vara entre el 0,1% y el 30%. Finalmente, el calcio intercambiable

    es la medida de calcio en solucin que se encuentra disponible para las races de las

    plantas y micelios del hongo (Reyna et al., 2007).

    Segn Garca-Montero (2006) los suelos que presentan un alto porcentaje de caliza

    activa presentan un 40% de incremento en la produccin de trufa respecto a otros que no

    posean bajos niveles de sta. Esta caliza activa proviene de la roca calcrea y es

    susceptible a la movilizacin en el perfil debido a su bajo dimetro, adems de ser muy

    activa qumicamente, sta representa una importante reserva de calcio intercambiable, y

    mantienen a ste en niveles altos equilibrando el complejo de cambio. A su vez la caliza

    activa tiene una importante participacin en la regulacin del pH, mantencin y

    organizacin de la estructura del suelo.

    La materia orgnica en el suelo, representa una fuente y reserva de nutrientes para

    los vegetales, as como a la vez aumenta la agregacin del suelo, porosidad y capacidad

    de retencin de agua. Se ha observado en truferas silvestres un rango bastante amplio de

    materia orgnica que va desde 0.5% hasta 17%. Para plantaciones truferas se

    recomiendan rangos de 1 al 10 % de materia orgnica presente en el suelo (Reyna et al.,

    2007).

    La relacin C/N es un indicador de evolucin y el grado de humificacin en el que

    se encuentra la materia orgnica. En truferas silvestres se han medido relaciones C/N de

    entre 5 y 20, siendo recomendado para plantaciones truferas valores de entre 5 y 15

    (Reyna et al., 2007)

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    La conductividad elctrica es la medida de sales presentes en el suelo. En suelos

    truferos silvestre es un parmetro estable, sin grandes variaciones que se mantienen en

    niveles bajos, no encontrndose truferas silvestres en suelos salinos (Reyna et a.l, 2007).

    Elevados valores en conductividad elctrica pueden deberse al material originario o

    a prcticas de sobre fertilizacin. Para el cultivo de la trufa se recomienda que los valores

    sean inferiores a 0,35 mmhos/cm (medida en solucin 1:5) (Reyna et al., 2007).

    Se ha observado que la importancia de la adicin de fertilizantes que contengan

    nitrgeno, fsforo y potasio en la produccin trufera es baja. Sumado a esto, el papel de las

    micorrizas mejora la capacidad de asimilacin por las plantas de estos nutrientes, en sus

    formas orgnicas e inorgnicas, haciendo innecesaria su aplicacin externa en la mayora

    de los casos. Es de considerar que un exceso de nutrientes puede afectar la micorrizacin

    y por ende, la produccin de T. melanosporum, ya que la planta se apoya en las micorrizas

    para suplir deficiencias o mejorar su nutricin (Domnguez et al., 2008)

    2.3.5 El quemado

    El quemado se conoce como la formacin de claros en la vegetacin, presentando

    un color ms claro en superficie y resultando ms esponjoso al pisarlo. El quemado se

    produce por un efecto fitotxico de los exudados producidos por los micelios del hongo al

    acercarse a la superficie, inhibiendo la germinacin de semillas que se encuentren en

    cercanas (Garca-Montero et al., 2007).

    Garca-Montero (2007) propone que la produccin deT. melanosporum y el tamao

    de los quemados se relaciona de forma significativa, es decir, apoya la tesis del

    conocimiento emprico de muchos truficultores que dicen que a mayor tamao del quemado

    mayor ser la produccin de trufas, pero a la vez muestra que el tamao del quemado es

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    solo un indicador y que no es una medida absoluta, ya que tambin influye la topografa, la

    caliza activa, el rbol con el cual se est realizando la simbiosis, entre otros factores.

    Es de considerar que el quemado aparece antes de la produccin de la trufa, pero

    no garantiza totalmente que dicha produccin sea efectiva (Suz et al., 2008)

    1..4 Viveros y la produccin de planta micorrizada

    La produccin controlada de planta micorrizada con Tuber melanosporum,es una

    de las bases actuales de la truficultura moderna. La micorrizacin de las plantas es un

    proceso que en la naturaleza se da de forma espontnea. La posibilidad de inducir

    micorrizacin en vivero es probablemente el descubrimiento que ha dado ms avance a la

    truficultura (Reyna et al., 2007).

    La micorrizacin controlada consiste bsicamente en poner en contacto las races

    de una planta husped con las esporas o el micelio del hongo, bajo condiciones

    ambientales y metodologa determinada, que busca asemejarse a las condiciones

    naturales. La intervencin del hombre se limita tan solo en colocar en contacto al hongo

    con la raz de su futuro hospedero y a dar condiciones ambientales adecuadas. En el ao

    1996 en Francia se contabilizaban 30 empresas y en Espaa 21 empresas dedicadas a

    ste rubro (Reyna et al., 2007).

    1..5Los precios de la Trufa

    Los precios de la trufa en los mercados internacionales presentan fuertes variaciones

    segn en la estacin en la que se trancen, sta posee un alto potencial econmico,

    llegando en muchos casos a 1.000 /kg. El precio medio de la trufa en la temporada

    2005-2006 en Espaa fue de 380 /kg mientras que en Francia fue de 460 /kg

    (Garca-Montero et al., 2007)

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    Los precios en otros mercados internacionales pueden llegar a ser an mucho ms

    altos, de esta forma no es difcil encontrar trufa fresca en Paris a 3000 /kg (Jeandroz et al.,

    2008)

    Trufa de primera calidad envasada en Londres a 4.000 /kg, pero si es en fresco

    puede alcanzar los 5.040 /kg (Samils et al., 2003).

    2.6 Cultivo de Tuber melanosporumen Chile

    En la actualidad Chile cuenta con gran potencial para el cultivo de T.

    melanosporum al poseer climas adecuados para el buen desarrollo del hongo, as como

    tambin posibles hospederos nativos (Prez et al., 2007).

    Chile cuanta con la ventaja comparativa de producir en contra estacin a los

    productores del hemisferio Norte, lo que le da la posibilidad de ocupar nichos de mercado

    en los cuales se presenta escasez de trufa (Prez et al., 2007).

    2.6.1 reas potenciales en Chile

    Chile posee algunas zonas con caractersticas agroclimticas ideales para el

    desarrollo de la truficultura, adems de su posicin geogrfica, lo cual ha generado a travs

    del tiempo una baja presencia y diversidad de hongo ectomicorrcicos que pudiesen

    competir con T. melanosporum (Ramrez, et al., 2003).

    Las reas con potencialidad es posible encontrarlas en sectores de la VI y VIII

    regin (34 a 38 de latitud Sur), aunque tambin es posible extender a reas especficas

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    de la IX y X Regin (38 a 40 latitud Sur) y hacia el norte hasta la regin metropolitana

    (Ramirez et al., 2007)

    En Chile la gran parte de los suelos de la zona centro sur presentan un pH que

    vara entre el cido a neutro (rangos de pH entre 5,5 y 7,0), por lo cual es necesario

    realizar fuertes enmiendas de cal para suplir este dficit, con el posterior manejo de las

    propiedades fsico-qumicas que esto adjunta. Adems se debe considerar la capacidad de

    drenaje de stos suelos, en donde el agua debe infiltrarse libremente evitando

    encharcamientos. (Ramrez et al., 2007).

    Existen reas potenciales en la regin metropolitana (Alto Maip) y la VI regin,

    donde algunos suelos derivan de depsitos aluviales con alto contenido de material

    calcreo, bajando considerablemente las necesidades de encalado (Ramrez et al., 2005).

    2.6.2 Establecimiento de plantaciones Truferas en Chile

    En la actualidad el total de la superficie plantada en Chile es de aproximadamente

    50 ha, para fines del 2007. Todas estas plantaciones son muy jvenes para entrar en

    produccin ya que se establecieron a fines del ao 2003 en la VII regin (en su mayora)

    (Ramrez et al., 2007).

    Los hospederos micorrizados en vivero fueron Quercus robur, Quercus ilex y

    Coryllus avellana, siendo sta ultima la que ha presentado mayores problemas de

    contaminacin por otras ectomicorrizas nativas, generando una competencia con T.

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    melanosporum, concordando con la experiencia en plantaciones europeas (Ramrez et al.,

    2007).

    Entre los rdenes en que se desarrolla el cultivo de T. melanosporum en Chile se

    distinguen los siguientes

    2.6.2.1 Orden Andisol

    Suelos derivados de cenizas volcnicas, con un elevado contenido de materia

    orgnica en su perfil. Presentan un alto contenido de arcillas amorfas (Alofan) y debido a

    esto pueden fijar grandes cantidades de fsforo. Son aptos para una gran gama de cultivos

    (Honorato, 2000).

    2,6.2.1 Orden Alfisol

    Caracterizaos por un horizonte subsuperficial de enriquecimiento secundario de

    arcillas cristalinas, horizonte desarrollado en condiciones de acidez o alcalinidad sdica. Se

    asocian por lo general a un horizonte superficial claro pobre en materia orgnica y de poco

    espesor. Estos suelos generalmente presentan de una moderada a alta saturacin de

    bases en su perfil (Honorato, 2000).

    1..5.3.3 Orden Molisol

    Suelos que presentan un perfil profundo y un horizonte superficial negro con un alto

    contenido de materia orgnica, que se ha formado en condiciones de estepa o pradera.

    Suelos de alta fertilidad que con un buen manejo pueden tener altos rendimientos con una

    gran gama de cultivos. Presentan en su perfil un alta saturacin de bases (Honorato,

    2000).

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    2.6.2.4 Orden Inceptisol

    Suelos con un mayor grado de desarrollo que suelos Entisoles, ya que es posible

    distinguir un horizonte B, pudiendo llegar a tener un horizonte superficial negro con un alto

    contenido de materia orgnica. En lneas generales muestran evidencias poco significativas

    de factores genticos de formacin, que implican horizontes con un bajo desarrollo

    (Honorato, 2000).

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    3. MATERIALES Y MTODOS

    3.1 Ubicacin del experimento

    El experimento se llev a cabo en el Centro tecnolgico de suelos y Cultivos de la

    Universidad de Talca, comuna de Talca, sptima regin, Chile. Este laboratorio es el nico

    que se encuentra acreditado a nivel regional por la Comisin de Normalizacin y

    Acreditacin (CNA) de la Sociedad Chilena de Ciencias del Suelo para realizar anlisis de

    suelo y tejidos vegetales. Adems se encuentra acreditado ante el Servicio Agrcola y

    Ganadero (SAG) para realizar los anlisis de suelo requeridos por el Ministerio de

    Agricultura para los programas de recuperacin de suelos degradados.

    3.2 Primera Incubacin: efecto de la aplicacin de dosis crecientes de CaCO3

    Se determin el efecto de las distintas dosis de CaCO3sobre la disponibilidad de Ca y

    su relacin con la disponibilidad de bases de intercambio en suelos establecidos conT.

    melanosporuma travs de un estudio de incubacin rpida. Los suelos estudiados fueron

    el Canelo (Molisol), Duao (Alfisol), El Colorado (Andisol), Fundo los Huachos (Inceptisol),

    Santa Adela (Alfisol), Santa Fe de Cato (Molisol). Cada suelo fue estabilizado y tamizado a

    2 mm, con el fin de homogenizar los parmetros de estudio.

    La adicin de CaCO3 fue realizada en la forma de Cal Agrcola con un 91% de CaCO3

    en su composicin. Posterior a lo anterior cada suelo fue llevado a concentraciones 30000,

    40000 y 50000 mg de Ca kg-1 a partir de contenido de Ca inicial, adicionando la cal

    necesaria para alcanzar los niveles de calcio deseados, basados en el siguiente clculo:

    Calcio deseado (mg kg-1) calcio inicial (mg kg-1) = Calcio a adicionar (mg kg-1)

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    Los tratamientos se presentan en el Cuadro 1:

    Cuadro 1: Dosis de Calcio aplicado a seis suelos que fueron incubados en estufas a 60 C

    por 24 Horas.

    Suelo

    Niveles de Cainicial en

    mg*kg-1Tratamientos

    Dosis Ca

    mg*kg-1

    DosisC a C O 3(gr)

    Dosis Cal agrcola(gr)

    El Canelo 13.862 1 0 0 0

    2 30.000 5,04 5,54

    3 40.000 8,17 8,98

    4 50.000 11,3 12,42

    Duao 11.317 1 0 0 0

    2 30.000 5,84 6.42

    3 40.000 8,96 9,85

    4 50.000 12.08 13,27

    El Colorado 11.771 1 0 0 0

    2 30.000 5,7 6,26

    3 40.000 8,82 9,7

    4 50.000 11,94 13,12

    Los Huachos 807 1 0 0 0

    2 30.000 9,071 10,033 40.000 12,196 13,48

    4 50.000 15,3206 16,94

    Santa Adela 19.004 1 0 0 0

    2 30.000 1,24 1,37

    3 40.000 3,81 4,21

    4 50.000 6,93 7,665

    Santa f deCato 12.679 1 0 0 0

    2 30.000 5,22 5,77

    3 40.000 8,344 9,224

    4 50.000 11,469 12,68

    Al encontrarse en los contenedores de polietileno se aadieron 0,5 ml de cloroformo

    para eliminar actividad biolgica. Cada uno de los suelos fue llevado a capacidad de

    campo (60% de la mxima capacidad de retencin de agua). Luego de alcanzar la

    capacidad de campo, los suelos en estudio fueron sometidos a incubacin rpida (60 C/24

    horas) en una estufa, mtodo rpido de incubacin que permite obtener resultados en un

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    corto plazo y similares a los obtenidos con otros mtodos de incubacin de mas largo plazo

    (Mora y Barrow, 1996). Este mtodo fue validado por Lpez (2007), evaluando

    disponibilidad de Molibdeno en suelos Andisoles.

    El diseo experimental fue completamente al azar con cuatro repeticiones por

    tratamientos.

    3.2.1 Evaluacin Primera Incubacin

    Se evalu tanto al inicio, as como tambin al final del proceso de incubacin pH

    (CaCl2), Ca, Mg, K, Na intercambiables. Finalizado el proceso de incubacin se evalu el

    Ca Total, CaCO3 Total y activo para cada serie de suelo con sus distintos tratamientos. El

    anlisis de suelo se realiz segn lo recomendado para suelos chilenos por la Comisin de

    Normalizacin y Acreditacin, Sociedad Chilena de Ciencias del Suelo, revisin 2004.

    3.1.2 Anlisis estadstico

    Los efectos de los distintos tratamientos en cada una de las etapas del estudio fueron

    analizados utilizando un anlisis de varianza univariante en el programa SPSS. Para

    tratamientos con diferencias significativas se le realizara una prueba de comparacin

    mltiple de promedios de Tukey.

    3.3 Segunda Incubacin: efecto de la adicin de Mg y K en las relaciones de las

    bases de intercambio en suelos con niveles de 30.000 mg kg-1de calcio total.

    Se realiz un ajuste de la relacin Ca/Mg/K en suelos establecidos con T.

    melanosporumcon un nivel de Ca disponible de 30.000 mg kg-1, a travs de un estudio de

    incubacin rpida en estufas (60 C/24 horas). Se adicionaron enmiendas de calcio en su

    forma de cal agrcola (91% de CaCO3), enmiendas de potasio en su forma de cloruro de

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    potasio como sal (99% de K2O) y enmiendas de magnesio en su forma de nitrato de

    magnesio (13% de MgO). Los suelos fueron ajustados a una concentracin de 30000 mg de

    Ca kg-1, a partir de su contenido de Ca inicial, en base a resultados obtenidos en la

    primera incubacin (Cuadro 2).

    Los suelos fueron estabilizados y tamizados a 2 mm. Con el fin de homogenizar las

    muestras en estudio. La unidad experimental fue un contenedor de polietileno que contena

    50 gr de suelo.

    Cuadro 2:Dosis de CaCO3para llevar los niveles de Ca Total a 30.000 mg. de Ca kg-1.

    Cada suelo tuvo 48 repeticiones con la dosis correspondiente.

    Serie

    Dosis Ca

    mg*kg-1 Dosis Cal Agrcola, gr de cal*50 gr de suelo-1

    El Canelo 30000 4,86

    Duao Chequen 30000 3,93

    El Colorado 30000 7,3

    Fundo los Huachos 30000 3,3

    Santa Adela 30000 5,41

    Santa f de Cato 30000 4,4

    3.3.1 Tratamientos Mg y K.

    Luego de llevar las muestras a 30.000 mg de Ca kg-1se procedi a agregar las dosis

    de los nutrientes magnesio y potasio (Cuadro 3).

    Al encontrarse en los contenedores de polietileno se aadieron 0,5 ml. de cloroformo

    para eliminar actividad biolgica. Cada una de las unidades experimentales fue llevada a

    capacidad de campo (60% de la mxima capacidad de retencin de agua). Luego de

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    alcanzar la capacidad de campo, los suelos fueron sometidos a estudios de incubacin

    rpida en una estufa de incubacin (60 C/24 horas).

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    Cuadro 3: Tratamientos de dosis de Magnesio y Potasio con un calcio total de 30000 mg

    de Ca kg-1.

    Serie TratamientosDosis Kmg*kg-1

    DosisCloruro deK, gr.

    Dosis Mgmg*kg-1

    Dosis Nitratode Mg (gr)

    Serie enestudio 1.1 0 0 0 0

    1.2 0 0 4.500 2,49

    1.3 0 0 9.000 4,97

    1.4 0 0 18.000 9,95

    2.1 1.500 0,143 0 0

    2.2 1.500 0,143 4.500 2,49

    2.3 1.500 0,143 9.000 4,97

    2.4 1.500 0,143 18.000 9,95

    3.1 3.000 0,286 0 0

    3.2 3.000 0,286 4.500 2,49

    3.3 3.000 0,286 9.000 4,97

    3.4 3.000 0,286 18.000 9,95

    4.1 6.000 0,572 0 0

    4.2 6.000 0,572 4.500 2,49

    4.3 6.000 0,572 9.000 4,97

    4.4 6.000 0,572 18.000 9,95

    3.3.2 Evaluacin segunda incubacin

    Luego de adicionar las distintas dosis de Mg y K, en suelos con niveles de calcio total

    cercanos a 30.000 mg kg-1, se procedi a estudiar las relaciones existentes entre las bases

    de intercambio, con el fin de obtener las dosis de fertilizantes necesarias para poder llevar

    a equilibrio dichas relaciones.

    3.3.3 Anlisis estadstico

    Los efectos de los distintos tratamientos en cada una de las etapas del estudio sern

    analizados utilizando un anlisis de varianza univariante en el programa SPSS. Para

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    21

    tratamientos con diferencias significativas se le realizara una prueba de comparacin

    mltiple de promedios de Tukey.

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    22

    4 RESULTADOS Y DISCUSIN

    4.1 Determinacin del Calcio Total en seis series de suelo con adicin de tres

    dosis de CaCO3

    Tuber melanosporumse desarrolla de forma natural en suelos calcreos o suelos

    que presenten un elevado contenido de Calcio (Suz et al., 2008), debido a que la trufa

    necesita altos contenidos de ste nutriente para completar su ciclo de vida en forma

    satisfactoria (Garca-Montero et a.l, 2006).

    Figura 1. Concentracin de Calcio Total en seis suelos con adicin de 3 dosis de

    CaCO3.. Resultados con letras diferentes muestran diferencias significativas entre los

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    23

    tratamientos de CaCO3 (30.000, 40.000 y 50.000 mg*kg-1de calcio por cada tratamiento),

    de acuerdo a la prueba de comparacin mltiple de promedios de Tukey.

    Segn Reyna (2007) los niveles de Calcio Total en el suelo no deben ser inferiores

    a 30.000 mg*kg-1. En la figura 1 inicialmente las series en estudio presentan niveles de

    Calcio total inferiores a 30.000 mg*kg-1. Luego al adicionar dosis crecientes de CaCO3

    stos niveles fueron superiores. Sin embargo el comportamiento de los niveles de calcio

    total no fue homogneo en los suelos estudiados. En el caso de El Colorado el nivel de

    calcio total alcanzado frente a una primera dosis de CaCO3 fue de 16.000 mgkg-1, el cual

    al tratarse de un suelo perteneciente al orden Andisol presenta caractersticas particulares,

    tales como una elevada capacidad tampn, as como un alto contenido de materia orgnica

    (cercana al 10%). Por lo tanto el bajo contenido de calcio total obtenido al adicionar la

    primera de dosis de CaCO3 se podra explicar como un posible fenmeno en el cual un

    catin divalente como el Calcio puede formar quelatos con los principales grupos

    funcionales de la materia orgnica, distinguindose entre estos los cidos carboxlicos y

    grupos fenlicos, los cuales al encontrarse en un medio con tendencia alcalina se

    presentan cargados negativamente, atrayendo en este caso al catin divalente Calcio (Tan

    et al., 1993). Caso contrario ocurre en el suelo Los Huachos en donde luego de adicionar

    la primera dosis de CaCO3presenta niveles de calcio total en el suelo cercanos a 28.000

    mg*kg-1, al tratarse de un suelo Inceptisol con horizontes poco desarrollados, materiales

    arcillosos con baja capacidad de intercambio catinico y bajo contenido de materia

    orgnica (cercano al 1%), es posible indicar que este suelo tiene una menor capacidad

    tampn y por lo tanto la mayora del calcio adicionado puede ser extrado durante la

    determinacin del calcio total.

    Con los resultados obtenidos en esta primera incubacin es posible determinar la

    dosis exacta de CaCO3para llevar a cada suelo en estudio al nivel deseado de 30.000

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    24

    mg*kg-1de Calcio total. En el caso de El Canelo presenta inicialmente 13.862 mg*kg-1 y

    se deben agregar dosis de CaCO3 que aporten 35.381 mgkg-1 de Calcio , Duao

    inicialmente tienen 11.300 mg*kg-1 y se deben agregar 28.610 mg*kg-1 de calcio, El

    Colorado inicialmente tiene 11.170 mg*kg-1y se deben agregar 53.144 mg*kg-1 de calcio,

    Los Huachos inicialmente tiene 800 mg*kg-1 y de deben agregar 24.042 mg*kg-1de

    calcio, Santa Adela inicialmente tiene 19.000 mg*kg-1y se deben agregar 39.384 mg*kg-1

    de calcio, Santa Fe de Cato inicialmente tiene 12.670 mg kg-1y se deben agregar 32.032

    mg kg-1 de calcio (Figura 1).

    4.2 Determinacin de pH, CaCO3total y activo en suelos incubados

    Segn Reyna (2007) un porcentaje del Calcio total de las truferas es posible

    encontrarlo en la forma de CaCO3, el cual presenta un rol fundamental en la mantencin y

    organizacin de la estructura del suelo, as como una importante participacin en la

    regulacin del pH del suelo. Estudios de Garca-Montero (2006) muestran que las mayores

    producciones de Tuber melanosporum se registran en suelos que presentan rangos de

    CaCO3 Total 3,12 al 7,88% y CaCO3 qumicamente activo en rangos de 2,25 y 7,01%,

    registrando en estos suelos un 40% de mayor produccin que en suelos que se

    encontraban fuera de estos rangos. En la Figura 2 se presentan los niveles de CaCO3 total

    y activos despus de la adicin de los distintos niveles de CaCO3. En particular los

    resultados muestran que en el caso de las suelos Santa Fe de Cato y Los Huachos

    presentan niveles de CaCO3 Total y CaCO3activos superiores 6% y 2% con la dosis ms

    baja de carbonato de calcio (Cuadro 1) que correspondi a 16.704 mg kg-1 y 29.072mg

    kg-1 de calcio para los suelos Santa Fe de Cato y los Huachos respectivamente

    (adicionados en la forma de cal agrcola). Las otras series de suelo estudiadas requieren

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    25

    dosis de CaCO3 mayores para poder alcanzar los porcentajes de CaCO3 total y activo

    aconsejados en los estudios de Garca-Montero, pero todos los suelos presentan un

    aumento significativo en el carbonato de calcio total y activo al agregar dosis crecientes de

    CaCO3, sin embargo estos niveles de aumento se presentan en menor forma en El

    Colorado, ya que frente a una primera dosis de CaCO3que aportaba 22.800 mg kg-1de

    calcio, el CaCO3 total y activo aumento desde 3,69 y 0,69% inicial a un 4,56 a 1,16%

    respectivamente (Figura 2).

    Figura 2. Concentraciones de CaCO3total, activo y pH frente a tres dosis crecientes

    de CaCO3Resultados con letras diferentes muestran diferencias significativas entre los tratamientos

    de CaCO3 (30.000, 40.000 y 50.000 mg*kg-1de calcio por cada tratamiento), de acuerdo a

    la prueba de comparacin mltiple de promedios de Tukey.

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    En general, el pH adecuado para el cultivo de la trufa flucta entre 7,5 a 8,5

    (Reyna et al., 2007). La Figura 2 muestra que la mayora de los suelos en estudio se

    encuentra dentro de estos rangos de pH luego de ser sometidos a dosis crecientes de

    CaCO3. Sin embargo, el suelo Los Huachos con un pH inicial de 6,72 luego de adicionar

    29.072 mg kg-1de calcio present un pH de 9, lo cual puede ser explicado por la baja

    capacidad tampn y la elevada primera dosis de calcio en este suelo perteneciente al orden

    Inceptisol. Los otros suelos estudiados frente a las mismas dosis de CaCO3adicionadas

    tienen un aumento significativo del pH. pero se mantienen en los rangos adecuados

    anteriormente citados, en el caso de El Colorado inicialmente presenta un pH de 7,84,

    luego de adicionar 22.800 mg*kg-1de calcio el pH aumenta a 7,86, pudiendo ser explicado

    por la alta capacidad tampn y la baja adicin de calcio a este suelo Andisol.

    1..3 Efecto de las adicin de CaCO3 sobre las Bases de Intercambio Catinico y las

    relaciones Ca/Mg y Ca/K

    El Calcio disponible es de gran importancia a la hora de producir trufas (Reyna et

    al, 2007), ya que es la forma de calcio presente en el suelo asimilable para races y

    micelios (Reyna et al.,2007). En el Cuadro 4 se observan diferencias significativas en el

    calcio disponible tras la adicin de dosis crecientes de CaCO3. En el caso de Los

    Huachos y Santa Adela presentan niveles de calcio disponible que van en rangos de 23

    a 32,7 cmol(+)kg frente a la adicin de dosis crecientes de CaCO3, El Canelo, Duao y

    Santa Fe de Cato presentan rangos de calcio disponible que van desde 27,3 a 37,4

    cmol(+)kg frente a tres dosis de CaCO3 adicionado. Dichos aumentos de calcio disponible

    son significativos, pero no son lineales al adicionar dosis mas elevadas de CaCO3 a los

    suelos. Sin embargo El Colorado tiene un calcio disponible inicial de 25,3 cmol(+)kg al

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    adicionar una primera dosis de CaCO3el aumento es significativo a 28 cmol(+)kg, pero al

    aumentar las dosis de CaCO3 el calcio disponible no aumenta de forma significativa,

    rompiendo la tendencia de aumento de los otros suelos en estudio.

    No se observan diferencias significativas del efecto que ejerceran elevadas dosis

    de calcio sobre las dems bases de intercambio (Cuadro 4). Al agregar tal magnitud de

    enmiendas calcreas, se dan condiciones para que pueda existir una competencia entre las

    minerales catinicos por los mismos sitios de intercambio del suelo e incluso por los

    mismos puntos de adsorcin de micelios del hongo y la raz, debido a que stas se

    encuentran cargadas negativamente en superficie (Tisdade y Werner, 1980). El Cuadro 4

    muestra que la relacin Ca/Mg se encuentra muy alta, superando 10, lo que abre la

    posibilidad que se presenten deficiencias de Magnesio en el suelo (Tisdade y Werner,

    1980). Debido a lo anterior en la segunda etapa de este estudio se decide adicionar dosis

    crecientes de MgO y KCl a los suelos, con un nivel estable de 30.000 mg*kg-1de Calcio

    Total en cada suelo estudiado.

    Cuadro 4. Efecto de las dosis de CaCO3 sobre el Ca, Mg, K, Na disponible y sus

    relaciones

    mg*kg-1 Cmol(+)kg Relacion

    Series Dosis Ca Ca Mg K Na S. Bases Ca/Mg k/MgEL CANELO 0 18 C 1,4 a 0,4 b 0,09 19,9 C 13,23 b 0,3 b

    30000 27,3 B 0,8 c 0,5

    a

    b 0,1 28,6 B 34,75 a 0,51 a40000 32,2 A 0,9 bc 0,5 a 0,11 33,7 A 35,12 a 0,55 a

    50000 34,5 A 1 bc 0,5 a 0,1 36,1 A 34,1 a 0,57 a

    DUAO 0 20,1 C 1,4 a 0,5 c 0,15 22,1 C 14,7 c 0,38 b30000 31 B 0,9 b 0,5 bc 0,14 32,6 B 34,51 b 0,6 a

    40000 33,2 Ab 0,9 b 0,6 a 0,15 34,8ab 39,12 a 0,65 a

    50000 34,8 A 0,9 b 0,6ab 0,15 36,4 A 39,64 a 0,69 a

    EL COLORADO 0 25,3 B 0,5 c 1,2 0,05a

    b 27 B 46,74 2,15 a

    30000 28 A 0,6 b 1,2 0,05 a 29,8 A 45,64 1,87 b

    40000 28,7 A 0,6 a 1,2 0,04 bc 30,7 A 44,73 1,9 b

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    b

    50000 28,9 A 0,7 a 1,2 0,03 c 30,8 A 42,99 1,79 b

    LOS HUACHOS 0 5,59 C 2,1 a 0,4 b 0,05 8,14 C 2,63 b 0,18 d30000 28,5 B 1,3 c 0,4 a 0,05 30,2 B 22,19 a 0,31 a

    40000 31,3 A 1,4 bc 0,4 a 0,05 33,1 A 22,87 a 0,29ab

    50000 32,7 A 1,5 b 0,4 a 0,05 34,7 A 21,81 a 0,27 c

    SANTA ADELA 0 22,2 C 2,7 a 0,6 a 0,22ab 25,7 C 8,31 c 0,23 d

    30000 23 C 2,2 b 0,6 a 0,23 a 26 C 10,36 b 0,27 c

    40000 27,8 B 1 d 0,6 b 0,22ab 29,5 B 28,57 a 0,58 b

    50000 31,1 A 1,2 c 0,6 b 0,21 c 33,1 A 27,14 a 0,5 a

    SANTA FE DECATO 0 25,2 D 0,5 d 0,3 c 0,06 26,1 D 49,36 a 0,63 a

    30000 31,8 C 0,9 c 0,4 b 0,08 33 C 36,87 b 0,41 b

    40000 33,6 B 1 b 0,4 b 0,08 35 B 34,57 c 0,37 c

    50000 37,4 A 1,1 a 0,4 a 0,07 39 A 34,07 c 0,36 c

    Promedios con letras diferentes muestran diferencias significativas entre los

    tratamientos de CaCO3(30.000, 40.000 y 50.000 mg*kg-1de calcio por cada tratamiento),

    de acuerdo a la prueba de comparacin mltiple de promedios de Tukey. Tratamientos sinletras indican que los promedios no presentan diferencias estadsticamente significativascon respecto al factor en estudio.

    1..4Disponibilidad de Magnesio en suelos con 30.000 mg*kg-1 de calcio total

    La Figura 3 muestra que al agregar dosis crecientes de MgO en series con un

    Calcio Total de 30.000 mg*kg-1, el Magnesio disponible aumenta de forma significativa y

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    Figura 3. Magnesio disponible frente a tres dosis crecientes de MgOPromedios con letras diferentes muestran diferencias significativas entre los 3 tratamientos

    MgO (4.500, 9.000 y 18.000 mg*kg-1 de Magnesio), de acuerdo a la prueba de

    comparacin mltiple de promedios de Tukey.

    linealmente en todas los suelos estudiados, quedando disponible prcticamente todo el

    magnesio agregado, siendo Los Huachos el suelo que alcanza el mayor nivel de

    magnesio disponible cercano a 120 cmol(+)kg, disponibilidad explicada por las

    caractersticas de este suelo Inceptisol, registrando una relacin Ca/Mg a una primera dosis

    de MgO cercana a 1 y una relacin cercana 0,25 frente a la dosis mas alta de MgO. Caso

    contrario ocurre en El Colorado si bien tienen una alta disponibilidad es significativamente

    menor al suelo anterior, llegando a 78 cmol(+)kg de magnesio en el suelo frente a la dosis

    ms alta de MgO, pudiendo explicarse por las caractersticas propias de un suelo Andisol,

    llegando a una relacin Ca/Mg cercana a a 1,8 al agregar la primera dosis de MgO y a

    una relacin de 0,7 frente a la dosis mas elevada de MgO.

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    Los Niveles deseados de magnesio para el cultivo de la trufa son cercanos a 2,9

    cmol(+)kg en suelos con 30.000 mg*kg-1de calcio total, niveles con los cuales se equilibra

    la relacin Ca/Mg, en el caso de El Canelo deben agregarse 628 mg*kg-1de magnesio al

    suelo para alcanzar el nivel deseado de este nutriente luego de intrapolar la curva

    generada por la adicin de dosis crecientes de MgO, en Duao se deben agregar 594

    mg*kg-1 de magnesio al suelo, en El Colorado se deben agregar 824 mg*kg-1 de

    magnesio al suelo, en Los Huachos se deben agregar 491 mg*kg-1 de magnesio al suelo,

    en Santa Adela se deben agregar 554 mg*kg-1 de magnesio al suelo y en Santa Fe de

    Cato se deben agregar 567 mg*kg-1

    de magnesio al suelo respectivamente, para obtener

    en cada suelo el Magnesio disponible necesario para el cultivo.

    1..5Disponibilidad de potasio en suelos con 30.000 mg*kg-1 de Calcio Total

    Figura 4. Potasio disponible frente a tres dosis crecientes de KCl.Promedios con letras diferentes muestran diferencias significativas entre los 3 tratamientos

    KCl (1.500, 3.000 y 6.000 mg*kg-1 de Potasio), de acuerdo a la prueba de comparacinmltiple de promedios de Tukey)

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    Comportamiento similar es observado en la Figura 4, en donde al agregar dosis

    crecientes de KCl, el aumento del potasio disponible es de forma significativa y lineal,

    quedando disponible prcticamente todo el potasio agregado, pudiendo deberse a que el

    suelo se encuentra saturado de Calcio, el cual fue agregado inicialmente, por lo cual los

    sitios de intercambio del suelo se encuentran ocupados y por lo tanto el los cationes que se

    adicionan en segundo lugar quedan en alta disponibilidad, presentando los suelos en

    estudio un comportamiento similar frente a las mismas dosis de KCl (Figura 4).

    Los niveles deseados de potasio disponible para el cultivo de la trufa son cercanos

    a 1,45 cmol(+)kg en suelos con 30.000 mg*kg-1de calcio total, en el caso de El Canelo

    deben agregarse 784 mg*kg-1de potasio al suelo para alcanzar el nivel deseado de este

    nutriente luego de intrapolar la curva generada por la adicin de dosis crecientes de KCl,

    en Duao se deben agregar 904 mg*kg-1 de potasio al suelo, en El Colorado se deben

    agregar 614 mg*kg-1 de potasio al suelo, en Los Huachos se deben agregar 682 mg*kg-1

    de potasio al suelo, en Santa Adela se deben agregar 700 mg*kg-1 de potasio al suelo y

    en Santa Fe de Cato se deben agregar 791 mg*kg-1 de potasio al suelo respectivamente,

    para poder obtener en cada suelo en estudio el potasio disponible necesario para el cultivo.

    1..6 Efecto del magnesio adicionado sobre el calcio disponible presente en el suelo

    La figura N 5 muestra que dosis crecientes de MgO tienen una influencia

    significativa frente al aumentan el calcio disponible en el suelo, en el caso de El Colorado

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    Figura 5. Efecto de tres dosis de MgO sobre el Calcio disponible de los suelos.Resultados con letras diferentes muestran diferencias significativas de acuerdo a la

    prueba de comparacin mltiple de promedios de Tukey.

    al adicionar una primera dosis de MgO el calcio disponible aumenta de 6.800 a 8.100

    mg*kg-1, aumentando significativamente a medida que se aumentan las dosis de MgO.

    Caso contrario ocurre en Los Huachos en donde la adicin de una primera dosis de MgO

    el calcio disponible aumenta de 4.600 a 5.200 mg*kg-1, y al ir aumentando las dosis de

    MgO el calcio disponible disminuye. Pudiendo ser explicado como el reemplazo por parte

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    33

    del catin divalente magnesio al catin divalente calcio, de la fase de intercambio y la fase

    difusa, entregndolo a la solucin del suelo.

    1..7Perspectivas

    De forma final al considerar al calcio como un nutriente determnate en la

    produccin de trufas, y a su vez las interacciones que tienen este elemento con el resto de

    los cationes de intercambio y propiedades fsicas del suelo, sera de gran utilidad

    profundizar y ampliar estos estudios a ensayos con actividad biolgica, aumentando

    tiempos de incubacin y mtodos de anlisis que permitan extrapolar estos resultados de

    una forma mas cercana a la realidad experimentada en el campo.

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    5 CONCLUSIONES

    1. Debido a que los suelos estudiados presentan diferentes propiedades fsicas,

    qumicas y biolgicas, es necesario adicionar enmiendas calcreas diferenciales

    con el objetivo de que estos suelos obtengan niveles aproximados a 30.000

    mg*kg-1de calcio total, diferencias explicadas por sus capacidades tampn y/o el

    contenido de materia orgnica que presenten en el perfil.

    2. Al adicionar elevadas dosis de enmiendas calcreas al suelo, las relaciones

    existentes entre las bases de intercambio tienden a desequilibrarse, pudiendo

    presentarse deficiencias de alguna base que se encuentre fuera de los rangos de

    equilibrio.

    3. La adicin de elevadas dosis de Magnesio y Potasio a suelos que presentan

    elevados niveles de calcio total (30.000 mg*kg-1), aumenta en forma significativa la

    disponibilidad de stos cationes en el perfil, siendo dicho aumente lineal en todas

    las dosis adicionadas. Esto puede deberse a que la gran mayora de los sitios de

    intercambio y puntos de fijacin ya se encuentran ocupados por el catin divalente

    calcio, por lo que los otros cationes (Mg y K) luego de ser adicionados quedan

    disponibles en la solucin del suelo.

    4. Al adicionar dosis crecientes magnesio, en suelos que presentan altos niveles de

    calcio total (30.000 mg*kg-1), aumenta de forma significativa el Calcio disponible,

    considerando que el aumento es diferencial en los suelos estudiados, debido a las

    caractersticas fisico-qumicas propias de cada suelo tratado

    5. Los estudios de incubacin rpida permiten determinar de manera eficiente y rpida

    las dosis de enmiendas calcreas y bases de intercambio necesarias para el

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    adecuado crecimiento y desarrollo de Tuber melanosporum en suelos de distinto

    origen y propiedades fsico-qumicas.

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