Universidad autónoma de Chiapas extensión … · Prueba de Benedict para azucares reductores ......
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Universidad autónoma de Chiapas extensión
Ocozocoautla
Identificación de biomoléculas
Practica 1 y 2
Biología celular
Dra. Ana Olivia cañas Urbina
Integrantes
Andrea Pérez Ochoa
Diana Laura Vázquez Vázquez
Blanca Guadalupe Penagos Gómez
¿Que son las biomoléculas?
Son moléculas constituyentes de los seres vivos los cuatro constituyentes más
abundantes de los seres vivos son carbono, hidrogeno, oxigeno, nitrógeno. Las
biomoléculas se pueden clasificar en: inorgánicas y orgánicas, en esta práctica solo
abordaremos las biomoléculas orgánica: hidratos de carbono, lípidos y proteínas.
Los carbohidratos son moléculas compuestas por H, C, O con dos funciones
principales en los seres vivos, que son energética y estructural. Su grupo funcional
es un grupo carbonilo, cetona. Algunos glúcidos forman importantes estructuras
esqueléticas, como la celulosa, constituyentes de la pared celular vegetal o la quitina
que forma la cutícula de los artrópodos. Los lípidos son hidrofóbicas y cuentan con
tres funciones: estructural, energética y reguladora. Su grupo funcional es el
carboxilo, los lípidos cuentan con 9kc/g. se pueden clasificar en dos grupos:
saponificables estas cumplen dos funciones importantes por una parte,
los fosfolípidos forman el esqueleto de las membranas celulares (bicapa lipídica);
por otra, los triglicéridos son el principal almacén de energía de los animales y no
saponificables que desempeñan funciones reguladoras.
Los carbohidratos
Los carbohidratos son componentes estructurales importantes de las células y son
además una forma importante de almacenar energía; los que conocemos como las
azúcares y polímeros de azúcares. Estas moléculas usualmente contienen carbono,
hidrógeno y oxígeno. Los carbohidratos se clasifican como monosacáridos,
disacáridos o polisacáridos, dependiendo del tamaño y la complejidad de la
molécula. Los monosacáridos se componen de una sola molécula de azúcar.
Cuando dos monosacáridos se unen se produce un disacárido, y cuando dos o más
se unen se produce un polisacárido.
Prueba de benedict
Muchos monosacáridos, como la glucosa y la fructosa, y algunos disacáridos, son
azúcares reductores porque poseen un aldehído libre (no enlazado a los otros
grupos en la molécula). La Prueba de Benedict se usa para detectar la presencia de
azúcares reductores porque el reactivo de Benedict contiene cobre que se reduce
en presencia de azúcares reductores. Durante esta reacción el azúcar se oxida. La
reacción antes mencionada se conoce como una reacción oxidación-reducción
(“REDOX”) porque la oxidación del azúcar sucede simultáneamente con la reacción
de reducción del cobre
Cuando se añade el reactivo de Benedict al azúcar reductor, y se aplica calor,
el color de la mezcla cambia a naranja o ladrillo intenso mientras mayor sea
la abundancia de azúcares reductores.
Un cambio a color verde indica la
presencia de menos azúcares
reductores. Las azúcares que no
reducen, como la sacarosa, no producen
cambios en color y la solución se
mantiene azul.
Los monosacáridos que forman anillos
no son azúcares reductores porque no
tienen un grupo aldehído libre, pero
pueden reducir si se convierten en
monosacáridos abiertos.
Azucares reductores
Las soluciones problema a utilizar son: jugo de naranja natural y procesado,
solución de edulcorante light y refresco o bebida light. Como solución testigo se
empleará solución glucosada al 10% y como blanco de reactivo se usará agua.
Procedimiento
Agregar 1 ml de la solución testigo, blanco de reactivo y soluciones problema a un
tubo de ensayo de 13x100 y añadir 2 ml de reactivo de Benedict a cada tubo. Una
vez preparadas las soluciones, los tubos se calentarán por separado a baño maría
(agitación constante) durante tres minutos.
Azucares complejos
Las muestras problema a utilizar son: una rebanada de zanahoria fresca, una
rebanada de zanahoria congelada, una rebanada de papa, una rebanada de
manzana, un cuarto de tortilla de maíz natural, un cuarto de tortilla de mazeca, un
cuarto de tortilla de trigo.
Prueba de Yodo:
La prueba de yodo se usa para detectar almidón.
El almidón es un polímero de glucosa producido por las plantas y es una
fuente importante de energía almacenada.
La molécula de almidón forma hélices entre las cuales se inserta el yodo,
tiñendo el almidón de azul oscuro a negro.
Procedimiento
Añade a cada muestra problema, dos gotas de lugol, reposa durante 5 minutos y
enjuaga.
Tabla 1. Prueba de Benedict para azucares reductores
Solución Color después de la reacción
Intensidad de color
Blanco de reactivo azul(no cambio) Medio intenso
Solución glucosada Verde y entre color rojizo ladrillo (cambio)
Intenso
Jugo de naranja natural Amarillo (cambio) Intenso
Jugo de naranja procesado Naranja (cambio) Medio intenso
Solución de edulcorante light
Azul (negativo ) Medio intenso
Refresco o bebida light Verde jade (negativo) Intenso
Tabla 2. Prueba de Lugol para azucares complejos (almidón)
Solución Color después de la reacción Azúcar reductor (+)(-)
Zanahoria fresca No se definió el color - Zanahoria congelada No se definió el color -
Papa Violeta + Manzana Café +1/2
Tortilla de maíz natural Violeta + Tortilla de mazeca Violeta +1/2
Tortilla de trigo No hubo color -
Grasas (o Lípidos)
Los lípidos, igual que los carbohidratos, son una fuente importante de energía
almacenada. Los lípidos son componentes importantes de las membranas
celulares, de algunas vitaminas, de ciertas hormonas y del colesterol. Los lípidos
son solubles en solventes no-polares y son muy poco solubles en agua porque se
componen principalmente de cadenas de hidrocarbonos.
Prueba de Sudán para identificación de grasas:
Detecta las cadenas de hidrocarbonos.
El reactivo de Sudán produce una reacción
hidrofóbica donde los grupos no-polares (los
hidrocarbonos) se agrupan y son rodeados por
moléculas del reactivo.
La prueba de Sudán tiñe los hidrocarbonos de rojo
Los alimentos problema a utilizar son: leche de vaca
light, leche o bebida de soja, queso panela, tortilla de
maíz en suspensión, aceite vegetal y margarina
derretida.
Procedimiento
Añada 2 ml de alimento a un tubo de ensayo de 13x100
y añada 5 gotas de Sudán III. Registre sus
observaciones (Tabla 3) y discuta.
Tabla 3. Determinación de lípidos (Sudan III)
Solución Color después de la reacción Lípidos (+)(-)
Leche vaca light lila (cambio) + Leche o bebida de soja Naranja(cambio) +
Tortilla de maíz en suspensión Amarillo(cambio) + Aceite vegetal Naranja (cambio) +
Margarina derretida Mas amarilla(cambio) +
Proteínas
Las proteínas son componentes estructurales de las células, controlan sus procesos
metabólicos y actúan como mensajeros químicos. Además, son parte importante de los
anticuerpos, enzimas y receptores celulares. Las proteínas están formadas por cadenas de
aminoácidos. Debido a la presencia de los grupos amino y carboxilo, los aminoácidos
resisten cambios en pH y son amortiguadores importantes en soluciones biológicas.
Reactivo de biuret
El reactivo de Biuret se compone de
hidróxido de sodio y sulfato de cobre.
El grupo amino de las proteínas reacciona
con los iones de cobre del reactivo de
Biuret y el reactivo cambia de azul a violeta
Los alimentos problema a utilizar son: caldo de
frijoles (concentrado), solución de caldo de pollo
knorr, papilla de salchicha, caldo de sopa nissin,
suspensión de tortilla de maíz, leche de vaca light y
leche o bebida de soja.
Procedimiento
Colocar en un tubo de ensayo de 13x100, 1 ml de de soluciones de alimento y 12
gota de reactivo de Biuret
Resultados
Tabla 4. Determinación de proteínas (Biuret)
Solución Color después de la reacción Proteínas (+)(-)
Caldo de frijoles No hubo cambio - Solución de caldo de pollo
knorr No hubo cambio -
Papilla de salchicha No hubo cambio - Caldo de sopa nissin No hubo cambio +1/2 Leche de vaca light Lila (cambio) +
Leche o bebida de soja Rosa (cambio) +
Discusión de ideas
En la práctica realizada de determinación de biomoleculas se determinaron distintos
tipos de alimentos, light, natural, vegetal entre otros, se pudo observar con la prueba
del lugol que con los alimentos como la papa, la zanahoria congelada y la tortilla de
maíz fueron positivos al presenciar almidón el único que no se marco fue el de la
tortilla de maíz ya que hubo entre unas y otras tortillas que si marcaban. La prueba
de benedict se presenció la intensidad de color en jugo de naranja. El de sudan lll
todos sus alimentos fueron positivos, el biuret presenciamos los positivos que
fueron leche de vaca light, leche de soja y medio de sopa nissi.
Conclusión
En esta práctica aprendimos identificar los biomoléculas y a saber sobre los
diferentes reactivos que utilizamos, comprobamos muchas cosas que nosotros no
crecíamos como la salchicha que solo tiene almidón (harina)
CUESTIONARIO
1- Defina cada una de las biomoléculas identificadas
Moléculas que son compuestas por Hidrogeno, Carbono y Oxigeno que contienen tres
funciones las cuales son:
Lípidos
Son sustancias que contienen en sus moléculas grupos hidrocarbonados de cada cadena
larga, que está presente en organismos vivientes, o que derivan de los mismos. Son
insolubles en agua, pero solubles en solventes orgánicos como el cloro formo, metanol, éter
o benceno. En las células vivientes, forman parte de la estructura de las membranas,
almacenan energía para las células, y a partir de ellas la célula fabrica prostaglandina.
Proteínas
Son biomoléculas que más diversidad de funciones realizan en los seres vivos, todos los
procesos biológicos dependen de su presencia o actividad. Son proteínas casi todas las
enzimas, catalizadores de reacciones metabólicas de las células.
Hemoglobina: Es la que trasporta oxígeno en la sangre. Anticuerpos encargados de
acciones de defensa natural contra infecciones o agentes extraños.
Carbohidratos
Son moléculas formadas por carbono, hidrogeno y oxigeno (CHO) e incluyen algunas
moléculas más relevantes en la vida de los organismos, como son la glucosa, que es
universalmente utilizada por las células para la obtención de la energía metabólica, el
glucógeno contenido en el hígado y el musculo que forma la reserva de energía más
fácilmente para las células.
2- Proporcione la clasificación de cada una de las biomoléculas identificadas
Lípidos
Se clasifican en saponificables se dividen en simples y complejos y no saponificables son
esteroides y terpeno.
Proteínas
Se clasifican en fibrosas, globulares y de membranas.
Estructura primaria: consta de una secuencia lineal de aminoácidos
Estructura secundaria: son las de forma laminar plegada
Estructura terciaria: es una cadena peptídica se dobla en sí
Misma para formar una proteína globular.
Estructura Cuaternaria: se forma por la agrupación de dos o más cadenas peptídicas de
tipo globular.
Carbohidratos
Monosacáridos: son aldosas y cetosas, Oligosacáridos: son disacáridos de trisacáridos a
decasacaridos y polisacáridos.
3- Describa el principio de cada una de las pruebas realizadas en la presente
práctica (Benedict, lugol, SUDAN III y Biuret)
Benedict
Identifico los azucares reductores, aquellos que contienen libre su SU OH. Como la glucosa,
maltosa y lactosa, en soluciones puede producir Cu2+, ya que teníamos el objetivo de
obtener el color entre naranja rojizo o como ladrillo.
Lugol
El lugol lo utilizamos para identificar al almidón en alimentos con azucares más complejos,
cuando nos daba positivos el color que obtendríamos seria celeste violeta y si no se
presenciaba nada sería negativo.
Sudan III
Es un tinte diazo del tipo lisocromo tinte soluble en grasas lo usamos para manchar los
triglicéridos en secciones congeladas y algunos lípidos y lipoproteínas.
Biuret
El reactivo contiene CuSo4 en solución acuosa alcalina, lo utilizamos para determinar la
presencia de las proteínas en la solución cuando es positivo la concentración tendrá un
color violeta.
4- Mencione la función de cada una de las biomoléculas identificadas
Lípidos
Estructural, energética y reguladora de hormonas
Proteína
Estructurales, defensa, bioreguladoras, funcional etc.
Carbohidratos
Energética y estructural
5- ¿Cuáles son las estructuras celulares que conjuntan la presencia de las
principales biomoléculas?
Citoplasma: contiene proteínas y carbohidratos
Membrana plasmica: forma bicapas lipidas y dobles capas los fosfolípidos
Núcleo: contiene proteínas como histonas
Citoesqueleto: contiene fibras proeteicas
Peroxisomas: contiene enzimas para catalizar carbohidratos
Aparato de Golgi: recepción de proteínas lípidos y carbohidratos
Centrosoma: contiene proteínas
6- ¿Qué beneficios obtenemos al consumir alimentos que contienen azucares reductores y qué beneficios obtenemos al consumir edulcorantes light?
Beneficios con azucares reductores En cierta parte nos beneficia porque obtenemos es la que produce energía en nuestro cuerpo
Beneficios con edulcorantes Light Nos ayuda a mantener la glucosa en el peso de nuestro cuerpo.
7- En términos de lípidos, ¿qué beneficios presentan los alimentos light frente a
los naturales? Explique su respuesta Los alimentos light nos beneficia en su bajo consumo de azúcar ya que estabiliza el peso en nuestro cuerpo y mantiene la glucosa y no contiene excesos de azucares y en las alimentos naturales son los que no son sometidos a ningún proceso de azucares o químicos para reducir el azúcar así es como se le llama es natural su contenido.
8- ¿Por qué los lípidos y las proteínas deben incluirse en la dieta humana? Los lípidos son ácidos grasos que nos dan energía, consumirlo es importante ya que nos
aportan una cierta cantidad de kilo calorías. Y Las proteínas son la base de nuestro cuerpo
para mantenerlo en forma.
REFERENCIAS
Medel, R. (2015) Biomoleculas. Recuperado el 20 de agosto del 2015 :
https://biochemiapuntesdermedelparatodos.wikispaces.com/file/view/BIOMO
L%C3%89CULAS.pdf
Bioquímica interactiva (2008) los carbohidratos. Recuperado el 19 de agosto del
2015: http://laguna.fmedic.unam.mx/~3dmolvis/carbohidrato/index.html
Bloomfiel M. (1992): Química de los organismos vivos. Limusa, México
D.F. recuperado el 19 de agosto del 2015:
https://anacanas.files.wordpress.com/2015/01/lipidos_bloomfield.pdf