Via de Embden-Meyerhof o via glucolitica es indudablemente la via mas comoun de la degradacion de de la glucosa a piruvato en la segunda etapa del catabolismo. Esta presente en todos los principales grupos de micoorganismos, y actua en presencia o ausencia de O2. La glucolisis (del griego glyco, dulce, y lysis, disolucion) tiene lugar en la matriz del citoplasmatica de procariotas y eucariotas.

La via en conjunto puede dividirse en 2 partes. En la etapa inicial de seis carbonos, la glucosa es fosforilada dos veces y finalmente convertida en fructosa 1,6-bifosfato. A menudo, se incorporan a la via otros azucares mediante su conversion en glucosa 6-fosfato o fructosa 6-fosfato. Esta etapa preliminar no produce energia; de hecho, se consumen dos moleculas de ATP por cada molecula de glucosa. Estos pasos iniciales <<ceban>> el sistema al añadir fosfatos a cada extremo del azucar. Los fosfatos se utilizaran despues para sintetizar ATP.

La etapa de tres carbonos de la glucolisis comienza cuando la nzima fructosa 1,6-bifosfato aldolasa cataliza la escision de la fructosa 1,6-bifosfato en dos mitades, cada una de ellas con un grupo fosfato. Uno de los productos, el gliceraldehido 3-fosfato, se convierte directamente en piruvato en un proceso de cinco pasos. Debido a que el otro producto, dihidroxiacetona fosfato, puede transformarse facilmente en gliceraldehido 3-fosfato, ambas mitades de la fructosa 1,6-bifosfato se utilizan en la etapa de tres carbonos. En primer lugar, el gliceraldehido 3-fosfato se oxida con NAD+ como aceptor de electrones, incorporandose al mismo tiempo un grupo fosfato para formar una molecula de alta energia denominada 1,3-bifosfoglicerato. El grupo fosfato de alta energia unido al carbono 1 es cedido posteriormente al ADP para formar ATP. En este caso, la sintesis de ATP recibe el nombre de fosforilacion a nivel de sustrato, debido a que la fosforilacion del ADP esta acoplada a la degradacion exergonica de una molecula de sustrato de alta energia.

Un proceso similar genera un segundo ATP por fosforilacion a nivel de sustrato. El grupo fosfato de 3-fosfoglicerato pasa al carbono 2, y el 2-fosfoglicerato es deshidratado para formar una segunda molecula de alta energia, el fosfoenolpiruvato. Esta molecula cede su grupo fosfato al ADP para formar un segundo ATP y piruvato, el producto final de la via.

En conjunto, la via glucolitica degrada una molecula de glucosa en dos moleculas de piruvato mediante la secuencia de reacciones anteriormente descritas. Tambien se producen ATP y NADH. Esta produccion puede calcularse considerando las dos etapas por separado. En la etapa de seis carbonos, se utilizan 2 ATP para formar fructosa 1,6-bifosfato. Por cada gliceraldehido 3-fosfato transformado en piruvato, se forman 1 NADH y 2 ATP. Debido a que a partir de 1 glucosa se forman 2 gliceraldehidos 3-fosfato (1 a traves de la dihidroxiacetona fosfato), la etapa de tres carbonos genera 4 ATP y 2 NADH por molecula de glucosa. Si restamos el ATP utilizado en la etapa de seis carbonos al ATP producido en la etapa de tres carbonos obtenemos una produccion neta de 2 ATP por molecula de glucosa. Por tanto, el catabolismo de la glucosa a piruvato en la glucolisis puede representarse por la sig. Ecuacion:

Glucosa + 2 ADP + 2 Pi + 2 NAD+ ----------------- 2 piruvato + 2 ATP + 2 NADH + 2 H+