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VIH-VPH y su influencia en el conteo de células CD4

El virus del papiloma humano (VPH) es la infección viral sexualmente

transmisible más común en el ser humano y el principal agente etiológico de cáncer

anogenital,por otra parte el virus de la inmunodeficiencia humana (VIH) continúa su

propagación global con al menos 40 millones de individuos infectados alrededor del

mundo, de los cuales más de la mitad son mujeres. El padecer ambas patologías

requiere de un estudio particular, se afecta aún más el sistema inmune, hace cambiar

el estudio clínico y el tratamiento. En el siguiente trabajo se estudia la influencia de

estas patologías sobre el conteo de células CD4.

>>>

>>> AUTORES

Sánchez-Hernández José Antonio,* Gutiérrez-

Fernández Estrella del Carmen,* Pérez y Terrón ‡ §

Rocío, Cedillo-Ramírez Lilia, Rivera-Tapia José §

Antonio

* Departamento de Biología Celular, Facultad de

Medicina, Benemérita

Universidad Autónoma de Puebla.‡ Escuela de Biología de la Benemérita Universidad

Autónoma de Puebla.

§ Centro de Investigaciones en Ciencias Micro-

biológicas,

Instituto de Ciencias de la Benemérita Univer-

sidad Autónoma de Puebla.

� CORRESPONDENCIA:

Dr. José Antonio Sánchez-Hernández Departa-

mento de Biología Celular, Facultad de Medicina,

Benemérita Universidad

Autónoma de Puebla. 13 Sur Núm. 2702,

� RESUMEN

� El virus de la inmunodeficiencia humana

continúa su propagación global con al menos 40

millones de individuos infectados alrededor del

mundo. Por otra parte, el virus del papiloma

humano es la infección viral sexualmente trans-

misible más común en el ser humano y se le

considera el principal agente etiológico del cáncer

cervical. En los últimos años se ha observado un

incremento considerable de pacientes que ad-

quieren estas enfermedades y más grave aún es

>>>

>>>

47

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que continúan reportándose más casos de pa-

cientes que cursan con ambas enfermedades al

mismo tiempo, lo que aumenta de manera

sustancial la posibilidad de cambiar el curso clínico

de las enfermedades convirtiéndose en un riesgo

potencial de desarrollar otras patologías como el

cáncer anorrectal y el cáncer cervical que se han

vuelto las principales causas de muerte en México.

Se ha demostrado también que padecer ambas

enfermedades parece tener un efecto negativo en

la inmunidad humana, puesto que se presentan

marcados cambios durante el transcurso de estas

afecciones, pues el conteo de las células CD4 se ve

afectado. El objetivo del presente trabajo fue

analizar pacientes que padecen tanto VIH como

VPH y su influencia en el conteo de células CD4, ya

que padecer ambas enfermedades puede cambiar

el curso clínico de las mismas y afectar de manera

significativa la inmunidad humana. Se investi-

garon 40 pacientes VIH positivas confirmadas por

Western blot por el Hospital General del Sur de

Puebla y el Laboratorio de Biología Celular de la

Facultad de Medicina de la Benemérita Univer-

sidad Autónoma de Puebla, México, a quienes

también se les realizó toma de células cérvicova-

ginales (Papanicolaou), dichas muestras fueron

procesadas con la técnica de tinción de Papani-

colaou modificado, además de tomarse muestras

con citobrush para realizar PCR y determinar qué

tipos de VPH coexistían con VIH.

� Asimismo, se les realizó conteo de células

CD4 para su posterior análisis y comparación. Se

reportaron cinco pacientes positivas a VPH con

valores de células CD4 dentro de los límites

normales, nueve pacientes negativas a VPH con

disminución del conteo de células CD4, 26

pacientes positivas a VPH con disminución del

conteo de células CD4 y 12 pacientes positivas a

VPH revelaron la presencia de coilocitos en la

citología exfoliativa. En conclusión, las pacientes

que padecen ambas enfermedades, tienen mayor

tendencia a sufrir una baja significativa en la

inmunidad celular a pesar de la terapia retroviral,

lo que las hace susceptibles a adquirir otras

patologías, ya que un conteo inferior a 200 células

CD4 por mL revela un daño sustancial en el

sistema inmunitario.

Palabras clave: VIH, VPH, conteo de células Cd4.

� INTRODUCCIÓN

� El virus de la inmunodeficiencia humana

(VIH) continúa su propagación global con al

menos 40 millones de individuos infectados

alrededor del mundo, de los cuales más de la

mitad son mujeres. Por otra parte, el virus del

papiloma humano (VPH) es la infección viral

sexualmente transmisible más común en el ser

humano y el principal agente etiológico de cáncer

anogenital causante de cerca de 95% de todos los

casos de cáncer cervical. Se han identificado más

de 200 tipos de VPH, de los cuales aproxima-

damente 40 pueden infectar al ser humano por vía

sexual a través del contacto de lesiones infectadas

(1-3)

� El VIH es un retrovirus de la familia de los

lentivirus, dentro del núcleo viral se encuentran

las proteínas p24, p7/p9, dos copias de ARN

genómico viral y las enzimas proteasa, trans-

criptasa inversa e integrasa que ayudan a mejorar

su replicación viral, este virus afecta diferentes

células de la respuesta inmunitaria, ya sea como

consecuencia directa o indirecta de la infección

por múltiples mecanismos que incluyen, entre

otros, la inducción de apoptosis mediada por

varias proteínas virales solubles (Nef, Tat, Vpu,

Vif), la muerte celular secundaria al estado de

hiperactivación inmunológica inducido por esta

infección, la formación de sincitios y el daño

progresivo de los órganos linfoides primarios y

secundarios(4-7).

� Es de esperarse entonces que mujeres

VIH-positivas estén predispuestas a adquirir otra

enfermedad de transmisión sexual, debido a que

modifica su presentación clínica, curso, compli-

caciones y respuesta a los tratamientos conven-

cionales además de la inmunosupresión que

produce, predisponiendo a las mujeres a compli-

caciones ginecológicas (8).

� Por otra parte la organización del geno-

ma de VPH consta de una región temprana E

(early), una región tardía L (late) y una región larga

de control L (long control region). El L1 codifica la

>>>

proteína principal de la cápside y el gen L2 codifica

una proteína secundaria. Otras proteínas codifica-

das por los genes del virus son E1 y E2 que regulan

la replicación del ADN viral, la propia expresión de

los genes y las proteínas E6 y E7, las cuales

inactivan el p53 supresor de tumores.(3)

� El VPH se clasifica por su localización en

cutáneo y mucoso o por su riesgo oncogénico en

alto, medio o bajo grado. Los considerados de

bajo riesgo son los tipos 6, 11, 40, 42, 43, 44, 54, 61,

70, 72, 81; mientras que los tipos 16, 18, 31, 33, 35,

39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 68, 73 son considerados

de alto riesgo.(5-9)

� Es reconocido que la infección por VIH

está relacionada con la persistencia de infecciones

por VPHcon serotipos de alto riesgo y por lo tanto

con lesiones cervicales graves, por lo que padecer

VIH con serotipos de alto riesgo de VPH induce a

padecer tipos de cáncer cervicales más invasivos.

(10-12)

� Padecer ambas enfermedades lleva a las

pacientes a un cambio radical en su organismo,

puesto que podemos referir que desde la fase

aguda de la infección por VIH-1 se activa una

respuesta específica de LTh contra este virus; no

obstante, esta respuesta no es efectiva para

controlar la infección y se va perdiendo gradual-

mente a medida que va dándose la eliminación de

estas células; sin embargo, hay evidencias clínicas

que sugieren que la respuesta dependiente de las

células T CD4+ puede ser eficiente para controlar

la infección o la replicación de VIH-1 en algunos

individuos.(13)

� Cursar con ambas enfermedades ha

demostrado que afecta la inmunidad de cierta

manera, ya que el conteo de las células CD4

puede afectar la asociación entre VPH y VIH, pues

en mujeres VIH positivas con severa inmuno-

supresión (cuenta de CD4 por debajo de 200 × 610 /L) se observa una mayor proporción de casos

positivos para algún tipo de VPH en comparación

con aquellas pacientes que presentan conteos de

células CD4 más altos. A su vez la patogenicidad

mostrada por VPH también se ve modificada por

la supresión inmunológica causada por VIH, pues

la inmunosupresión podría permitir un aumento

en la replicación viral, por lo que en las pacientes

que padecen ambas enfermedades no sólo su

inmunidad se ve afectada sino que también son

cinco veces más propensas a padecer neoplasias

del tracto genital inferior (8,9).

� Un aspecto importante en las mujeres

que presentan la coinfección de VIH con VPH es

que la progresión de la infección por VIH está

marcada por un decremento de las células CD4

incrementando la carga viral de VIH muy asociada

a la persistencia de VPH y a las lesiones escamosas

intraepiteliales (SIL). Otros cambios en la

población general a nivel de la inmunidad que

pueden presentarse al padecer ambas enferme-

dades son los asociados a un infiltrado leucoci-

tario asociado a una función disminuida de los

linfocitos T citotóxicos y una baja en la regulación

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38

22 AÑOS

Endocrinología Química Clínica Marcadores Tumorales Marcadores Virales

Hematología Inmunología Drogas An�convulsionantes Inmunosupresores

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50 Revista Bioanálisis I Junio 2020 l 102 ejemplares

de CD25 activados (a nivel de la cadena α del

receptor IL-2Rα para IL2) además de un decre-

mento

� El VPH se clasifica por su localización en .

cutáneo y en la proporción de células CD4 con una g r .

proporción de mucoso o por su riesgo oncogénico

en alto, medio o bajo grado. Los considerados de

bajo riesgo son los tipos 6, 11, 40, 42, 43, 44, 54, 61,

70, 72, 81; mientras que lostipos 16, 18, 31, 33, 35, 39,

45, 51, 52, 56, 58, 59, 68,73 son considerados de alto

riesgo (5-9)

� Es reconocido que la infección por VIH

está relacionada con la persistencia de infecciones

por VPHCD4/CD8 preservada. (10)

� Por otro lado la respuesta inmunitaria a

VPH no se conoce del todo, aunque una vez

establecida la infección se sabe que la respuesta

inmunitaria es mediada por células, la infección

puede erradicarse o mantenerse en un estado de

latencia. Con la pérdida de la respuesta inmu-

nitaria debido a la infección por VIH, la inmunidad

específica a

� VPH se ve disminuida, activando la repli-

cación de VPH. La información obtenida también

sugiere que los mecanismos para el incremento en

los niveles de anticuerpos para VPH son diferentes

en mujeres VIH positivas respecto a las VIH

negativas (11)

� Otro aspecto relevante es la capacidad de

VPH para evadir la vigilancia inmunitaria cambian-

do la polarización de las células Th, disminuyendo

la expresión del complejo principal de histocompa-

tibilidad clase I y reduciendo la función de las

células presentadoras de antígeno intraepiteliales,

lo cual puede causar una falta de polarización de

Th1 desde el inicio de la infección por VPH. Esto

provoca un cambio en la producción de IL 4, IL-6 e

IL-10. De forma similar, la progresión de la

infección por VIH al desarrollo de SIDA se ha

asociado a la polarización del análisis de Th2 en las

secreciones cérvico-vaginales, las cuales podrían

contribuir a la persistencia de la infección por VPH

(10).

� En cuanto al tratamiento se sabe que

cuando existen ambas enfermedades, el trata-

miento y las recurrencias de VPH están relacio-

nados con la cuenta de CD4, pues restaurar la

inmunocompetencia podría elevar la cuenta de los

mismos. La terapia antirretroviral también se le ha

asociado a regresión de lesiones de VPH. (12)

� El objetivo de la presente investigación

fue analizar pacientes que padecen tanto VIH

como VPH y su in- fluencia en el conteo de células

Cd4.

� MATERIAL Y MÉTODOS

� Se investigaron 40 pacientes VIH positivas

confirmadas por la técnica Western blot en el

Hospital General del Sur de Puebla, México a

quienes se les tomaron mues- tras con citobrush

para realizar PCR y determinar qué especies virales

de VPH coexistían con VIH, el material obtenido

fue transportado en una solución tampón TE (Tris-

HCl y ácido etilendiaminotetraacético en pH de 8),

la identificación de genotipos de VPH se efectuó

mediante PCR utilizando los siguientes primers:

MY09/11 y GP5 + /GP6 y se usaron primers para el

gen de la actina como control interno. Los produ-

ctos de PCR fueron separados por electroforesis

en gel de agarosa al 2% y se visualizaron bajo luz

ultravioleta, los productos de PCR fueron secuen-

ciados en un secuenciador AbiPrism 310 (Aplied

Biosystems) utilizando GP5+ como primer en todas

las reacciones de secuenciación. Las secuencias

obtenidas fueron alineadas y comparadas con la

base de datos Genebank:

http://blast.ncbi.nlm.nih.gov/Blast.cgi?PROGRAM

=blastn&BLAST_PROGRAMS=megaBlast&PAGE

_TYPE=BlastSearch&SHOW_DEFAULTS=on&LIN

K_ LOC=blasthome.

� Los datos fueron analizados con el Soft-

ware SPSS, versión 9.0 (SPSS Inc., Chicago, IL

EUA). El genotipaje se llevó a cabo en las

instalaciones del Laboratorio de Biología Mole-

cular Diagnóstica (BIMODI), Querétaro, México.

También se realizó conteo de células CD4 a todas

las pacientes para su posterior comparación y

análisis. A todas las pacientes se les realizó citolo-

gía exfoliativa de control que reveló en algunos

casos coilocitos típicos propios de VPH, aunque su

>>>

descripción escapa a los objetivos de la presente

investigación.

Figura 1. La citología reveló en algunas

pacientes presencia de coilocitos, representativos

de infección por VPH (40X).

Cuadro I. Reacción en cadena de la poli-

merasa en el virus del papiloma humano y conteo

de células Cd4.

�

51

>>

>>

RESULTADOS

� A 40 pacientes que resultaron positivas a

V I H p o r We s t e r n b l o t s e l e s a p l i c ó u n

interrogatorio ginecológico, posteriormente se

r e a l i z ó l a r e c o l e - c c i ó n d e c é l u l a s p a r a

Papanicolaou, acto seguido se tomó una segunda

muestra con citobrush para efectuar PCR; si

tomamos en cuenta que los valores normales en el

conteo de células CD4 es entre 500 y 1,500 células

por mililitro cúbico, los resultados que se

obtuvieron fueron los siguien-tes: cinco pacientes

positivas a VPH y con valores de células CD4 dentro

de los límites normales, nueve pacientes negativas

a VPH con disminución del conteo de células CD4,

26 pacientes positivas a VPH con reducción en el

conteo de células CD4 (Cuadro I) y 12 pacientes

positivas a VPH revelaron la presencia de coilocitos

en la citología exfoliativa (Figura 1).-

� DISCUSIÓN

� Cabe destacar que todas las pacientes

diagnosticadas con VIH están recibiendo terapia

retroviral. De acuerdo con los resultados obte-

nidos en 26 pacientes (65%) positivas a VPH se

observó una baja significativa en el conteo de

células CD4, ya que sólo cinco (12.5%) de ellas

obtuvieron valores dentro del rango normal del

conteo de células CD4; sin embargo, nueve

resultaron negativas a VPH y también su conteo

de células CD4 resultó disminuido.

� Debido a que las células CD4 (también

conocidas como T-4) son un tipo de linfocito y

forman parte importante del sistema inmuno-

lógico, puesto que dirigen el ataque contra

infecciones, su baja afecta al paciente y lo hace

susceptible al ataque de otras infecciones como la

neumonía por pneumocistosis, toxoplasmosis o

criptococosis, entre otras.

� De acuerdo con los resultados obtenidos

sugerimos que las pacientes que padecen ambas

enfermedades tienen mayor tendencia a sufrir

una baja significativa en la inmunidad celular pese

a la terapia antirretroviral y las hace susceptibles a

adquirir otras patologías, ya que un conteo

inferior a 200 células CD4 por mililitro revela un

daño sustancial en el sistema inmunitario. (12,13)

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