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ANALISIS CLÍNICO 1
“AÑO DE LA DIVERSIFICACIÓN PRODUCTIVA Y DEL
FORTALECIMIENTO DE LA EDUCACIÒN”
TITULO
¨LA SERIE ROJA Y LA SERIE BLANCA, PROCESOS DE
MADURACIÓN CELULAR DE CADA UNO DE ELLOS,
MEDIADORES QUÍMICOS RESPONSABLES DE LA
MADURACIÓN CELULAR Y TÉCNICAS DE AISLAMIENTO
DE CÉLULAS MADRE¨
AUTORES
HUERTA GONZÁLES MÓNICA
QUINDE JIMÉNEZ RAYZA
DOCENTE ASESOR:
Msc. R. Diomedes Camones Maldonado
LUGAR:
Chimbote – Perú
FECHA:
MAYO -2015
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUDESCUELA PROFESIONAL FARMACIA Y BIOQUÍMICA
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ANALISIS CLÍNICO 2
ÍNDICE
1.
Título de la investigación……………………………………………………3
2. Enunciado del problema……………………………………………………..3
3. Objetivos………………..……………….……………………….…………..3
3.1 Objetivo general…………………..……………….……………….…...3
3.2 Objetivos específicos……..…..…..……………………………….……3
4. Justificación de la investigación..…………..……....………………….…….4-5
5. Introducción…………………………………………….…………………6-7
6. Desarrollo del tema
Proceso de maduración celular de la serie roja y serie blanca……………7-12
7. Referencias Bibliograficas………………………………………………….13
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ANALISIS CLÍNICO 3
1. TITULO: "LA SERIE ROJA Y LA SERIE BLANCA, PROCESOS DE
MADURACIÓN CELULAR DE CADA UNO DE ELLOS, MEDIADORES
QUÍMICOS RESPONSABLES DE LA MADURACIÓN CELULAR Y
TÉCNICAS DE AISLAMIENTO DE CÉLULAS MADRE".
2. ENUNCIADO DEL PROBLEMA:
¿Cuáles serán los procesos que facilitaran la maduración de la serie roja y la
serie blanca y cuáles son las técnicas a emplear para el aislamiento de células
madre?
3. OBJETIVOS:
3.1.1. OBJETIVO GENERAL:
Evaluar los mediadores que intervienen en la maduración de la serie
roja y de la serie blanca, así como aprender las técnicas de aislamiento
de células madre.
3.1.2. OBJETIVOS ESPECIFICOS:
Identificar todos los procesos que intervienen en la maduración
celular.
Conocer los mediadores químicos responsables de la maduración
celular.
Aprender las técnicas de aislamiento de células madre.
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ANALISIS CLÍNICO 4
4. JUSTIFICACIÓN:
Esta investigación será importante para nosotros como futuros profesionales de la saludya que conoceremos todos los procesos que intervienen en la maduración de la serie roja
y la serie blanca, además identificaremos las técnicas de aislamiento de células madre,
tema es de mucha importancia para la carrera de Farmacia y Bioquímica.
La serie roja la componen los glóbulos rojos o eritrocitos (eri = rojo; cito = célula) y los
granulocitos. Estas células se originan en la médula ósea a partir de una célula
denominada hemocitoblasto.
La serie es la siguiente: Hemocitoblasto - eritroblasto basófilo - eritroblasto policromático- normoblasto -Reticulocito I - Reticulocito II - Reticulocito III-
Reticulocito IV - Eritrocito.
La principal función de los eritrocitos es el transporte del oxígeno y del gas carbónico a
partir de la combinación con la hemoglobina (Hb). El control de la unión de los gases a
la hemoglobina depende de las situaciones de cada tejido. Así, cuando la presión de
oxígeno (pO2) es baja, la hemoglobina se disocia y libera el oxígeno hacia las células. En
este proceso interviene el 2-3 difosfoglicerato (2-3 DPG) reduciendo la afinidad de laHemoglobina por el O2. De la misma manera, el eritrocito contiene grandes cantidades
de anhidrasa carbónica, enzima que cataliza la reacción entre el CO2 y el agua para formar
ácido carbónico (CO2 + H20 H2CO3). De esta manera el CO2 es retirado de las células
y trasportado hasta los capilares pulmonares donde la ecuación se invierte y el CO2 es
transportado hacia los alvéolos y por allí, a la atmósfera. Por término medio, la
concentración de eritrocitos en sangre es de 5.2 millones por microlitro ( l) en el hombre
y de 4.7 mill/ l en la mujer. Los glóbulos rojos no pueden contener más de 34 gr de Hb ycada gramo de hemoglobina se combina con 1,39 ml O2, lo que significa que el transporte
de oxígeno por cada mm de sangre es de 21 ml para el hombre y 19 ml para la mujer, en
promedio.1
La serie blanca está constituida por los leucocitos (leuco = blanco; cito = célula). En el
siguiente esquema se presenta el proceso de formación de estas células.
Hemocitoblasto -Mieloblasto -Promielocito : Eosinófilo Medular- Eosinófilo
periférico- Mielocito netrófilo- metamielocito neutrófilo- Banda neutrófila -Granulocito neutrófilo segmentado -Basófilo medular -Basófilo periférico
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ANALISIS CLÍNICO 5
Hemocitoblasto: Monoblasto - Monocito
Hemocitoblasto: Reticulocito linfocítico – Linfoblasto-Linfocito grande-linfocito
pequeño Hemocitoblasto: Reticulocito linfocítico- Plasmblasto- Célula plasmática
Los leucocitos constituyen una unidad móvil del sistema inmune del organismo así como
son los encargados de los procesos de inflamación y reparación de los tejidos. El número
promedio de leucocitos en la sangre de un humano adulto es de 7.000 cel / l de sangre
(con un rango de 4.000 a 9.000 cel / l de sangre). Los tipos de leucocitos son:
1) Los neutrófilos polimorfonucleares: entre el 50% y el 70% del total
2) Los eosinófilos: entre un 0 y 3% del total3) Los basófilos polimorfonucleares: entre un 0 y 1%
4) Los monocitos: entre un 1 y 10%
5) Los linfocitos: entre un 20 y 40% Los neutrófilos, eosinófilos y los basófilos tienen un
aspecto granular cuando se observan al microscopio, de ahí que también se les conozca
como granulocitos. Los granulocitos y los monocitos son especialistas en fagocitar
(deglutir) los microorganismos que invaden el cuerpo. Los linfocitos y las células
plasmáticas son las encargadas de producir anticuerpos contra los virus y las bacterias.Los megacariocitos también hacen parte de los leucocitos, pero en sangre solo se
encuentran fragmentos de estas células, llamadas plaquetas o trombocitos (entre 150.000
y 300.000 plaq/ l de sangre) y tienen como función destacada el proceso de coagulación
de la sangre.1
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ANALISIS CLÍNICO 6
5. INTRODUCCIÓN:
El presente tema de investigación proviene del curso de análisis clínico, considerándose
así el siguiente enunciado del problema: ¿Cuáles serán los procesos que facilitaran la
maduración de la serie roja y la serie blanca y cuáles son las técnicas a emplear para el
aislamiento de células madre?
Esta investigación pretende como objetivo general evaluar los mediadores que
intervienen en la maduración de la serie roja y de la serie blanca, así como aprender las
técnicas de aislamiento de células madre, y como objetivos específicos identificar todos
los procesos que intervienen en la maduración celular, conocer los mediadores químicos
responsables de la maduración celular y aprender las técnicas de aislamiento de célulasmadre.
Es importante determinar los procesos de maduración celular, mediadores químicos
responsables de la maduración celular y técnicas de aislamiento de células madre; para lo
cual empezaremos con que la sangre es una forma especializada de tejido conectivo que
incluye elementos figurados (principalmente células) y una substancia intercelular
líquida, llamada plasma sanguíneo. Las células sanguíneas se dividen en hematíes o
glóbulos rojos, los glóbulos blancos o leucocitos y las plaquetas. Por otra parte, el plasmatransporta los materiales nutritivos (absorbidas del sistema digestivo), las substancias de
deshecho producidas por el metabolismo y las hormonas. Es un líquido algo alcalino,
homogéneo, el cual contiene una proteína llamada fibrinógeno la cual favorece el proceso
de coagulación sanguínea al formar una red de filamentos a partir de la fibrina. Cuando a
la sangre se le elimina esta proteína, el plasma se convierte en suero.1
Serie roja o serie eritrocitaria.
Serie blanca o serie leucocitaria.
Serie plaquetaria.
A. Serie roja o eritrocitaria:
Está constituída por hematíes, eritrocitos o glóbulos rojos. Su función consiste
primordialmente en transportar el oxígeno desde los pulmones a todos los tejidos y células
del organismo. En el hemograma se cuantifica:
- Número de hematíes.
- Hematocrito: mide el porcentaje de hematíes en el volumen total de la sangre.
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ANALISIS CLÍNICO 7
- Hemoglobina: mide su concentración en sangre (gr./dl). Es una molécula proteica
compleja del hematíe que transporta oxígeno y dióxido de carbono.
- Indices eritrocitarios: proporcionan información sobre:
· Volumen corpuscular medio (VCM). Mide el tamaño de los hematíes. · Concentración corpuscular media de la hemoglobina (CHCM). Mide la concentración
de hemoglobina por hematíe.
· Hemoglobina corpuscular media (HCM). Mide la cantidad de hemoglobina por
eritrocito.
Los valores varían dentro de la normalidad según la edad y el sexo.2
B. Serie blanca o leucocitaria
Está constituído por glóbulos blancos, leucocitos o polinucleares. Tienen función de
defensa del organismo frente a infecciones y sustancias extrañas.
En el hemograma el recuento de leucocitos tiene dos componentes:
1. Cifra total de leucocitos en 1 mm3 de sangre venosa.
2. Fórmula leucocitaria: Mide el porcentaje de leucocitos granulados (Neutrófilos,
basófilos y eosinófilos) y agranulados (linfocitos y monocitos) en sangre periférica.
El aumento en porcentaje de algún tipo de leucocitos conlleva disminución en el
porcentaje de otras. Los valores varían dentro de la normalidad según la edad.2
Actualmente, el principal objetivo de la investigación de Células Madre (SC) consiste en
su derivación como soporte para la creación de células pre o diferenciadas para su
posterior aplicación en medicina regenerativa. Los campos de aplicación incluyen
ensayos clínicos y farmacológicos de enfermedades neurodegenerativas,
cardiovasculares y diabetes, la generación de células donantes universales y la ingeniería
tisular. Todas las lineas de hESCs aprobadas actualmente con fondos federales en los
EEUU son derivadas sobre soportes celulares de ratón (feeder layers) y son expuestas a
una variedad de productos de origen animal escasamente definidos. Actualmente, una de
las principales preocupaciones es la exposición de las hESCs a componentes animales,
debido al riesgo de contaminaciones por retrovirus y otros patógenos que pudieran ser
transmitidos al paciente (lineas celulares de calidad terapéutica). En los últimos años se
han ido usando feeders humanos (placenta, piel, etc…) para evitar estas posibles
contaminaciones.3
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ANALISIS CLÍNICO 8
6. DESARROLLO DEL TEMA
A.- PROCESOS DE MADURACIÓN CELULAR DE LA SERIE ROJA Y SERIEBLANCA
HEMATOPOYESIS
La hematopoyesis es el conjunto de procesos que se llevan a cabo para que se produzcala proliferación, diferenciación y maduración de cada uno de los elementos que forman
parte de la sangre. La médula ósea es el principal órgano dónde se realiza lahematopoyésis en el adulto
Puesto que esta producción solo es suficiente para satisfacer las necesidadesnormales, cualquier gran aumento en la demanda origina un incremento en la actividadhematopoyética del hígado y el bazo, lo cual recibe el nombre de hematopoyesis extramedular. 5
El punto de partida de todos y cada uno de estos procesos, está dado por la estimulaciónde una célula madre pluripotencial o stem-cell. Siendo ésta el progenitor Hemato- poyetico más indiferenciado. Que a su vez puede dar origen, a cualquiera de las célulashematopoyéticas.
Las células madre pluripotentes (progenitoras o stem-cells) mantienen la producción delas células sanguíneas o hematopoyesis, durante toda la vida. Son muy escasas, pero a
partir de ellas, se originan todas las diferentes células sanguíneas.Las células madres hematopoyéticas, tienen capacidad
de autorrenovación, proliferación y diferenciación..En condiciones normales existe una coordinación entre la formación y destrucción delas células sanguíneas.En la siguiente tabla, se presenta el promedio de las células hematopoyéticas.
Tipo celular Tiempo de vidaHematíes 120 días.Granulocitos 6-8 hrs.Plaquetas 7-10 díasLinfocitos Prolongada, hasta años.Monocitos 70 hrs.
Para mantener esas cifras normales, es necesario que se mantenga un equilibrio,entre producción y apoptosis (muerte celular programada).La apoptosis es un fenómeno biológico fundamental, permanente, dinámico e interactivo. Existen mecanismos pro o anti apoptóticos, regulados genéticamente, que actúanen forma activa y equilibrada.Esta función es necesaria para evitar la sobre producción celular; pero es un procesoordenado y "silencioso" que no produce reacción tisular y por ello es difícil de captar.En el mecanismo molecular, que controla la apoptosis actúan varios agentes, de los cualesuno de los más importantes y mejor estudiados, es el complejo cisteino-aspártico
proteasas, denominadas "caspasas".
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ANALISIS CLÍNICO 9
Se han descrito 10 caspasas en célulashumanas, que provocan una degradación protéica bien definida, hasta llegar a laformación de cuerpos apoptóticos. Algunas caspasas son "iniciadoras"y otras “efectoras" del proceso catalítico, actuando sobre endonucleasas, que son lasresponsables directas de la fragmentación del ADN.
Dependiendo del estímulo que reciba la célula progenitora, va a tener la capacidad dediferenciarse a una línea determinada. En este proceso de maduración, vamos areconocer diferentes estadios. Entre uno y otro de estos estadios, las células van a irteniendo cambios morfológicos, hasta convertirse en una célula madura.El siguiente esquema de maduración, de las diferentes líneas hematopoyéticas.
Sabiendo que la diferenciación y maduración, de cada una de las líneashematopoyéticas, es el producto de un proceso dinámico. Al momento de realizar elinforme de un hemograma, específicamente al hacer el recuento diferencial,
los caracteres morfológicos de las células observadas al microscopio, a veces no van acorresponder exactamente a cada uno los estadios descritos en los libros o atlas deHematología.5
Los eritrocitos, también llamados glóbulos rojos o hematíes, son los elementos
formes cuantitativamente más numerosos de la sangre. La hemoglobina es uno de sus
principales componentes, y su objetivo es transportar el oxígeno hacia los diferentes
tejidos del cuerpo. Los eritrocitos humanos carecen de núcleo y de mitocondrias, por lo
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ANALISIS CLÍNICO 10
que deben obtener su energía metabólica a través de la fermentación láctica. La cantidad
considerada normal fluctúa entre 4.500.000 (en la mujer) y 5.000.000 (en el hombre)
por centímetro cúbico de sangre.
Origen
Los eritrocitos derivan de las células madre comprometidas denominadas blastos que
seguirán una diferenciación hacia la línea eritroide. La eritropoyetina, hormona producida
en los tejidos renales, estimula la eritropoyesis (es decir, la formación de eritrocitos) y es
responsable de mantener una masa eritrocitaria en un estado constante. Los eritrocitos, al
igual que los leucocitos, tienen su origen en la médula ósea.
Proceso de desarrollo
Las etapas de desarrollo morfológico de la célula eritroide incluyen (en orden de madurez
creciente) las siguientes etapas:
proeritroblasto
eritroblasto basófilo
eritroblasto policromatófilo
eritroblasto ortocromático
reticulocito
hematíe, finalmente, cuando ya carece de núcleo y mitocondrias.
ERITROCITO EN LA MEDULA OSEA
A medida que la célula madura, la producción de hemoglobina aumenta, lo que genera
un cambio en el color del citoplasma, en las muestras de sangre teñidas con la tinción de
giemsa. El núcleo paulatinamente se vuelve picnótico, y es expulsado fuera de la célula
en la etapa de eritroblasto ortocromático.
La membrana del eritrocito es un complejo bilipídido – proteínico, el cual es importante
para mantener la deformabilidad celular y la permeabilidad selectiva, principalmente porla proteína espectrina y la banda 3. Al envejecer la célula, la membrana se hace rígida,
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ANALISIS CLÍNICO 11
permeable y el eritrocito es destruido en el bazo. La vida media promedio del eritrocito
normal es de 100 a 120 días.5
ERITROPOYESIS
El proceso que lleva a la formación y al paso a la circulación de los glóbulos rojos tienelugar en la médula ósea donde están los eritroblastos, precursores nucleados de loseritrocitos, llamados también normoblastos para indicar que son elementos de laeritropoyesis normal.Las etapas celulares intermedias que conducen a la formación del glóbulo rojo estánconstituidas por: proeritroblasto, elemento directamente producido por la célulaindiferenciada, que tiene unas dimensiones iguales o ligeramente superiores a las delHemocitoblasto; su citoplasma es muy rico en ribonucleótidos, siendo sede de una intensaactividad metabólica; la especial riqueza en ácido ribonucleico le confiere una intensa
basofilia más marcada que la del Hemocitoblasto. Esta característica, constituyendo una
excepción a la regla biológica general según la cual la basofilia protoplasmática decreceal progresar la evolución madurativa, según las cuales la abundancia de ribonucleótidosconstituye una condición determinante para la producción de las proteínas citoplasmáticasespecíficas de la eritropoyesis. El núcleo es grande y contiene los nucléolos
particularmente ricos en ácido ribonucleico; el retículo cromatínico recuerda el delHemocitoblasto, pero se diferencia por la menor delicadeza de la trama y por ladisposición en tramas más gruesas;
Eritroblasto basófilo, que tiene las dimensiones inferiores respecto al precedente; elnúcleo, perfectamente redondo, ha perdido los nucléolos, y la cromatina tiendeclaramente a disponerse formando gruesas tramas de ácido desoxirribonucleico; elcitoplasma es todavía basófilo, aunque menos que el proeritroblasto.5
Eritroblasto policromatófilo, presenta una reducción de la masa nuclear cuya estructura
cromática, es aquí en gruesos bloques dispuestos a manera de rayos; el citoplasma presenta una coloración intermedia, entre un rosa pálido y un azul, debido al hecho deque en él han aparecido ya los pigmentos hemoglobínicos que son acidófilos, pero existetodavía algo de ácido ribonucleico que es basófilo. La síntesis de la hemoglobina,sustancia particular que confiere a los hematíes circulantes (y en práctica a la sangre) y alos precursores eritroblásticos el color rojo, comienza sustancialmente en este estadio,aunque existan trazas mínimas en el eritroblasto basófilo.5
Eritroblasto acidófilo u ortocromático, que tiene las dimensiones mucho más reducidas,con el citoplasma intensamente acidófilo por elevado contenido hemoglobínico, núcleo
oscuro, muy pequeño, con tendencia a la picnosis y cuya base, desde el punto de vista bioquímico, se encuentra una condensación de las estructuras desoxirribonucleicas y ladespolimerización del ADN (ácido desoxirribonucleico) y que se completa con laexpulsión de la célula. Con la desaparición del núcleo la célula llega ya al estado deeritrocito y como tal emigra a la circulación, donde es posible encontrar cualquierelemento con un pequeño residuo nuclear o con residuos de ribonucleótidoscitoplasmáticos, evidenciables con coloraciones vitales y constituyendo lallamada sustancia granulofilamentosa .5
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ANALISIS CLÍNICO 12
LEUCOPOYESIS
Es el proceso que a través de las fases de diferenciación, multiplicación y maduracióncelular lleva a la entrada en la circulación de los glóbulos blancos. Comprende tres líneas
que tienen lugar en diversos órganos, es decir; la granulocitopoyesis, que tiene su sede enla médula; la linfocitopoyesis, en el bazo y en todas las estructuras linfáticas (timo,nódulos linfáticos, glándulas linfáticas, placas de Peyer, etc.), y la monocitopoyesis, en eltejido linfático, en el bazo y en parte también en la médula ósea. Este proceso madurativolleva consigo, para las diversas series celulares, modificaciones estructurales, funcionalesy bioquímicas, de las cuales dependen las distintas propiedades biológicas típicas de cadauna de las líneas celulares como, por ejemplo, la motilidad, la fagocitosis, las propiedadesinmunológicas, etc. 5
B. TECNICAS DE AISLAMIENTOS DE LAS CELULAS MADRES
B.1. Células Madre embrionarias: Los embriones humanos que son utilizados paraobtener las SC son producidos en clínicas de Fertilización In Vitro (donados odesechados), donde son deshidratados, congelados y enviados a los centros deinvestigación de SC para su utilización. Los embriones son, entonces, descongelados yrehidratados al baño maría en placa calefactora, durante 50 segundos a 37ºC. Estosembriones, listos para ser cultivados (derivados), se dejan desarrollar hasta fase de morulaen el día 4 y forman el blastocito el día 6. El blastocito es aislado y cultivado sobre unacapa de células feeder. El blastocito se fija a las células feeder y la Masa Celular Interna(ICM) queda expuesta, permitiendo su extracción y disociación mecánica de los
blastocitos con número de células y morfología adecuadas (derivación). Otra técnica para
la obtención de SCs es la transferencia nuclear, consistente en la introducción del núcleode una célula somática en un huevo fertilizado cuyo núcleo original ha sido eliminado. Elambiente del huevo fertilizado tiene el efecto de reprogramar el núcleo transferido a suestado primordial, continuando normalmente con la división del huevo.
B.2. Células Madre Fetales: Aisladas de embriones muertos y sangre del cordónumbilical.
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REFERENCIAS:
1. Gustavo S. La sangre, conocimiento corporal. 4 ed. Colombia: Universidad de
Antioquia; 2000.
2. Hemograma serie blanca, serie roja y serie plaquetaria. [Acceso 19 de abril del
2015]. Disponible en : http://www.mailxmail.com/curso-hematologia-
alteraciones-celulares-tecnicas-utilizadas-laboratorio/hemograma-serie-roja-
serie-blanca-serie-plaquetaria
3. Información de desarrollo de aplicación. [Acceso 19 de abril del 2015].
Disponible en :
http://www.cultek.com/inf/otros/soluciones/celulas%20madre/celulas_madre_te
cnicas.pdf
4. Cultek.Celulas Madres,sección técnica.[acceso 19de mayo del 2015]Disponible
en :
http://www.cultek.com/inf/otros/soluciones/celulas%20madre/celulas_madre_tecnicas.pdf
5. Garcia B, Rubio F, Crespo M. Tecnicas de análisis Hematologicos.1ra edición.
Editorial Paraninfo S.A.Madrid. 2015
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