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Procesos deBioseparacin
Unidad I
RUPTURA CELULARCLASE 3
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Visto anteriormente
Estrategia de Diseo de ProcesoDOWNSTEAM
Composicin de entrada a unacorriente DSPVarios procesos de produccinTabla de Puricacin
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Rompimiento Celular
Precipitacin cidosNucleicos, Proteasas
Concentracin
Purificacin AltaResolucin
Separacin MaterialIntracelular (Desechos)
Caldo de ermentacin
Separacin de C!lulasSin C!lulasC!lulas inmo"ili#adasC!lulas retenidas
Con C!lulas
Prote$nasintracelular
So%renadante
&ratamiento de cuerpos incluidos
Refinamiento
PermiteAltos ni"eles de pure#a'sta%ilidad del producto
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!"u# sabemos acerca un $%rmacobiotecnolgico&
Teraputico Preventivo
Rehabilitatorio
EECT!
Prote"nas reco#binantes$ anticuerpos#onoclonales$ secuencia de %cidos
nucleicos
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Sistemas de e'presin de P(OTE)NAS(ECOM*+NANTES
Bacterias
Levaduras
&irus
Cultivos declulas
ani#ales
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!"u# implica conocer todoesto&
,ocali-acin del producto deinter#s
E'tracelular+ntracelular
RupturaCelular
Antibiticos.en-imas
e'tracelulares.Muc/os polisac%ridos0 ma0or1a deamino%cidos2 Ma0or1a de las prote1nas
producidas pormanipulacin gen#tica de
bacterias 3ue no segreganlas prote1na al medio2
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RupturaCelularRupturaCelularPR!TE'(AS
PR!TE'(ASPR!TE'(ASPR!TE'(AS
,os e3uipos in4olucrados enesta etapa no /an sido
diseados especialmente parael %rea biotecnolgica sino 3ueson prestadas de otras %reas56%rea de alimentos. de pinturas0 pigmentos72
)todos (!
#ec%nicos
)todos #ec%nicos
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RupturaCelular(esistencia
a5Te#peratura)edios alcalinos*eter+entes
En,i#as
Es-uer,os de corte
)todos(!
#ec%nicos)todos
#ec%nicos
La tcnica e#pleadadeter#inar% elta#a.o de los
desechos
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M#todos NO mec%nicos
A+entes
/u"#icosSol4entes org%nicos.detergentes. %lcalis. agua
6s/oc8 osmtico7
A+entes
en,i#%ticosPermeabili-an en $ormaselecti4a las membranas
celularesLiso,i#a
0lucana
sas
)ananasas
,os m#todos no9mec%nicos son -%ciles de escalar. siuno necesita tratar :; 4eces m%s materia org%nica bastacon adicionar :; 4eces m%s reacti4o 3u1mico oen-im%tico2
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M#todos NO mec%nicosTcnicas Principios Stress Costos E1e#plos
Permeabili-aci
n en-im%tica
Permeabili-acin de la pared
celular. lo cual produce el
rompimiento de la pared
celular
Tratamiento deM2l0sodei8ticuscon liso-ima2
S/oc8
osmtico
(uptura osmtica de la
membrana
(uptura deC#lulas de
.
>ipoclorito
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EST?D+O +ND+V+D?A,
Estructura 2
unciones de la
#e#brana celular
0ra# Positivas
(e+ativas
Tipos de
clulas
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Tratamiento En-im%tico
(uptura Permeabili-acin
Teor1a5 En-imas /idroli-an la membrana celular
/asta la permeabili-acin2
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Metodolog1a
Trata#iento En,i#%tico
En-ima @ (eaccin selecti4a deterioro de paredcelular
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S/oc8 OsmticoTeor1a5lu=o osmtico de agua 3ue puede e'istir al interior de lac#lula debido a los solutos 3ue estos contiene2
Se usa para el aislamientode mitocondrias0 cromosomasmitticos2
,a susceptibilidad de las c#lulas es relati4a 0 depende$uertemente de su tipo2
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S/oc8 Osmtico4C#o saber la presin necesaria para
ro#per las clulas5
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Solubili-acin
Teor1a5 Solubili-acin de los l1pidos de la pared o
membrana celular2
Parte >+D(OB*+CA
Parte >+D(O),+CA
Taurocolato desodio
*eter+ente Aninico*eter+ente Catinico
*eter+ente no 6inico 2
polidispersante
l bili i
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Aninicos
Solubili-acin
u0endo los grupos CA(*O+,OS por S?,ATOS se puede superar esa des4enta=
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Catinicos
Solubili-acin
Detergentes m%s sua4es (ompimiento m%s sua4e
(o inicos
Pol1meros solubles en agua
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Solubili-acin
Monto solubili-ado
Acti4idad
monmero
Tensin supercial
Concentracin de*eter+ente
A ba=as concentraciones de detergente no se producedegradacin de los l1pidos. pero a alta concentracin seproduce una degradacin 3ue resulta linealmenteproporcional a la concentracin de detergente2 unto aesta 4ariable tambi#n se altera la tensin supercial de la
solucin2
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uentes de in$ormacin
*elter P2 Cussler E2,2 S/ou >u W2*ioseparations2 DoFnstreamprocessing $or biotec/nolog0G
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